光质对灵芝生长及抗氧化酶系统的影响

目的 以飞船搭载的灵芝Ganoderma lucidum菌株为材料,研究不同光质对灵芝生长形态及抗氧化酶活性的效应,找出适于灵芝生长的最佳光质,为光质选择提供理论依据.方法 栽培灵芝时进行不同光质处理,在灵芝不同生长发育时期观测其形态变化,并测定抗氧化酶体系中主要酶活性.结果 不同光质处理的弹孢前期灵芝菌盖厚度与菌盖表面环纹数与对照差异显著.不同光质处理对灵芝子实体产量和灵芝孢子粉产量均有影响.红色、蓝色光质处理提高了过氧化物酶( POD)、过氧化氢酶(CAT)活性.蓝色光质处理提高了可溶性蛋白量,并且使丙二醛(MDA)在生长末期保持相对较低水平,从而延缓了灵芝子实体衰老.绿色、黄色光质抑制了抗氧化酶活性,导致灵芝子实体可溶性蛋白量下降及MDA量上升,加速了灵芝子实体的衰老过程.结论 蓝色光质可以使灵芝子实体维持较高的抗氧化酶水平,促进可溶性蛋白合成,从而增强灵芝代谢,延缓灵芝衰老.     

蓝光对灵芝子实体生长和糖代谢相关酶的影响

目的研究蓝光对灵芝子实体生长、生物量、多糖及4种糖代谢相关酶的影响,为灵芝子实体培养中光质的优化提供依据。方法用自然光和蓝光两种光质处理栽培灵芝,在灵芝不同生长发育时期观察其形态变化,采用苯酚-硫酸法测定灵芝多糖含量,并测定灵芝子实体4种糖代谢相关酶活性,同时采用SPSS 17.0统计软件分析多糖含量与糖代谢酶间的相关性。结果研究发现,在灵芝子实体的生长发育过程中,蓝光处理生物量积累、多糖含量及4种糖代谢相关酶活性均显著高于自然光处理,多糖含量与HK、PGI、α-PGM活性变化趋势一致,均是先升高后降低,最大值均出现在菌盖形成期,多糖含量与G-6-PDH活性变化趋势存在差异。相关性分析显示,蓝光处理的灵芝子实体多糖含量与HK、PGI、α-PGM活性呈现显著的相关性(P0.01)。结论研究表明蓝光处理对于灵芝子实体产量有明显的促进作用,促进多糖的积累和相关酶活的活性。由此推测HK、PGI、α-PGM是灵芝多糖合成的关键酶。     

不同品种灵芝多糖含量差异研究

目的 :比较产粉灵芝与无粉灵芝多糖含量的不同,明确不同品种灵芝子实体多糖含量的差异。 方法 :光学显微镜观察灵芝子实体结构,蒽酮-硫酸法测定了不同品种灵芝多糖含量。 结果 :无粉灵芝的多糖含量比产粉灵芝多糖含量高出近1倍;灵芝子实体由4部分组成,分别为菌皮、皮层、菌肉、菌管;子实体中菌管所占比例最大,厚度比例占70％以上,且多糖含量在各部分中也最高,最高可达3.88％。 结论 :无粉灵芝多糖含量高于产粉灵芝;菌管是灵芝子实体多糖的主要来源。     

