黄河三角洲野生柽柳接种管花肉苁蓉研究

目的:研究黄河三角洲地区种植管花肉苁蓉的可行性。方法:用挖沟接种方法,在黄河三角洲盐碱地引种管花肉苁蓉,调查管花肉苁蓉接种率和生长状况;收获种子,用氟啶酮预处理,测定种子萌发率;利用色谱法分析黄河三角洲所产的管花肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量。结果:管花肉苁蓉能在黄河三角洲地区正常生长、开花、结实,完成生活史。黄河三角洲野生柽柳接种管花肉苁蓉的接种率为81.9%,管花肉苁蓉生长状况良好,能正常开花结果;收获种子的萌发率在46~63%之间;肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量之和为22.1%,符合药典规定。结论:在黄河三角洲盐碱地引种管花肉苁蓉获得成功,生产的管花肉苁蓉指标成分符合药典要求。     

中药肉苁蓉接种技术的研究

 目的 有效提高管花肉苁蓉和荒漠肉苁蓉的接种率。方法 本实验选用柽柳和梭梭及管花肉苁蓉和荒漠肉苁蓉种子为实验材料,进行了激素浸种处理、不同接种深度、不同浸种时间、生根粉、保水剂和接种装置处理对肉苁蓉接种率影响的实验研究。结果 将肉苁蓉种子用500 mg·L-1的激素A浸泡24 h,用牛皮纸信封作为接种装置,接于40 cm土层深度,并灌溉3 g·L-1生根粉和4 g·L-1保水剂混合溶液2 L。结论 本结果可有效提高中药肉苁蓉接种率。     

管花肉苁蓉寄生实验体系的研究

 目的 明确管花肉苁蓉寄生过程和环境条件,建立寄生实验体系。方法 用塑料盒-沙土-玻璃板装置,培养柽柳和管花肉苁蓉,统计发芽率和接种率。结果 黑暗、相对湿度100%,温度为20~30 ℃条件下,管花肉苁蓉接种率为63%;种子萌发后,接种上管花肉苁蓉的时间为7~12 d。结论 黑暗、相对湿度100%、温度为20~30 ℃是管花肉苁蓉寄生的适宜环境条件。     

管花肉苁蓉人工控制寄生技术研究

目的研究建立名贵中药材肉苁蓉的基源植物管花肉苁蓉Cistanche tubulosa的人工控制寄生技术,加强其资源保护与利用。方法运用人工控制寄生培养的方法,主要对寄主柽柳树龄、寄生接种时间、寄生接种种子量进行筛选;运用高效液相色谱法,对生产的管花肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量进行分析。结果 1年生、2年生、3年生的柽柳植株均能与管花肉苁蓉形成寄生,1年生柽柳植株的成活率和寄生率均最高,分别为97%和91%;在四月上旬、五月上旬、六月上旬、九月上旬进行接种,管花肉苁蓉与1年生柽柳植株均能形成寄生,四月上旬寄生率最高,为93%;接种种子量对管花肉苁蓉寄生率、寄生体数量存在显著影响,0.02 g为最适宜的接种量。人工控制寄生条件下,2年生管花肉苁蓉的松果菊苷和毛蕊花糖苷含量均高于药典标准。结论人工控制寄生技术寄生效率高,生产质量好,可为管花肉苁蓉规范化生产提供有力的技术保障。     

8种柽柳引种适应性及接种管花肉苁蓉试验研究

目的：通过对不同柽柳种适应性、管花肉苁蓉接种率和松果菊苷含量的分析,为柽柳引种和管花肉苁蓉种质资源保护及筛选提供理论依据。方法：在华北平原引种8种柽柳并接种管花肉苁蓉,采用高效液相法分析了苯乙醇总苷指纹图谱和松果菊苷含量。结果：不同柽柳种的适应性差异显著,甘肃柽柳、甘蒙柽柳与对照中国柽柳管花肉苁蓉的苯乙醇总苷组成成分基本相同,生长4个月时的松果菊苷含量差异不显著。结论：甘肃柽柳和甘蒙柽柳适宜作为管花肉苁蓉种质资源保护和筛选的寄主在华北平原引种栽培。     

管花肉苁蓉种子萌发和寄生过程的形态学研究

目的:了解管花肉苁蓉寄生过程。方法:变档体视显微镜观察管花肉苁蓉种子萌发和寄生过程的形态结构。结果:①管花肉苁蓉种子不接触寄主柽柳根,可独立萌发。②种子萌发首先从种孔长出芽管,其顶端与寄主根接触并膨大为吸器,吸器侵入寄主根,使寄主根维管束内充满褐色物质。③管花肉苁蓉幼体撑破芽管而出,其上可见6~7个鳞叶突起的;断裂的芽管、胚乳细胞残留体及种皮脱落。④近茎端的根明显膨大变粗;远茎端的寄主根则逐渐萎缩。结论:寄生过程遵循种子萌发长出芽管,接触寄主根形成吸器并侵入寄主根,管花肉苁蓉幼体出现3个阶段。     

