血管紧张素Ⅳ对糖尿病大鼠胆碱乙酰转移酶表达及认知功能的影响

目的 观察血管紧张素Ⅳ(AngⅣ)对糖尿病大鼠海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)表达及认知功能的影响.方法 38只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组和糖尿病+AngⅣ组,建立STZ糖尿病大鼠模型, Morris水迷宫测试大鼠学习和记忆能力,免疫组化观察大鼠海马ChAT的表达,RT-PCR检测ChAT mRNA水平的表达.结果 糖尿病+ AngⅣ组海马chAT及其mRNA表达与糖尿病组相比明显增高(P<0.05),糖尿病+ AngⅣ组大鼠学习和记忆成绩也明显优于糖尿病组(P<0.05).结论 AngⅣ对糖尿病大鼠认知功能有改善作用,其机制可能与ChAT表达增加有关.     

血管紧张素1-7对糖尿病大鼠海马胰岛素降解酶的表达及认知功能的影响

目的观察血管紧张素1-7对糖尿病大鼠海马胰岛素降解酶的表达及认知功能的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组、糖尿病+Ang-(1-7)组及糖尿病+Ang-(1-7)+A-779组,每组10只,腹腔注射STZ建立糖尿病大鼠模型。Morris水迷宫测试大鼠逃避潜伏期的时间和穿越目标区域的次数,RT-PCR和Western印迹检测大鼠海马胰岛素降解酶mRNA及蛋白的表达情况。结果与对照组相比,糖尿病组和糖尿病+Ang-(1-7)+A-779组逃避潜伏期时间延长(P<0.05),穿越目标区域次数减少(P<0.05),海马部位的胰岛素降解酶mRNA和蛋白的表达水平显著下降(P<0.05);与糖尿病组相比,糖尿病+Ang-(1-7)组大鼠逃避潜伏期时间和穿越目标区域次数的成绩明显改善(P<0.05),海马部位胰岛素降解酶的mRNA和蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。结论 Ang-(1-7)对糖尿病大鼠认知功能有改善作用,其机制可能与上调了胰岛素降解酶的mRNA和蛋白表达水平有关。     

姜黄素对Aβ诱导的老年痴呆大鼠海马胶质纤维酸蛋白表达的影响

目的通过观察姜黄素对Aβ1～40诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠空间学习记忆能力及海马区星形胶质细胞胶质纤维酸蛋白(GFAP)表达的影响,探讨姜黄素的作用机制。方法选择健康SD大鼠48只,分为空白对照组、AD对照组、姜黄素给药组,每组16只。Aβ1～40诱导大鼠认知障碍模型,采用Morris水迷宫测定大鼠的学习记忆能力。采用免疫组织化学方法检测GFAP蛋白表达,RT-PCR检测GFAP mRNA表达。结果姜黄素干预后AD大鼠空间学习记忆能力明显改善(P<0.05);与空白对照组相比,AD对照组大鼠脑组织海马区可见星形胶质细胞GFAP表达明显增多(P<0.05),姜黄素给药组大鼠脑组织海马区GFAP mRNA及免疫阳性细胞表达较AD对照组下降(P<0.05)。结论姜黄素能够改善Aβ1～40诱导的AD模型大鼠空间学习记忆障碍,其机制可能与降低GFAP的表达和抑制星形胶质细胞活性有关。     

苯那普利、缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏血管紧张素转换酶2表达的影响

目的观察糖尿病大鼠肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2)的表达及苯那普利、缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏ACE2表达水平的影响,初步探讨ACE2在糖尿病肾病发病机制中的作用。方法3月龄的SD雄性大鼠,腹腔内注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,随机分为3组,每组7只,分别为糖尿病模型组、苯那普利治疗组[10mg/(kg.d)]、缬沙坦治疗组[10mg/(kg.d)],SD雄鼠7只作为正常对照组。给药3月后,处死动物、留取标本,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定肾脏中ACE和ACE2 mRNA的表达水平,免疫组化法比较肾脏中ACE2蛋白的表达水平。结果与正常对照组相比,糖尿病模型组大鼠ACE、ACE2 mRNA表达分别下降30.7%、50.1%(P<0.05)。与糖尿病模型组比较,苯那普利组ACE mRNA的表达明显增加(P<0.01),ACE2 mRNA的表达无明显差异;缬沙坦组ACE mRNA的表达治疗后没有明显变化,而ACE2 mRNA和蛋白的表达均有明显增加,分别增加68.7%和69.8%(P<0.01)。结论1)肾脏局部ACE2表达水平的降低可能是糖尿病大鼠肾损害的发病机制之一;2)ARB可能是通过增加肾脏局部ACE2的表达而发挥肾脏保护作用。     

