TRAIL联合顺铂诱导胶质瘤细胞凋亡的机制

作为新型的抗肿瘤药物,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)已进入临床Ⅱ期试验阶段[1].研究发现,TRAIL可以诱导包括胶质瘤在内的多种肿瘤细胞发生凋亡,但大多恶性胶质瘤细胞对TRAIL耐药[2].前期研究的实验发现,原代培养的胶质瘤细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性不同,检测发现死亡受体(DR)5的表达量不同,并当TRAIL与化疗药物联合作用后可发挥协同作用[3～5].因此,本文进一步对TRAIL与化疗药物联合作用诱导胶质瘤细胞凋亡的机制进行研究,为TRAIL作为肿瘤治疗新药提供新的实验依据.     

TRAIL及其受体与HBV相关慢性肝病相关性的研究进展

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)归属于肿瘤坏死因子超家族,与死亡受体结合后,激活caspase瀑布样级联反应,可诱导肿瘤细胞、转化细胞及病毒感染细胞发生凋亡,而对正常组织及细胞无凋亡诱导作用。TRAIL及其受体通过与HBV、细胞因子等的相互作用,在HBV相关慢性肝病的发病机制中发挥着重要作用。此外,体内TRAIL表达还与慢性乙型病毒性肝炎患者抗病毒治疗存在一定的关联性。本文对TRAIL及其受体与HBV相关慢性肝病的相关性进行综述,为进一步明确两者间的关系提供理论依据。     

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体受体在白血病细胞中的表达及其意义

目的研究肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)受体在白血病细胞中的表达及其临床意义。方法应用RT-PCR方法对76例白血病患者的骨髓,包括15例急性淋巴细胞性白血病(急淋)、10例急性淋巴细胞性白血病缓解期(急淋缓解)、16例急性非淋巴细胞性白血病(急非淋)、11例急性非淋巴细胞性白血病缓解期(急非淋缓解)、12例慢性粒细胞性白血病急性变期(慢粒急变期)和12例慢性粒细胞性白血病慢性期(慢粒慢性期)以及25例正常人骨髓或外周血白细胞表面TRAIL受体的表达进行检测。结果急淋、急淋缓解、急非淋、急非淋缓解、慢粒急变期和慢粒慢性期患者骨髓的白细胞表面死亡受体(deadreceptor,DR)DR4和DR5表达高,而诱骗受体(decoyreceptor,DcR)DcR1和DcR2表达低,且DR4的表达高于DR5的表达;缓解期DR4和DR5的表达高于患者组;正常人骨髓或外周血白细胞中DR4和DR5表达低,而DcR1和DcR2表达高。结论TRAIL受体在不同类型的白血病细胞中的表达具有明显的差异性。     

TRAIL及其受体促凋亡机制与消化道肿瘤治疗的前景

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)因其选择性诱导肿瘤细胞凋亡的特点而受到关注.TRAIL促肿瘤细胞凋亡的机制及其受体对它的调控机制尚在探索中.目前,TRAIL及其受体已被广泛运用于消化道肿瘤的治疗研究中,不同的消化道肿瘤细胞株对TRAIL诱导的凋亡敏感性不同,某些细胞株对TRAIL耐药.克服肿瘤细胞对TRAIL的耐药,同时保护正常细胞免受伤害,充分发挥TRAIL选择性杀伤肿瘤细胞的优点,将使TRAIL在抗癌方面发挥积极的作用.     

肺癌组织中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体的表达及其临床意义

目的　探讨不同类型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAILR )在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法　采用RT PCR检测 40例肺癌组织、对应癌旁非癌肺组织以及非小细胞肺癌细胞株A5 49不同类型TRAILR的表达 ,并结合临床资料进行分析。结果　 40例肺癌组织表达死亡受体DR4,3 5例肺癌组织表达死亡受体DR5 ;40例癌旁肺组织均表达死亡受体DR5和DR4,3 3例肺癌组织不表达诱捕受体DcR1,2 5例肺癌组织不表达DcR2 ,而 40例癌旁肺组织均表达DcR。肺癌细胞株A5 49中有DR5、DR4、DcR2的表达 ,但DcR1表达缺失。肺癌组织中DR的表达水平与肿瘤的分期有关 ,Ⅲ期肿瘤DR的表达显著低于Ⅰ /Ⅱ期DR表达 (P <0 .0 5 )。DR的表达与病人的性别、年龄、病理学分型无关。结论　肺癌存在TRAILR类型的表达差异 ,诱捕受体 (特别是DcR1)的表达缺失为TRAIL治疗肺癌提供了靶点     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体的表达及TRAIL的抗癌作用

