生态因子对人参皂苷合成及其关键酶基因表达的影响

目的研究生态因子和人参皂苷合成关键酶表达对人参皂苷合成、积累的影响。方法以人工栽培的4年生人参为研究对象,用实时荧光定量PCR法对在不同生长时期根组织中8个关键酶基因(HMGR、FPS、SS、SE、DS、β-AS、CYP82D47、CYP716A47)表达量进行测定;采用HPLC法测定根中8种单体皂苷(人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rb_1、Rb_2、Rb_3、Rc、Rd)的量;以小型气象站对人参样地气象数据进行采集;采用SPSS软件进行相关性分析。结果人参皂苷合成关键酶基因在人参皂苷积累的重要时期(开花期至果熟期)的表达高于果后参根生长期和枯萎期,人参皂苷合成关键酶基因的表达相互影响,协同增减,人参根组织中关键酶基因的表达对人参皂苷积累多表现出了正相关关系;人参根中人参皂苷Rg_1、Rb_1、Re、Rc量较高,8种单体皂苷量动态变化趋势并不相同;温度、光合有效辐射、土壤水势是影响根部人参皂苷合成的重要生态因子,温度与人参皂苷Rb_1、Rd显著负相关(P0.05),光合有效辐射对人参皂苷Rg_1的生成有显著的促进作用(P0.05),土壤水势与人参皂苷Rb_1显著负相关(P0.05);灰色关联度分析结果表明温度、光合有效辐射、相对湿度是影响人参皂苷量的主导生态因子,人参皂苷合成关键酶基因的表达是次要因子,在生态因子主导下人参皂苷合成关键酶基因调控人参皂苷的合成与积累。生态因子与关键酶基因的表达共同调控了人参皂苷的合成,对人参皂苷的积累有重要影响。结论明确了人参皂苷合成关键酶基因表达和人参皂苷量在人参中的动态变化,为人参皂苷合成生理生态机制的明晰及对人参药材质量的调控提供了理论依据。     

水培条件下氮素对拟巫山淫羊藿产量和黄酮类成分的影响

采用水培方法研究了不同氮浓度和氮素形态及配比对拟巫山淫羊藿产量和黄酮类成分的影响。氮浓度设7个处理组N0~N6,分别为0,2.5,5.0,7.5,10.0,13.0 mmol·L~(-1);氮形态设5个处理组T1~T5,硝铵比NO3-N/NH4-N依次为5∶0,4∶1,2.5∶2.5,1∶4,0∶5,总施氮量为5 mmol·L~(-1)。结果表明,随氮浓度的增大,拟巫山淫羊藿的生物量和叶干重均显著升高,N5组的生物量和叶干重分别比N0组和N4组高29%,23%和36%,23%(P0.05),但与N6组差别不显著;根,茎干重变化不明显。净光合速率及各光合色素含量在N3~N5组中较高。朝藿定A,B,C,淫羊藿苷及总黄酮含量在N3组最低,N4组突然升高,N4~N6组变化不大,朝藿定C的含量最高的N5组比含量最低的N3组高131%(P0.05)。在不同硝铵比处理组中,生物量,单株叶干重,茎干重在硝铵比为2.5∶2.5时最大,单纯施用硝态氮(T1)和铵态氮处理(T5)最低(二者差异不显著);各光合色素含量和净光合速率在T3和T4组最低,其他3组较高。氮形态对黄酮含量的影响远小于氮浓度的影响。朝藿定C的含量在T1组中最高,但仅比T2~T5组高5%~8%(P0.05),其他4组间差异不明显。朝藿定A,B,淫羊藿苷及总黄酮含量在T1组中均较高,在T2组中最低,T1组分别比T2组高41%,62%,27%(P0.05)。拟巫山淫羊藿为高氮耐受性植物,10.0 mmol·L~(-1)是其生长转向良好的拐点,最适的氮浓度为10.0~13.0 mmol·L~(-1),喜好硝态氮和铵态氮混施,最适的氮形态及配比为2.5 mmol·L~(-1)硝态氮+2.5 mmol·L~(-1)铵态氮。     

