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相似文献
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1.
目的比较不同实验诊断方法在丙型肝炎(丙肝)抗体检测中的应用价值,并探讨HCV RNA定量与ALT指标之间的关系。方法对105例增强化学发光法(CIA)检测丙肝抗体初筛结果呈阳性(S/Co>1)的标本,分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量聚合酶链反应(RFQ-RT-PCR)进行检测,并对可疑结果(①CIA检测结果S/Co在1~8之间的标本,②ELISA检测结果呈阴性的标本)采用HCV RIBA3.0进行确认;应用OLYMPUS AU-5400全自动生化仪及其生化检测试剂检测全部标本ALT指标。结果ELISA及RFQ-RT-PCR方法检测样本阳性率分别为93.33%和70.48%;对可疑标本经HCV RIBA3.0确认试验显示,2例结果呈阳性(分别为NS3、HCV-C和NS3、NS4阳性),1例为阴性,4例仍为可疑(其中1例HCV RNA>103copies/ml);HCV RNA含量呈阳性的样本中,ALT异常率与HCV RNA含量间呈正相关(r=0.96,P<0.01),而ALT数值的变化与HCV RNA含量并无相关性(r=0.19,P>0.05)。结论第三代ELISA诊断试剂盒检测丙肝抗体同样具有较高的灵敏度,2种检测方法均可能存在假阳性或假阴性情况;RFQ-RT-PCR检测结果阳性率低于CIA与ELISA检测结果;在临床诊断中丙肝抗体的检测应与荧光定量聚合酶链反应一起使用,以提高临床丙肝诊断的准确率。  相似文献   

2.
颜景欣 《山东医药》2006,46(25):61-62
采用EIA法和RT—PCR技术,对ALT正常、HCV阳性无偿献血者与急慢性丙肝感染患者进行单片段HCV抗体、HCV—RNA检测。结果显示,C、NS3抗体出现较早,检出率、反应性较强,对丙肝有诊断价值。慢性丙肝NS4、NS5抗体检出率较高,RT—PCR检出率低于抗体检测,可发现早期感染者。抗-E1和抗-E2抗体阳性率明显低于其他抗体,提示膜区具有保护性。  相似文献   

3.
目的 了解丙型肝炎病毒(HCV)载量与HCV抗体(抗-HCV)滴度及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平的关系.方法 采用双抗原夹心酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测抗-HCV;用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测436例抗-HCV阳性者的HCV RNA定量,同时检测ALT水平.用SAS9.0软件进行分析.结果 HCV RNA阳性率随S/CO值的增大而增高,当S/CO值在11.965时,敏感性为80.83%,特异性为70%;HCV RNA载量与ALT水平呈正相关(r=0.234 10,P<0.05),HCV RNA介于104~105IU/ml时ALT异常率最高,说明异常ALT水平在不同HCV RNA分组中存在统计学差异(P<0.05);随着HCV RNA载量的升高,ALT异常率升高,但以中病毒载量组最明显(χ2=58.4480,P<0.05).结论 抗-HCV滴度越高,HCV RNA阳性率越高;HCV RNA是反映HCV复制的可靠指标,结合ALT结果可帮助了解HCV在体内的复制情况.  相似文献   

4.
患者,男性,49岁,1992年输血1次.1999年查体发现抗HCV抗体阳性,肝功正常,无不适,未治.2006年9月检测肝功ALT即达178 IU/L,AST190 IU/L,抗HCV阳性,HCV RNA定量8.96×106copies/ml;空腹血糖6.1mmol/L(正常值3.89~6.11mmol/L).  相似文献   