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)可特异性杀伤肿瘤细胞同时赦免正常细胞。最近有报道，化疗可加强TRAIL诱导肺癌细胞凋亡。本研究意在观察TRAIL受体(TRAILR)的表达及TRAIL与顺铂、紫杉醇联合作用的抑癌性。     

γ-干扰素加强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抑制大肠癌细胞及其机制

有研究发现，部分肿瘤细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导的凋亡作用并不敏感，这限制了TRAIL在抗肿瘤治疗中的应用。有研究证实，γ-干扰素(IFN-γ)能增强TRAIL对肿瘤细胞的凋亡作用。我们以体外培养人大肠癌细胞株RKO为研究对象，探讨IFN-γ加强TRAIL的凋亡诱导作用，以及IFN-γ对TRAIL及其受体表达的调节作用。     

IL-1RA对急性排斥期大鼠角膜移植物TRAIL及其受体DR4表达的影响

目的研究白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)对急性排斥期角膜移植物肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其死亡受体-4(DR4)表达的影响。方法建立大鼠同种异体穿透角膜移植模型，设生理盐水处理组和IL-1RA治疗组。免疫组织化学法检测急性排斥期角膜植片TRAIL及DR1表达，并以正常大鼠角膜作对照。结果TRAIL及DR4在正常角膜均有表达，主要分布于上皮层。急性排斥期角膜植片各层TRAIL及DR4表达均增高；与IL-1RA治疗组相比．生理盐水处理组TRAIL及DR4表达增高更明显。结论TRAIL及DR4的表达参与角膜移植免疫排斥反应的发生，IL-1RA可通过调节其表达抑制角膜移植免疫排斥反应。     

TRAIL联合顺铂诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的作用

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是体内天然的抗肿瘤药物,可由人体的免疫系统正常表达,目前在美国TRAIL已进入临床Ⅱ期研究阶段[1].本课题组在以往研究中发现,TRAIL在胶质母细胞瘤诱导凋亡过程中,发生凋亡抵抗而不能引起肿瘤细胞凋亡[2].因此,本文将研究TRAIL和化疗药物顺铂对非小细胞肺癌细胞联合诱导凋亡的作用,为TRAIL作为新药开发提供更进一步的理论依据,此方面研究国内还未见相关报道.     

HIV/HCV混合感染患者肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体水平分析

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体在艾滋病病毒(HIV)/丙型肝炎病毒(HCV)混合感染者发病机制中的作用。方法用流式细胞术检测DR4~+CD4~+T淋巴细胞(CD4~+T淋巴细胞简称CD4细胞)、DR5~+CD4~+T细胞、TRAIL~+CD4~+T细胞的比例,CD4细胞计数;用酶联免疫吸附试验检测血浆可溶性TRAIL(s TRAIL)浓度;用荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定血浆HIV、HCV核糖核酸载量。结果混合感染者DR5~+CD4~+T细胞比例高于HCV单纯感染者(P=0.03),与HIV单纯感染者相比无统计学差异(P 0.05)。未接受高效抗反转录病毒治疗(HAART)的HIV单纯感染者的sTRAIL浓度高于接受HAART的HIV单纯感染者(P 0.01)。sTRAIL浓度与HIV病毒量呈正相关(r=0.631,P 0.01);DR5~+CD4~+T细胞比例与CD4细胞计数呈正相关(r=0.377,P 0.01)。结论在HIV感染状态下,CD4细胞可能对TRAIL诱导的凋亡更加敏感,而混合感染HCV后对CD4细胞凋亡的进一步影响或许并不涉及TRAIL及其受体。     

TRAIL真核表达质粒诱导胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)真核表达质粒对U251胶质瘤细胞凋亡的诱导作用。方法构建人TRAIL基因114-281胞外段肽链相应基因序列(504bp)的真核表达质粒;构建荷U251胶质瘤裸鼠模型,随机分组给药后,观察肿瘤生长情况,应用透射电镜技术,分析TRAIL真核表达质粒抗肿瘤作用。结果质粒组和质粒 化疗组肿瘤生长受到抑制。超微结构提示为凋亡改变。结论TRAIL真核表达质粒可以诱导U251胶质瘤细胞凋亡,与化疗药物联合应用后作用更明显。     

高血压脑出血患者外周血中TRAIL及其受体的研究进展

高血压脑出血(hypertensive intracerebral hemorrhage,HICH)患者颅内血肿继发性脑水肿以及继发性脑血管痉挛等病理生理改变是导致预后欠理想的一个重要因素。其预后尚欠缺临床指标。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是继肿瘤坏死因子(TNF)后发现的具有诱导细胞凋亡能力的细胞因子配体,在多种组织和细胞中广泛表达。其与HICH形成过程有一定的联系。但是TRAIL及其受体与HICH之后发生的机体各种病理生理改变以及预后的关系尚不明确。该文对HICH患者外周血中TRAIL及其受体的研究进展作一综述。     

