免疫酶染色法检测人血清中抗幽门螺杆菌抗体的效果评价及…

幽门螺杆菌与胃炎、消化性溃疡有着非常密切的关系，但诊断方法仍以胃镜采样然后进行培养涂片，尿素酶试验为主；或使用需要一定设备的ＥＬＩＳＡ方法进行检测，难以一般有消化系统症状的患者中使用，给Ｈ．ｐ感染的诊断和治疗带来了困难。     

唾液抗幽门螺杆菌IgG检测诊断幽门螺杆菌感染的评价

目的 评价唾液抗幽门螺杆菌（ＨＰ）抗体诊断ＨＰ感染的价值。方法 ９３例病人同时进行唾液抗ＨｐＩｇＡ测定、快速尿素酶试验（ＲＵＴ）、组织涂片ＨＥ染色及病理ＷＳ银染色法诊断ＨＰ感染结果 唾液抗ＨｐＩｇＧ检测阳性率近似于ＲＵＴ法，高于组织涂片ＨＥ染色法和病理ＷＳ银染色法，其诊断ＨＰ感染的敏感性与９６．９７％，特异性８８．２３％，准确性９５．１８％，阳性预测值９７％，阴性预测值８８．２４％，结论唾液抗Ｈｐ     

酶联免疫法检测粪便幽门螺杆菌特异性抗原

目的：探讨酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）检测粪便幽门螺杆菌（ＨＰ）特异性抗原（ＨＰＳＡ）在诊断ＨＰ感染中的价值。方法：９９例患者通过快速尿素酶试验及组织学Ｗａｒｔｈｉｎ－Ｓｔａｒｒｙ银染法检测，分为ＨＰ感染组和非感染组，用酶联免疫法检测粪便中ＨＰＳＡ。结果：粪便酶联免疫法检测ＨＰ感染的敏感性为１００％，特异性为８５．７１％。结论：酶联免疫法检测粪便中ＨＰＳＡ敏感性、特异性高，且取材方便，方法简单，适合临床应用。     

幽门螺杆菌对人上皮细胞的吸附

幽门螺杆菌对人胃粘膜的吸附是实现其感染的第一步。本研究以人上皮细胞株ＨＥｐ—２为材料对幽门螺杆菌吸附上皮细胞的性能进行了探讨，结果显示，幽门螺杆菌ＹＣ—１１Ａ株具有特异吸附于ＨＥｐ—２细胞表面的性能，其吸附能力在与ＨＥｐ—２细胞共孵育３ｈ后达到高峰，吸附率达８１％，此后吸附率虽无显著提高，但单个ＨＥｐ—２细胞吸附的幽门螺杆菌数量却随孵育时间的延长而有明显增加。在大气环境中与在含５％氧气的微氧环境中幽门螺杆菌对ＨＥｐ—２的吸附无显著差异。抗幽门螺杆菌优势抗原单克隆抗体不能有效阻断幽门螺杆菌对ＨＥｐ—２的吸附。     

四种弓形虫病血清学诊断方法的比较研究

本研究应用弓形虫的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、常规酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和间接免疫荧光试验（ＩＦＡ）及间接血凝抑制试验（ＩＨＡ）四种方法，分别检测了同一批人血清（１５０份）。结果表明：（１）四种方法中以Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ最为敏感，血清阳性检出率最高为１９．３％；ＩＦＡ次之为１１．３％；ＥＬＩＳＡ为８．６９％；ＩＨＡ最低仅为６．６６％。（２）Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ明显优于常规ＥＬ     

聚合酶链反应诊断结核性腹膜炎的评价

目的评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对结核性腹膜炎的诊断价值。方法用ＰＣＲ技术检测３０例结核腹水中结核分支杆菌ＤＮＡ，并与腹水涂片抗酸染色及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测腹水中抗ＰＰＤ抗体进行比较。结果ＰＣＲ的阳性率为６０％，特异性９４．４％；ＥＬＩＳＡ法阳性率６３．３％，特异性７２．２％；涂片镜检均为阴性。结论ＰＣＲ在诊断结核性腹膜炎具有较高的敏感性和特异性，优于ＥＬＩＳＡ法及涂片镜检，如与ＥＬＩＳＡ技术结合可进一步提高检测的敏感性和特异性。     