5.
荧光定量PCR法在丙型肝炎病毒核糖核酸检测中的应用   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的:通过与荧光半定量PCR及传统逆转录PCR(RT-PCR)比较,探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)在丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)检测中的应用价值。方法:采用FQ-PCR、荧光半定量PCR及RT-PCR三种方法同步检测180例丙型肝炎患者HCV RNA含量,所得结果采用χ^2检验。结果:FQ-PCR在血浆中及单个核细胞中的阳性检出例数最多,分别占78.3%和83.7%。无论是在血浆中或单个核细胞测定,FQ-PCR阳性检出率均明显高于同步检测的荧光半定量PCR及RT-PCR(P〈0.01)。以RT-PCR为标准,当HCV RNA水平在10^3~5copies/ml时,FQ-PCR和荧光半定量PCR阳性检出水平相一致(P〉0.05),明显高于RT-PCR(P〈0.01)。当HCV RNA水平在10^6~7cop-ies/ml时,3种检测方法的阳性检出率基本相同(P〉0.05)。结论:FQ-PCR检测HCV RNA具有高灵敏度、高特异性,且二次污染的可能性小。  相似文献   

6.
《肝脏》2018,(10)
目的检测获得母婴配对垂直传播丙型肝炎病毒(HCV)的概率,并分析其与肝功能转氨酶等影响因素之间的关系。方法收集2011年1月至2013年12月在南京市第二医院就诊的门诊及住院的母婴HCV患者共321例,采集空腹静脉血标本,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测HCV抗体(抗-HCV);实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HCV RNA;采用速率法,用电化学发光全自动免疫分析系统Cobas 6000及配套试剂检测ALT、AST,并进行统计学分析。结果纳入的34例孕妇HCV RNA为(5.20±0.88)lgIU/mL,34例产妇中有3例HCV RNA阴性,其余31例HCV RNA均为阳性;婴儿中HCV RNA阳性2例(龙凤胎,病毒载量分别为4.70×103 IU/mL和7.60×104 IU/mL),其余33例均为阴性。孕妇ALT及AST异常率为14.71%(5/34),母婴垂直传播的概率约为2.94%(1/34)。结论本研究母婴垂直传播的风险约为2.94%,垂直传播给婴儿的概率极小;多数产妇的病毒载量为106~107 IU/mL,且肝功能正常者居多,提示孕妇可能发生免疫耐受。  相似文献   

7.
目的:探讨痘苗病毒辅助的重组丙型肝炎病毒制备体系中生产细胞的选择.方法:将已构建好的质粒pT7HCV及pVHCV分别共转染BHK21,HepG2,SMMC7721细胞株,4 h后用痘苗病毒感染细胞,96 h后用RT-PCR检测HCV的RNA表达.用荧光定量PCR方法检测培养上清中RNA的拷贝数,并用Western blot检测结构蛋白E2以及非结构蛋白NS5的表达.结果:PT-PCR检测到各细胞株培养上清中均有HCV的RNA的存在,定量PCR显示RNA的拷贝数在BHK21,HepG2,SMMC7721细胞中的产量分别为(2.974±0.8)×107,(1.99±0.17)×105,(1.19±0.17)×105(copies/mL).Western blot检测到在这3种生产细胞中均有HCV非结构蛋白NS5的表达.结论:BHK21,HepG2,SMMC7721细胞株均可生产出重组丙型肝炎病毒颗粒,且以BHK21为生产细胞株时产量最高.  相似文献   

8.
目的:探讨丙型肝炎(丙肝)患者感染途径与其肝脏病变程度的关系。方法:根据感染途径的不同将210例丙肝患者分输血后丙肝(PTHC组)102例和散发性丙肝(SHC组)108例,应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术、酶联免疫吸附方法(ELISA)和自动生化速率法分别检测两组患者血清中HCV RNA含量、抗-HCV及ALT水平。结果:PTHC组HCV RNA阳性率和ALT的异常率均显著高于SHC组(χ2=23.39,P<0.01和χ2=13.73,P<0.01);HCV RNA阳性患者中,PTHC组的HCV DNA含量均值显著高于SHC组(t=4.29,P<0.01);ALT异常患者中,PTHC组的ALT水平均值显著高于SHC组(t=4.30,P<0.01)。HCV RNA的含量与ALT水平呈正相关(r=0.794,P<0.01)。结论:PTHC组患者病毒血症水平和肝脏功能损害的程度均显著高于SHC组,HCV不同的感染途径可导致患者不同的感染结果。  相似文献   

