七氟烷对幼鼠认知功能及海马CA1区NMDAR1表达的影响

目的观察七氟烷麻醉对幼鼠认知功能的影响。方法将48只新生SD大鼠随机分为三组各16只,高浓度组吸入3%七氟烷6 h,低浓度组吸入1.5%七氟烷6 h,对照组吸入空气。各组分别于出生后21 d（Ⅰ期）、60 d（Ⅱ期）随机取8只行Y型迷宫试验,连续3 d记录全天总反应时间（TRT）和错误次数（EN）;于最后一次测试后处死,采用免疫组化染色法测定脑海马CA1区N-甲基-D-天冬氨酸1（NMDAR1）表达情况。结果与对照组比较,高浓度组试验Ⅰ期T1时TRT延长,EN增加（P〈0.05）;Ⅱ期各组测试成绩差异无统计学意义;各组海马CA1区NMDAR1表达Ⅰ、Ⅱ期差异均无统计学意义。结论七氟烷麻醉后早期可导致幼鼠一过性认知功能减退,但对NMDAR1表达无明显影响。     

rLent／NT4-NAP对AD大鼠行为学及海马内NF-κB mRNA及caspase-3 mRNA表达的影响

目的 探讨神经保护肽慢病毒(rLent/NT4-NAP)感染老年性痴呆(AD)大鼠鼻黏膜后分泌表达NAP对AD大鼠行为学及海马内NF-κB mRNA及caspase-3 mRNA表达的影响.方法 选择无菌级雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、假手术组、AD组、慢病毒组,每组10只.Aβ1-40联合转移生长因子β1(TGFβ1)注入各实验大鼠左侧海马区制备AD动物模型,利用水迷宫实验检测大鼠记忆能力,利用原位杂交方法观察大鼠海马内NF-κB mRNA和caspase-3 mRNA的表达.结果 AD组与正常组、假手术组比较,逃避潜伏期明显延长,差异有统计学意义(P＜0.05);慢病毒组与AD组比较逃避潜伏期明显缩短,差异有统计学意义(P＜0.05);慢病毒组与正常组、假手术组比较差异无统计学意义(P＞0.05).原位杂交结果示:AD组NF-κB mRNA,caspase-3 mRNA相对表达水平明显升高,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).慢病毒组NF-κB mRNA,caspase-3 mRNA相对表达水平与AD组比较明显降低(P＜0.01);与正常组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 rLent/NT4-NAP感染AD大鼠鼻黏膜后能够分泌表达 NAP;NAP能够下调AD大鼠海马NF-κB mRNA,caspase-3 mRNA的表达,抑制细胞凋亡,对AD大鼠海马神经元具有保护作用.     

不同浓度七氟烷对大鼠认知功能及海马内磷酸化cAMP反应元件结合蛋白表达的影响

目的观察不同浓度七氟烷麻醉对大鼠认知功能和海马内cAMP反应元件结合蛋白磷酸化表达的影响。方法 SPF级5周龄SD大鼠90只,体质量100¹10 g,随机分为对照组(C组)、1%七氟烷麻醉组(S1组)、2%七氟烷麻醉组(S2组)、2.6%七氟烷麻醉组(S3组)、4.1%七氟烷麻醉组(S4组)。C组单纯吸氧6 h,氧流量2.0 L/min,其余各组在与C组相同的氧流量条件下分别给予1%、2%、2.6%和4%七氟烷吸入6 h。采用Morris水迷宫实验观察麻醉后1、2、3、4和5 d学习记忆和空间搜索能力的变化;采用旷场箱观察麻醉后在旷场的自发行为的变化;采用Western印迹法测定麻醉后海马内cAMP反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化表达的变化。结果与C组相比,麻醉后1110 g,随机分为对照组(C组)、1%七氟烷麻醉组(S1组)、2%七氟烷麻醉组(S2组)、2.6%七氟烷麻醉组(S3组)、4.1%七氟烷麻醉组(S4组)。C组单纯吸氧6 h,氧流量2.0 L/min,其余各组在与C组相同的氧流量条件下分别给予1%、2%、2.6%和4%七氟烷吸入6 h。采用Morris水迷宫实验观察麻醉后1、2、3、4和5 d学习记忆和空间搜索能力的变化;采用旷场箱观察麻醉后在旷场的自发行为的变化;采用Western印迹法测定麻醉后海马内cAMP反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化表达的变化。结果与C组相比,麻醉后1³ d,S3组平均逃逸潜伏期明显延长,而S4组麻醉后13 d,S3组平均逃逸潜伏期明显延长,而S4组麻醉后1⁴ d,平均逃逸潜伏期均明显延长(P<0.05);麻醉后1、2 d,S2组平均逃逸潜伏期均明显延长(P<0.05),S1组麻醉后各时间点以及S2、S3和S4组麻醉后5 d平均逃逸潜伏期未见明显差异(P>0.05);与C组相比,S1和S2组平均第三象限停留时间和穿台次数差别无统计学意义(P>0.05),S3和S4组平均第三象限停留时间和穿台次数明显减少(P<0.05);各组麻醉后1和5 d在旷场箱内的自发行为表现差异无统计学意义(P>0.05);与C组相比,S2、S3和S4组海马组织中磷酸化CREB表达明显下降(P<0.05),而S1组海马组织中磷酸化CREB表达水平与C组差别无统计学意义(P>0.05)。结论高浓度七氟烷可以引起大鼠麻醉后早期认知功能障碍,并呈剂量依赖性。CREB蛋白磷酸化的抑制以及其转录下调,引起记忆相关蛋白合成的减少可能是其机制之一。     

