二黄糖肾康对糖肾病大鼠肾脏保护作用的研究

目的:探讨二黄糖肾康对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的机制。方法:单侧肾切除大鼠加腹腔注射STZ(50mg/kg)复制糖尿病肾病大鼠模型,给二黄糖肾康提取液灌胃,8周后检测糖尿病肾病大鼠肾功能,用流式细胞术检测细胞凋亡及凋亡调控因子Fas/Fas-L表达。结果:二黄糖肾康能改善糖尿病肾病大鼠肾功能,细胞凋亡数目相对减少,Fas和Fas-L的表达显著减弱。提示:二黄糖肾康可能通过影响凋亡调控因子Fas和Fas-L的表达而抑制肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用。     

金水清对IgA肾病大鼠细胞凋亡和Bcl-2、Bax表达的影响

目的观察金水清对免疫球蛋白A(IgA)肾病大鼠细胞凋亡和调控基因Bcl-2、Bax及肾脏病理改变的影响,阐明金水清治疗IgA肾病的可能作用机制。方法采用口服、尾静脉注射BSA+皮下注射四氯化碳、蓖麻油+尾静脉注射脂多糖+高温高湿环境+高糖高脂饮食的复合法,复制大鼠IgA肾病模型,并给予金水清治疗,通过光镜、电镜下观察大鼠肾组织病理改变,TUNEL法检测大鼠细胞凋亡情况,SABC法检测肾组织中Bcl-2和Bax的表达。结果与模型组比较,治疗组大鼠病理改变明显减轻。与正常组比较,模型组细胞凋亡指数、Bax、Bax/Bcl-2明显升高,且有显著性差异(均P0.05);与模型组比较,治疗组细胞凋亡指数、Bax、Bax/Bcl-2明显降低,且有显著性差异(均P0.05);与正常组比较,模型组Bcl-2明显降低,且有显著性差异(P0.05);与模型组比较,治疗组Bcl-2明显升高,且有显著性差异(P0.05)。结论金水清能够有效抑制系膜细胞凋亡,有效地上调肾组织中Bcl-2表达,下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值,从而达到减轻肾脏组织的病理损伤的目的。     

黄芪多糖预处理对肾缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响

目的:探讨黄芪多糖预处理对肾缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响及机制。方法:SD大鼠30只随机分为假手术组、模型组和黄芪多糖干预组,每组各10只。黄芪多糖干预组在建模前,每天给予黄芪多糖450 mg/kg灌胃,连续用药10 d,1次/d;假手术组和模型组以相同方式灌胃等体积的生理盐水。模型组与黄芪多糖干预组建模,假手术组只分离不建模,48 h后肾动脉采血,立即处死大鼠并取肾脏组织。全自动生化分析仪测定血清中的尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量,TUNEL法检测肾脏细胞凋亡,免疫组化检测肾组织Bax和Bcl-2蛋白含量表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清BUN、Cr含量明显升高(P0.01);与模型组比较,黄芪多糖干预组大鼠血清BUN和Cr含量明显下降(P0.01)。与假手术组比较,模型组肾脏细胞凋亡指数明显升高(P0.01);与模型组比较,黄芪多糖干预组大鼠肾脏细胞凋亡指数明显降低(P0.01)。与假手术组比较,模型组肾脏Bax表达明显升高,Bcl-2表达明显下降(P0.01);与模型组比较,黄芪多糖干预组大鼠肾脏Bax表达明显降低,Bcl-2表达明显升高(P0.01)。结论:黄芪多糖预处理具有减轻肾脏细胞凋亡,改善肾功能的作用,其机制可能与下调Bax蛋白表达,以及上调Bcl-2蛋白表达有关。     

灯盏花素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的探讨灯盏花素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响。方法 48只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌注组、硝苯地平组、灯盏花素组。肾脏缺血60min再灌注24h,检测大鼠血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平,TUNEL法检测大鼠肾组织细胞凋亡情况,免疫组化方法检测肾组织Bax和Bcl-2蛋白表达。结果与假手术组比较,缺血再灌注组大鼠血清BUN和Cr浓度增高(P0.05),肾细胞凋亡指数升高,Bax蛋白表达明显上调(P0.05),Bcl-2蛋白表达和Bcl-2/Bax比值明显下降(P0.05)。与缺血再灌注组比较,灯盏花素组血清BUN和Cr水平降低(P0.05),肾细胞凋亡指数降低,Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,Bcl-2/Bax升高(P0.05)。结论灯盏花素可以抑制大鼠肾脏缺血再灌注细胞凋亡,其机制可能与改变Bax和Bcl-2蛋白的表达有关。     