人参中人参皂苷生物合成对水分调控的响应及其机制的初步研究

探究土壤含水量对人参皂苷生物合成的影响,并从抗氧化酶系统和皂苷合成途径关键酶基因表达等角度阐释其机制。以三年生盆栽人参为试验材料,设置3个水分梯度,即饱和含水量的40%(W1),60%(W2),80%(W3),采用HPLC测定11种单体皂苷含量并以GAPDH为内参基因,利用实时荧光定量PCR分析皂苷合成途径中6个关键酶基因(HMGR,SS,β-AS,CYP716A47,CYP716A52v2,CYP716A53v2)表达量,同时对超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD),过氧化氢酶(CAT)活性和MDA含量进行测定。人参皂苷含量及生物量随土壤含水量的增大呈上升趋势,W3处理最适; PPD(Rb1,Rc,Rb2,Rd,Rh2,Rb3,Rg3),PPT(Rg1,Re,Rf)型人参皂苷,Ro及总皂苷均在8月30日达最大值,分别为9. 92,5. 48,0. 63 mg·g-1。整个调控期间W3抗氧化酶活性大于W1,MDA含量小于W1并且W3处理时β-AS,CYP716A47,CYP716A53v2基因表达量呈上升趋势而HMGR,SS基因在各个水分条件下表达量较稳定。经相关性分析得W3处理组HMGR,SS基因与PPD,PPT型人参皂苷及Ro呈现显著正相关,CYP716A52v2基因与Ro呈显著正相关,CYP716A47基因与PPD型人参皂苷呈极显著正相关; W1,W2处理时β-AS基因与PPD型人参皂苷呈极显著正相关。W3处理为最适水分,人参总皂苷及单体皂苷含量最高,各基因与皂苷含量相关性密切,更利于人参皂苷的积累。     

低温胁迫对人参皂苷生物合成途径基因家族表达特性的影响研究

目的研究低温胁迫对人参皂苷生物合成途径的3个基因家族3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶(PgHMGR)、鲨烯合酶(PgSS)、鲨烯环氧酶(PgSE)的影响,探讨各个家族成员响应低温的机制,并推测出响应低温的关键家族基因。方法将3周大的新鲜人参愈伤组织放置在5℃的冰箱中,分别在0、0.5、1、2、3 d后进行取样,分别记作CK、D1、D2、D3、D4,进行RNA提取和反转录实验,实时荧光定量PCR检测低温胁迫处理下不同基因的表达量。结果 PgHMGR1的表达量在D3时期达到对照组的1.3倍,PgHMGR2的表达量在D1时期达到峰值,为对照组的3.8倍;PgSS1的表达量在D3时期达到对照组的1.7倍;PgSE1和PgSE2的表达量均在D1时期分别达到对照组的6.9倍和6倍。其他家族基因(PgHMGR3、PgSS2、PgSE3)的表达量均无显著性变化。结论人参皂苷生物合成途径各个基因家族积极响应低温胁迫处理,推测PgHMGR1、PgHMGR2、PgSS1、PgSE1和PgSE2是人参愈伤组织响应低温胁迫时的关键家族基因。     

吴茱萸汤颗粒剂、配方颗粒剂及传统汤剂中指标成分的含量比较

目的:比较吴茱萸汤颗粒剂、配方颗粒剂与传统汤剂中指标性成分的含量差异。方法:采用不同高效液相色谱法(HPLC)测定吴茱萸颗粒剂、配方颗粒剂与传统汤剂中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量,并对含量测定方法进行考察。结果:颗粒剂、配方颗粒剂与传统汤剂中吴茱萸碱和吴茱萸次碱质量浓度之和分别为47.32,13.49,12.60 mg·L~(-1),颗粒剂、配方颗粒剂中二者的质量浓度之和分别为传统汤剂的3.76,1.07倍;人参皂苷Re和人参皂苷Rb1质量浓度之和分别为335.23,345.28,307.39 mg·L~(-1)。颗粒剂、配方颗粒剂中二者的质量浓度之和分别为传统汤剂的1.09,1.12倍。结论:比较吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量时,颗粒剂与传统汤剂相差较大,而配方颗粒剂与传统汤剂基本一致;比较人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量时,颗粒剂、配方颗粒剂与传统汤剂基本一致。     