亚麻醉浓度的七氟烷对成年大鼠认知功能及海马齿状回神经发生的影响

目的探讨亚麻醉浓度的七氟烷对成年大鼠认知功能及海马齿状回神经发生的影响。方法将18只SD大鼠经过Moms水迷宫训练2d后,随机分为空白组（未经任何处理）、氧气组（吸氧2h）和七氟烷组（1-5％七氟烷吸入麻醉2h）,给予相应的处理后,连续5d用Moms水迷宫行学习记忆测试。测试完毕后处死大鼠,取脑组织用免疫组化方法观察海马齿状回的神经发生。结果与空白组相比,七氟烷组元认知功能障碍,海马齿状回神经发生明显增加（P〈0．05）。结论亚麻醉浓度的七氟烷不影响成年大鼠的认知功能,且能诱发成年大鼠海马齿状回的神经发生。     

七氟烷复合咪达唑仑麻醉对老年大鼠认知功能的影响及其机制

目的探讨七氟烷复合咪达唑仑麻醉对老年大鼠认知功能的影响及其机制。方法将64只SD大鼠随机分为对照组(C组)、七氟烷组(S组)、咪达唑仑组(M组)、七氟烷复合咪达唑仑组(S+M组),每组大鼠16只,处理后采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠认知功能的变化以及各组大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体(NR)1、NR2B mRNA表达情况、各组大鼠海马神经型一氧化氮合酶(n NOS)、半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3蛋白表达。结果 Morris水迷宫实验训练1 d,各组大鼠潜伏期比较差异无统计学意义(P>0.05),训练3 d、5 d,各麻醉组大鼠潜伏期均显著高于C组,差异有统计学意义(P<0.05),且S+M组大鼠潜伏期明显高于S组及M组(P<0.05),差异有统计学意义;将平台撤除后,各麻醉组大鼠60 s内穿过平台次数明显低于C组,差异有统计学意义(P<0.05),且S+M组大鼠穿过平台次数明显低于S组及M组,差异有统计学意义(P<0.05);各组大鼠海马NR1 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05),S组与S+M组大鼠海马NR2B mRNA相对表达量较C组、M组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),M组与C组大鼠海马NR2B mRNA相对表达量差异无统计学意义(P>0.05);与C组比较,各麻醉组大鼠海马n NOS蛋白表达降低,差异有统计学意义,且S+M组大鼠海马n NOS蛋白表达量最低,而各组大鼠海马caspase-3蛋白表达情况无明显变化,差异有统计学意义(P>0.05)。结论七氟烷复合咪达唑仑可引起大鼠认知功能的降低,其机制可能与抑制NR2B、NOS表达有关,而与神经细胞凋亡无明显关系。     