白藜芦醇增敏TRAIL对肺癌细胞PC9的凋亡机制研究

目的观察白藜芦醇(resveratrol,RES)增敏肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducting ligand,TRAIL)对人肺癌细胞PC9细胞株的促凋亡作用,并探讨其机制。方法取对数生长期的人肺癌细胞PC9细胞,MTT法检测不同浓度的RES和TRAIL对PC9细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测不同浓度的RES和TRAIL对PC9细胞的凋亡,Western blot法检测不同浓度的RES作用PC9细胞后死亡受体4(Death receptor 4 DR4)的表达变化。结果 RES对人肺癌细胞PC9细胞有明显增殖抑制作用,且呈剂量依赖性,联合TRAIL后可显著促进PC9的凋亡率,不同浓度的RES作用24h后,可显著上调DR4的表达。结论 RES增敏TRAIL对人肺癌PC9细胞的抑制作用明显,其凋亡机制可能是与上调DR4有关。     

甲胎蛋白调节肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体2表达及其对Bel 7402细胞耐受该配体的影响

目的 研究甲胎蛋白(AFP)对肝癌细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体-2(DR5)表达及其在肝癌细胞耐受TRAIL中的作用.方法 用Western blot法分析全反式维甲酸(ATRA)处理人肝癌细胞株Bel 7402细胞24 h后DR5表达的变化;免疫共沉淀(Co-IP)技术研究AFP与维甲酸受体(RAR)-β相互作用;激光共聚焦显微镜观察AFP与RAR-β的细胞共定位; RNA干扰技术抑制Bel 7402细胞AFP表达,再用ATRA处理24h后检测细胞内DR5表达的变化;用pcDNA3.1质粒和人AFP基因连接构建表达AFP的载体(称为pcDNA3.1-afp),然后转染到不表达AFP的人肝癌细胞株HLE细胞;细胞生长状况用四甲基偶氮唑盐法检测.组间比较用f检验进行统计学分析.结果 Bel 7402和HLE细胞低表达DR5,ATRA(160μmol/L)处理24h后能促进肝癌细胞DR5表达; Co-IP技术研究显示AFP能与RAR-β结合;共聚焦显微镜观察发现AFP与RAR-β共定位于细胞质;干扰AFP表达后,Bel 7402细胞的DR5表达明显提高,抑制AFP表达后,ATRA能显著促进Bel 7402细胞内DR5的表达,并增加Bel 7402细胞对TRAIL的敏感性;转染pcDNA3.1-afp载体后,HLE细胞内的AFP能与RAR-β结合,并发现pcDNA3.1-afp载体能对抗TRAIL诱导HLE细胞凋亡.结论 Bel 7402细胞内表达的AFP具有抑制DR5表达的生物学功能;AFP可能通过抑制RAR-β入核调节DR5的表达;细胞内高表达的AFP是导致Bel 7402细胞耐受TRAIL诱导细胞凋亡的重要原因.     

TRAIL诱导大鼠肝星状细胞系HSC-T6凋亡及机制研究

目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）诱导肝星状细胞凋亡情况及调控机制。方法用RT-PCR检测大鼠肝星状细胞（HSC-T6）中α-SMAmRNA和DR5mRNA的表达;MTT比色法和流式细胞术检测外源性TRAIL对HSC-T6细胞增殖和诱导细胞凋亡的影响;采用Western blot检测Bax、Caspase3蛋白的表达。结果培养的HSC-T6细胞表达α-SMA mRNA和DR5mRNA随作用时间的延长逐渐增加,TRAIL可以抑制其细胞增殖。TRAIL与对照组比较可以诱导活化的HSC-T6细胞凋亡明显增加（P〈0.05）,Western-blotting分析显示TRAIL作用下,HSC-T6细胞中的线粒体Bax蛋白、细胞浆Caspase3蛋白表达均上调。结论外源性TRAIL可诱导活化的HSC-T6细胞凋亡,可能与DR5及线粒体Bax表达上调有关。     

结肠癌中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体的表达

背景：肿瘤坏死因子(17NF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)是最近发现的TNF家族新成员，可诱导许多恶性肿瘤细胞凋亡。已知TRAIL是通过其受体起作用的，因此肿瘤对TRAIL受体的表达状况，决定了其对TRAIL的敏感性。目的：检测TRAIL受体(R1、R2、R3、R4)在结肠癌组织中的表达，为TRAIL应用于结肠癌的临床治疗提供理论基础。方法：取16例新鲜结肠癌组织提取mRNA，用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测TRAIL受体的表达。结果：12例结肠癌组织仅表达TRAIL-R1、R2，不表达R3、R4，而4例结肠癌组织除表达R1、R2外，还表达R3。结论：结肠癌组织表达TRAIL受体，多数仅表达R1、R2，但也有的除表达R1、R2外，还表达R2。TRAIL可能在结肠癌细胞凋亡中起重要作用。     