人参转录因子ERF基因家族的表达分析

ERF转录因子是植物最大的转录因子家族之一,对药用植物次生代谢具有重要的调控意义。该研究运用转录组热图方法从空间和时间2个层面分析了ERF家族基因的表达,筛选出6个可能参与人参皂苷调控的ERF基因。采用UPLC-MS/MS测定了不同浓度MeJA处理的人参不定根中人参皂苷Rg_1,Re,Rb_1的含量。运用实时荧光定量PCR测定MeJA处理的人参不定根中人参皂苷生物合成关键基因(DDS,CYP716A47,CYP716A53v2)和ERF家族基因的表达;采用Pearson相关对DDS,CYP716A47,CYP716A53v2基因与ERF家族基因表达特异性进行分析。结果表明,不同浓度MeJA处理的人参不定根中原人参二醇型人参皂苷Rb_1含量上升,原人参三醇型人参皂苷Rg_1和Re含量有所下降,与DDS,CYP716A47的表达量上升以及CYP716A53v2基因表达量下降相一致;ERF003,ERF118,ERF012的表达与CYP716A53v2呈显著正相关,而与DDS呈显著负相关,说明ERF003,ERF118,ERF012很可能通过抑制DDS表达和促进CYP716A53v2表达来调控人参皂苷合成;ERF1B表达则与CYP716A47呈显著负相关,说明ERF1B很可能抑制CYP716A47的表达从而参与调控人参皂苷合成。该文为后期深入研究ERF转录因子对于人参皂苷生物合成调控的功能验证奠定基础。     

土壤不同水分含量对三七生长、光合特性及有效成分积累的影响

目的:揭示土壤不同水分含量对三七生长、光合特性及有效成分含量的影响。方法:通过盆栽控水试验,对土壤不同水分条件下二年生三七的生长指标、光合特性指标及有效成分皂苷的含量进行测定。结果:(1)土壤水分含量为0.60 W或0.70 W时更有利于三七干物质积累。(2)土壤水分为0.45 W或0.85 W时三七光合速率下降,且引起光合速率下降的原因并不相同。(3)土壤水分含量为0.45 W时有利于人参皂苷Rg1的积累,0.60W时三七皂苷R1和人参皂苷Rd的积累最多,人参皂苷Rb1则在0.70 W处理下积累最多。结论:二年生三七的种植过程中,土壤的最适含水量为0.60 W,在此条件下对三七生长、光合作用以及总皂苷的积累最为有利。     

人参皂苷Rg1促进体外培养神经干细胞 增殖的研究

目的:考察人参皂苷Rg_1对体外培养神经干细胞增殖的影响及其可能机制.方法:体外培养14 d大鼠胎鼠神经干细胞,培养液中掺入终浓度为10 mg·L~(-1)的5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU),在培养液中分别加入1,10μmol·L~(-1)的人参皂苷Rg_1,同时设置空白组.通过免疫荧光染色标记,计数BrdU阳性细胞数目;利用实时荧光定量RT-PCR方法检测神经干细胞负性分化调节基因Hesl和正性分化调节基因Mashl mRNA表达.结果:与空白对照组比较,10 μmol·L~(-1)人参皂苷Rg_1可显著性增加BrdU阳性细胞数目(40.5±10.9 vs 26.2±6.0,P＜0.01),上调Gesl基因表达(1.00±0.11vs1.28±0.14,P＜0.05);1 μmol·L~(-1)人参皂苷Rg_1同时上调了Hesl和Mashl基因表达(1.00±0.11 vs 1.28±0.14,1.01±0.17 vs 1.25±0.23,P＜0.05),但BrdU阳性细胞数目无显著性差异(26.2±6.0vs24.7±9.3).结论:人参皂苷Rg_1可以促进体外培养的神经干细胞增殖,这种促增殖作用可能是通过上调Hesl基因表达实现的.     

西洋参不同组织部位中皂苷生物合成相关基因的表达研究

通过皂苷含量与基因表达量之间相关性分析,获得西洋参中不同组织部位皂苷含量与人参皂苷生物合成相关基因表达之间联系。以四年生红果期西洋参的14个组织部位为材料,利用高效液相法和香草醛-硫酸比色法测定西洋参样本中6种单体皂苷（人参皂苷Rg1,Re,Rb1,Rc,Rb2,Rd）,分组皂苷和总皂苷含量;同时,利用实时荧光定量PCR法检测西洋参不同组织部位中7种（SQS,OSC,DS,β-AS,SQE,P450,FPS）人参皂苷生物合成相关基因的表达量。在西洋参中7种人参皂苷生物合成相关酶基因虽然参与人参皂苷合成,但是β-AS和P450基因的表达对单体皂苷,分组皂苷及总皂苷含量影响不显著;FPS,SQS,OSC,DS和SQE这5种基因表达对单体皂苷Re,Rg1,Rb1,Rd,分组皂苷PPD和PPT,单体总皂苷TMS和总皂苷TS含量影响显著或者极显著（P〈0.05或P〈0.01）。西洋参中部分单体皂苷,分组皂苷以及总皂苷的生物合成受着皂苷合成途径多种酶基因相互作用影响,生物合成途径中关键酶基因表达差异决定了西洋参中不同组织部位皂苷含量。因此,该研究通过相关性分析进一步明确了FPS,SQS,OSC,DS和SQE这5种酶基因是控制西洋参中皂苷合成的关键酶,它们通过集群协同表达互作的方式调控西洋参中人参皂苷的生物合成。     

