唾液酸修饰绿原酸脂质体制备及其体外抗肿瘤活性研究

目的 响应面设计制备唾液酸（sialic acid，SA）修饰的绿原酸（chlorogenic acid，CA）脂质体（CA-SAL），考察其体外细胞毒性和摄取。方法 采用改良逆相乙醇注入法制备CA-SAL，以葡聚糖凝胶G-50柱离心法分离脂质体和游离药物，并通过HPLC法测定药物质量浓度，计算包封率。以包封率和载药量为考察指标，通过Box-Behnken响应面设计实验优化CA-SAL的处方和工艺，MTT法评价其对人肺癌A549细胞的细胞毒性，倒置荧光显微镜观察A549细胞对CA-SAL的摄取情况。结果 优化后的CA-SAL制备条件：氢化大豆磷脂与绿原酸的质量比为15∶1，水化温度60℃，超声功率400 W。CA-SAL平均粒径为（90.13±0.51）nm，多分散指数（PDI）为0.16±0.01，Zeta电位为（-25.3±0.5）mV；包封率为57.8%，RSD为0.1%。MTT实验结果显示，CA-SAL对A549细胞的增殖抑制作用显著强于绿原酸脂质体（CA-CL），细胞摄取实验表明A549细胞对唾液酸修饰脂质体的摄取更高。结论 通过响应面优化制备的CA-SAL粒径小、性质稳定。经唾液酸修饰后的脂质体可以增强人肺癌A549细胞的细胞摄取及体外细胞毒性。     

Box-Behnken设计-效应面法优化延胡索乙素聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒处方和体外释药行为研究

目的 Box-Behnken设计-效应面法（Box-Behnken design-response surface method,BBD-RSM）优化延胡索乙素（THP）聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly（lactic-co-glycolic acid）,PLGA]纳米粒（THP-PLGA-NPs）处方,并进行体外评价。方法 纳米沉淀法制备THP-PLGA-NPs,以包封率、载药量、多分散系数（polydispersity index,PDI）和粒径大小为评价指标,单因素结合BBD-RSM筛选最优处方,采用甘露醇作为冻干保护剂制备成冻干粉,将最优处方进行表征及体外释放实验。结果 最佳处方为PLGA用量为491.8 mg、油水体积比1：5.2、乳化剂质量分数为1.12%。THP-PLGA-NPS包封率为（185.07±1.06）%,载药量为（4.73±0.21）%,粒径为（181.32±7.14）nm,分别与模型预测值接近。体外释药具有明显的缓释特征,释药过程符合Higuchi模型：M_t/M_∞=0.112 4 t^1/2+0.078 0,r=0.987 9。结论 Box-Behnken实验设计可用于THP-PLGA-NPS处方的筛选,且优化后的纳米粒具有缓释作用。     

TPGS表面修饰岩白菜素固体脂质纳米粒的制备与口服生物利用度研究

目的 制备D-α-维生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯（TPGS）修饰岩白菜素固体脂质纳米粒（TPGS surface-modified bergenin solid lipid nanoparticles,TPGS-Ber-SLN）,并考察其体外释药和口服药动学行为。方法 采用高压均质法制备TPGS-Ber-SLN。以包封率、载药量和粒径为考察指标,通过单因素考察结合Box-Behnken设计-效应面法（Box Behnken design- response surface methodology,BBD-RSM）优化TPGS-Ber-SLN处方,并制备成冻干粉末。X射线粉末衍射法（X-ray powder diffraction,XRPD）和差式扫描量热法（differential scanning calorimetry,DSC）分析岩白菜素在TPGS-Ber-SLN冻干粉末中的存在状态,透析袋法考察TPGS-Ber-SLN在不同介质中释药情况。以岩白菜素原料药为参考,比较TPGS-Ber-SLN在体内药动学行为及口服生物利用度。结果 TPGS-Ber-SLN最佳处方工艺：岩白菜素用量为40 mg,单硬脂酸甘油酯用量525 mg,泊洛沙姆188质量浓度为17.5 mg/mL,TPGS质量浓度为0.2 mg/mL,均质次数为9次。TPGS-Ber-SLN的平均包封率、载药量、粒径及ζ电位分别为（83.16±1.09）%、（4.97±0.13）%、（229.46±19.07）nm和（-15.67±0.23）mV,体外释药过程符合Weibull模型。口服药动学结果显示,TPGS-Ber-SLN的t_max延长至（2.07±0.43）h,t_1/2延长至（4.21±0.78）h,C_max和生物利用度分别提高至3.91倍和5.34倍。结论 TPGS-Ber-SLN显著改变了岩白菜素的药动学行为,增加了口服吸收生物利用度。     