莱菔承气汤对重症急性胰腺炎大鼠肾脏细胞凋亡的影响

[目的]探讨中药莱菔承气汤对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾脏细胞凋亡及凋亡基因Bax和Bcl-2表达的影响。[方法]健康Wistar大鼠72只,随机分为空白对照组(24只)、SAP模型组(24只)和莱菔承气汤治疗组(24只)。3组大鼠均于术后6 h,12 h,24 h心脏采血,检测血肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)。Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞术检测肾脏细胞凋亡指数,RT-PCR检测肾脏组织Bax、Bcl-2 mRNA的表达。[结果]与对照组相比较,随着时间变化,SAP模型组大鼠血肌酐、血尿素氮水平明显升高(P0.01),肾脏细胞凋亡指数趋于升高,Bax mRNA表达明显升高(P0.01),Bcl-2 mRNA表达明显下降(P0.01)。与SAP模型组相比较,莱菔承气汤治疗组大鼠血肌酐、血尿素氮水平明显下降(P0.01),肾脏细胞凋亡指数下降,Bax mRNA表达明显下降(P0.01),Bcl-2 mRNA表达明显升高(P0.01)。[结论]中药莱菔承气汤可能通过调节凋亡相关基因,减少肾脏细胞凋亡以减轻肾脏病理损伤,从而改善SAP时并发的急性肾功能障碍。     

川芎嗪对DM大鼠醛糖还原酶活性及肾脏细胞凋亡的影响

目的:研究醛糖还原酶(AR)、凋亡相关基因Bcl-2和Bax与糖尿病肾病(DN)的关系,探讨醛糖还原酶抑制剂(ARIs)和具有ARIs作用的中药川芎嗪对DN的治疗作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机平均分为4组,即正常对照组、糖尿病(DM)对照组、DM依帕司他治疗组、DM川芎嗪治疗组。腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱发DM。定期测定尿白蛋白变化。16周后,处死大鼠,分离肾脏测定其AR活性,观察Bcl-2、Bax的表达,取部分肾皮质进行电镜细胞计量、观察细胞凋亡的形态学变化。结果:①与正常对照组相比,DM对照组肾脏皮质AR活性明显升高(P<0.001),依帕司他治疗组、川芎嗪治疗组AR活性较DM对照组明显降低(P<0.01),而各组间血糖水平无明显差异。②DM对照组尿白蛋白随病程逐渐升高,而治疗组变化不明显。③DM对照组肾脏Bcl-2、Bax蛋白表达明显增加,依帕司他治疗组、川芎嗪治疗组的Bcl-2蛋白表达较DM对照组增多,而Bax蛋白表达较DM对照组减少。④透射电镜下见DM对照组肾脏肾小管上皮细胞呈典型的凋亡形态学改变,依帕司他治疗组、川芎嗪治疗组肾组织细胞凋亡改变明显减轻。⑤DM对照组肾小球基底膜增厚...     

川芎嗪对重症胰腺炎大鼠肾细胞凋亡的影响

目的评价川芎嗪对重症急性胰腺炎大鼠肾细胞凋亡的影响及保护机制。方法雌性SD大鼠45只,随机分为对照组、重症急性胰腺炎模型组、川芎嗪治疗组,以4%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射方法复制大鼠重症急性胰腺炎模型。光镜下观察大鼠肾脏病理变化,动态检测血清淀粉酶(AMY)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)水平,TUNEL法检测肾小管细胞凋亡率,Western blotting法检测肾脏Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组及川芎嗪组肾脏病理损伤程度随病情进展逐渐加重,血清AMY、Cr、BUN水平均明显升高,肾小管细胞的凋亡率明显增加,Bcl-2/Bax比值显著减少;川芎嗪处理后,Bcl-2/Bax比值较模型组同时间点均显著升高,其余指标较模型组同时间点均显著降低,川芎嗪治疗组肾脏病理损伤改善程度优于模型组。结论川芎嗪可能促进Bcl-2高表达并减弱Bax表达,抑制肾小管细胞凋亡,对重症急性胰腺炎大鼠肾损伤产生保护作用。     