凋亡与桥本甲状腺炎

在探讨桥本甲状腺炎(HT)发病机制的研究中,近来认为死亡受体/肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)可导致甲状腺滤泡细胞破坏。根据目前报道,TRAIL仅仅特异性地作用于甲状腺上皮细胞,而不同于Fas/FasL还可造成甲状腺成纤维细胞和血管平滑肌细胞的损害。结合HT病纤维变性的临床症状,TRAIL致甲状腺滤泡细胞的凋亡中似乎比FasL更具有说服力。bcl-2的作用需进一步研究。     

TRAIL体外诱导人肝星形细胞LX-2凋亡作用及调控机制

目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）诱导肝星形细胞凋亡情况及调控机制。方法用RT-PCR检测LX-2中α-SMAmRNA和DR5mRNA的表达;MTT比色法、流式细胞术检测外源性TRAIL对LX-2细胞增殖和诱导细胞凋亡的影响;采用Westernblot检测Bax、Caspase3表达。结果培养的LX-2表达α-SMAmRNA和DR5mRNA逐渐增加,TRAIL可以抑制其细胞增殖,与剂量相关（P〈0.05）。与对照组比较,TRAIL诱导活化的LX-2细胞凋亡明显增加（P〈0.05）,Western blot分析显示TRAIL作用下,LX-2线粒体Bax、细胞质Caspase3表达上调。结论外源性TRAIL可以诱导活化的LX-2凋亡,其机制与DR5及线粒体Bax表达上调有关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体在特发性炎性肌病患者骨骼肌的表达

目的 通过检测TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体DR4、DR5、DCRI、DCR2在特发性炎性肌病(IIM)患者骨骼肌组织中的表达,探讨TRAIL系统在IIM发病机制的作用和意义.方法 选IIM患者肌活榆标本36份,其中多发性肌炎(PM)13份,皮肌炎(DM)23份,另选9份骨科外伤手术患者骨骼肌组织标本作对照.用免疫组化法检测TRAIL及其受体在对照组和IIM患者骨骼肌组织中的表达水平.结果 (I)对照组和IIM患者骨骼肌细胞上均有TRAIL及其受体DR4、DR5、DCR1、DCR2表达,IIM患者骨骼肌细胞上TRAIL、DR4、DCR2表达明显增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P值均小于0.05).(2)IIM患者肌内膜和间质血管周围浸润的淋巴细胞以表达TRAIL和DCR1为主,少量表达DR4,未见DR5、DCR2表达.(3)有吞咽困难的患者病变肌组织TRAIL、DR4、DCR2表达水平明显升高.ESR升高的患者DCR2表达水平较高.结论 IIM患者受累肌组织中TRAIL及其受体的表达明显增加,提示TRAIL系统可能在IIM肌细胞损伤过程中发挥重要作用.     

西黄丸含药血清增加TRAIL对RBE细胞的抑瘤作用及其机制

[目的]探讨西黄丸含药血清与肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)单独或联合对人胆管癌细胞RBE增殖和凋亡的影响及其机制。[方法]制备高、中、低剂量西黄丸含药血清;人胆管癌细胞RBE分别用西黄丸含药血清、人重组可溶性TRAIL蛋白(rsTRAIL)及两者联合处理;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;分别用免疫荧光染色结合流式细胞术和RT-PCR检测TRAIL R1/DR4和TRAIL R2/DR5在细胞表面及mRNA水平的表达。[结果]高剂量西黄丸含药血清可以抑制RBE细胞增殖,诱导其凋亡,较对照组差异有统计学意义(P0.01);中、低剂量西黄丸含药血清未见上述抑瘤作用;rsTRAIL以剂量依赖性方式抑制RBE细胞增殖,诱导其凋亡;低剂量西黄丸含药血清联合rsTRAIL处理后,RBE细胞增殖抑制率和凋亡率明显高于单用rsTRAIL组,比较差异有统计学意义(P0.05)。低剂量西黄丸含药血清单独或联合rsTRAIL作用于RBE细胞36h后,死亡受体TRAIL R1/DR4和TRAIL R2/DR5在细胞表面和mRNA水平的表达均较对照组细胞明显增强,差异均有统计学意义(P0.01)。[结论]西黄丸含药血清增强TRAIL对人胆管癌细胞RBE的增殖抑制和凋亡诱导效应,其机制可能与西黄丸含药血清上调RBE细胞TRAIL死亡受体表达相关。