新生儿滤纸血斑TSH检测TR—IFMA,IRMA,ELISA的对比研究

对碘缺乏病病区和非病区新生儿脐带滤纸血斑同时利用三种方法检测ＴＳＨ值，结果表明ＩＲＭＡ值＞ＴＲ－ＩＦＭＡ值＞ＥＬＩＳＡ值，三者相关非常显著，相关系数分别是ＴＲ－ＩＦＭＡ与ＥＬＩＳＡ为０．８３８、ＥＬＩＳＡ与ＩＲＭＡ为０．８３５、ＩＲＭＡ与ＴＲ－ＩＦＭＡ为０．７７７。５ｍＵ／Ｌ以下所占百分率ＥＬＩＳＡ为７６．９％、ＴＲ－ＩＦＭＡ为６４．７％、ＩＲＭＡ为４４．８％。经多年补碘的病区与非病区ＴＳＨ值分布频率基本相似。认为三种方法均可用于碘缺乏病监测，但ＩＲＭＡ值偏高，可根据回归方程ＴＲ－ＩＦＭＡ、ＥＩＡ值进行换算。     

重型肝炎患者丙型肝炎病毒抗体的存在状态及其意义

采用合成肽酶免疫分析法（ｓｐＥＬＩＳＡ）和美国Ｏｒｔｈｏ公司第２代ＥＬＩＳＡ（２ｎｄＥＬＩｓＡ）对１０３例重型肝炎患者血清丙型肝炎病毒抗体（抗ＨＣＶ）作筛选，阳性血清用重组免疫印迹法（４·ＲＩＢＡ）作鉴定，并用逆转录聚合酶链反应检测ＨＣＶＲＮＡ，以重新评价重型肝炎患者血清抗ＨＣＶ存在状态及其意义。发现ｓｐＥＬＩＳＡ和２ｎｄＥＬＩＳＡ检测抗ＨＣＶ的阳性率分别为２２．３３％（２３／１０３）和１９．１０％（１７／８９），阳性血清经４·ＲＩＢＡ鉴定仅５９．０９％（１３／２２）阳性，ＨＣＶＲＮＡ检出率亦仅为６０．００％（９／１５）。动态观察，约１／３抗ＨＣＶ阳性患者抗ＨＣＶ持续２～４周消失。血清反复冻融可使阳性检测吸光值（Ａ４９２）下降，阴性检测Ａ４９２值升高。血清抗ＨＣＶ阳性和（或）ＨＣＶＲＮＡ阳性患者均合并乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染，但合并ＨＣＶＲＮＡ阳性患者预后较差。结果提示单独ＨＣＶ感染不是本地区重型肝炎发生的主要原因，部分患者抗ＨＣＶ存在可能属既往感染或系“被动输入”所致，也可能为假阳性，检测ＨＣＶＲＮＡ对于确切了解重肝患者ＨＣＶ感染状况和判断预后有一定的意义。     

医院用血液制品HCV污染情况的调查

目的调查医院治疗用血液制品ＨＣＶ污染情况．方法临床治疗所用的血液制品，在输完后留容器之残液备检．采用酶标免疫法（ＥＬＩＳＡ）检测．对ＥＬＩＳＡ检测之阳性标本及在阴性标本中随机抽取９份，采用逆转录双ＰＣＲ方法检测ＨＣＶ＿ＲＮＡ．结果血浆白蛋白抗＿ＨＣＶ阳性率４５８％，新鲜血浆阳性率２６％．两种方法检测同一标本，ＥＬＩＳＡ检测阳性的血液制品中，用ＰＣＲ证实，并非都有病毒复制；而在ＥＬＩＳＡ检测的阴性标本中，仍旧有较高的ＰＣＲ阳性检出．结论血液制品存在着ＨＣＶ污染，抗＿ＨＣＶ对于ＨＣＶ感染的诊断价值很高．检测血液制品中的抗＿ＨＣＶ，合理使用血液成份，可防止ＨＣＶ在医院内传播．     

结核性腹膜炎的实验室诊断

目的评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对结核性腹膜炎的诊断价值。方法用ＰＣＲ结合地高辛标记核酸探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术检测４２例结核性腹水中结核分支杆菌ＤＮＡ，并与常规细菌学检测及ＥＬＩＳＡ对比。引物来自结核分支杆菌特异重复插入序列ＩＳ６１１０。特异性通过杂交及限制性内切酶ＳａｌⅠ酶切证实。同时比较了Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测与凝胶电泳检测的敏感性。结果ＰＣＲ的敏感性为６９％，ＥＬＩＳＡ为７１％，培养为９％，涂片镜检均为阴性。并发现杂交较凝胶电泳检测更敏感。结论ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ法对结核性腹膜炎有较高的诊断价值，但前者更具有特异性。将Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术与ＰＣＲ技术结合，可进一步提高检测的敏感性和特异性。     