补阳还五汤对血管性痴呆大鼠学习记忆和海马N-甲基-D-天冬氨酸受体表达的影响

目的观察补阳还五汤对血管性痴呆(VaD)大鼠海马CA1区N甲基D-天冬氨酸受体表达及长时程增强(LTP)的影响及机制。方法选择SD大鼠144只,随机分为假手术组、VaD模型组(模型组)、尼莫地平组和补阳还五汤组,每组36只。采用四血管阻断法制备VaD大鼠模型。Morris水迷宫实验评估大鼠学习记忆功能,大鼠海马CA3-CA1区记录海马CA1区LTP,免疫组织化学、Western blot法和实时荧光定量PCR检测大鼠海马NR1、NR2A、NR2B蛋白和mRNA表达的变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长和平均探索次数减少(P<0.05),大鼠海马CA1区LTP明显降低(P<0.05),CA1区NR1、NR2A、NR2B蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,补阳还五汤组、尼莫地平组大鼠学习、记忆成绩明显提高(P<0.05),海马CA1区NR1、NR2A、NR2B蛋白及mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论补阳还五汤可上调脑缺血再灌注海马CA1区脑组织NR1、NR2A、NR2B蛋白的表达,促进LTP,进而改善VaD大鼠学习记忆能力。     

银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠模型学习记忆及PSD-95表达的影响

目的观察银杏叶提取物对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力和海马组织PSD-95蛋白的影响。方法将大鼠随机分为模型组,银杏叶提取物干预组,假手术组和正常组,造模14 d后用水迷宫测定各组大鼠的学习、记忆功能,将大鼠断头取脑后,用TUNEL法检测海马组织神经元情况,并用蛋白印迹方法观察大鼠海马PSD-95蛋白表达。结果模型组大鼠存在记忆障碍,而银杏叶提取物干预组大鼠学习记忆能力明显改善,与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠海马组织有大量凋亡神经元,与假手术组及正常组相比有明显统计学意义(P<0.01),与银杏叶提取物干预组相比也有显著差异(P<0.05)。银杏叶提取物干预组海马CA1及CA3区PSD-95蛋白明显增加,与模型组比较有统计学意义(P<0.01)。结论银杏叶提取物明显促进VD大鼠海马组织PSD-95蛋白表达,抑制海马神经元凋亡,改善VD大鼠学习记忆能力,对VD大鼠有显著的治疗作用。     

AM251对糖尿病脑病大鼠认知功能和海马区细胞凋亡的影响

目的 观察AM251对糖尿病脑病大鼠认知功能及海马区神经细胞存活的影响.方法 将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病脑病组、AM251治疗组,除正常对照组外,其他各组腹腔注射链脲佐菌素65 mg/kg复制糖尿病脑病模型,AM251治疗组分别给予AM251 0.5 mg/kg腹腔注射,每天一次,其余两组给予等量生理盐水腹腔注射,1个月后进行外迷宫测试其学习记忆能力,断头取脑,免疫组织化学法、Western印迹法分别检测N-乙基顺丁烯二酰亚胺敏感性融合蛋白(NSF)蛋白表达的变化,TUNEL法检测海马区神经细胞凋亡.结果 糖尿病脑病组大鼠学习记忆能力明显低于正常对照组(P＜0.05),TUNEL阳性细胞增多(P＜0.05),酪氨酸磷酸化指标NSF表达增加(P＜0.05),AM251治疗组大鼠较糖尿病组学习成绩升高(P＜0.05),TUNEL阳性细胞减少(P＜0.05),NSF表达减少(P＜0.05).结论 NSF表达增高可能与糖尿病大鼠海马神经元凋亡及认知功能障碍有关,AM251可以通过降低NSF的表达,减少神经元凋亡,从而对糖尿病大鼠学习与记忆障碍有一定程度的改善.     

