调节性T淋巴细胞和辅助性T淋巴细胞17在HBV相关肝病中的作用

目前,免疫细胞在HBV感染免疫调节中的作用得到广泛关注。对近年来调节性T淋巴细胞(Treg)和辅助性T淋巴细胞(Th)17在HBV相关性疾病,尤其是HBV相关性肝纤维化和肝衰竭以及肝细胞癌的发生、发展和预后中所起的作用进行了回顾。指出了Treg和Th17在HBV感染不同时期的动态变化及其在肝细胞癌中的作用还需要进一步研究,并期待后期研究通过不同信号通路对Treg或Th17进行调节,为HBV相关疾病治疗提供更加精准的方向。     

辅助性T淋巴细胞17/调节性T淋巴细胞比值失衡在HBV相关肝脏疾病进展中的作用

慢性乙型肝炎患者肝脏损害多发生在免疫介导作用下,考虑病毒感染和免疫反应的相互作用是疾病病情进展的重要原因。慢性乙型肝炎可发展至肝纤维化、肝硬化甚至肝细胞癌。回顾了辅助性T淋巴细胞17(Th17)与调节性T淋巴细胞(Treg)的发现起源,叙述了二者自身特性,同时阐述了在维持免疫系统稳定过程中二者所起的作用及作用机制;详细分析了细胞失衡在慢性乙型肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝细胞癌等各个阶段中的作用,指出Th17/Treg失衡会促使HBV相关肝脏疾病病情加重。     

慢性乙型肝炎患者外周血中T淋巴细胞亚群和CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞的表达水平与HBV DNA定量的相关分析

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中T淋巴细胞亚群(CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD4+/CD8+T)和CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Treg)表达水平与HBV DNA定量的相关性。方法选取2012年7月-12月在兰州市第二人民医院就诊的175例HBV感染者作为研究对象,分为CHB组(63例)、HBV携带者(ASC组)(112例),以同期50例健康体检者作为对照组。采用流式细胞术检测3组患者血清中的CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD4+T/CD8+T和CD4+CD25+Treg表达水平,实时荧光定量PCR法检测HBV DNA载量。多组间均数比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验,计数资料组间比较采用χ2检验;采用Pearson进行相关性分析。结果 CHB患者外周血CD4+CD25+Treg表达水平(30.97±18.78)%显著高于对照组(27.30±17.59)%,差异具有统计学意义(P0.05);与对照组相比,CHB组、ASC组的CD3+T、CD4+T淋巴细胞百分数和CD4+与CD8+T淋巴细胞百分数比值显著降低,差异均有统计学意义(P值均0.05),CD8+T淋巴细胞百分数显著升高,差异均有统计学意义(P值均0.05);ASC组和CHB组CD4+CD25+Treg表达水平与HBV DNA呈正相关(r值分别为0.501、0.682,P值均0.01)。结论 HBV感染者存在T淋巴细胞亚群比例异常,HBV DNA可以促进CD4+CD25+Treg表达水平升高,说明CD4+CD25+Treg和CD4+与CD8+T淋巴细胞比例失衡在乙型肝炎慢性化过程中发挥重要作用。     

HBeAg(+)与HBeAg(-)乙型肝炎病毒携带者外周血CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞比例的变化及意义

目的探讨HBeAg(+)与HBeAg(-)HBV携带者外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Treg)的变化及其意义。方法 HBeAg(+)与HBeAg(-)HBV携带者两组各50例患者,应用流式细胞仪测定外周血CD3+T淋巴细胞所占比例、CD4+和CD8+T淋巴细胞所占比例及其比值、CD4+CD25+Treg所占比例;以同期门诊健康体检者20例为健康对照组。结果与健康对照组相比,HBeAg(+)与HBeAg(-)HBV携带者,在外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+与CD8+T淋巴细胞所占比例差异无统计学意义。CD4+与CD8+T淋巴细胞比值,在HBeAg(+)HBV携带者有升高趋势,但与HBeAg(-)HBV携带者和对照组比较差异无统计学意义。HBeAg(+)HBV携带者,CD4+CD25+Treg所占比例较对照组明显升高,而HBeAg(-)HBV携带者,CD4+CD25+Treg所占比例较对照组明显降低,差异均有统计学意义。结论尽管肝功能在正常范围,HBeAg(+)与HBeAg(-)HBV携带者外周血CD4+CD25+Treg比例不同,HBeAg(+)HBV携带者高于健康对照组,而HBeAg(-)HBV携带者低于健康对照组,提示HBeAg(+)与HBeAg(-)HBV携带者处于不同的免疫状态。     