华支睾吸虫成虫抗原免疫酶染色试验和间接免疫荧光抗体试验效果的比较

应用成虫冰冻切片抗原作免疫酶染色试验(IEST)及间接免疫荧光抗体试验(IFAT),对比检测了 51份华支睾吸虫病患者和 50份健康人血清,两法的阳性率分别为 92％和 88％;假阳性率分别为 2％和4％,应用 IEST和IFAT对比检查 22份急性血吸虫病患者血清、20份慢性血吸虫病患者血清及 15份并殖吸虫病患者血清。IEST 出现的交叉反应率分别为 14％、5％和0;IFAT出现的交叉反应率分别为 14％、10％和0。表明两法诊断华支睾吸虫病均有较高的敏感性和特异性,并且抗原定位好。而 IEST不需要特殊仪器,更适合于现场应用。     

成虫童虫冰冻切片抗原间接荧光抗体试验和免疫酶染色试验诊断肺吸虫病

以肺吸虫成虫童虫冰冻切片抗原片做间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）及免疫酶染色试验（ＩＥＳＴ）对比检测９４份肺吸虫感染者和４０例正常健康人血清,两法的阳性率分别为９３．６％、９５．７％和８９．１％、９３．６％,假阳性率均为０。ＩＦＡＴ和ＩＥＳＴ对比检测３４份血吸虫病人血清,３５份华支睾吸虫病人血清和３０份肺结核病人血清。ＩＦＡＴ出现的交叉反应率为１４．７％、５．７％、０和１４．７％、８．６％、０。ＩＥＳＴ出现的交叉反应率为５．９％、０、０和８．８％、５．７％、０。结果表明两法用于肺吸虫病的诊断均有较高的敏感性和特异性,而且抗原定位好,ＩＥＳＴ不需荧光显微镜或荧光设备,较易推广应用     

免疫酶染色试验检测斯氏狸殖吸虫抗体的研究

目的探索用免疫酶染色试验检测斯氏狸殖吸虫病抗体的敏感性和特异性。方法从病犬肺虫囊中收集斯氏狸殖吸虫成虫,冰冻切片,制作抗原片。采用免疫酶染色试验(IEST)检测斯氏狸殖吸虫病人和病鼠血清抗体。试验设健康大鼠血清对照及其他寄生虫病血清对照。结果斯氏狸殖吸虫病人和病鼠血清特异抗体阳性率分别为96.7%和97.4%。实验动物从感染后第2周开始抗体检测阳性,第4周阳性率达97.4%,持续10周。结论免疫酶染色试验敏感性高、特异性强,对斯氏狸殖吸虫病的早期诊断有重要参考价值。     

IEST、IFAT和Dot-ELISA诊断华枝睾吸虫病的比较研究

用成虫冰冻切片抗原免疫酶染色试验(IEST)、间接免疫荧光抗体试验(IFAT)和斑点-ELISA(Dot-ELISA)对比检测了51例华枝睾吸虫病人血清,阳性率分别为92%、88%和92%.检测健康人血清50例,假阳性率分别为2%、4%和2%.用3法检测22例急性血吸虫病人血清、20例慢性血吸虫病人血清和15例肺吸虫感染者血清.IEST的交叉反应率分别为14%、5%和0;IFAT的交叉反应率分别为14%、10%和0;Dot-ELISA的交叉反应率分别为14%、5%和0.显示3种方法诊断华枝睾吸虫病均有较高的敏感性和特异性.而IEST和Dot-ELISA更适于现场应用.     

免疫酶染色试验及双面胶纸条法环卵沉淀试验诊断...

IEST, DGS-COPT and CV-COPT using lyophilized ova of schistosoma japonicum were performed on sera from 120 cases of schistosomiasis japonica, 120 cases of schistosomiasis japonica 3-8 years after being cured with praziquantel and 120 healthy individuals by single-blind method. The sensitivity and specificity of IEST was 91.7% and 95.8% respectively which were significantly higher than that of both DGS-COPT and CV-COPT. The negative conversion rate of cured patients was 70.8% with IEST, 80.8% with DGS-COPT and 81.7% with CV-COPT. The results showed that IEST has higher diagnostic value for schistosomiasis than both COPT. DGS-COPT has the same diagnostic value as CV-COPT, however, it was easy to perform and time-saving, thus it might be applied in the fields for practical purposes.     