华北平原管花肉苁蓉干物质积累和松果菊苷含量动态变化研究

目的：通过对管花肉苁蓉干物质积累和松果菊苷含量的研究,为华北平原人工栽培管花肉苁蓉提供理论依据。方法：比较分析了华北平原管花肉苁蓉不同生长阶段干物质积累量的动态变化,高效液相系统分析了指标性成分松果菊苷含量。结果：管花肉苁蓉干物质积累呈“S”型动态变化,9月份干物质积累增加最多,生长12个月单株干物质量可达138.58 g;不同接种时间的管花肉苁蓉,随着接种时间的推迟,年内干物质积累量显著降低;管花肉苁蓉松果菊苷含量以生长5个月时最高,达到30.59%,之后逐渐降低,生长12个月时松果菊苷含量为9.76%。结论：明确了华北平原一年生管花肉苁蓉干物质积累和松果菊苷含量的动态变化规律。     

氟啶酮对管花肉苁蓉种子萌发影响的研究

管花肉苁蓉C istanche tubulosa(Schenk)Whigt是列当科肉苁蓉属多年生全寄生草本植物[1],以干燥肉质茎入药,是中药材肉苁蓉基源植物之一[2]。近年来由于市场需求量不断增加,造成野生资源的严重匮乏,已被列为国家二级珍稀濒危保护植物[3]。为了满足药用,开展了人工种植管花肉苁蓉的研究[4-6],但接种率普遍较低,这主要是因为管花肉苁蓉是寄生植物,种子萌发机制尚不清楚,自然条件下,其萌发需要来自寄主柽柳根的刺激。本实验研究了     

管花肉苁蓉不同部位中苯乙醇总苷含量的测定

目的:考察苯乙醇总苷在管花肉苁蓉不同部位的分布情况。方法:采用UV法测定管花肉苁蓉不同部位中苯乙醇总苷的含量。结果:苯乙醇总苷在管花肉苁蓉不同部位分布为根部>中部>顶部,同一株管花肉苁蓉中顶部和根部的最大差异达到8.7倍。结论:管花肉苁蓉不同部位苯乙醇总苷含量的差异很大,且大部分的有效成分分布在根部,这些数据将为更加合理科学地使用开发管花肉苁蓉提供依据。     

肉苁蓉和管花肉苁蓉通便与补肾壮阳药理作用的研究

目的 :为了阐明管花肉苁蓉是否可以作为肉苁蓉代用品使用。方法 :根据其主治功效 ,对肉苁蓉和管花肉苁蓉水煎液对小鼠通便作用及对“肾阳虚”小鼠体重、耐寒时间等进行了实验研究。结果 :二者均具有一定的通便润燥和温补肾阳的作用。结论 :初步认为在目前肉苁蓉地道药材资源急骤减少时 ,管花肉苁蓉可以代肉苁蓉使用。     

药用肉苁蓉的遗传多样性RAPD分析

目的 :荒漠肉苁蓉Cistanche deserticola和管花肉苁蓉Cistanche tubulosa群体遗传多样性的研究。方法 :对荒漠肉苁蓉 2个野生居群和管花肉苁蓉 4个野生居群进行RAPD分析 ,利用POPGENE1.31版软件分析群体的遗传多样性。结果 :荒漠肉苁蓉平均多态位点百分率 47.37% ,2个居群多态位点分别为 39.4 7%和 35.53% ,平均Nei’s基因多样性为 0 .135 8,Shannon’s多态性信息指数为 0.2072 ,基因分化系数Gst=0.2546。管花肉苁蓉平均多态位点百分率 27.5 9% ,各居群多态位点百分率从 19.54 %到 25.29% ,其中安迪尔居群的最高 25.29% ,平均Nei’s基因多样性为 0.0823,Shannon’s多态性信息指数为 0.1258,基因分化系数Gst=0.1755。结论 :荒漠肉苁蓉和管花肉苁蓉在居群间均有一定的分化 ,荒漠肉苁蓉的遗传多样性明显高于管花肉苁蓉 ,并已明显分化成 2个生态型。     

不同品种肉苁蓉药材一些药理作用的比较

肉苁蓉、管花肉苁蓉及水浸后肉苁蓉的水煎物醇溶部分能显著增加去势大鼠精囊前列腺的重量,肉苁蓉及管化肉苁蓉的水煎物,还可提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活力。     

