3种方法建立小鼠脾虚模型过程中血清褪黑激素水平变化规律的研究

[目的]研究3种方法建立小鼠脾虚模型过程中血清褪黑激素(MT)水平的变化规律,进一步探讨MT在脾虚证中的作用.[方法]利用ELISA法检测血清MT水平,观察MT在建立利血平型、大黄型和偏食醋型小鼠脾虚模型过程中的变化规律.[结果]随造模时间的延长,3种脾虚模型动物血清MT水平变化过程明显不同,但文献中显示的3种脾虚模型建立成功天数,与笔者实验中MT水平低下所对应的天数恰好吻合.[结论]提示MT的改变较普遍地存在于脾虚的发病过程中,不仅可以作为某些脾虚证的特征参照指标,也可能是某些脾虚病症在某个阶段的的重要客观生化指标.     

脾虚小鼠小肠上皮细胞蛋白质组特征及白参的干预作用研究

[目的]研究脾虚型小鼠小肠上皮细胞蛋白质组特征及白参的调节作用.[方法]昆明种小鼠60只,利血平法复制动物模型,随机分为正常、脾虚模型和白参汤剂组,双向凝胶电泳技术分离蛋白质,改进的考染法染色,以PDQuest软件分析图谱,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行质谱分析.[结果]鉴定出的33个蛋白质点中有27个表达明显减弱,6个表达增强.经白参汤剂治疗后,其表达多数得以回调.各蛋白质的功能类型几乎涉及小肠细胞各主要功能.[结论]脾虚型小鼠小肠上皮细胞的蛋白质组特征主要表现为蛋白质表达呈双向变化,以下调为主.表达变化的蛋白质涉及细胞各部位,白参汤剂对小肠上皮细胞蛋白质组的调节作用是白参健脾的重要机制之一.     

脾虚证临床与实验研究进展

近 2 0年来 ,国内应用现代医学技术和方法 ,对脾虚证临床与实验进行了多方位、多层次的研究。随着近年来有关脾虚证诊断标准规范化和实验性脾虚证动物模型的反复探索 ,有关脾虚证临床与实验研究取得了重大进展 ,现综述如下。1　脾虚证动物模型的研究自 80年代开展脾虚证本质研究以来 ,由于临床研究方面的诸多困难 ,使得许多研究工作不得不借助于动物模型进行深入探讨。经过近 2 0年努力 ,现已经建立了小鼠、大鼠、金黄地鼠、马属动物驴等动物的脾虚模型 ,方法学上包括大黄脾虚模型[1] 、利血平模型[2 ] 、饥饱失常模型[3] 等。虽仍为初级阶…     

3种脾虚证模型大鼠胃黏膜损伤情况的比较

[目的]比较3种不同造模方法所致脾虚证模型大鼠胃黏膜损伤情况.[方法]将40只大鼠随机分成5组,即空白1组(5只),空白2组(5只)、利血平组(10只)、甘蓝猪油组(10只)、小承气组(10只).造模过程观察动物一般情况,包括毛发光泽度,活动、反应、大便、食量,体重.光镜下观察胃黏膜的病理组织学变化.[结果]3种造模方法均能使大鼠出现类似临床脾虚证的表现,在光镜下观察符合胃底、胃窦部黏膜糜烂的表现.其中2周后观察,与甘蓝猪油组比较,小承气组黏膜缺损较重,利血平组黏膜下水肿较重.小承气组实验6周后表现较2周、4周加重.[结论]结合一般情况及光镜下结果评价,小承气组造模方法较好.     

脾虚小鼠原位移植肝癌模型的建立及评价

目的:建立脾虚小鼠原位移植肝癌模型,探讨脾虚对小鼠肝癌成瘤率和生存率的影响。方法:60只6周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、脾虚组、脾虚肝癌组和肝癌组,每组15只。采用利血平建立小鼠脾虚模型,利血平皮下注射14天后,在脾虚模型基础上,hePal-6小鼠肝癌细胞经裸鼠皮下种植后移植入C57BL/6小鼠肝脏,制作肝癌模型并观察35天。实验过程中观察动物脾虚程度、成瘤情况及生存时间等。结果:脾虚组和脾虚肝癌组小鼠脾虚积分较正常组明显升高(P0.01),平均分值分别为17.57±4.86和18.13±4.53,符合典型脾虚模型的分值范围。小鼠肝癌总的成瘤率可以达到86.67%。与肝癌组小鼠比较,脾虚肝癌模型组小鼠的成瘤率为100.0%,高于肝癌组的73.33%(P0.05)。脾虚肝癌组小鼠的生存时间明显低于肝癌组小鼠(P0.01)。结论:脾虚小鼠原位移植肝癌模型为从中医脾虚因素研究肝癌提供了简单可行的动物模型,脾虚是肝癌形成和预后不良的重要因素。     

