刺糖多糖的分离纯化与结构分析

 目的 分离纯化刺糖多糖,并对刺糖多糖的结构进行分析。方法 采用水提醇沉法提取刺糖多糖,联合使用大孔吸附树脂、纤维素和葡聚糖凝胶柱色谱对刺糖多糖进行分离纯化,采用凝胶过滤法测定其纯度和相对分子质量,气相色谱法分析其单糖组成,再通过部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解和核磁共振分析其结构。结果 经分离纯化得到多糖组分AP1-1;纯度测定表明其为均一多糖,相对分子质量约为99.7×10³;其单糖组成为甘露糖、葡萄糖和半乳糖,物质的量比为1.10∶2.19 ∶4.32;主链由→4)-β-D-GalpA-(1→,→4)-β-D-Galp-(1→和→4,6)-α-D-Glcp-(1→组成,支链由→6)-α-D-Glcp和2- OCH³-α-D-Man组成。结论 多糖AP1-1是一个有分枝的杂多糖。     

猴头菌丝体多糖的化学研究

目的:对猴头菌丝体的多糖类成分进行化学组成及结构研究。方法:DEAE 纤维素、DEAE-Sephadex 柱分离,葡聚糖凝胶柱层析测定纯度,凝胶过滤法测定分子量,酶解、气相色谱及光谱分析等测定化学组成及结构。结果和结论:从猴头菌丝体中分离得到5 个多糖均一体,其主要成分HEPA₁ 分子量6 .2 ×10⁴ ,为以葡萄糖为主的杂多糖,单糖组成摩尔比为葡萄糖∶阿拉伯糖∶木糖= 33 .1∶1 .7∶1 .0 ;HEPA₄ 分子量2 .6 ×10⁴ ,为杂多糖肽,肽部分由17 种氨基酸组成,占糖肽的3 .8 % ;HEPB2 分子量1 .2×10⁴ ,为以葡萄糖为主的杂多糖,单糖组成摩尔比为葡萄糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖= 50 .7∶2 .1∶1 .0∶2 .4 。各均一体单糖间的甙键构型均以α-甙键为主。     

SE-HPLC测定太子神悦胶囊中多糖相对分子质量分布及含量

 目的建立高效液相色谱法测定多糖相对分子质量和含量的方法;分析太子神悦胶囊中多糖的相对分子质量分布和含量测定。方法采用SephadexG-100凝胶柱纯化分离不同相对分子质量的多糖组分,用TSK-GELG3000SW,7.8mm×300mm色谱柱,2410示差折光检测仪,测定其相对分子质量分布和含量。结果太子神悦胶囊中相对分子质量17.0×10³-27.0×10³的多糖(JNTP2)的含量为(0.805±0.01)%;相对分子质量分布为Mr:24×10³;Mn:17×10³;Mp:27×10³;Mr/Mn为1.4结论建立了简便、快捷、精密度高的凝胶色谱方法;较为准确的测定了太子神悦胶囊中多糖的含量和相对分子质量分布,为制定太子神悦胶囊多糖的质量标准提供依据。     

虎奶菌多糖的分离纯化及成分分析

 目的：虎奶菌碱溶性多糖的分离纯化及成分分析。方法：用0.5 mol·L^-1氢氧化钠溶液从虎奶菌核中提取多糖,利用气相色谱法(GLC)测定多糖组成,凝胶渗透色谱法(GPC)测定相对分子质童,红外光语法(FT-IR)测定糖苷键构型,高腆酸氧化及Smith降解确定糖基间连接方式。结果：虎奶菌多糖由葡萄糖组成,平均相对分子质量为4.3×10⁵。经高碘酸氧化,每摩尔单糖残基消耗0.48 mol·L^-1高碘酸,同时释放0.24 mol·L^-1甲酸,氧化产物经还原,水解后检出葡萄糖和甘油。红外光谱在890 cm^-1处有吸收,而在840 cm^-1处无吸收。结论：虎奶菌碱溶性多糖为(1→3)-β-D-葡聚糖,并含1,6-连续支链。     