LED光源的不同光质对灵芝菌丝体生长及抗氧化酶活性的影响

目的:研究不同光质对灵芝菌丝体生长及抗氧化酶活性的影响,为灵芝菌丝体培养提供科学的理论依据.方法:采用新型半导体发光二极管(LED)光源设置不同光质处理,动态观测灵芝菌丝体生长、多糖含量及抗氧化酶活性变化.结果:蓝光处理及黑暗对照条件下灵芝菌丝体生长较快,黑暗对照条件下菌丝体形态纤细、菌落淡薄,蓝光、白光处理菌丝体粗壮、菌落浓密.白光处理菌丝体生物量积累最高,蓝光次之.绿光处理灵芝菌丝体POD酶活性波动变化较大,生长中后期显著高于其他处理.白光处理菌丝体CAT酶在生长过程中始终保持较高活性.生长前期黄光处理菌丝体SOD酶活性最高,后期黑暗对照SOD酶活性较高.前期绿光处理菌丝体多糖含量较高,生长后期蓝光处理菌丝体多糖含量显著高于其他处理.结论:光质影响灵芝菌丝体生长代谢,蓝光利于灵芝菌丝体生长代谢.     

灵芝生长过程中灵芝多糖含量变化规律研究

目的：对灵芝人工袋料栽培生长过程中灵芝多糖的含量变化情况进行跟踪测量，研究灵芝多糖在灵芝生长过程中的含量变化规律。方法：采用硫酸一苯酚法对不同生育时期的灵芝培养基和子实体样品中灵芝多糖的含量进行测定，比较不同生育时期灵芝多糖含量的变化规律。结果：在灵芝培养基中，随着灵芝菌丝的生长和成熟，灵芝多糖的含量逐步增加，直到开伞期达到最高值，从孢子弹射期后，灵芝多糖含量急剧下降。在灵芝子实体中，从灵芝现蕾开始，灵芝多糖含量逐步增加，到孢子弹射前达到最高值，孢子弹射后，含量急剧下降。从子实体和培养基中灵芝多糖含量的对比情况来看，在孢子弹射前，子实体中灵芝多糖含量远高于培养基；但在孢子弹射后，子实体和培养基中灵芝多糖含量均急剧下降，二者的灵芝多糖含量没有极显著差异。结论：在灵芝生产中，应该选择在开伞期后、孢子弹射前采收子实体为宜。这时采收的灵芝子实体产品灵芝多糖含量最高，品质最好。将灵芝采收后的培养基用于灵芝多糖的提取，进行合理的开发利用，可以大力提高灵芝生产的经济效益。     

灵芝不同生长阶段三萜酸含量变化研究

目的:揭示不同生长发育阶段灵芝生长与灵芝三萜酸含量的相关性,探索灵芝的最佳采收时期。方法:对不同生长发育阶段的灵芝,采用"烘干恒重法"测定干重,HPLC测定灵芝10种三萜酸的含量。采用Alltima C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.04%甲酸溶液,检测波长254 nm,流速1.0 mL/min,柱温15℃。结果:灵芝总三萜酸的含量在灵芝现蕾期、菌盖形成期变化不明显,弹孢前期最高,在弹孢后期显著降低。灵芝酸A是灵芝子实体内含量最高的灵芝三萜酸,7种灵芝酸的含量均在弹孢前期最高。结论:对灵芝生长和不同生长发育阶段灵芝三萜酸含量变化研究发现灵芝子实体最佳采收时期应该是灵芝弹孢前期。     

光质对灵芝菌丝体生长及内源IAA代谢调控的研究

采用新型LED冷光源设置不同光质条件,动态观测灵芝菌丝体生长、内源IAA含量和其相关酶活性变化及多糖积累情况,研究光质对灵芝菌丝体生长、内源IAA水平及活性成分积累的影响,揭示光质作用于灵芝的效应及机制,为灵芝菌丝体培养提供科学的理论依据.研究发现,蓝光处理菌丝体生长稳定,多糖含量明显高于其他处理,综合优势明显;红光处理在灵芝菌丝体生长前期能显著提高其内源IAA水平,加快其生长;绿光处理菌丝体生长缓慢,鲜重少,但其折干率大.不同光质对灵芝菌丝体IAA代谢相关酶活性有显著影响:蓝光处理灵芝菌丝体IAA含量始终处于较低水平,其吲哚乙酸氧化酶(IAAO)、过氧化物酶(POD)以及色氨酸合成酶活性变化均为前期高而中后期低;黄光处理菌丝体IAA含量居中,但其IAAO、色氨酸合成酶活性最大.结果表明不同光质影响灵芝菌丝体生长,同时对其内源IAA水平也有显著影响.     