不同麻醉药物对老年非体外循环冠状动脉旁路移植术患者血清兴奋性氨基酸的影响

目的 比较不同麻醉药对老年非体外循环冠状动脉旁路移植术患者血清兴奋性氨基酸（EAA）的影响。方法 择期行非体外循环冠状动脉旁路移植术的患者120例,年龄60～75岁,ASA（美国麻醉医师协会）Ⅱ或Ⅲ级,随机分为丙泊酚复合瑞芬太尼组（P组）和七氟烷（S组）,每组60例。P组丙泊酚复合瑞芬太尼,S组吸入七氟烷维持麻醉。分别于麻醉前（T0）、术毕即刻（T1）、术后24h（T2）、48h（T3）、72h（T4）从颈内静脉采血2ml,采用反相高效液相色谱荧光法检测血清中EAA浓度。结果 组内比较T2、T3两组血清谷氨酸（Glu）、天冬氨酸（Asp）、甘氨酸（Gly）浓度与麻醉前均有不同程度升高（P＜0.05）;与P组比较S组Glu、Asp、Gly浓度在T2明显升高（P＜0.05）,Glu浓度在T3明显升高（P＜0.05）,T1和T4 Glu、Asp、Gly浓度与P组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 非体外循环冠脉搭桥术老年患者应用丙泊酚复合瑞芬太尼麻醉,可降低血清EAA浓度,有减少术后认知功能障碍的趋势。     

缺血后适应对老龄大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究缺血后适应能否减轻老龄大鼠急性心肌缺血再灌注损伤,比较缺血后适应的心脏保护作用在成年和老龄大鼠之间有无差别。方法32只雄性F344大鼠分为成年（6～8月龄）和老龄（20～22月龄）组,每组再分为缺血再灌注（I/R）组（缺血30min,再灌注2h,8只）和缺血后适应（IPost）组（缺血30min,给予4轮10s再通/10s缺血后再灌注2h,8只）,监测平均动脉压（MAP）、心率收缩压乘积（RPP）等血流动力学参数和心电图,测定心肌梗死面积,再灌注2h后检测血清肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）浓度。结果再灌注2h时,成年IPost组MAP和RPP均高于I/R组（P＜0.05）,而老龄IPost组与I/R组间差异无统计学意义（P＞0.05）。再灌注初30min内,成年IPost组和I/R组心律失常评分分别为1分和3.5分,两者间差异有统计学意义（P＜0.05）;老龄IPost组和I/R组心律失常评分分别为2分和3分,两者间差异无统计学意义（P＞0.05）。成年和老龄IPost组心肌梗死面积较I/R组分别减少52%和44%（均P＜0.05）。成年和老龄IPost组CK和LDH浓度较I/R组均有明显降低（P＜0.05）。结论缺血后适应能缩小老龄大鼠心肌梗死面积、减少心肌酶释放,且其程度与成年大鼠相似;同时缺血后适应能改善成年大鼠心肌顿抑、减少再灌注心律失常,但此作用在老龄大鼠未观察到。     

Wnt/β-catenin信号通路在七氟醚诱导术后认知障碍中的作用机制

目的:探讨通过激活Wnt/β-catenin信号通路抑制炎症反应对七氟醚诱导的老年大鼠术后认知障碍(POCD)的影响。方法:将60只雄性大鼠随机分为对照组(C组)、3%七氟醚组(S组)、氯化锂(LiCl)+3%七氟醚组(LiCl+S组),每组20只。S组、LiCl+S组吸入3%七氟醚6 h, C组吸入空氧混合气体6 h, LiCl+S组于吸入七氟醚前连续5 d腹腔注射LiCl 2 mmol/kg,每日1次。七氟醚麻醉结束后24 h,随机取每组10只大鼠,采用Morris水迷宫实验检测老年大鼠认知功能,前4 d进行定位航行实验,第5天进行空间探索实验。水迷宫实验结束后立即处死大鼠,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察海马组织病理形态学改变。七氟醚麻醉结束后24 h,取每组剩余10只大鼠立即处死,采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)法检测海马区肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、β-catenin及磷酸化糖原合酶激酶3β(p-GSK-3β)蛋白表达水平。结果:与C组相比,S组和LiCl+S组水迷宫实验第2天、第3天、第4天逃避潜伏期明显延长(P<0.0...     