山茱萸多糖的化学研究

目的 :研究山茱萸补益活性成分。方法 :采用热水提取 ,乙醇沉淀 ,三氯醋酸除蛋白等步骤分得粗多糖 ,DEAE 纤维素及SephadexG-200柱层析分离 ,纯化 ,高效凝胶渗透色谱鉴定纯度并测定分子量 ,薄层层析 ,纸层析 ,气相色谱 ,气 质联用 ,甲基化分析 ,部分酸水解及¹³CNMR确定多糖的化学结构。结果 :分离得到一水溶性多糖Co-4 ,其分子量为 2.4 7× 10⁴,主链为 1 ,4-连接的 β-D-葡聚糖 ,部分葡萄糖残基 6位上有分枝。结论 :首次对山茱萸多糖进行较深入的化学研究并阐明水溶性多糖Co-4化学结构。     

HPLC测定银杏外种皮多糖的分子质量及含量

目的:建立银杏外种皮多糖的分子质量及含量的HPLC测定方法。方法:以葡聚糖为标样,采用HPLC法,PL aquagel-OH MIXED(7.5 mm×300 mm,8μm)色谱柱,柱温25℃,示差折光检测器,流动相为超纯水,流速1.0mL.min^-1。结果:银杏外种皮多糖的分子质量为11 062.5,RSD 0.78% (n=6);含量为68.7%,RSD 3.4%(n=6),葡聚糖(分子质量为12 000)在1~20μg呈良好线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率为97.9%,RSD 2.5%。结论:本方法灵敏度高,操作简便,重复性好,可用于银杏外种皮多糖的分子质量和含量的测定。     

不同产地和不同品种枸杞子中多糖成分测定

目的 通过比较19批不同产地宁夏枸杞果实和3批北方枸杞果实的总糖含量、重均相对分子质量（M_w）及单糖组成,探索枸杞中多糖成分的差异性。方法 采用水提醇沉法获得22批枸杞的粗多糖成分,以葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸法测定总糖含量;Shodex SB-806 HQ型凝胶柱和Shodex SB-804 HQ型凝胶柱串联,流动相为0.1%氯化钠溶液,柱温为40 ℃,柱流速为0.5 mL·min^–1,采用凝胶渗透色谱-示差检测器-多角度激光光散射法（GPC-RI-MALLS）测定M_w及分布系数;选择Zorbax Eclipse XDB C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液,柱温为35 ℃,流速为1.0 mL·min^–1,检测波长为250 nm,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化-高效液相色谱-光电二极管阵列检测器（HPLC-PDA）测定单糖组成,同时建立单糖组成指纹图谱。结果 22批枸杞样品中粗多糖成分的质量分数为3.24%~8.66%,M_w为0.733×10⁶~3.191×10⁶;多糖成分均由9种单糖组成,其中阿拉伯糖含量最高。结果显示,不同产地宁夏枸杞粗多糖结构较为一致,但北方枸杞中多糖成分在结构上与宁夏枸杞存在较明显差异,主要体现在M_w、色谱峰面积比及半乳糖醛酸含量上。结论 宁夏枸杞和北方枸杞的粗多糖成分在结构上有较大差异,且通过建立的单糖组成及M_w测定方法可以对其进行有效区分,可为枸杞质量标准完善及枸杞资源评价提供方法和思路。     

山豆根多糖的性质和化学组成

 目的研究山豆根中各种水溶性多糖的性质、组成和类型。方法山豆根脱脂后,用热水,1mol·L^-1NaOH,2.5 mol·L^-1NaOH依次进行提取,分离纯化,进行组成分析和性质测定。结果共分离得到8种均一的多糖：山豆根水提多糖Ssa^-1,Ssa^-2,Ssa^-3,Ssa^-4,山豆根碱提多糖SSb-1FA, SSb^-2,SSb^-3和SSc^-1,根据组成和性质,它们分属于5种结构类型。结论山豆根中的可溶性多糖包括：淀粉、类淀粉、半纤维素、果胶,其中淀粉的含量最多,其次为果胶类多糖。     

牛膝高分子物质的细胞毒性及其组成的初步研究

 目的:研究牛膝对P388白血病细胞的体外细胞毒性及其活性成分。方法:牛膝根以水提取,经Toyopear1 HW-40C凝胶过滤,得到高分子物质部分。以P388白血病细胞的体外培养确定细胞毒活性。以Sephacryl S-200进行分离和纯化。以¹H-NMR进行初步的组成鉴定?结果:牛膝水提取物的高分子物质部分有细胞毒性,IC₅₀值为5.2μg·ml^-1。多糖为其主要成分,由木糖、甘露糖和果糖等单糖做成。结论:牛膝水提取物的高分子物质部分对P388白血病细胞有显著的体外细胞毒性?多糖可能是细胞毒性成分。     