大黄酚前体脂质体的制备及其质量评价

目的 研制大黄酚前体脂质体并对其质量考察。方法 采用载体沉积法制备大黄酚前体脂质体,以包封率为评价指标,通过单因素考察和正交试验法优化该处方,并观察其稳定性、形态及粒径。结果 大黄酚前体脂质体的最佳处方：温度为40℃,载脂比为40：1,胆固醇卵磷脂比为1：5,药脂比1：12;按该处方制备的大黄酚前体脂质体稳定性好,包封率达（84.69±2.29）%,平均粒径为（593.4±14.2）nm,Zeta电位为（-54.35±0.88）mV。结论 采用载体沉积法,以山梨醇为载体,按最优处方和最佳制备条件可制得包封率较高、稳定性好、粒径均匀的大黄酚前体脂质体。     

不锈钢膜乳化法制备PLGA微球的初步研究与评价

目的： 以水飞蓟宾药物为主药,利用不锈钢膜制备粒径均一的聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）微球。方法：采用不锈钢膜乳化法,结合单因素考察优化微球的制备工艺,并对微球的平均粒径、粒径分布、载药量、包封率及体外释放等理化性质进行考察。结果：所得微球圆整度好,表面光滑,平均粒径（4.961±0.56）μm,径距（1.75±0.18）,包封率（54.997±4.05）%,载药量（23.16±1.70）%。结论：不锈钢膜乳化法可用于制备中药难溶性成分水飞蓟宾PLGA微球,且所制备的微球粒径均一可控,有较大的开发价值。     

载As2O3 pH敏感钙砷复合物脂质体的制备及体外评价

目的 制备pH敏感释药的As₂O₃脂质体，并进行体外评价。方法 采用薄膜分散法制备含钙离子脂质体，然后用离子沉淀法孵育制备钙砷复合物脂质体（CaAs-LP）。测定CaAs-LP的粒径、Zeta电位及多分散系数（PDI）；透射电子显微镜观察脂质体的形态；电感耦合等离子体发射光谱仪测定纳米药物的载药量与包封率；透析袋法考察其体外释药特性。噻唑蓝（MTT）法考察未载药脂质体及CaAs-LP对人源性乳腺癌MCF-7细胞、人源性脑胶质瘤U87细胞和人源性肝癌HepG2细胞的毒性；共聚焦显微镜考察U87细胞对CaAs-LP的摄取效率。结果 制备的CaAs-LP呈规整类球型，粒径约为（117.16±1.94）nm，包封率和载药量分别为（74.31±2.11）%、（8.31±0.13）%。体外释放研究表明，CaAs-LP具有明显的缓释以及pH响应释药特征。未载药的脂质体在MCF-7、U87、HepG2和L02细胞中的生物相容性良好；CaAs-LP抑制肿瘤细胞生长的作用较原药有所上升，半数抑制浓度（IC₅₀）值分别为11.91、4.90、19.41、27.59 μmol/L。细胞摄取研究表明肝癌细胞对脂质体具有良好的摄取。结论 CaAs-LP具备显著的缓释以及pH响应释药的特性，在肿瘤治疗方面具有较好的应用前景。     