妊娠期亚临床甲减大鼠对子代学习记忆能力及脑发育相关基因表达的影响

目的 通过建立妊娠期亚临床甲状腺功能减退(甲减)孕鼠动物模型,观察母鼠亚临床甲减对仔鼠行为学改变的影响,并从脑发育相关基因表达方面探讨母体亚临床甲减导致胎儿脑发育障碍的机制.方法将60只SPF级雌性成年Wistar大鼠随机分成3组(每组n=20):(1)亚临床甲减组:手术切除甲状腺,于背部皮下植入微渗泵,L-T4装入泵中持续泵入;(2)甲减组:手术完全切除甲状腺,术后注入等量生理盐水,作为阳性对照;(3)正常对照组(假手术组):行甲状腺切除假手术,术后注入等量生理盐水.取仔鼠出生后第3、7及21天海马组织,以实时定量PCR法检测各时间点脑源性神经营养因子(BDNF)、神经细胞黏附分子(NCAM)mRNA表达;以Western印迹法检测BDNF、Rap1的蛋白含量;第40天仔鼠进行Morris水迷宫学习与记忆测试.结果(1)与正常对照组比较,亚临床甲减组的仔鼠第3天BDNF mRNA和蛋白表达减弱(均P＜0.05),NCAM mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05);第21天Rap1蛋白表达明显增强(P＜0.05);水迷宫结果显示第44天逃避潜伏期明显高于对照组,第49天长时记忆试验中在目标象限游泳时间明显低于对照组(均P＜0.05).(2)与甲减组比较,亚临床甲减组的仔鼠出生后各时点BDNFmRNA及蛋白表达明显增强(P＜0.05或P＜0.01).Rap1蛋白表达明显降低(P＜0.05);水迷宫结果显示第44天逃避潜伏期明显低于甲减组,第49天长时记忆试验中在目标象限游泳时间明显高于甲减组(均P＜0.05).结论母体亚临床甲减的仔鼠空间学习能力及空间记忆能力均下降,其作用机制可能与甲状腺激素调控基因BDNF表达下调、Rap1表达升高有关.     

电刺激小脑顶核对AD大鼠海马神经元c—Rel和Bcl—xl表达的影响

目的 研究电刺激小脑顶核(FNS)对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力及脑内海马神经元c-Rel和Bcl-xl表达的影响.方法 40只SD大鼠随机分成4组:Aβ1-40微量注射组(AD组)、假手术组(SC组)、Aβ1-40微量注射+电刺激小脑顶核组(FNS组)和Aβ1-40微量注射+电刺激齿状核组(DNS组),采用Morris水迷宫检测电刺激小脑顶核对AD大鼠认知功能的影响;通过HE染色、电镜观察电刺激小脑顶核对AD大鼠的海马神经元形态的影响;采用免疫组化法观察电刺激小脑顶核对AD大鼠海马神经元c-Rel和Bcl-xl的表达的影响.结果 与SC组比较,AD组、FNS组和DNS组每天隐匿平台逃避潜伏期明显延长(P＜0.05)、海马CA1区的Bcl-xl和c-Rel阳性细胞OD值差异显著(均P＜0.05); FNS组与AD组比较,大鼠每天逃避潜伏期明显缩短(P＜0.05),FNS组海马CA1区Bcl-xl和c-Rel阳性细胞OD值为(0.46±0.04、0.65±0.09),较AD组阳性细胞OD值明显增高(P＜0.05),但齿状核刺激(DNS)组与AD组比较大鼠每天逃避潜伏期和海马CA1区Bcl-xl和c-Rel阳性细胞OD值无显著差异(P＞0.05).结论 电刺激小脑顶核能通过增强C-Rel及Bcl-xl的表达,抑制海马神经元的凋亡,改善AD大鼠学习记忆能力.     

重组人促红细胞生成素对脑梗死患者的脑保护作用

目的观察重组人促红细胞生成素（rHu—EPO）治疗脑梗死的疗效。方法根据发病时间,将217例脑梗死患者分为急性期组（发病≤48h）113例和亚急性期组（发病〉48h至5d）104例。每组又按抽签法随机分为2个亚组,A1组（急性期对照组）50例,A2组（急性期治疗组）63例;B1组（亚急性期对照组）50例,B2组（亚急性期治疗组）54例。各组患者均接受基础治疗,A2组和B2组辅助rHu—EPO治疗,3000U／次,皮下注射,1次／3d,共2次。治疗前和治疗后第1、6个月时,采用改良爱丁堡±斯堪的那维亚评分（MESSS）评价神经功能缺损状况,检测治疗后14d时血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平,并观察血清一氧化氮（NO）变化。结果①治疗后第1、6个月A2组患者MESSS分别为16±6、10±7,A1组分别为21±8、14±4,两组间第1、6个月比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）;治疗后14d,A2组NSE为（10．0±3．6）μg/L,NO为（41±6）μmol／L,A1组NSE为（12．4±5．8）μg／L,NO为（47±10）μmol／L,两组比较,P〈0．05和P〈0．01。②第1、6个月B2组与B1组间MESSS差异无统计学意义（均p〉0．05）;14d时两组间NO水平相近（P〉0．05）,但两组间NSE比较[（12．0±5．1）、（14．3±4．8）μg/L],差异有统计学意义（P〈0．05）。③第1、6个月A2组与B2组间MESSS比较,差异有统计学意义（均P〈0．001）。结论EPO能改善脑梗死急性期患者的近期预后,具有脑保护作用;但对亚急性期患者的预后,未显示有改善作用。短期应用rHu—EPO,无明显不良反应。其治疗机制之一可能是抑制了NO过量生成。     