慢性乙型肝炎患者外周血中调节性T淋巴细胞、Ⅰ型调节性T淋巴细胞和辅助性T淋巴细胞17的表达特点及临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+(Treg)、CD4+CD25+IL-10+(Tr1)和CD4+IL-17+(Th17)的表达特点及其与CHB病情的关系。方法选取2013年1月至2014年6月解放军第一八○医院收治的轻中度CHB患者和重度CHB患者各40例,另选取同期无肝病诊断史的健康人40例为对照。分别抽取CHB患者及对照者的外周血,以流式细胞术检测外周血中Treg、Tr1和Th17表达水平,real time-PCR检测血清中Foxp3、RORγt mRNA水平,ELISA检测患者血清中TGFβ1、IL-10、IL-17表达水平。计量资料组间比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果轻中度和重度CHB患者与对照组相比,Treg、Tr1和Th17的百分率,转录因子Foxp3、RORγt表达水平,细胞因子TGFβ1、IL-10、IL-17水平均明显高于健康对照组(P值均0.05);而Treg/Th17和Foxp3/RORγt值显著低于对照组(P值均0.05)。与轻中度CHB患者相比,重度CHB患者Treg、Tr1和Th17的百分率,Foxp3、RORγt表达水平,TGFβ1、IL-10、IL-17水平均显著升高(P值均0.05);Treg/Th17和Foxp3/RORγt值显著降低(P值均0.05)。结论 CHB患者中Treg(特别是Tr1)和Th17的表达失衡程度与CHB病情进展呈正相关,因此,对于CHB患者,纠正Treg(特别是Tr1)和Th17表达失衡可能是很重要的治疗措施,同时监测Treg(特别是Tr1)和Th17的表达比例改变,对于估计CHB患者病情预后、指导临床治疗有积极作用。     

CD4~+T淋巴细胞亚群与HBV感染不同临床转归的关系

人体感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)后可有无症状的隐性感染、急性乙型肝炎和急性重型乙型肝炎等多种临床表现.此后有的清除病毒,表现为自限性HBV感染,而约90%的儿童和10%的成人则转为HBV携带者或慢性乙型肝炎,并可进一步发展成肝硬化和肝细胞癌.CD4+T淋巴细胞在抗感染免疫中起核心作用.他有Th1、Th2、Treg、Th17、Th22、Tfh和Th9等多种亚群,均可来自于同一祖细胞(Th0),有着各自的分化途径和分泌不同的细胞因子,起着不同的作用.但彼此又相互作用和相互转化,尤其是Th1/Th2和Th17/Treg的平衡在HBV感染的临床转归中发挥着重要作用.     

苏州地区血吸虫性肝病患者临床特征及外周血T淋巴细胞亚群分布

目的了解苏州地区晚期血吸虫病肝病患者临床特征及其外周血T淋巴细胞亚群分布。方法以2016年1月-2018年1月在苏州大学附属第一医院感染科住院治疗的32例晚期血吸虫病肝病患者为研究对象,并根据是否合并其他感染分组进行研究;同时随机选取20例老年健康体检者为对照。采集研究对象静脉血,采用流式细胞术检测外周血CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、调节性T(Treg)细胞和Th17细胞比例。结果苏州地区血吸虫性肝病患者多因门脉高压相关并发症入院,合并感染率较高(59.38%,19/32)。血吸虫性肝病患者外周血CD4^+T、CD8^+T淋巴细胞及Th17细胞百分比低于健康对照组(t=-5.111、-4.470和-2.749,P均<0.05);Treg细胞百分比高于健康对照组(t=5.628,P<0.05)。有感染组、无感染组及对照组患者的CD4^+T、CD8^+T淋巴细胞、Th17细胞及Treg细胞亚群分布差异均有统计学意义(F=15.837、16.594、9.290和27.866,P均<0.05)。结论苏州地区血吸虫性肝病患者入院多以门脉高压相关并发症多见,合并感染者较常见,且患者外周血T淋巴细胞亚群已处于失衡状态。     