灵芝的液体培养

灵芝是一种名贵中药,属担子菌纲、多孔菌目、多孔菌科、灵芝菌属.近年研究表明灵芝含有能提高人体免疫能力、具有抗肿瘤活性的灵芝多糖,所以灵芝具有抗癌、延缓衰老、镇静止痛和护肝等功效[1],且毒性极低[2].灵芝的子实体和菌丝体在药用价值方面相同,目前我国主要从灵芝子实体中提取灵芝多糖,人工栽培子实体生产周期长,生产力低下,而采用液体发酵法,工业化生产灵芝菌丝体和灵芝多糖可缩短生产周期,大大提高灵芝多糖的生产能力.因此,要发展灵芝生产,提高灵芝液体培养的生物学产量有重要意义.为了提高灵芝菌丝体液体发酵的生产能力,为工业化生产灵芝菌丝体及多糖提供经济实用的培养基,我们对灵芝菌丝体液体生长的营养条件进行了研究.     

灵芝子实体与菌丝体及破壁菌丝主要活性成份的比较

目的:对人工栽培的灵芝子实体、茵丝体及破壁处理菌丝体的主要化学成分进行测定分析,为灵芝药材品质及检测产品质量提供依据.方法:用硫酸蒽酮法测定灵芝多糖含量;采用齐墩果酸作对照,香草醛一冰醋酸显色,分光光度计测吸光值测定三萜化合物.结果:无论多糖还是三萜化合物,菌丝体含量均高于子实体,破壁处理高于未处理.     

不同潮数期生长的灵芝对比分析

目的了解灵芝在不同潮数期的出芝规律及子实体特征。方法将灵芝栽培在椴木上,观察灵芝的出芝规律及子实体特征,统计分析不同潮数期生长的灵芝子实体差异。结果灵芝生长都经历原基期、菌柄形成期、菌盖形成期、子实体成熟期;不同潮数期的灵芝出芝规律基本一致,三潮灵芝均在15～27天出芝量达到最大且在33天后出芝结束。此外,第一潮灵芝形态特征显著区别与其它两潮灵芝,子实体大小、重量均优于第二、第三潮灵芝。结论灵芝的出芝规律在不同潮数期保持一致,但子实体形态差异显著,其原因可能在于栽培基质营养的不同。     

不同品种灵芝主要活性成分分析

目的:对不同品种灵芝子实体中4类活性成分进行测定分析,为灵芝品种专用化育种提供依据.方法:采用紫外分光光度法测定灵芝样品总多糖、总三萜和蛋白质含量;采用反相高效液相色谱法测定灵芝样品麦角甾醇含量.结果:不同品种灵芝子实体中总多糖、总三萜、蛋白质均为含量较高的主要成分,但麦角甾醇的含量极低;4类成分在不同灵芝品种中含量差异显著,含量之间未发现有相关性.结论:灵芝多糖、三萜、蛋白质这3类各具典型功效的主要成分含量测定对灵芝子实体的质量控制均有重要的意义,并且可为制剂生产、临床应用的专用品种选育提供科学依据.     