9.
目的了解安徽省艾滋病监测哨点丙型肝炎(简称丙肝)病毒(HCV)阳性者在各类人群的分布情况,并对HCV检测实验室常用的抗体检测与核酸检测方法进行分析。方法以2016年安徽省艾滋病监测哨点HCV酶联免疫法(EIA)检测阳性的370例标本为研究对象,进行HCV抗体补充试验,样本量足够的情况下进行HCV核糖核酸(RNA)定量检测,结合流行病学资料进行分析。结果对369例EIA检测HCV阳性标本进行重组免疫印迹试验(RIBA),阳性率99.2%(366例),其中注射吸毒人群占90.4%(331/366),暗娼占4.1%(15/366),性病门诊就诊者占3.0%(11/366),流动人口占1.4%(5/366),孕产妇占0.8%(3/366),男男性行为者占0.3%(1/366);344例样本量足够的标本进行了HCV RNA定量检测,阳性率82.6%(284/344),丙肝核酸阴转率为17.4%(60/344),对RIBA阳性结果的标本进行分条带统计,其中核抗原区出现概率最高,达到99.7%(365/366),其次为NS3-1、NS3-2和NS5,NS4出现概率最低,仅为85.8%(314/366)。结论我省艾滋病哨点中HCV感染和患病者集中在吸毒人群,是防治的最主要人群;HCV EIA检测阳性的标本可直接进行核酸检测,不必进行抗体补充试验,以减少检测成本;但核酸结果与抗体和临床症状相悖时也应考虑随访检测。  相似文献   

10.
目的了解新疆地区通过静脉吸毒途径HCV感染者体内HCV基因型特点、病毒载量以及二者相关性。方法收集317例有明确静脉吸毒史的丙肝患者血清,提取病毒RNA,荧光定量PCR检测血清HCV载量,并用逆转录—巢式PCR扩增HCV RNA阳性血清病毒cDNA片段进行酶切分析,测定基因型。结果本组114例血清HCVRNA阳性,其中基因1型90例,HCV RNA含量1×10(6.90±1.26)IU/ml;基因2型22例,HCV RNA含量1×10(5.12±0.77)IU/ml;2例未能分型。1型患者比例及病毒载量均高于2型(P均〈0.05)。结论新疆地区通过静脉吸毒途径HCV感染者体内病毒载量与其基因型有关,HCV1型病毒载量明显高于2型。  相似文献   

11.
目的了解丙型肝炎核心抗原(HCV-cAg)检测方法的敏感性及特异性,确定具有临床意义的S/CO值,探讨其在丙型肝炎诊断中的意义。方法使用ELASA方法检测丙型肝炎核心抗原,RT-PCR检测HCV RNA定量,观察不同S/CO值所对应的HCV RNA定量之间的关系,以HCV RNA为诊断金标准,列四格表做诊断实验。结果 HCV-cAg抗原检测的敏感性为87.05%,特异性为76.67%,阳性预测值为96.53%,阴性预测值为44.23%。结论 (1)随着HCV-cAg的S/CO值逐渐增大,其与HCV RNA阳性符合率明显增高,随着HCV-cAg的S/CO值减小,其与HCV RNA阴性符合率明显增高;(2)S/CO值=2可以作为临床判断HCV感染病毒血症存在的一个标准;(3)本实验的敏感性和特异性较好,检测方法简单,可以作为丙型肝炎临床诊断的补充试验及筛查。  相似文献   

12.
目的:评价化学发光免疫分析(CLIA)测定丙肝病毒(HCV)抗体的方法学性能在血液筛查中的应用。方法:以辣根过氧化物酶(HRP)为酶标记物,以鲁米诺为发光底物,采用双抗原夹心法检测血样中的抗-HCV。建立抗-HCV化学发光酶免疫分析方法,与常规使用的抗-HCV酶联免疫分析方法(ELISA)同时检测20例发光值(RLU)大于14 000的抗-HCV血清阳性标本,再用荧光定量RT-PCR检测;每天用卫生部临床检验中心指定生产的HCV的质控血清对CLIA进行检测,建立自己实验室的该项目临界值浓度,连续6个月对HCV质控血清检测,计算S/CO值,统计分析精密度、CV;用EQA的质控物检测HCV抗体,进行标本符合率计算。结果:CLIA方法的灵敏度为0.02ng/mL,阳性符合率为100%,ELISA的阳性符合率为75.2%,荧光定量RT-PCR检测的阳性符合率为100%。结论:HCV抗体CLIA检测抗-HCV试验方法的敏感性、准确性、稳定性较好,能满足临床输血早期筛查,以排除假阳性,杜绝漏检的风险。  相似文献   