T淋巴细胞亚群的早期活化对乙型肝炎疫苗接种后免疫应答的影响

目的 探讨乙型肝炎疫苗接种后免疫应答与T淋巴细胞亚群活化的关系.方法 采集18例乙型肝炎疫苗接种应答者、22例乙型肝炎疫苗接种无应答者、10例未接受乙型肝炎疫苗接种的健康对照者全血.用流式细胞术对其外周血单个核细胞的表面标志物CD69、CD4、CD8、CD3等进行检测.计算不同T淋巴细胞亚群百分比.并经t检验比较不同T淋巴细胞亚群CD69表达的差异.结果 在应答者中,外周血激活型T辅助淋巴细胞(CD69~+ CD4~+ T淋巴细胞)数明显升高,而CD69~+ CD8~+ T淋巴细胞数则明显减少.应答者、无应答者、对照者外周血CD69~+ CD4~+ T淋巴细胞分别占CD4~+ T淋巴细胞的(1.81±1.33)%、(0.64±0.48)%和(0.56±0.39)%,应答者分别与无应答者和对照者比较.差异均有统计学意义(t=3.444、3.940,均P<0.01).应答者、无应答者、对照者外周血CD69~+ CD8~+ T淋巴细胞分别占CD8~+ T淋巴细胞的(0.43±0.25)%、(3.05±1.69)%和(3.11±2.41)%,应答者分别与无应答者和对照者比较,差异均有统计学意义(t=7.997、5.944,均P<0.01).应答者、无应答者、对照者CD3~+ CD4~+ T淋巴细胞占CD3~+ T淋巴细胞的百分比和CD3~+ CD8~+ T淋巴细胞占CD3~+ T淋巴细胞的百分比比较差异均无统计学意义.结论 乙型肝炎疫苗接种后无应答与Th细胞早期活化不足有关.     

原发性肝细胞癌患者CD4+CD25+调节性T淋巴细胞的频率、表型及功能

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）在HCC患者外周血及肿瘤组织中的频率、抑制功能及临床意义。方法收集18例原发性HCC患者的PBMC、肝癌组织及相应的癌旁组织标本,以及10例CHB患者和15名健康对照的外周血标本,以三色与四色流式分析法分析PBMC以及肿瘤浸润的淋巴细胞中CD4^＋CD25^＋Treg的频率及表型,并同时分析其与HBV持续感染、肿瘤TNM分期和其他临床指标的关系,用BrdU掺入法评价CD4^＋CD25^＋Treg的免疫抑制功能。结果与健康对照组相比HCC患者、慢性HBV感染者外周血中CD4^＋CD25^＋Treg频率明显上升（P＜0．01）,且HCC患者肿瘤浸润的淋巴细胞中CD4^＋CD25^＋Treg的频率也明显上调（P＜0．01）;随着肿瘤的进展HCC患者外周血中CD4^＋CD25^＋Treg呈上升趋势（P＜0．05）; HCC患者CD4^＋CD25^＋Treg可非特异性地抑制自身活化的CD4^＋CD25^- T淋巴细胞,并呈剂量依赖性,且抑制能力与健康对照组相比差异无统计学意义。结论HCC患者外周血中及肿瘤组织中CD4^＋CD25^＋Treg的频率升高,增多的CD4^＋CD25^＋Treg可能参与抑制抗HCC的免疫应答,从而使肝癌细胞逃脱机体的“免疫监视”作用。     