罗格列酮改善高血压大鼠血管对胰岛素的反应性

目的研究罗格列酮（RSG）对自发性高血压大鼠（SHR）的高血压状态、血糖和胰岛素水平的影响及其离体血管对胰岛素的反应性。方法将实验动物分为3组：正常大鼠（WKY）对照组（幼年16只,成年15只）、未治疗的SHR组（幼年9只,成年9只）、RSG治疗的SHR组〔幼年6只,成年6只,3mg/（kg.d）,口服,治疗2周〕。2周后,测量未治疗组和治疗组成年SHR的收缩压、血糖和胰岛素水平;分离胸主动脉,采用离体血管灌流方法,对比观察不同处理组离体主动脉对胰岛素的舒血管反应。结果在成年SHR中,未治疗组和治疗组收缩压、血糖和胰岛素水平均无显著差异〔（187±4）vs（181±5）mmHg,P〉0.05;（6.2±0.2）vs（5.3±0.3）mmol/L,P〉0.05;（23.8±3.7）vs（20.4±0.8）mU/L,P〉0.05〕。治疗组对胰岛素的舒血管反应与未治疗组无显著差异〔最大收缩率：（72±8）%vs（73±4）%,P〉0.05〕;在幼年SHR中,未治疗组和治疗组血糖和胰岛素水平亦无显著差异,但治疗组对胰岛素的舒血管反应较未治疗组显著增加〔（40±6）%vs（61±5）%,P〈0.01〕。结论短期RSG治疗可改善幼年SHR血管对胰岛素的反应性。     

三氯苯达唑治疗大鼠斯氏狸殖吸虫童虫感染的实验研究

目的观察不同剂量三氯苯达唑治疗大鼠斯氏狸殖吸虫童虫感染的疗效,探讨其量效关系和最适剂量。方法60只SD大鼠随机分成实验组（A、B、C）和对照组D,每组15只大鼠。将斯氏狸殖吸虫囊蚴经腹腔注射感染各组大鼠,感染后第39dA、B、C组大鼠分别给予三氯苯达唑50、100和200mg/（kg·d）×4d治疗,治疗结束后第1、15和22d剖杀大鼠,回收虫体。并计数,计算检虫率及减虫率;称虫体湿重,并与对照组比较,进行统计学分析。结果治疗结束后第1d,检虫率和虫体湿重组间比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）;治疗结束后第15d,中、高剂量组检虫率、减虫率及虫体湿重与对照组比较,差异有统计学意义,低、中、高剂量组间比较,差异有统计学意义（P均〈0.01）,而低剂量组与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗结束后第22d,检虫率、减虫率及虫体湿重组间比较,差异均有统计学意义（P均〈0.01）。结论三氯苯达唑对大鼠斯氏狸殖吸虫童虫感染疗效显著,但其杀虫过程缓慢,随着治疗后时间延长,疗效逐渐提高,其呈明显的剂量效应关系,最适治疗剂量为200mg/（kg·d）左右。     