管花肉苁蓉花中查耳酮合酶的基因克隆、功能鉴定与表达分析

目的 研究管花肉苁蓉Cistanche tubulosa花中查耳酮合酶（chalcone synthase）Ct CHS蛋白的功能和Ct CHS基因在白、红、紫3种颜色花中的表达模式。方法 利用RT-PCR克隆Ct CHS基因并进行生物信息学分析。将p ET-28a-CtCHS质粒转入大肠杆菌通过IPTG诱导蛋白表达。将Ct CHS重组蛋白与底物4-香豆酰辅酶A、丙二酰辅酶A孵育并利用HPLC和MS检测产物。将p CAMBIA1300-35S-GFP-CtCHS质粒转入拟南芥原生质体观察CtCHS蛋白亚细胞定位。利用q RT-PCR检测Ct CHS基因在3种颜色管花肉苁蓉花中的表达模式。结果 克隆出1条Ct CHS基因，开放阅读框（open reading frame,ORF）长度为1173 bp，编码390个氨基酸，蛋白相对分子质量为42 800，具有查耳酮合酶保守的催化残基Cys164、His303、Asn336。利用大肠杆菌外源表达Ct CHS蛋白并纯化获得重组蛋白。Ct CHS蛋白能够催化4-香豆酰辅酶A与丙二酰辅酶A生成柚皮素查耳酮。Ct CHS蛋白主要定位于细胞质。Ct C...     

干旱胁迫对管花肉苁蓉组织培养体系中苯乙醇苷类成分含量的影响

目的建立管花肉苁蓉Cistanche tubulosa组织培养体系,并考察干旱胁迫对其中苯乙醇苷类成分含量的影响。方法通过液质联用技术分析管花肉苁蓉愈伤组织与悬浮培养体系中的主要化学成分,绘制其生长曲线,并通过渗透压调节剂(NaCl、甘露醇和PEG6000)模拟干旱胁迫环境,考察组织培养体系中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量的变化。结果管花肉苁蓉愈伤组织与悬浮培养细胞均能生成松果菊苷和毛蕊花糖苷;绘制管花肉苁蓉愈伤组织生长曲线,确定30d为最佳继代时间;NaCl和甘露醇所诱导的干旱胁迫不利于愈伤组织细胞的生长及其苯乙醇苷类成分的积累,而6%PEG6000能显著促进悬浮细胞中苯乙醇苷类化合物的生成,诱导15d后,松果菊苷和毛蕊花糖苷的生物量分别为(1.07±0.10)g/L和(0.12±0.01)g/L,分别可达细胞干质量的20.94%和2.27%,为对照组的1.29倍和1.19倍。结论 PEG6000介导的干旱胁迫对管花肉苁蓉悬浮细胞中松果菊苷和毛蕊花糖苷的积累有明显促进作用。     

多年生乌拉尔甘草复合丛枝菌根真菌接种效应研究

目的:探究2种丛枝菌根真菌复合与独立接种对田间栽培多年生乌拉尔甘草生长与有效成分积累的长短期效应。方法:选取摩西斗管囊霉Funneliformis mosseae与根内根孢囊霉Rhiaophagus intraradices 2种丛枝菌根真菌菌种,在大田条件下对乌拉尔甘草进行单菌种与复合菌种接种处理,分别于栽培的第1年和第2年采集乌拉尔甘草样品,分析其形态指标和有效成分甘草酸、甘草苷含量。结果:田间试验结果表明,复合接种和摩西斗管囊霉单接种均对乌拉尔甘草中甘草酸与甘草苷含量有提升作用,其中复合接种提升效果最为显著,其次为摩西斗管囊霉单接种,根内根孢囊霉单接种处理无显著提升作用。接种处理组乌拉尔甘草种苗的生长指标与对照组差异无统计学意义。接种丛枝菌根真菌显著提高了甘草苷含量与甘草酸含量的比值,接种组甘草苷、甘草酸的积累速率呈显著正相关且与对照组有明显差异。结论:揭示了大田条件下复合丛枝菌根真菌接种的长期效应,发现摩西斗管囊霉与根内根孢囊霉复合接种可以提高大田栽培乌拉尔甘草的品质,并对甘草苷与甘草酸的含量比例有调节作用,为人工栽培乌拉尔甘草过程中丛枝菌根真菌利用提供参考。     

肉苁蓉属植物叶绿体基因组密码子偏好性分析

目的 明确肉苁蓉属药用植物叶绿体基因组密码子使用偏性及影响因素。方法 以肉苁蓉Cistanche deserticola、盐生肉苁蓉C. salsa、沙苁蓉C. sinensis和管花肉苁蓉C. tubulosa为研究材料，利用CUSP在线软件、CodonW 1.4.2、SPSS、Microsoft Excel等软件分析其基因密码子使用偏性参数。结果 4个肉苁蓉属植物叶绿体基因组的密码子使用模式相似，密码子均以第3位碱基A/T结尾且密码子使用更偏向A/T碱基；4个物种的有效密码子数值（effective number of codon,ENC）均大于35，说明肉苁蓉属物种叶绿体基因密码子偏好性较弱。中性绘图分析、有效密码字数（ENC-plot）分析、奇偶偏好性（PR2-plot）分析和对应性分析的结果均说明自然选择是影响肉苁蓉属叶绿体基因组密码子偏好性的主要因素。利用同义密码子的相对使用频率（relative synonymous codon usage,RSCU）值筛选出肉苁蓉属4个物种共同拥有4个最优密码子。结论 对肉苁蓉属4个物种叶绿体基因组密码子使用偏性进行分析，揭示了影响其密...