调节性T淋巴细胞对成人乙型肝炎疫苗接种免疫应答的影响

目的 通过对乙型肝炎疫苗接种后不同免疫应答人群调节性T淋巴细胞(Treg细胞)Foxp3 mRNA的表达和细胞因子分泌的检测,探讨乙型肝炎疫苗接种后免疫应答与免疫调节细胞和细胞因子之间的内在联系.方法 采集不同反应人群全血,实时荧光定量PCR检测人外周血单个核细胞Foxp3 mRNA的表达;流式细胞术对外周血单核细胞的表面标志物CD4、CD25进行检测;酶联免疫法检测外周血单个核细胞植物血凝素(PHA)和HBsAg刺激后白细胞介素(IL)-4、IL-12、IL-18、干扰素(IFN)γ的产生水平.根据不同资料采用方差分析、q检验或相关分析进行统计学处理.结果 (1)PHA和HBsAg刺激前后,无应答组Foxp3的表达均高于应答组和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)应答组外周血CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比(0.59%±0.46%)明显低于对照组(1.30%±1.44%),差异有统计学意义(F=2.990,P＜0.01).(3)各组外周血单个核细胞经PHA和HBsAg刺激后,无应答组的IFN γ浓度[(11.00±9.03)U/ml]明显低于应答组[(38.88±28.16)U/ml],差异有统计学意义(P＜0.01).(4)各组外周血单个核细胞经PHA和HBsAg刺激后,IL-18、IL-4、IL-12的浓度差异均无统计学意义.结论 CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在一定程度上参与了乙型肝炎疫苗接种应答的负性调控;乙型肝炎疫苗接种后无应答与IFN γ分泌不足有关;抗-HBs滴度水平与IFN γ和CD4+CD25+Foxp3表达无相关性.     

系统性红斑狼疮患者外周血Th17细胞与调节性T细胞的变化

目的 探讨外周血辅助性T细胞17(Th17)与调节性T细胞在系统性红斑狼疮(SLE)发生、发展中的变化.方法 选取32例SLE活动期患者作为SLE活动组、30例SLE稳定期患者作为SLE稳定组及25名健康者作为对照组,采用流式细胞术及定量聚合酶链反应(PCR)的方法,分别从蛋白质水平与mRNA水平检测其外周血CD4+T细胞IL-17及FoxP3的表达.采用单因素方差分析进行统计学处理.结果 SLE活动组外周血CD4+T细胞IL-17蛋白质(1.01±0.22)％及mRNA(2.04±0.63)表达水平显著高于SLE稳定组(0.48±0.16)％、(1.12±0.34)及健康对照组(0.41±0.12)％、1(P＜0.01),但SLE稳定组与健康者对照组差异无统计学意义(P＞0.05).SLE活动组外周血CD4+T细胞FoxP3蛋白质(2.36±0.54)％及mRNA(0.42±0.16)表达水平显著低于SLE稳定组(4.34±0.95)％、(0.87±0.28)及健康对照组(5.09±1.17)％、 1(P＜0.01),SLE稳定组又低于健康对照组(P＜0.05).结论 SLE患者外周血中可能存在Th17/调节性T细胞的失衡,且失衡程度可能与病情活动性相关.     

调节性T淋巴细胞与HBV感染慢性化的关系

调节性T淋巴细胞是抑制机体免疫应答,诱导机体免疫耐受的一种T淋巴细胞亚群,是近年来免疫学领域研究的热点之一。调节性T淋巴细胞功能紊乱和数量上的变化与自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤免疫耐受、移植排斥以及过敏性疾病的进程和治疗密切相关。归纳了近几年调节性T淋巴细胞的表面标志、免疫机制及其与乙型肝炎发病和抗病毒治疗过程的关系。     