氟伐他汀动员内皮祖细胞促进大鼠梗死心肌血管新生的作用

目的观察氟伐他汀动员急性心肌梗死（AMI）大鼠内皮祖细胞（EPCs）,促进梗死心肌血管新生,减小梗死面积的效果。方法①成年Wistar大鼠左前降支结扎造模,随机分为空白组（A组）、假手术组（B组）、AMI组（C组）和氟伐他汀治疗AMI组（D组）。②流式细胞技术检测不同时段大鼠外周静脉血EPC动态变化。③4周末处死大鼠,心肌切片Masson染色,左室心肌正中线弧长方法计算梗死面积。④CD31单克隆抗体免疫组化法标记心肌新生血管内皮细胞并计算各组梗死、梗死周边及非梗死区新生血管数。结果①造模后第7天D组EPCs（37．13±3．44／2×10^5MNCs）显著高于A组（19．88±4．91／2×10^5MNCs）、B组（22．33±5．43／2×10^5MNCs）和C组（26．56±3．17／2×10^5MNCs）,差异具有统计学意义（P〈0．05）;C组较A组有少量增加（P〈0．05）,B组较A组无明显升高（P〉0．05）,B组和c组差异无统计学意义（P〉0．05）。造模后第14天D组EPCs（45．5-±4．99／2×10^5MNCs）同样显著高于A组（17．25±7．17／2×10^5MNCs）、B组（22．78±2．91／2×10^5MNCs）和C组（26．88±3．76／2×10^5MNCs）（P〈0．05）;B组和C组较A组有少量增加（P〈0．05）,B组和C组差异无统计学意义（P〉0．05）。第7天和第14天各组变化比较,A、B、C三组EPCs变化无统计学意义（P〉0．05）,D组则明显增加（P〈0．05）。②D组梗死区新生血管计数（10．75±1．61／mm。）明显多于C组（5．09±2．33／mm。）（P〈0．01）,梗死周边区新生血管计数D组（17．53±2．35／mm^2）同样明显多于C组（8．55±2．40／mm^2）（P〈0．01）。③D组梗死面积[（31．41±2．59）％]小于C组[（35．67±5．22）％]（P〈0．01）。结论①氟伐他汀能动员急性心肌梗死大鼠内皮祖细胞进入外周血循环,使其数量增加并促进梗死周边区血管新生。②心肌梗死后大鼠应用氟伐他汀可以限制梗死面积。     

促红细胞生成素预处理在心肌缺氧复氧损伤中对凋亡相关基因表达影响的研究

目的:观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)预处理在大鼠心肌缺氧复氧损伤(hypoxia/reoxygenation,H/R)中的抗凋亡效应以及对凋亡相关基因bcl-2及bax表达的影响。方法:Wistar成年雄性大鼠60只,分为2组,分别为对照组,EPO预处理组(EPO组),每组30只,EPO组大鼠经腹腔注射5000U/kg重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin,RHuEPO),对照组注射同体积生理盐水。2组各15只大鼠于给药24h后,检测各项指标,其余15只大鼠置于常压缺氧环境中(O27%)12h后,移至常压常氧环境中2h,予H/R损伤,之后采取心肌标本,DNA末端转移酶标记法(TUNEL法)检测心肌细胞凋亡,免疫组化检测凋亡效应酶胱天蛋白酶-3(caspase-3)、凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2)及B细胞淋巴瘤/白血病相关x蛋白(Bcl-associated x protein,bax)蛋白表达水平,计算bcl-2/bax比值。结果:H/R损伤前2组心肌细胞凋亡率,caspase-3以及bax蛋白表达水平无显著性差异(P>0.05),EPO组bcl-2蛋白表达水平、bcl-2/bax比值显著高于对照组(P<0.01)。H/R损伤后2组心肌细胞凋亡率,caspase-3、bax及bcl-2蛋白表达水平显著高于损伤前(P<0.01),而bcl-2/bax比值显著低于损伤前(P<0.01),EPO组的心肌细胞凋亡率、caspase-3蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05,P<0.01),而bcl-2蛋白表达水平以及bcl-2/bax比值显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),2组bax蛋白表达水平差异无显著性(P>0.05)。结论:EPO预处理在心肌H/R损伤中具有显著的抗凋亡效应;这一效应与其上调抗凋亡基因bcl-2的表达有关。     