人参皂苷对人参幼苗生长发育的影响

目的 考察人参总皂苷(total ginsenosides,TGS)和人参皂苷Rg1、Rb1、Re的生态活性.方法 从四年生的人参根中提取TGS并进一步分离出3种单体皂苷,考察了不同质量浓度(25、50、100 mg/L)的TGS和人参皂苷Re、Rg1、Rb1对人参幼苗生长发育的影响.结果 TGS和人参皂苷Rb1处理对人参的幼苗和幼根的生长发育表现出明显的高质量浓度抑制而低质量浓度促进作用,而人参皂苷Rg1和Re却对人参幼苗的各项生长指标总体表现为微弱的促进作用,4种化合物的抑制效应依次为人参皂苷Rb1＞TGS＞人参皂苷Rg1＞人参皂苷Re,其中TGS和人参皂苷Rb1处理组人参生长的变化趋势相近.人参幼苗叶绿素的合成随着各皂苷质量浓度的升高而降低,但高质量浓度处理的叶绿素量仍然都高于对照.透射电镜观察到人参幼根细胞在100 mg/L TGS和人参皂苷Rb1处理后,发生了质壁分离和细胞器降解,液泡膜也逐渐分解,核膜变得模糊不清.人参根尖在高质量浓度的人参皂苷处理后因细胞功能受损而不能完成正常的生理活动.结论 TGS和3种单体皂苷对人参幼苗生长发育的作用效应不同,TGS和人参皂苷Rb1有较明显的化感活性.     

营养元素缺乏对西洋参生长及皂苷积累的影响

矿质营养元素是维持西洋参正常生长和保证其品质的关键因素,为了解不同营养元素缺乏对西洋参的综合影响,以二年生西洋参为材料,采用温室砂培试验,设置Hoagland全营养对照和10种营养元素缺乏处理,观察缺素症状,测定株高、叶面积、生物量、光合指标、根系活力、人参皂苷含量。结果表明,缺氮、钾、铁可导致西洋参叶片明显失绿黄化;缺氮、钾、钙、镁和硼是导致株高和叶面积下降的主要因子;所有缺素处理西洋参的生物量均显著下降(P<0.05),其中缺氮、钾、钙、铁下降最多,全株生物量低于全营养对照的50%以上。氮、钾、铁缺乏是导致西洋参净光合速率、气孔导度、胞间二氧化碳浓度、蒸腾速率、叶绿素含量下降的主要因子;氮、钾、钙缺乏是降低根系活力的前3位因子;不同营养元素缺乏对西洋参6种单体皂苷的影响有差异,综合来看,氮、磷、硼、锌、铜缺乏对皂苷的合成影响最大。以上研究结果有助于明确西洋参对不同营养元素的需求特性,对栽培生产中缺素诊断、肥料合理使用、提高产量和质量具有重要意义。     

人参皂苷含量变化及其影响因素

人参皂苷是具有千年药用历史的人参的主要活性成分,因此皂苷含量被认为是评价人参内在质量的重要指标之一。目前已从人参不同部位分离鉴定了数十种的人参皂苷,且不同部位人参皂苷含量有所不同。人参皂苷含量受多种因素的影响,主要包括人参生长环境、皂苷合成相关基因以及蛋白表达变化等,本文就上述三个方面进行归纳整理,以期为人参皂苷含量变化相关的研究提供参考。     