肺结核患者疗程中外周血辅助性和调节性T细胞的动态研究

目的 探讨辅助性T细胞17（Th17）和CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞与结核病的发病及抗结核治疗转归的关系。 方法 纳入对象包括32例活动性肺结核患者、25例Mtb潜伏感染者、45例健康对照者。流式细胞术检测外周血Th17细胞分泌细胞因子IL-17和CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞表达强度。结果以x±s表示,所有数据均使用Prism 4.0统计软件进行分析,两组间比较采用非配对t检验,多组间的比较采用ANOVA方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。 结果 肺结核患者组治疗前IL-17表达为（3.25±1.68）%,明显低于健康对照组［（4.62±1.46）%］（F=6.633,P<0.0001）。比较活动性肺结核患者组IL-17表达在治疗前、治疗3个月［（4.17±2.27）%］、治疗6个月［（5.58±1.66）%］时的检测结果,发现治疗3个月时高于治疗前,但差异无统计学意义（F=12.244,P=0.057）;而治疗6个月时明显高于治疗前（F=12.244,P<0.0001）和治疗3个月时（F=12.244,P=0.004）。健康对照组CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞表达为（4.97±1.60）%,与Mtb潜伏感染组［（5.00±1.08）%］比较,差异无统计学意义（F=11.986,P=0.937）;活动性肺结核患者组治疗前表达为（6.59±1.73）%,显著高于健康对照组及Mtb潜伏感染组(F=11.986,P<0.0001)。比较活动性肺结核患者组治疗前、治疗3个月［（8.28±2.04）%］、治疗6个月［（7.46±1.87）%］时的CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞表达,发现治疗3个月时的表达明显高于治疗前（F=6.458,P=0.001）;治疗6个月时的表达低于治疗3个月时（F=6.458, P=0.085）,但差异无统计学意义;治疗6个月与治疗前的表达相比较,差异无统计学意义（F=6.458,P=0.068）;治疗6个月CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞表达明显高于健康对照组（t=6.255,P<0.0001）。 结论 结核病患者外周血Th17细胞明显减少,经有效抗结核治疗后,Th17细胞逐渐增加,表明Th17细胞在抗结核免疫中起保护作用。结核病患者外周血CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞明显增多,经抗结核治疗后CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞逐渐减少,进一步说明CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞在抗结核免疫中起抑制作用。     

慢性乙型肝炎患者外周血及肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和乙型肝炎病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞的表达及意义

目的 研究CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL在慢性乙型肝炎患者外周血和肝组织中的表达和临床意义.方法 流式细胞分析技术和流式细胞术细胞因子测定法(CFC)检测157例HBV感染者(包括急性乙型肝炎20例、慢性乙型肝炎115例、乙型肝炎肝硬化22例)和20例健康对照组外周血和部分肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL的表达.组间分析采用t检验.结果急性乙型肝炎,慢性乙型肝炎轻、中、重度患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞分别为(2.87±0.94)%、(3.53±1.56)%、(4.59±2.98)%和(3.65±1.73)%,明显高于对照组的(2.36±0.60)%(t值分别为2.04、5.97、3.30和3.17,P<0.01);慢性乙型肝炎轻、中、重度和乙型肝炎肝硬化患者外周血HBV特异性CTL为(0.189土0.152)%、(0.103±0.110)%、(0.118±0.120)%和(0.098±0.101)%,明显低于急性乙型肝炎患者的(0.815±0.360)%(t值分别为10.09、11.87、9.17和8.96,P<0.01).肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL的表达高于外周血.结论 CD4+CD25+调节性T细胞可能通过抑制CD8+T淋巴细胞在机体抗病毒过程中发挥重要作用.     

急性乙型肝炎患者程序性细胞死亡受体1表达与记忆性T淋巴细胞形成的关系

目的 观察急性自限性乙型肝炎发病过程中患者体内病毒抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)上程序性细胞死亡受体1(PD-1)表达的动态变化特点及其与记忆性抗原特异性CD8+T淋巴细胞形成的关系. 方法 针对不同表位合成4种五聚体,长期随访收集11例人类白细胞抗原(HLA)-A2阳性的急性乙型肝炎患者的外周血,流式细胞仪检测病毒特异性CTL上免疫抑制性分子PD-1、记忆性分子(CCR7、CD45RA、CD127)和活化标志物CD38的表达情况,并分析其相关性.同时进行肝功能,HBsAg、抗-HBs和血清HBV DNA载量检测.结果所有急性自限性乙型肝炎患者发病早期均表现出高频度、病毒抗原多表位的特异性CTL反应,而晚期各表位CTL频率均明显下降.CTL上PD-1表达在早期明显上调;与早期比较,晚期PD-1分子的表达明显降低(t=4.314,P＜0.01).同时CTL高表达记忆性分子CCR7,CD45RA和CD127,而低表达活化标志物CD38.提示病毒清除后记忆性CD8+T淋巴细胞形成. 结论 在急性自限性乙型肝炎发病过程中,HBV特异性CTL上PD-1分子表达的动态变化与记忆性T淋巴细胞的形成密切相关.     