疏肝化湿汤防治2型糖尿病作用及抗细胞凋亡机制研究

目的 研究疏肝化湿汤对2型糖尿病的防治作用并探讨其抗细胞凋亡的作用机制.方法 采用高糖高脂饲料喂养加腹腔注射链脲佐菌素建立动物模型,疏肝化湿汤干预后,采血检测血糖、血浆胰岛素,制作胰岛、心脏、肾脏组织切片,采用TUNEL法检测细胞凋亡,采用免疫组化法检测组织Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 疏肝化湿汤能显著降低模型大鼠的血糖,升高其血浆胰岛素;能显著降低模型大鼠胰岛、心脏、肾脏组织的细胞凋亡,上调Bcl-2的表达,抑制Bax的表达.结论 疏肝化湿汤对2型糖尿病的防治作用可能与抑制胰岛β细胞凋亡有关;疏肝化湿汤还能抑制心肾组织的细胞凋亡,这可能是其防治并发症的原因之一.     

冬虫夏草对糖尿病对比剂肾病大鼠肾细胞中线粒体凋亡途径的影响

目的:探讨冬虫夏草对糖尿病对比剂肾病(contrast-induced nephropathy, CIN)大鼠肾细胞中线粒体凋亡途径的影响。方法:大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,各组大鼠分别给予相应剂量冬虫夏草和生理盐水灌胃连续7 d,第8天大鼠经尾静脉注射碘克沙醇建立CIN模型,收集标本测定BUN、Scr、NGAL、KIM-1、NO、SOD、MDA和T-AOC,荧光定量PCR和WB法检测Caspase-3、Caspase-9、Bax和Bcl-2基因和蛋白水平,Tunel法检测肾细胞凋亡情况,HE染色法观察肾组织病理变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠BUN、Scr、NGAL、KIM-1和MDA水平升高、NO、SOD和T-AOC水平降低,Caspase-3、9和Bax表达升高、Bcl-2及Bcl-2/Bax比值降低,肾凋亡细胞明显增多;肾细胞出现空泡、坏死等表现。与模型组比较,低剂量组Scr和MDA含量降低,Caspase-3和Bax表达降低,而Bcl-2和Bcl-2/Bax比值升高,中、高剂量组Scr、BUN、NGAL、KIM-1和MDA水平降低、NO和SOD含量升高,Caspase-3、9和Bax表达降低、Bcl-2与Bcl-2/Bax比值均升高,高剂量组大鼠肾凋亡细胞明显减少,且肾小管病理性改变减少。结论:冬虫夏草可增强糖尿病CIN大鼠抗氧化应激能力,调控线粒体凋亡途径,减少肾细胞凋亡,保护肾损伤,高剂量冬虫夏草疗效更佳。     

六味地黄汤对慢性肾衰竭大鼠Bax和Bcl-2表达的影响

目的探讨六味地黄汤对慢性肾衰竭大鼠肾脏Bax和Bcl-2表达的影响。方法将45只雄性SD大鼠随机分为空白组(10只)、假手术组(10只)及手术组(25只),手术组予以5/6肾切除造模,造模成功后随机分为模型组及治疗组。治疗组予六味地黄汤灌胃,其余3组予等体积蒸馏水灌胃。干预8周后检测各组大鼠血肌酐、血尿素氮、尿蛋白定量水平;HE、Masson染色观察大鼠肾脏组织形态学变化;免疫组化及实时荧光定量PCR分别检测大鼠Bax及Bcl-2蛋白及mRNA的表达水平。结果空白组及假手术组大鼠肾脏未观察到明显病理变化,模型组存在不同程度的肾小管及肾间质病变,治疗组较模型组病灶明显减轻;模型组血肌酐、血尿素氮、尿蛋白定量水平明显升高(P 0.01),治疗组较模型组降低(P 0.05);Bax和Bcl-2主要在肾小管区表达,模型组Bax表达水平明显升高(P 0.01),Bcl-2表达水平明显降低(P 0.01);与模型组比较,治疗组Bax表达水平降低(P 0.05),Bcl-2表达水平升高(P 0.05)。结论六味地黄汤可通过调控凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达,改善慢性肾衰竭大鼠肾纤维化程度,延缓肾功能进展。