离体培养条件对人参不定根生长及其活性成分合成的影响

目的:对人参不定根的摇瓶培养条件进行系统的优化。方法:利用组织培养技术结合高效液相色谱法和紫外分光光度法,考察了接种量、蔗糖浓度以及无机盐浓度对人参不定根的生长、人参皂苷以及人参多糖合成的影响。结果:每1 L培养基接种的不定根鲜重为20 g时人参不定根的干重增殖倍数达到最大值;随着蔗糖浓度的升高,人参不定根干重增殖倍数呈先升高后降低的趋势,人参多糖含量增长趋势不明显,不同蔗糖浓度时各单体皂苷含量有显著区别,人参总皂苷含量随蔗糖浓度的升高而降低,单位体积培养基中的多糖和皂苷产量均在40 g.L-1蔗糖质量浓度下达到最大值;培养基中的无机盐浓度对不定根的生长以及多糖和皂苷的合成与积累都有较大影响,3/4MS最有利于不定根的生长以及皂苷的合成,而不定根中的多糖含量则随着盐浓度的升高而降低。结论:接种量、蔗糖浓度、无机盐浓度都会显著影响人参不定根的生长以及其活性成分的合成和积累。     

多效唑(PP333)对蔓性千斤拔光合作用相关因子的影响

目的 研究PP333喷施处理对蔓性千斤拔光合因子的影响.方法 用不同浓度PP333处理,研究其对蔓性千斤拔光合相关因子的影响.结果 经多效唑处理可提高叶片叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素及总叶绿素含量,同时可提高叶片净光合速率,降低叶片蒸藤速率、胞间CO2浓度及气孔导度.结论 PP333处理可有效改善蔓性千斤拔光合特性.     

高皂苷人参株系早期筛选的研究

通过PCR引物检测人参DNA特异性片段,快速、准确的评价低龄人参种质质量,加快人参育种进程。该研究基于个体之间的基因差异,设计7对引物,通过比对不同人参DNA的扩增图谱与皂苷含量相关性,成功得到一对特异性引物GC1,并采用L_(16)(4~5)正交试验优化其25μL PCR体系,各组分最佳配比为:DNA 2.60 mg·L~(-1),Mg2+1.44 mmol·L~(-1),d NTP 0.19mmol·L~(-1),引物0.32μmol·L~(-1),Taq 0.076 U·μL~(-1)。对GC1引物进行验证,在24株供试人参中有2株扩增出1 200 bp特异性条带阳性样品,2株阳性样品中9种单体皂苷及其加和值含量均较高。该特异性条带序列与甘油-3-磷酸脱氢酶同源性达99%。GC1可以作为一种高皂苷人参株系早期筛选鉴定方法的特异性引物,有利于加快人参育种进程。     

外源土壤Cd胁迫对三七富集及其药效成分的影响

目的推算三七GAP种植土壤Cd的安全限量浓度。方法采用当地土壤添加不同浓度的CdCl2溶液进行三七盆栽实验,考察重金属Cd在三七各组织器官中的富集规律及其对主要药效成分合成的影响,推得保证三七品质及服用安全性的三七GAP种植土壤Cd安全浓度限值。结果随着土壤Cd浓度的增加,三七根,茎,叶,花中Cd量均有明显增加,其变化规律符合对数曲线。三七不同组织富集Cd能力顺序为茎>根>花>叶,其中茎对Cd的吸收最强,富集系数最高。三七主要药效成分在土壤Cd的量小于30 mg/kg时,三七皂苷R1,人参皂苷Rb1,人参皂苷Rg1以及总皂苷均未表现出显著性变化,当土壤Cd的量等于30 mg/kg,主要药效成分量明显降低。结论由中药中重金属Cd的行业限量标准(0.3 mg/kg),根据土壤-三七Cd浓度拟合曲线计算出土壤Cd浓度安全限量为0.6 mg/kg。     

20(R)-人参皂苷Rg3抗角膜瘢痕机制研究

目的:研究不同浓度的20(R)-人参皂苷Rg3(GRg3)对兔角膜成纤维细胞增殖和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨GRg3抑制角膜瘢痕增生的机制。方法:直接选用大白兔获取兔角膜成纤维细胞后进行原代培养,采用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法观察不同浓度(10 mg·L~(-1),20 mg·L~(-1),50 mg·L~(-1),100 mg·L~(-1),150 mg·L~(-1),200 mg·L~(-1))GRg3对兔角膜成纤维细胞增殖作用的影响。应用反转录-PCR(RT-PCR)技术研究不同浓度GRg3对培养的兔角膜成纤维细胞TGF-β1m RNA表达的影响。结果:MTT法检测结果:与对照组比较,当GRg3浓度达到20 mg·L~(-1)及以上时,兔角膜成纤维细胞增殖均显著受抑制。当GRg 3浓度达到50 mg·L~(-1)及以上时,GRg3对兔角膜成纤维细胞TGF-β1 mRNA表达具有抑制作用。结论:GRg3具有抑制体外培养的兔角膜成纤维细胞增殖的作用,并随着GRg3浓度的增加,其抑制作用增强。随培养时间的延长,GRg3抑制作用增强。GRg3对兔角膜成纤维细胞TGF-β1mRNA表达具有抑制作用。     