柠檬苦素脂质体的制备和制剂学评价

目的 针对柠檬苦素（limonin,LM）的成药性问题,开发其脂质体制剂,优化处方和制备工艺,并考察其体外抗肿瘤活性。方法 采用薄膜分散法制备柠檬苦素脂质体（LM@Lip）,通过单因素实验和正交试验筛选LM@Lip的制备工艺和处方,采用Malvern粒度仪检测所制备LM@Lip粒径、PDI及Zeta电位,采用HPLC检测其包封率和载药量,透析法研究LM@Lip体外释放情况,MTT法评价LM@Lip对HepG2及A549细胞的毒性。结果 优化后的脂质体制备条件：药脂比为1：150,胆脂比为1：9,探头超声条件为功率120 W、时间6 min（间隔1 s）。载药脂质体的平均粒径为（119.5±6.2）nm,PDI为0.318±0.124,Zeta电位为（-17.2±1.3）mV,包封率为87.9%,载药量为0.57%,药物质量浓度为63.4 μg/mL。体外释放实验结果显示,12 h累积释放量为58.59%。MTT结果显示,LM@Lip对HepG2和A549细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为20.16、15.39 μg/mL,其肿瘤抑制作用优于LM单药。结论 将LM制备成LM@Lip可以增加药物的稳定性及溶解度,药物表现出一定的缓释现象,并且能明显抑制肿瘤细胞增殖,效果优于LM。     

载姜黄素pH敏感聚合物胶束的制备、表征及体内外抗非小细胞肺癌研究

目的 合成两亲性聚合物聚乙二醇-聚L-天冬氨酸［methoxy poly （ethylene glycol）-b-poly （β-benzyl L-aspartate）,PEG-b-PBLA］和pH敏感性聚合物［octadecylamine-p （API-Asp）₁₀,OAPI］,并利用PEG-b-PBLA包载OAPI和抗肿瘤药物姜黄素,构建pH敏感性载药胶束,考察其理化性质,并评价其体内外抗非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）效果。方法 利用甲氧基聚乙二醇胺［methoxy poly （ethylene glycol） amine,mPEG₂₀₀₀-NH₂］引发L-天冬氨酸-4-苄酯-N-羧基环内酸酐［benzyl （S）-2,5-dioxooxazolidine-4-acetate,BLA-NCA］开环聚合制备两亲性聚合物PEG-b-PBLA。利用硬脂胺引发BLA-NCA开环聚合和氨解反应合成具有pH敏感特性的聚合物OAPI。采用透析法制备载姜黄素的具pH敏感特性胶束（C-NP）,并对其粒径、稳定性和pH响应性体外药物释放等性质进行了考察。最后,利用NSCLC A549细胞、三维肿瘤球模型以及A549细胞建立的荷瘤小鼠模型考察了C-NP胶束的体内外抗肿瘤效果。结果 透射电子显微镜结果显示,所制备的C-NP呈类球形,具有明显的核壳结构,且分布均匀,其粒径为（165.32±1.53）nm,ζ电位为（-5.24±0.42）mV,载药量为（5.27±0.14）%,包封率为（88.46±3.28）%,临界胶束浓度为4.82 μg/mL。体外稳定性实验显示在生理条件下,C-NP具有较好的稳定性,敏感性实验显示在酸性条件下,C-NP不稳定,具pH敏感特性。体外药物释放结果表明,在pH 5.0的介质中孵育72 h后,C-NP的累积释放量高达（81.44±5.90）%,表明C-NP胶束具有良好的pH敏感性。细胞毒性实验、肿瘤球生长抑制实验证明C-NP能增强姜黄素体外抗肿瘤活性。细胞共定位实验显示,相比较pH不敏感组C-B-NP,C-NP可以在酸性溶酶体中快速分解,从而逃逸发挥抗肿瘤效应。体内药效学实验结果表明,C-NP组显著抑制了荷瘤裸鼠的肿瘤生长。结论 成功构建了载有姜黄素的pH敏感性胶束C-NP,其具有良好的理化性质和pH敏感性,且通过多种模型初步证实其对NSCLC非小细胞肺癌具有较强的抑制作用。     

溴化双十二烷基二甲基铵修饰的载汉防己甲素聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒制备及体外评价