13.
目的 探讨丁型肝炎病毒(HDV)核酶在细胞内抑制丙型肝炎病毒(HCV)RNA的可能性。方法 针对HCV-5′NCR-C RNA的不同靶位构建了pC1-RzC1(107~113nt)、pC1-RzC2(268~274nt)、pC1-RzC3(345~351nt)3个HDV核酶重组真核表达载体,采用脂质体介导将它们转染至HCV阳性胎肝细胞中,通过荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞和培养上清液中的HCV RNA,初步探讨HDV核酶对HCV RNA的抑制活性。结果 (1)重组表达载体通过PCR、酶切和碱基序列测定证实了3组HDV核酶定向插入到真核表达载体。(2)免疫组织化学观察到HCV阳性胎肝细胞中HCV NS3、NS5抗原及逆转录-PCR法检测胎肝细胞及上清液中的HCV RNA正、负链,同时利用Light Cycler荧光PCR定量检测HCV RNA的含量,证明HCV感染胎肝细胞成功。(3)HCV阳性胎肝细胞中HDV核酶对全长HCV RNA的抑制活性,当剂量为0.5μmol/L时,pC1-RzC1、pC1-RzC2、pC1-RzC3抑制活性分别为53.2%、50.5%、10.6%(t=5.25,P<0.01)。pC1-RzC1连续1周作用于HCV阳性的胎肝细胞,结果显示第2~7天的抑制活性分别是60.7%、64.2%、68.4%、71.9%、78.8%、83.1%(t=15.34,P<0.01)。结论 pC1-RzC1、pC1-RzC2在HCV阳性胎肝细胞中对HCV RNA的抑制活性明显高于pC1-RzC3。  相似文献   

14.
维持血液透析的尿毒症病人乙型丙型肝炎病毒感染情况研究   总被引:29,自引:0,他引:29  
目的 了解北京地区 (东城、宣武、朝阳区 )接受规律性血液透析患者 ,乙型肝炎病毒 (HBV)和丙型肝炎病毒 (HCV)的感染情况及其相关因素。方法  1998年 3~ 12月在北京协和医院、朝阳医院等 4家医院血液净化中心 ,长期维持血液透析的尿毒症患者 2 2 5例 ,血透中心工作人员及健康献血者 5 0例为对照组。分别用PCR法和高敏PCR法检测HBVDNA、HCVRNA ,ELISA法检测乙肝两对半及丙肝抗体 ,并分析其与透析时间、输血、肝功能损害的关系。结果  2 2 5例血液透析病人中 ,HCVRNA阳性 37例 (16 4 %) ;HBVDNA阳性 3例(1 33%)。多元回归分析表明 :输血和透析时间是丙型肝炎感染的危险因素。共有 3 0 %(3/ 99)的病人同时感染乙肝和丙肝 ,均有肝功能的损害和临床症状 ,8 1%(8/ 99)HBcAb阳性患者同时合并HCV感染。结论 血液透析病人乙肝和丙肝感染远高于对照组 ,透析时间和输血次数是丙肝感染的危险因素 ,HBV和HCV同时感染问题值得重视。  相似文献   

15.
目的研究隐匿性丙型肝炎(OHC)的诊断及其临床表现和病理学特征。方法对11例肝功能异常的患者进行肝活检,采用免疫组化法检测HCV抗原;将组织裂解后提取核酸,采用套式RT-PCR法检测HCV RNA。结果11例患者血清ALT为87±9.6U/L,AST为68±7.4U/L;血清抗-HCV和HCV RNA阴性;肝组织病理学分级为G0S03例,G1S04例,GoSll例,G1S13例;免疫组化检测HCVAg(++)3例,(+++)8例,而HBsAg和HBcAg阴性;5例肝组织HCVRNA阳性者,HCV RNA〉1.0×10^3 copies/ml 2例,〉1.0×10^4copies/ml 3例;基因分型1b型3例,2a型2例。结论我国存在OHC患者,以1b和2a基因型为主。  相似文献   