肠源性内毒素血症对慢性乙型肝炎患者调节性T淋巴细胞/辅助性T淋巴细胞17的影响

目的探讨肠源性内毒素血症(IETM)对慢性乙型肝炎(CHB)患者调节性T淋巴细胞(Treg)/辅助性T淋巴细胞(Th)17的影响。方法选取2014年12月-2015年10月在山西医科大学第一医院住院治疗的CHB患者(CHB组)80例,同时选取健康体检者(HC组)20例作为对照。根据内毒素(ET)水平将CHB组分为ET阳性组和ET阴性组。测定外周血单个核细胞中叉头样转录因子(Foxp3)、维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)mRNA的表达,Treg和Th17百分比,以及ALT、HBV DNA水平。计量资料两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验,计数资料组间比较采用χ2检验。结果 CHB组Treg、Th17百分比、Foxp3、RORγt相对表达量与HC组比较均明显增高[(6.51±1.18)%vs(5.91±1.29)%,(4.99±1.07)%vs(4.18±0.87)%,2.12±0.83 vs 1.60±0.70,1.56±0.77 vs 1.09±0.59],P值均0.05。ET阳性组Treg、Th17百分比、Foxp3、RORγt相对表达量、Th17/Treg、RORγt/Foxp3、ALT水平与ET阴性组比较均明显增高[(6.75±1.17)%vs(6.21±1.14)%,(5.39±1.03)%vs(4.48±0.91)%,2.29±0.90 vs 1.91±0.70,1.84±0.76 vs 1.23±0.64,0.82±0.19 vs 0.74±0.16,0.95±0.38 vs 0.74±0.54,(220.16±115.82)U/L vs(170.86±99.69)U/L],P值均0.05。ET阳性组HBV DNA载量比ET阴性组增高,但差异无统计学意义(P0.05)。相关分析表明,CHB患者ET水平与Th17、Treg及ALT呈正相关(r值分别为,P值均0.05),而与HBV DNA无相关性。结论 CHB患者体内存在的IETM可能通过调控Foxp3、RORγt mRNA表达增加,导致外周血Treg、Th17百分比升高,进而Treg/Th17比例失衡,使HBV难以清除而导致慢性化。     

Th17细胞和调节性T细胞在系统性红斑狼疮患者中的研究

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血Th17细胞、调节性T细胞及联系两者的细胞因子白细胞介素(IL)-6的变化及其与病情活动的相关性,探讨Th17细胞、调节性T细胞在SLE发病机制中的作用.方法 收集103例SLE患者及28名健康者,SLE活动性的判断采用SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分方法,其中非活动组(SLEDAI≤9分)患者37例,活动组(SLEDAI＞9分)患者66例.用四色分选流式细胞仪检测外周血Th17细胞、调节性T细胞百分数,用流式细胞仪微球捕获芯片技术(CBA)检测血清IL-6浓度,并分析其与病情活动的相关性.统计学处理采用t检验、秩和检验和Spearman相关分析.结果 ①SLE患者组Th17细胞[(1.2±1.1)%]、IL-6[(35±92)pg/ml]显著高于健康对照组[(0.6±0.4)%、(6±3)pg/ml],而调节性T细胞[(1.6±1.2)%]显著低于健康对照组[(2.6±1.8)%].②SLE活动组Th17细胞[(1.6±1.7)%]显著高于SLE非活动组[(1.0±0.7)%]与健康对照组(P均＜0.05),SLE活动组调节性T细胞[(1.5±1.3)%]显著低于SLE非活动组[(2.1±2.0)%]与健康对照组(P均＜0.05),SLE活动组Th17/调节性T细胞(0.68±0.34)显著高于SLE非活动组(0.24±0.20)与健康对照组(0.13±0.09,P均＜0.05),SLE活动组IL-6[(41±22) pg/ml]显著高于SLE非活动组[(32±28) pg/ml]与健康对照组(P均＜0.05);SLE非活动组与健康对照组之间Th17细胞、调节性T细胞、Th17/调节性T细胞、IL-6差异均无统计学意义(P＞0.05).③Th17细胞百分数与SLEDAI呈正相关,调节性T细胞百分数与SLEDAI呈负相关,Th17/调节性T细胞与SLEDAI呈正相关,IL-6浓度与SLEDAI评分之间呈正相关,Th17细胞与调节性T细胞呈负相关.结论 SLE患者外周血Th17细胞、调节性T细胞及IL-6浓度较健康对照组显著增高,并与疾病活动性密切相关,说明Th17细胞、调节性T细胞可能在SLE的发生、发展中起重要作用.