睾酮抑制高盐喂养下雄性大鼠血管内皮生长因子的表达和释放

目的探讨不同水平睾酮对高盐饮食下雄性大鼠血管内皮生长因子的影响。方法雄性Wistar大鼠32只随机分为4组：假手术组（Sham组）,去势组（Cas组）,去势后补充睾酮组（TC组）,去势后补充睾酮和氟他胺组（FTC组）。每组8只。各组大鼠均以8%氯化钠高盐颗粒饲料喂养;Sham组施以假手术,Cas、TC及FTC组均施以去势手术。TC组及FTC组予丙酸睾酮2mg/kg、隔日1次皮下注射,FTC组同时予氟他胺1mg/kg、每日1次灌胃,持续8周。8周后采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定各组血清中睾酮、血管内皮生长因子（VEGF）的浓度,实时定量PCR（RT-PCR）测定血管内皮中VEGF mRNA的表达水平。结果（1）Cas组睾酮浓度[（0.26±0.02）μg/L]与Sham组[（3.15±0.54）μg/L]相比明显下降,而FTC组[（5.47±1.29）μg/L]、TC组[（2.80±0.30）ng/L]则明显升高（均P＜0.01）;（2）与Sham组的血清VEGF浓度[（20.837±13.823）ng/L]相比,Cas组[（47.246±19.733）ng/L, P＜0.01]和FTC组[（46.043±22.607）ng/L,P＜0.05]明显升高,TC组[（22.870±12.057）ng/L]则无明显差异（P＞0.05）;（3）与Sham组相比,Cas组和FTC组血管内皮细胞VEGF mRNA表达水平均显著降低（均P＜0.01）,而TC组无显著差异（P＞0.05）。结论高盐饮食下,睾酮水平增高抑制血管内皮生长因子的表达和释放。     

络瘀通胶囊对大鼠脑缺血-再灌注损伤的作用

目的观察并探讨络瘀通胶囊对大鼠脑缺血-再灌注后神经功能的影响及其保护机制。方法采用改良Longa法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血1.5 h后进行再灌注。选取10只大鼠作为假手术组,将40只造模成功的雄性SD大鼠按照随机数字表法分为4组,每组10只:模型组、络瘀通中剂量组(LYTM组)、络瘀通高剂量组(LYTH组)及胞磷胆碱钠组(CS组)。分别于造模后3 d及7 d采用12分评分及前肢踩空实验评价大鼠神经功能,应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测造模3 d后大鼠缺血侧及假手术组同侧脑组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、碱性成纤维生长因子(b-FGF)及磷酸化蛋白激酶/蛋白激酶(p-AKT/AKT)的表达,及造模后7 d同侧脑组织中Caspase-12的表达并进行组间比较。结果 (1)神经功能评分:造模后3 d各组12分评分及前肢踩空实验评分差异均无统计学意义(均P0.05);造模后7 d,LYTM组、LYTH组、CS组较模型组均明显改善(均P0.05)。(2)Western blot结果显示:1模型组BDNF及b-FGF表达明显少于假手术组(均P0.05);与模型组比较,LYTM组、LYTH组、CS组均可上调BDNF和b-FGF表达,以LYTH组作用最明显(P0.01)。2与假手术组比较,模型组p-AKT/AKT表达明显减少(P0.05);与模型组比较,LYTM组、LYTH组、CS组p-AKT/AKT表达增加,以LYTH组和CS组明显,差异均有统计学意义(均P0.05)。3在Caspase-12的表达中,模型组裂解后Caspase-12表达较假手术组明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,LYTM组、LYTH组Caspase-12前体(pro Caspase-12)和裂解后Caspase-12表达有减少趋势,但差异无统计学意义(均P0.05);CS组Caspase-12前体和裂解后Caspase-12表达水平明显低于模型组(P0.05)。结论络瘀通胶囊可通过促进神经元存活及再生对大鼠脑缺血-再灌注性损伤起到保护作用,且该保护作用也可能与抑制神经细胞凋亡有关。     

替比夫定联合苦参素治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的疗效观察

目的观察替比夫定联合苦参素治疗HBeAg阳性的慢性乙型肝炎的疗效。方法65例HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者被随机分为联合治疗组33例,给予替比夫定600mg/d,苦参素片0．6g/d;单用组32例仅给予替比夫定治疗。观察治疗12周、26周、52周时的应答反应情况。结果联合组和单用组HBVDNA阴转率在12周时分别为45．4％和31．3％,两组比较差异无显著性（P〉0．05）,但在第26周（72．7％vs46．9％）,52周（81．8％vs59．4％）时,两组比较差异有显著性（P〈0.05）。联合组和单用组HBeAg／HBeAb血清转换率在12周时分别为12．1％和6．3％,两组比较差异无显著性（P〉0．05）,但在第26周（30．3％V89．38％）、52周（45．5％vs21．9％）时,两组比较差异有显著性（P〈0．05）。两组肝功能复常率在12周、26周、52周差异无显著性（P〉0．05）。在两组患者治疗过程中,均未发现明显副作用。结论替比夫定和苦参素联用能显著提高对慢性乙型肝炎患者的抗病毒疗效。