泛素和凋亡相关因子在糖尿病大鼠脑内的表达

目的 探讨持续高血糖状态对大鼠学习记忆能力的影响以及泛素和凋亡相关因子表达的变化,为糖尿病脑病的发病机制提供相关依据.方法 雄性SD大鼠,随机分为正常对照组和糖尿病模型组,腹腔注射链脲佐菌素(streptozotoein,STZ)建立糖尿病大鼠模型.电迷宫法测试各组大鼠的学习记忆能力;尼氏染色和免疫组织化学法观察大鼠额叶皮质和海马区的组织学变化.原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠额叶皮质和海马区凋亡细胞数;免疫印迹法(Western-blot)检测大鼠额叶皮质和海马区Bcl-2、P53蛋白的表达;反转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测大鼠额叶皮质和海马区泛素基因的表达.结果 糖尿病组大鼠学习记忆能力明显下降,额叶皮质和海马区神经细胞凋亡数高于对照组,泛素、P53表达水平明显高于对照组,而Bcl-2表达显著减少(P＜0.05).结论 高血糖状态下大鼠额叶皮质与海马区的泛素、P53表达增加,Bcl-2表达降低,大鼠额叶皮质和海马区凋亡细胞数明显增多,从而引起大鼠学习记忆能力下降.     

丝胶对糖尿病大鼠海马一氧化氮含量及一氧化氮合酶表达的影响

目的 观察彩色蚕茧提取物.丝胶对糖尿病大鼠海马一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)表达的影响.方法 48只雄性SD大鼠随机分为4组,正常对照组、糖尿病模型组、丝胶组和二甲双胍组,每组12只.模型组、丝胶组和二甲双胍组大鼠均采用2%链脲佐菌素连续腹腔注射建立糖尿病动物模型,以血糖≥16.7 mmol/L作为成模标准.待模型成功建立后,丝胶组和二甲双胍组大鼠分别给予丝胶(2.4 g·kg-1·d-1)和二甲双胍(55.33 mg·kg-1·d-1)灌胃,连续35 d.采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠的空间学习记忆能力,免疫组化染色观察海马神经元神经型一氧化氮合酶(nNOS)的表达,硝酸还原酶法检测海马NO的含量.结果 与正常大鼠比较:糖尿病模型大鼠的空间学习记忆能力明显下降.海马神经元nNOS的表达以及海马NO的含量明显升高(P<0.05,P<0.01).与糖尿病模型大鼠比较:丝胶组和二甲双胍组大鼠的空间学习记忆能力明显提高,海马神经元nNOS的表达以及海马NO的含量明显降低(P<0.05,P<0.01);且丝胶组与二甲双胍组比较无明显差异(P>0.05).结论 丝胶可通过减轻糖尿病时过量NO对海马神经元的毒性提高糖尿病大鼠的学习记忆能力,从而改善糖尿病时的认知功能障碍.     

针刺耳穴对全脑缺血大鼠学习记忆能力和海马脑源性神经营养因子表达的影响

目的探讨针刺耳穴对全脑缺血大鼠的治疗机制。方法选择45只SD大鼠,随机分为对照组、模型组和针刺组,每组15只;模型组和针刺组大鼠用改良的4血管阻塞法建立血管性痴呆(VaD)大鼠模型,针刺组造模后针刺"肾"、"心"耳穴4周;对照组只做手术,但不阻断血管。用Morris水迷宫检测3组大鼠学习记忆能力,免疫组织化学SABC法检测海马神经元脑源性神经营养因子(BDNF)阳性表达。结果模型组大鼠学习记忆能力较对照组明显减退(P<0.05,P<0.01),海马神经元BDNF阳性表达较对照组明显增多(P<0.05);针刺组大鼠学习记忆能力较模型组明显提高(P<0.05),海马神经元BDNF阳性表达较模型组和对照组均明显增多(P<0.05,P<0.01)。结论针刺耳穴改善全脑缺血大鼠学习记忆能力,其机制可能与针刺上调VaD大鼠海马神经元BDNF的表达有关。     