Abstract：

Objective To study the changes of Th17 cell, regulatory T cell (Treg) and interleukin (IL)-6 in the peripheral blood of patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and their relationship with disease activity. Methods Percentage of Th17 and Treg in the peripheral blood of 103 patients with SLE and 28 healthy volunteers were detected by flow cytometry. The concentration of IL-6 in SLE patients and healthy volunteers was detected by cytometric bead array (CBA). The disease activity of SLE was measured by SLEDAI. SLE patients were divided into two groups: stable SLE (SLEDAI≤ 9, n=37) and active SLE (SLEDAI＞9, n= 66). The change of Th17, Treg, IL -6 and their relationship with disease activity were analyzed. Nonparamentric tests, t -test and spearman correlation were used for statistical analysis. Results The percentage of Th17 cells and the concentration of IL-6 in the peripheral blood in patients with SLE was higher than that in normal controls [respectively for (1.2±1.1)%, (35±92) pg/ml and (0.6±0.4)%, (6±3) pg/ml, P＜0.05]. However, the percentage of Treg in patients with SLE was lower than that in normal controls [respectively for (1.6±1.2)%,(2.6±1.8)%, P＜0.05]. The percentage of Th17, Th17/Treg IL-6 level in active SLE patients was higher than those in inactive SLE and those in normal controls (P＜0.05). However, the percentage of Treg in active SLE was lower than that in stable SLE patients and that in normal controls (P＜ 0.05). The percentage of Th17, Th17/Treg and concentration of IL-6 was positively correlated to disease activity(P＜0.05). But the percentage of Treg had negative correlation with the percentage of Th17 and disease activity (P＜0.05). Conclusion Th17, Treg and serum IL-6 in SLE patients are abnormal and they maybe contribute to the pathogenesis of SLE.     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在慢性乙型肝炎患者中的作用

目的 探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与乙型肝炎慢性化和病毒清除之间的关系.方法 收集慢性活动性乙型肝炎(CAH)患者19例、HBV携带者(AsC)21例、HBV感染恢复者12例和健康对照者15例.通过流式细胞术分析外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞的表型和频率,磁珠分选(MACS)CD4+CD25+T细胞,实时荧光定量PCR方法 分析Foxp3 mRNA基因在CD4+CD25+T细胞的表达水平.统计学处理采用单因素方差分析或非参数检验.结果CAH或AsC组外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞频率以及CD4+CD25+T细胞中Foxp3 mRNA的表达水平显著高于健康对照组或HBV感染恢复者(F=6.8,F=3.72,均P<0.05).免疫组织化学染色发现,CAH患者肝组织Foxp3'T细胞浸润累积较对照组明显增高,但AsC较CAH减少.HBeAg阳性患者(包括CAH和AsC)CD4'CD25'T细胞频率显著高于HBeAg阴性患者(t=2.3,P<0.05),抗-HBe阴性患者显著高于抗-HBe阳性患者(t=2.4,P<0.05).CD4+CD25+Foxp3+T细胞频率与慢性乙型肝炎患者血清中HBV病毒载量存在正相关(r=0.56,P<0.01).结论 慢性乙型肝炎患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞异常与乙型肝炎慢性化和病毒清除有关.