16.
荧光RT-PCR法检测丙型肝炎病毒基因型   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的应用荧光RT-PCR方法对慢性丙型肝炎(CHC)患者血清进行HCV基因型分析。方法采用荧光RT-PCR方法与测序方法比较,对118例CHC阳性患者血清进行HCV RNA分型,比较两种方法分型结果的一致性;为了考察该方法的特异性,对98例慢性乙型肝炎(CHB)患者血清进行HCV RNA分型检测。结果在118例HCV RNA阳性血清标本中,用荧光RT-PCR方法检测有HCV基因1型79例(66.9%),2型29例(24.6%),1/2混合型8例(6.8%);另有2例(1.7%)HCV RNA定量为1×103IU/ml弱阳性标本未分出型。测序法分出1型81例(68.4%),2型29例(24.6%),1/2混合型6例(5.1%),与荧光RT-PCR方法一致2例(1.7%)HCV RNA定量结果为1×103IU/ml的阳性标本测序法未分出型。未发现其他基因型的病例。98例CHB患者血清检测结果均为阴性。结论荧光HCV基因分型的方法具有良好的敏感性、特异性、可重复性且省时省力,可选择该方法为临床诊断服务。  相似文献   

17.
丙型肝炎病毒感染的不同人群HCV RNA定量研究   总被引:7,自引:7,他引:0  
目的了解丙型肝炎病毒感染的不同人群血清HCV RNA水平,比较定性和定量PCR结果,探讨HCV RNA含量与血清ALT的相关性.方法采用荧光定量PCR和逆转录巢式定性PCR同时检测136例丙型肝炎病毒感染者血清HCV RNA,并测定定量PCR(+)者血清ALT.用相关系数分析HCV RNA含量与血清ALT的关系.结果定性PCR阳性率为80.88%,定量PCR阳性率为77.94%.两者相对符合率为94.12%.定量PCR(+)血清(106例)HCVRNA含量在107.04~1010.96拷贝·L-1.无症状献血员HCV RNA含量显著低于慢性丙型肝炎、肝硬变和肝细胞癌患者(P<0.05),肝细胞癌患者血清ALT水平显著低于慢性丙型肝炎(P<0.05).HCVRNA滴度与血清ALT呈正相关(r=0.61,P<0.01).结论定性和定量检测结果有很好的一致性.病毒复制水平上升在肝损伤和肝病进展中可能起重要作用.  相似文献   

18.
目的检测新疆地区丙型肝炎患者HCV-RNA水平并进行基因分型分析。方法 2015年7月至2017年10月石河子大学医学院第一附属医院感染性疾病科确诊的丙型肝炎患者153例,采集静脉血,采用RT-PCR法检测HCVRNA;采用ELISA法检测抗HCV抗体;采用PCR-反向点杂交法进行HCV基因分型,并比较不同传播途径HCV基因型及不同基因型丙型肝炎患者HCV-RNA水平和抗HCV水平;使用自动生化分析仪检测ALT和AST水平;使用血细胞分析仪检测Hb、PLT水平,并进行比较分析。结果 153例丙型肝炎患者共检出5种HCV基因型1b、2a、3b、3a和6a,以1b型所占比例较高,为60.13%;不同基因型HCV组丙型肝炎感染患者血HCV-RNA分别为(2.34±0.25)×103IU/mL,(1.35±0.14)×103 IU/mL,(1.62±0.17)×103 IU/mL,(1.29±0.13)×103 IU/mL和(1.44±0.15)×103 IU/mL,差异有统计学意义(FHCV-RNA=12.568,P0.05)。不同基因型抗-HCV分别为(12.67±1.29)S/CO、(11.62±1.20)S/CO、(10.20±1.05)S/CO、(8.66±0.85)S/CO和(11.75±1.20)S/CO,差异有统计学意义(F抗HCV抗体=10.352,P0.05);输血、血液透析、静脉药瘾、性途径及混合途径组1b所占比例分别为75.61%、71.88%、40.74%、50.00%和65.38%,与其他基因亚型组比较差异有统计学意义(P0.05);感染不同HCV基因型组ALT、Hb、PLT比较有统计学意义(FALT=4.549,FHb=5.467,FPLT=9.310,P0.05),AST水平差异无统计学意义(F=1.838,P0.05);1b型组ALT、Hb、PLT分别为(77.50±7.81)U/L、(143.02±14.04)g/L和(169.98±16.93)109/L,与其他基因型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论新疆地区丙型肝炎患者感染HCV基因型以1b为主,血中抗-HCV和HCV-RNA含量及ALT、Hb水平均与HCV基因型有关,可为丙型肝炎的个性化治疗提供参考依据。  相似文献   