DIGFA-kit和IEST检测人、鼠斯氏狸殖吸虫抗体的研究

目的探索用肺吸虫病金标渗滤试剂盒（DIGFA-kit）和免疫酶染色试验（IEST）检测斯氏狸殖吸虫抗体的敏感性和特异性。方法采用DIGFA-kit和IEST检测流行区人群和病鼠血清抗体。结果斯氏狸殖吸虫病流行区人群和病鼠血清特异性抗体两种方法均为5.08%和100%。用此二种血清学方法检测正常大鼠、旋毛虫病大鼠、血吸虫病兔和蛔虫病人血清,除1例血吸虫病兔血清DIGFA-kit出现阳性反应外,其它血清两种方法均为阴性反应。实验动物从感染后第2周两种方法开始抗体检测阳性,第4周阳性率均达100%,持续至8周。结论二种方法对斯氏狸殖吸虫特异性IgG抗体的检测均有较好的敏感性和特异性。     

猪囊尾蚴冰冻切片免疫酶染色试验诊断脑囊虫病的初步研究

应用猪囊尾蚴冰冻切片作为抗原进行免疫酶染色试验。脑囊虫病人的检出率为98.2％(55/56);50例健康人、23例华支睾吸虫病人和26例并殖吸虫病人的假阳性率和交叉反应均为0,但细粒棘球蚴病人血清的交叉反应为18.1％(4/22)。结果表明,该法是一种特异性强、敏感性高、经济与有效的脑囊虫病血清学诊断方法。     

应用三联抗原免疫酶染试验对暂住人口“三病”的监测

用血吸虫、疟疾、丝虫三联抗原片免疫酶染试验监测暂住人口8733人.测出血吸虫、疟疾和丝虫抗体阳性分别为597(6.8%)、113(1.3%)110(1.3%)例.其中,浙江藉血吸虫抗体阳性率为10.3%(62/604),与总体阳性率的差异非常显著(P<0.01).安徽籍为5.9%(218/3673),与总体阳性率的差异显著(P<0.05).各省藉疟疾和丝虫抗体阳性率与总体阳性率均无显著差异(P>0.05).该法可作现场群体过筛方法之一.抗体阳性者作重点监测管理对象.     

血吸虫 疟疾 丝虫三联抗原片免疫酶染试验对三病监测的研究

PVC三联抗原片免疫酶染试验(IEST)系在PVC薄膜同一个三角形的凹井内,联合包被血吸虫尾蚴、恶性疟原虫和丝虫微丝蚴断片,用同一种免疫酶染技术以一滴血清同时检测3种寄生虫病抗体的检测方法。结果:血吸虫病环卵沉淀试验阳性者的检出率为95.74％,间日疟原虫血检阳性者的检出率为89.10％,历史丝虫微丝蚴阳性者的检出率为82.61％,99例健康者出现血吸虫阳性3例(3.03％),疟疾和丝虫阳性各1例(1.01％),经X~2检验,3种抗原各自对3病检测的特异性有非常显著意义(P<0.01)。 该法与3病常用血清学方法对1380例外来人口的监测比较和对4841例不同疫区人群的3病现场监测应用结果,均能反映各组人群的实际流行概貌。     

Rapid urease test from non-ulcer part of stomach is superior to histology from ulcer in detection of Helicobacter pylori infection in patients with gastric ulcer

BACKGROUND/AIMS: Helicobacter pylori is the major pathogenesis of peptic ulcer disease. It is important for the endoscopists to detect H. pylori infection during endoscopy. Only one endoscopic diagnostic method can be used due to the limitation of health insurance payments in Taiwan. Most endoscopists use the tissue obtained from the ulcer margins for histopathological examination and detection of H. pylori infection in patients with gastric ulcer. Whether this is suitable deserves study. METHODOLOGY: A total of 103 consecutive subjects with gastric ulcer were recruited. Biopsy specimens from the margins of gastric ulcer were sent for histological examination with modified Giemsa stain. Two biopsy specimens from the antrum and greater curvature site of mid body were embedded in rapid urease test (CLOtest). A patient was classified as H. pylori positive if either CLOtest or histology were positive. RESULTS: 57 patients had H. pylori infection. The detection rate of rapid urease test and histological examination was 96.5% (55/57) and 59.6% (35/57), respectively. Of the 3 patients who had positive histological examinations and negative urease test, only one was confirmed again to have H. pylori infection. The detection rates of rapid urease test and histological examination in different locations of ulcer (antrum/angularis/proximal stomach) were 92.6%/100%/100% and 81.5%/42.1%/36.4%, respectively. CONCLUSIONS: Our study shows that rapid urease test has higher detection rate than histological examination of the biopsy specimens obtained from the margins of gastric ulcer in diagnosis of H. pylori infection. Under the consideration of the health insurance payments limitation and elimination of false-negative detection rate of H. pylori infection, we strongly recommend the rapid urease test from the antrum and body specimens rather than from the ulcer margins for detection of the bacteria in patients with gastric ulcer disease.