目的 制备溴化双十二烷基二甲基铵(DMAB)修饰的载汉防己甲素(Tet)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒(DMAB-Tet-PLGA-NPs),考察其制备的影响因素,优化制备工艺,并对其理化性质、细胞毒性及细胞摄取进行研究。方法 采用乳化分散溶剂挥发法制备DMAB-Tet-PLGA-NPs,运用均匀设计试验优化制备工艺,通过包封率、载药量、累积释药量等指标考察其载药特性;采用MTT比色法考察DMAB-Tet-PLGA-NPs对人肺腺癌细胞株A549的细胞毒性;采用定量定性法评价DMAB-Tet-PLGA-NPs细胞摄取率。结果 制备的DMAB-Tet-PLGA-NPs平均粒径为(205.40±2.66)nm,表面带正电,呈规则的球形及椭圆形。药物包封率和载药量分别为(50.780±3.253)%和(2.130±0.035)%。体外释放实验显示DMAB-Tet-PLGA-NPs缓慢释药,48 h累积释药量64.56%。MTT实验表明DMAB-Tet-PLGA-NPs细胞毒性呈剂量及时间依赖性。定性定量细胞摄取实验证实DMAB-Tet-PLGA-NPs能较好地被细胞摄取。结论 DMAB-Tet-PLGA-NPs粒径大小均一,包封率高,体外释药表现出较好的缓释效果,易被细胞摄取,对A549细胞的活性有明显的抑制作用。     

载紫杉醇聚(2-乙基-2-噁唑啉)修饰单壁碳纳米管递药系统的制备及体外抗肿瘤作用评价

目的 以抗肿瘤药物紫杉醇（PTX）为模型药物，制备载紫杉醇聚（2-乙基-2-噁唑啉）（PEOz）修饰单壁碳纳米管递药系统（PTX@PEOz-SWCNT），对其进行理化性质、体外释药、生物相容性及体外抗肿瘤作用的评价。方法 采用化学偶联合成PEOz-SWCNT，用紫外-可见吸收光谱法（UV-Vis）和红外光谱法（FTIR）对合成产物进行表征，并对其粒径和电位进行测定；制备载药复合物PTX@PEOz-SWCNT，测定其载药量和包封率，透析法进行体外释药试验；体外溶血试验评价载体材料的安全性，MTT法评价载体材料生物相容性及载药复合物对MCF-7细胞的生长抑制率，用荧光倒置显微镜考察了香豆素-6（C6）标记载体在MCF-7细胞中的摄取。结果 PEOz-SWCNT材料的平均粒径为（219.8±2.9）nm，Zeta电位值为（-35.23±0.74）mV，PTX@PEOz-SWCNT的载药量为（38.19±0.74）%，包封率为（94.38±0.94）%；载药复合物在pH 5.0的条件下释药明显加快，表现出明显的pH响应性；体外溶血试验结果表明，PEOz-SWCNT质量浓度在0.4 mg/mL以下无明显溶血反应，PEOz-SWCNT材料在细胞水平生物相容性良好，PTX@PEOz-SWCNT对MCF-7细胞的生长抑制率显著增强；与C6@SWCNT相比，C6@PEOz-SWCNT载药复合物的细胞摄取增加。结论 PTX@PEOz-SWCNT递药系统在肿瘤靶向给药方面具有一定的应用前景。     

浅论针刺补泻

针刺补泻是针灸治病的基本法则,其原则是＂虚则补之,实则泻之＂,常用手法包括提插补泻、捻转补泻、徐疾补泻、开阖补泻、迎随补泻、呼吸补泻、平补平泻、烧山火和透天凉等。针刺补泻的机理不是直接补人体之不足,或泻人体之有余,而是通过不同的针刺方法,间接的经过经络的调整作用,产生补虚泻实的效果,从而达到防病治病的目的。     

内科杂病治疗八法

杂病又名杂症,通常指外感病以外的内科疾病,具有寒热虚实夹杂之义,比较难治,若临证审证求因,活用以下八法,定有裨益:①轻清法;②涤浊法;③疏利法;④达郁法;⑤运通法;⑥灵动法;⑦燮理法;⑧固元法。     