19.
目的对温州地区无偿献血者的血液标本进行血清学与核酸联合检测,全面评估血清学与核酸检测(NAT)在降低输血相关传染性疾病中的互补性。方法对2014年10月至2015年6月,温州市中心血站采集的无偿献血者的血液标本,用酶联免疫吸附试验(ELISA)对血液传染性指标乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒(HCV)抗体、艾滋病病毒(HIV)抗体、苍白球螺旋体(TP)抗体进行检测,丙氨酸转氨酶(ALT)采用速率法,同时采用核酸检测技术对乙型肝炎病毒(HBV)DNA、HCV RNA、HIV RNA进行6人份三项目联合检测,并对检测结果进行分析。结果 33 736份血液标本中,ELISA(+)NAT(+)95份,其中HBsAg(+)NAT(+)72份,符合率60.5%;HCV抗体(+)NAT(+)13份,符合率11.2%;HIV抗体(+)NAT(+)10份,符合率30.3%。41份ELISA(-)核酸(+)样本,且均为HBV DNA阳性。ELISA(+)NAT(-)173份。ELISA双试剂阳性样本中,HBV、HCV、HIV S/CO≥5的样本组的核酸阳性符合率高于S/CO5的样本组。结论核酸检测能有效地降低输血传播疾病的发生,但也存在漏检的可能,不能完全取代血清学检测,只有两者有机结合才能真正保证血液的安全。  相似文献   

20.
目的探讨HEV核酸(HEV RNA)、HEV抗原(HEV Ag)、HEV抗体(HEV IgM抗体和HEV IgG抗体)在临床诊断HEV感染中的作用。方法收集在北京大学人民医院进行HEV IgM抗体和HEV IgG抗体检测的13992例标本,其中1924例HEV IgM抗体或HEV IgG抗体阳性。分别采用荧光PCR法进行HEV RNA和基因型检测,酶联免疫吸附试验方法进行HEV Ag、HEV IgM抗体和HEV IgG抗体检测,并检测ALT、AST、TBil和DBil水平。计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U检验。结果1924例标本中HEV IgM抗体阳性152例(7.9%),HEV IgG抗体阳性1897例(98.6%),HEV RNA阳性62例(3.2%),HEV Ag阳性55例(2.9%)。HEV IgM抗体阳性组中HEV RNA阳性率为40.8%(62/152),HEV Ag阳性率为36.2%(55/152)。HEV RNA阳性组中HEV Ag阳性率为88.7%(55/62)。HEV RNA阳性组(n=62)ALT、AST、TBil、DBil水平高于HEV RNA阴性组(n=90)(Z值分别为-7.609、-6.942、-5.815、-6.130,P值均<0.001),HEV Ag阳性组(n=55)ALT、AST、TBil、DBil水平明显高于HEV Ag阴性组(n=97)(Z值分别为-6.413、-5.786、-5.199、-5.545,P值均<0.001)。巢式PCR扩增测序结果显示58例HEV RNA阳性,4例阴性。HEV IgG抗体阳性高水平明显降低HEV Ag检测的S/CO值,甚至出现阴性结果。结论与HEV抗体相比,HEV Ag可以提高戊型肝炎的诊断水平,具有一定的临床意义;高水平的转氨酶或胆红素可以辅助诊断HEV感染;高水平的HEV IgG抗体会降低HEV Ag检测值,检测时应注意HEV Ag阴性时HEV IgG抗体值。  相似文献   

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