高效凝胶过滤色谱法测定沙漠嘎多糖的重均相对分子质量

目的:建立以高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)测定沙漠嘎多糖重均相对分子质量的方法。方法:通过将沙漠嘎多糖分离、柱层析纯化,获得沙漠嘎多糖S1,采用HPGFC法测定重均相对分子质量。色谱条件:AsahipakGS色谱柱GS-3207E(250mm×7.5mmID,9μm)与GS-6207G(500mm×7.5mmID,9μm)串联使用;流动相:0.003mol·L^-1乙酸钠;流速:1mL·min^-1;柱温:35℃;示差折光检测器(RID)。结果:沙漠嘎多糖重均相对分子质量的回归方程为:lg(Mw)=10.167-0.287t_R(r=-0.976),线性范围为:10000～500000Da,测得沙漠嘎多糖S1重均相对分子质量约为8.5×10⁴Da。结论:为沙漠嘎多糖重均相对分子质量测定提供了简便、实用的分析方法。     

红栓菌胞外多糖分离纯化和性质研究

目的：分离并研究红栓菌胞外多糖的结构性质。方法：红栓菌发酵液，滤去菌丝等固形物，浓缩发酵液至1／4原体积，经乙醇沉淀、脱色、除蛋白、乙醇沉淀、干燥得多糖粗品PPS1，PPS1经DEAE-纤维素DE-52以及Sephadex G-150纯化得多糖纯品PPS2；采用凝胶过滤、醋酸纤维膜电泳、红外光谱、紫外光谱、核磁共振谱、气相色谱等方法测定多糖的性质。结论：从红栓菌中获得的多糖PPS2为单一组分，相对分子量为29200，由木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖等单糖组成。     

白花蛇舌草总多糖的分离纯化、结构鉴定及初步免疫活性分析

目的:分离纯化白花蛇舌草总多糖,研究其对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫增强活性。方法:采用超滤技术分离纯化白花蛇舌草总多糖,高效凝胶渗透色谱-示差检测器方法测定相对分子质量,柱前衍生化HPLC分析其单糖组成;采用环磷酰胺致免疫低下小鼠碳粒廓清试验研究其免疫活性。结果:从白花蛇舌草中分离得到1个单一多糖组分ODP-1,其相对分子质量20.88 k Da,单糖组成为甘露糖-鼠李糖-半乳糖醛酸-葡萄糖-半乳糖-阿拉伯糖,摩尔比0.005∶0.033∶0.575∶1.000∶0.144∶0.143;免疫活性试验结果表明,ODP-1可升高环磷酰胺致免疫低下小鼠廓清指数、吞噬指数、胸腺指数和脾指数。结论:白花蛇舌草多糖ODP-1为均一多糖,具有免疫增强活性。     

芦荟多糖的纯化工艺与体外抗肿瘤活性

目的:研究芦荟多糖的提取、纯化工艺及体外抗肿瘤活性,为芦荟的产业化开发提供实验依据。方法:采用水提醇沉,三氯乙酸法除蛋白,DEAE-52离子交换色谱分离。用Sephacryl S-400凝胶柱层析纯化并确定芦荟多糖的相对分子量,HPLC法检测纯度,GC法鉴别单糖组成及分子摩尔比。以MTT法观察其体外抗肿瘤活性等。结果:从中华芦荟(Aloe vera L.var. chinesis(Haw.)Berger.)凝胶冻干粉中提取分离得到纯多糖AVP,经HPLC检测为单一对称峰,相对分子量为86000,由甘露糖和葡萄糖组成,摩尔比为10.3∶1.0。AVP对人肝癌细胞(SMMC-7721)、人胃癌细胞(BGC-823)及人肺癌细胞(A549)的增殖均有抑制作用。结论:该法分离的芦荟多糖AVP纯度好,收率高达3.6%,可用于进一步的研究和开发,提高芦荟的资源利用率。     