脾虚证进程中小鼠特异性/非特异性免疫功能变化及中药的干预作用

目的 观察脾虚证进程中小鼠特异性/非特异性免疫功能的变化及中药敦煌大宝胶囊对其免疫功能的影响.方法 受试动物随机分为空白对照组、模型组、敦煌大宝胶囊大、中、小治疗组,阳性对照组,每组8只.建立脾虚证小鼠模型,中药干预后观测各组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数;ConA,LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖反应及NK细胞活性等指标.结果 脾虚证进程中小鼠特异性/非特异性免疫功能低下(P＜0.05).经中药干预后,与模型组比较,敦煌大宝胶囊治疗组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数;ConA,LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖反应及NK细胞活性显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 脾虚证进程中小鼠特异性/非特异性免疫功能低下,敦煌大宝胶囊对脾虚证小鼠免疫功能紊乱具有明显改善作用.     

枳术汤对脾虚便秘小鼠P物质和降钙素基因相关肽基因的靶向调控

[目的]观察枳术汤对脾虚气滞便秘小鼠P物质(SP)和降钙素基因相关肽(CGRP)基因表达的影响,探讨其靶向调控机制.[方法]采用饮食、劳倦加泻下法复制脾虚气滞便秘小鼠模型,造模组分别给予枳术汤、麻仁软胶囊、0.85%氯化钠治疗及非药物干预(自然恢复),用RT-PCR法检测并比较各组小鼠胃肠道SP和CGRP mRNA水平.[结果]模型组小鼠SPmRNA水平较空白组降低,尤以胃窦降低明显;而CGRP mRNA较空白组升高,以胃窦升高明显.治疗后枳术汤组SP mRNA较其他组升高,而CGRP mRNA较其他组降低,差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]枳术汤可提高脾虚气滞便秘小鼠胃窦SP基因的表达,降低胃窦CGRP的表达,从而促进胃肠动力,达到治疗便秘的目的.     

白细胞介素-12及白细胞介素-18致小鼠脾虚的研究

目的：观察白细胞介素-12(IL-12)及白细胞介素-18(IL-18)能否导致脾虚，研究脾虚与IL-12及IL-18的关系。方法：60只小鼠随机分为脾虚组、IL组和对照组。采用利血平制作脾虚动物模型组，IL组每日腹腔注射IL-12、IL-18。采用免疫分析技术检测3组小鼠血浆IL-12、IL-18的含量。结果：IL-12及IL-18引起明显脾虚证的表现，与利血平制作脾虚动物模型组相似。脾虚组和IL组血浆IL-12、IL-18的含量明显升高。结论：IL-12、IL-18可导致脾虚，血浆IL-12、IL-18的含量可作为脾虚证的实验室参考指标。     

痛泻安肠方对腹泻型肠易激综合征小鼠内脏高敏及肠道菌群的影响

目的:观察痛泻安肠方对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)肝郁脾虚证小鼠内脏高敏及肠道菌群的影响。方法:30只SPF级雄性C57BL/6小鼠用随机数字表法分为空白组、模型组及痛泻安肠方低、中、高剂量组，每组各6只。除空白组小鼠外，其余各组小鼠均使用束缚应激2周联合番泻叶灌胃1周复制IBS-D肝郁脾虚证小鼠模型。造模成功后分别给予痛泻安肠方相应剂量灌胃，连续2周。比较各组小鼠腹部撤退反射(AWR)评分；甲苯胺蓝染色观察小鼠结肠肥大细胞数量；ELISA检测小鼠血清5-羟色胺(5-HT)、降钙素基因相关肽(CGRP)、血管活性肠肽(VIP)、神经肽Y(NPY)和P物质(SP)表达水平；16S rRNA高通量测序检测各组小鼠肠道菌群种类及丰富度的变化。结果:与IBS-D肝郁脾虚证模型组小鼠比较，痛泻安肠方各剂量组小鼠AWR评分呈不同程度的降低；结肠黏膜肥大细胞浸润减少；血清5-HT、CGRP、VIP、SP水平降低，差异有统计学意义(P<0.05)。16S rRNA测序分析发现，痛泻安肠方干预增加了IBS-D肝郁脾虚证小鼠肠道菌群的多样性及丰富度，增加了疣微菌门和阿克曼菌属的丰富度。结论:痛泻...     

四君子汤对脾虚大鼠神经内分泌免疫网络功能的影响

[目的]探讨四君子汤对脾虚证大鼠神经内分泌免疫功能的影响.[方法]将45只大鼠随机分为正常组、脾虚组、治疗组,检测各组大鼠尿木糖水平,用放射免疫分析方法检测脾虚组、治疗组血清胃泌素、胃动素、白细胞介素-4、白细胞介素-8、醛固酮的水平.[结果]治疗组胃泌素、胃动素、白细胞介素-4、白细胞介素-8、醛固酮水平较对照组明显升高(P＜0.01).[结论]脾虚能引起神经内分泌免疫功能下降,四君子汤治疗后有明显改善.