人参中人参皂苷Rg1，Rb1在体肠吸收影响因素的研究

目的:考察药物浓度、肠段、pH及P-gp对人参中人参皂苷Rg_1,Rb_1肠吸收的影响规律.方法:采用大鼠在体循环灌流法,应用HPLC测定肠吸收循环液中人参皂苷Rg1,Rb1的浓度,UV法测定肠吸收循环液中即时酚红浓度.结果:人参皂苷Rg1,Rb1分别在0.075～0.75 g·L~(-1)和0.03～0.3 g·L~(-1),各浓度的吸收量与药物浓度呈良好线性关系(r>0.999),且吸收速率常数(K)、累积吸收百分率(A%)及t_(1/2)无显著性差异;pH对人参皂苷Rg_1,Rb_1吸收均无显著影响;各个肠段人参皂苷Rg.的吸收量,K_a,A%及t_1/2值无显著性差异,而人参皂苷Rb_1.在空肠循环的各参数显著高于十二指肠和回肠(P<0.05);此外,P-gp抑制剂维拉帕米对人参皂苷Rb_1的吸收有明显促进作用(P<0.05),而对人参皂苷Rg_1无此作用.结论:人参皂苷Rg_1,Rb_1在肠道的吸收均呈一级动力学过程,推断为被动扩散;人参皂苷Rg_1无特定的吸收部位,而人参皂苷Rb_1在空肠段具吸收部位选择性;人参皂苷Rb_1为P-gp底物,可通过与P-gp抑制剂合用提高其生物利用度.     

茉莉酸甲酯调控下人参发状根皂苷合成相关基因表达的研究

通过外源添加茉莉酸甲酯(MeJA),研究其调控液体培养条件下人参发状根中皂苷生物合成途径相关酶基因在诱导子作用时表达情况。以四年生吉林人参主根诱导的人参发状根无性系为材料,利用香草醛-硫酸比色法测定MeJA处理前后人参发状根的总皂苷含量;同时,利用荧光实时定量PCR测定MeJA处理前后人参发状根中鲨烯合成酶(squalene synthase,SQS)、鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SQE)、氧化鲨烯环化酶(oxidized squalene cyclase,OSC)、达玛烷二醇合成酶(dammarenediol synthase,DS)、β-香树脂合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)和环阿屯醇合成酶(cycloartenol synthase,CAS)基因的相对表达量。结果表明:获得MeJA添加到人参发状根中最佳添加浓度为6×10~(-4)μmol·L~(-1)、添加时间为22 d、作用时间为5 d;MeJA的添加可以提高人参发状根中过氧化物酶(PPD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(PPD)的酶活性;经过MeJA处理后人参发状根中人参皂苷生物合成途径的SQS,SQE,OSC,DS,β-AS基因的表达变化均有显著提高,然而CAS基因的表达变化不显著。因此说明在添加MeJA处理后,皂苷生物合成途径中SQS,SQE,OSC,DS,β-AS基因表达情况与PPD,CAT,PPO的酶活性的变化趋势也相一致。     

培养条件对西洋参悬浮细胞生物量和 活性成分的影响

目的:研究主要理化因子对西洋参细胞悬浮培养的影响.方法:利用组织培养技术结合高效液相色谱法和紫外分光光度法,考察接种量、培养基种类、基质pH和光照条件对西洋参悬浮细胞生长,人参皂苷Re,Rb1以及西洋参多糖含量的影响.结果:当接种量为25 g·L~(-1)时,西洋参细胞的干重增殖倍数显著增加;通过考察Ms,SH,B_5 3种培养基对西洋参细胞的影响,结果表明MS培养基最有利于西洋参细胞生长,B_5培养基最有利于人参皂苷和西洋参多糖的合成.3种培养基中西洋参细胞多糖含量均高于栽培西洋参;pH变化对西洋参细胞生长影响不大,pH 6.0时,最有利于人参皂苷Re和西洋参多糖的合成;光照培养显著促进西洋参细胞次生代谢物的合成,但对多糖合成没有太大影响.结论:接种量、培养基种类、基质pH和光照条件对西洋参悬浮细胞生长,人参皂苷Re,Rb_1以及西洋参多糖合成有显著影响.