红花水溶性多糖的分离、纯化及初步研究

 目的从红花中提取水溶性粗多糖,进一步纯化,得到均一的多糖CTP,并研究其组成和性质。方法粗多糖经反复冻融、Sevage法脱蛋白、超滤、柱色谱等方法分离纯化得到CTP。经比旋光度测定、HPLC等方法检验其均一性,结果CTP为均一组分,GC分析其单糖组成为Gle和Cal,摩尔比为6.08:1 结论CTP为中性杂多糖,相对分子质量4000～5000。     

黑石耳多糖的初步化学研究

 目的：测定黑石耳(Dermatocarpon miniatum,DEM)多糖的组成、分子量及苷键的连接方式。方法：利用气相色谱法测定多糖的组成，凝胶过滤法测定分子量，Smith降解及高碘酸氧化确定苷键的连接方式。红外光谱测定苷键类型。结果：DEM多糖由葡萄糖聚合而成，平均分子量为1.8×10⁶。高碘酸氧化，Smith降解有甲酸、丙三醇、丁四醇生成。结论：DEM多糖主要由〖WTBX〗α(1→4)、α(1→6)苷键连接而成的葡聚糖。     

黄芪多糖在体内代谢形式研究

目的:以黄芪多糖为研究对象,研究其通过口服给药后在动物体内的代谢形式。方法:采用醇沉试验和斐林反应等化学鉴别法和高效凝胶渗透色谱法鉴定黄芪多糖在SD大鼠体内的代谢形式。结果:黄芪多糖体内代谢物醇沉试验为阴性,表明未检测到多糖;斐林试剂反应为阳性,表明在含药血清样品中可检测到多糖代谢物。高效凝胶色谱法测定黄芪多糖体内代谢物分子量与单糖标准品基本一致。结论:黄芪多糖经口服后在动物体内分解为单糖或低聚糖。     

中药多糖相对分子质量测定方法的概述

目的:目前中药多糖药理活性的研究比较活跃,关于多糖相对分子质量测定方法的文献研究较少。综述中药多糖相对分子质量的测定方法,简要的归纳分析其优缺点并进行对比,筛选出较为简便实用的多糖相对分子质量测定方法,为中药多糖相对分子质量的测定以及中药多糖的药理活性进一步研究提供理论基础。方法:查阅国内近些年关于中药多糖相对分子质量测定的大量文献,对中药多糖相对分子质量的测定方法进行分析归纳。结果:测定多糖相对分子质量的方法主要有黏度法、超离心法、光散射法、渗透压法、凝胶色谱法、高效凝胶色谱法以及联用法等,其中近些年最常用的是高效凝胶渗透色谱法。结论:该方法操作简单、快速、灵敏、重复性好和样品用量少,可作为测定多糖相对分子质量及分子分布的首选方法。     

仙茅多糖的分离纯化及结构分析

目的:对仙茅多糖进行分离纯化,并对其结构进行分析,为仙茅多糖的进一步应用提供理论基础。方法:仙茅根茎经水提、醇沉、冷冻干燥得仙茅粗多糖(XMP),经DEAE-纤维素柱和Sepharose CL-6B凝胶柱色谱纯化得纯多糖XMP-1,采用凝胶渗透色谱、紫外光谱、红外光谱、气质联用等技术对XMP-1的结构进行分析。结果:仙茅多糖由甘露糖、葡萄糖、半乳糖3种单糖组成,其摩尔比为81.2∶5.7∶1,多糖质量分数为91.8%,相对分子质量为3 031 Da,不含核酸、蛋白质和色素。具有吡喃特征吸收峰,在水溶液分子中的分子构象可能为自然卷曲结构。结论:仙茅纯多糖是一种分子量较小的中性杂多糖。     

黑木耳酸性多糖(FⅡ)的分离、纯化及相对分子质量测定

 目的：黑木耳酸性多糖（FⅡ）的分离、纯化及分子质量测定。方法：按文献方法，从黑木耳子实体提取得到酸性多糖（FⅡ），采用20%H2O2溶液脱色，通过纸层析、柱层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定，用小角激光光散射和膜渗透压法测定FⅡ的重均分子质量Mw和数均分子质量Mn。结果：FⅡ纯度较高，它的重均分子质量为58.8×104，数均分子质量为14.3×104。结论：多糖脱色最好用弱氧化剂，不要用强氧化剂，光散射法和膜渗透压法是测定多糖分子量的有效方法。