赤芝孢子粉和子实体主要化学成分变异规律研究

目的:揭示产地、品种、采收部位和潮次、破壁技术对赤芝孢子粉和子实体中总三萜、总多糖、总蛋白含量的影响。方法:收集龙芝1号、沪农1号、市售赤芝孢子粉和子实体,分别采用硫酸-蒽酮比色法、香草醛-冰醋酸比色法和Lowry法测定其中总多糖、总三萜、总蛋白的含量。结果:全国6个主产区的破壁孢子粉总多糖为0.40%~2.25%,总三萜为1.36%~3.15%,总蛋白为0.74%~1.91%;浙江主栽赤芝品种子实体总多糖、总三萜、总蛋白质量分数分别为0.25%~1.42%,0.44%~1.42%,1.82%~3.67%,未破壁孢子粉分别为0.41%~0.91%,0.09%~0.12%,0.78%~0.90%,破壁孢子粉分别为1.03~2.25%,1.89%~3.15%,0.96%~1.04%。结论:全国不同主产区的灵芝破壁孢子粉化学成分含量存在显著差异,浙江产区总多糖和总三萜含量较高,福建产区总蛋白含量较高;浙江主栽赤芝品种龙芝1号总三萜含量较高,沪农1号总多糖含量较高;破壁孢子粉中总三萜与总多糖含量高于子实体,子实体菌柄中总多糖含量大多高于菌盖,菌盖中总三萜含量显著高于菌柄;2潮采收的菌盖和菌柄中总多糖含量高于1潮相应的部位,但总三萜含量大多低于1潮;孢子粉破壁可显著提高总三萜和总多糖的提取和溶出率。     

灵芝多糖对高脂性脂肪肝大鼠氧化应激的影响

目的:研究灵芝多糖对高脂性脂肪肝大鼠氧化应激的影响。方法:SD大鼠72只,随机分为6组:正常对照组(N组),模型组(M组),灵芝多糖低(GLPs-L)、中(GLPs-M)、高(GLPs-H)剂量组(200,400,800 mg·kg-1)和辛伐他汀组(SV 1.8mg·kg-1)。用高脂饲料喂养建立大鼠高脂性脂肪肝(HFL)模型。经12周给药后,分别测定各实验组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化能力(T-AOC)以及肝组织中MDA,SOD,GSH-Px和T-AOC的含量;光镜观察肝组织脂肪病变程度。结果:M组血清TC,TG,LDL-C含量显著升高(P<0.01);与M组比较,GLPs-M,GLPs-H组血清TC,TG,LDL-C含量均显著降低(P<0.05或P<0.01),GLPs-H组HDL-C含量显著增加(P<0.05);GLPs-M,GLPs-H组血清和肝匀浆中MDA含量较M组相比均明显降低(P<0.05或P<0.01),SOD,GSH-Px和T-AOC水平较M组相比均明显上升(P<0.05或P<0.01)。GLPs-M,GLPs-H组可使肝细胞脂肪变性程度明显减轻。结论:灵芝多糖能明显降低高脂性脂肪肝大鼠血脂水平,有效对抗氧化应激,对大鼠高脂性脂肪肝有一定的防治作用。     

复方灵芝孢子精油软胶囊抗疲劳耐缺氧能力研究

目的： 研究复方灵芝孢子精油软胶囊抗疲劳、耐缺氧的药理作用。 方法： 昆明种小鼠随机分为5组,分别为复方灵芝孢子精油软胶囊低、中、高（385,770,1 540 mg·kg^-1·d^-1）3个剂量组、对照药红参醇提物400 mg·kg^-1·d^-1组、空白对照组,灌胃给药30 d后分别考察各组小鼠负重游泳、常压耐缺氧条件下的生存时间及负重游泳后小鼠血清尿素氮、乳酸脱氢酶、甘油三酯含量。 结果： 复方灵芝孢子精油软胶囊低、中、高剂量组能不同程度的加快运动小鼠血清尿素氮的清除、提高血清乳酸脱氢酶含量、减少运动后小鼠体内血清游离甘油三酯含量,显著的延长小鼠负重游泳时间（P<0.05,P<0.05,P<0.01）;中、高剂量组能显著延长小鼠缺氧条件下的生存时间（均P<0.05）。 结论： 复方灵芝孢子精油软胶囊具有抗疲劳、耐缺氧作用,是一种有效的抗疲劳中药复方制剂。     