祖卡木颗粒剂的除杂工艺研究

目的优选出祖卡木颗粒剂的除杂工艺。方法以总黄酮、总蒽醌、甘草酸的保留率及固形物减少率为考察指标比较不同除杂工艺—超滤法、吸附澄清法、高速离心法、醇沉法及自然沉降法的效果。结果采用高速离心法进行除杂,有效成分保留最多。结论在对比的几种除杂方法中,采用高速离心法有效成分保留最多,而且操作简单,省时。     

肝病调理三法简析

肝病调理三法,即:调理脾胃法、调肾法、调肝法。指出:解除情志致病因素,使之心情舒畅,精神愉快,气机调畅、气血和平,则有利于肝病的康复。     

活血化瘀理气通腑法治疗腹部手术后并发症临床观察

目的：探讨腹部外科手术后并发症防治的措施和效果。方法：自1999年1月至2005年12月的420例患者。年龄最大者70岁，最小15岁，均有腹部手术史，病史以术后10小时-2周不等。不禁食水的病人经口服药，禁食水的病人在静脉补液的基础上，用活血化瘀、理气通腑法治疗。结果：全部患者均经此法治愈出院。其中3例上消化道出血患者避免了再次手术；1例肠瘘患者瘘口愈合；10例肝炎、肝硬化、脾功能亢进患者并发血小板升高，腹痛．经此法治疗，血小板恢复正常，腹痛消失．结论：腹部手术后发生并发症，单用西医输液治疗患者恢复慢，住院时间长，费用昂贵。配合使用活血化瘀、理气通腑法治疗，可较快缓解症状体征，避免再次手术，是一种安全有效、无创易行且经济的治疗方法．     

心悸与《伤寒论》

心悸首见于《伤寒论》,仲景对病机、症状、治法、方药均详尽论述,脉证合参,细分轻重缓急,据证遣方,随证化裁,条文言简意赅,寓意深奥。治疗方法归纳为益气法、温阳法、阴阳双补、温阳利水、健脾化饮、和解法、疏肝法七种。仲景辨治心悸特点为注重温阳化饮,从五脏论治,伤寒心悸和杂病心悸分别辨治,体现辨病与辨证相结合的宗旨。     

清肝、泻肝、养肝、温肝法治疗肝硬化

肝硬化是一种常见的慢性进行性肝脏疾病,本病早在2000多年前,中医即有记载和叙述,中医根据肝硬化各阶段、各类型证候表现不同,根据临床表现,一般可分为代偿期的肝积和失代偿期的臌胀。对肝病的治疗,历代医学家在《黄帝内经》的基础上各有发挥,给后世肝病临床留下宝贵经验,现以清王旭高的治肝三十法的论述中归纳成治肝八法,现以其中四法,即清肝法、泻肝法、养肝法、温肝法的治疗方法上,探讨及分析其在肝硬化治疗上的运用,以便于临床掌握使用。     

薯蓣皂苷元的制备方法研究进展

目前薯蓣皂苷元的制备方法主要有酸水解法、微生物法、酶解法以及一些其他方法.传统的酸水解方法由于酸用量大,酸降解有机质副产物多,使污水排放量大,环境污染严重,限制了薯蓣皂苷元的产业化发展;而利用微生物、酶等生物水解法,具有反应条件温和、环境友好等特点,连同诱导子激发植物组织细胞培养等相关技术,受到研究人员的广泛关注,已成为薯蓣皂苷元产业化制备的新的发展方向.     

三步疗法治疗带状疱疹72例

采用皮肤针、艾灸、针刺三步疗法治疗带状疱疹，大大缩短了病程，疗效显著。     

润、燥、降、升四法治便秘

便秘是人们最熟悉的消化道症状之一,很多人习惯将便秘与大黄联系在一起。针对大黄治疗便秘的不足之处,该文提出了用润、燥、降、升四法治疗便秘,用药轻灵,效果稳定。