灵芝孢子粉化学成分和药理作用的研究进展及其质量标志物（Q-Marker）预测分析

灵芝孢子粉是灵芝的生殖细胞，包含灵芝所有的化学成分，主要含有灵芝三萜类、多糖类、甾体类、脂肪酸类和蛋白质类等多种化合物。灵芝孢子粉具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、保护心血管、保肝护肝等药理作用。《中国药典》2020年版对灵芝孢子粉的质量控制标准尚未明确规定，就灵芝孢子粉化学成分和药理作用研究进展进行综述，并基于质量标志物（quality marker，Q-Marker）理论，从植物亲缘性与特有性、有效性、可测性、临床应用、可入血成分等方面进行Q-Marker预测分析，初步推测多糖类、灵芝酸、甾醇类（麦角甾醇）、不饱和脂肪酸（油酸）等成分为其Q-Marker，为规范灵芝孢子粉质量研究和建立、完善灵芝孢子粉质量标准提供参考。     

灵芝菌发酵基质的条件优化及菌质活性物质的分析

目的：通过灵芝菌与玉米须、玉米芯的双向固体发酵,形成新的药性菌质,并对其活性成分进行分析。方法：以不同配比的玉米须和玉米芯为基质,以活性物质多糖和三萜的含量为指标考察菌质的最佳培养基配比,分别采用紫外分光光度法、薄层色谱法和高效液相色谱法进行定性及定量分析。结果：玉米须和玉米芯以1：0,1：1,1：2,1：3,1：4,1：5,0：1配比,用灵芝菌发酵,形成的菌质多糖含量递增,三萜含量递减;薄层色谱结果显示,与发酵前对比,发酵后色谱斑点由红色转为蓝绿色荧光,并随着玉米须在培养基中比重增加而斑点越明亮;高效液相色谱结果显示,发酵后原有一些物质峰减弱或消失,并生成新的物质。结论：以玉米须-玉米芯1：5作为基质产生的菌质长势及活性成分含量最高,发酵前后菌质的物质组成有明显改变。     

光质与种质对铁皮石斛种苗生长和有效成分的影响

为了揭示光质与种质对铁皮石斛种苗生长和有效成分的影响,采用8种光质(红光、蓝光、黄光、绿光和3个不同比例的红蓝混光),对3个家系(9×66,17×30,78×68)进行组培试验,测定农艺性状及叶绿素、总生物碱、多糖的含量.结果表明,光质和种质对铁皮石斛种苗和有效成分均有极显著的影响,红光有利于种苗根系与苗高生长,蓝光有利于种苗增粗与生物碱积累,红蓝混光有利于叶绿素与多糖含量增加.研究结果为铁皮石斛种苗优质、低碳、高效生产提供了基础,并为优质药材生产给出了有益的提示.     

光质对灵芝菌丝体生长及三萜酸量影响的研究

目的 研究光质对灵芝菌丝体生长及三萜酸量和组分的影响。方法 采用新型LED冷光源设置不同光质处理,动态观测灵芝菌丝体生长、总三萜酸量及三萜酸组分的变化情况。结果 不同光质处理灵芝菌丝体形态、生长速度、生物量和总三萜酸量及单体三萜酸在组分、相对量及各组分间的比例都有所变化。蓝光处理菌丝体在整个培养期始终保持稳定增长;红光处理菌丝体前期生长速度及生物量最大,但是中后期生长速度显著下降,生物量增加缓慢,次于蓝光;绿光处理菌丝体前中期生长速度及生物量均最小,然而培养后期增加明显,干物质迅速积累。灵芝三萜酸在菌丝体培养第7天时已大量产生,随培养时间延长种类增多,组分量降低。绿光和蓝光处理对提高灵芝菌丝体三萜酸种类和量均有明显优势。结论 光质对灵芝菌丝体生长及三萜酸量和成分均有显著影响,蓝光对促进灵菌丝体生长及三萜酸积累综合优势明显。