脑通胶囊对VD大鼠海马组织NMDA受体1亚基和2B亚基mRNA表达的影响

目的观察脑通胶囊对血管性痴呆(VD)模型大鼠学习记忆、海马组织N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体1亚基和2B亚基mRNA表达的影响。方法采用改良的四血管法(14-VO)制备VD模型,Morris水迷宫测定大鼠学习、记忆能力,实时荧光定量PCR检测NMDA受体1亚基和2B亚基mRNA的表达情况。结果与模型组比较,脑通胶囊大、中剂量组逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增加,NMDA受体1亚基mRNA表达降低,NMDA受体2B亚基mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论脑通胶囊可降低NMDA受体1亚基mRNA的表达,提高NMDA受体2B亚基mRNA的表达,从而改善VD大鼠学习、记忆能力。     

慢性脑缺血大鼠海马区Cdc42表达及其与认知功能障碍的相关性

目的研究慢性脑缺血大鼠海马组织中细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)表达的变化,探讨其在慢性脑缺血所致认知功能障碍中可能发挥的作用。方法大鼠40只,随机分为假手术组、持久性双侧颈总动脉结扎(2VO)8、10、12 w组,每组各10只。应用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,用免疫组织化学及Western印迹两种方法检测各组大鼠海马区Cdc42的表达。结果 Morris水迷宫显示手术组大鼠较假手术组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05);免疫组化及Western印迹均显示手术组大鼠海马区Cdc42表达明显低于假手术组(P<0.05)。结论 Cdc42表达量的降低可能参与了慢性脑缺血所致认知功能障碍的形成。     

银杏叶提取物对慢性脑低灌注大鼠认知功能的影响

目的观察银杏叶提取物(EGB)对慢性脑低灌注大鼠认知功能的影响,及对海马CA1区脑源性神经营养因子(BDNF)和N-甲基-D-门冬氨酸受体-2B(NMDAR-2B)表达的调节作用,探讨EGB保护认知功能的可能机制。方法将34只Wistar大鼠随机分为正常对照组(6只)、模型组(6只)、EGB高剂量组(8只)、EGB低剂量组(8只)和石杉碱甲组(6只)。采用Morris水迷宫系统检测各组大鼠学习记忆能力,采用免疫组织化学法观察大鼠海马CA1区BDNF和NMDAR-2B的表达。结果永久性结扎双侧颈总动脉术后第1个月时,各组大鼠学习记忆能力比较,差异无统计学意义(P0.05);术后第2个月时,与模型组比较,其他4组学习记忆能力明显下降,差异有统计学意义(P0.01),海马CA1区BDNF和NMDAR-2B表达明显增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论海马CA1区BDNF和NMDAR-2B表达降低可能是大鼠认知功能障碍的诱因之一。EGB和石杉碱甲在改善慢性脑低灌注大鼠认知功能障碍方面具有同等效应。     

红景天对阿尔茨海默病模型大鼠行为学及海马区突触相关蛋白的影响

目的探讨红景天对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠行为学能力及海马组织突触后致密蛋白(PSD-95)、shank-1蛋白表达的影响及其治疗AD的可能作用机制。方法采取腹腔注射D-半乳糖+灌胃AlCl3+一次性注射东莨菪碱法制备AD大鼠模型,用红景天采取灌胃方式对实验大鼠进行干预,并以喜得镇作为对照,观察其干预效果。用Morris水迷宫法检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组化法检测大鼠海马区PSD-95、shank-1蛋白水平的变化。结果模型组与空白组相比,学习记忆能力明显减退(P<0.01),PSD-95、shank-1蛋白水平下降(P<0.01);中药组与模型组相比,学习记忆能力显著改善(P<0.01),PSD-95、shank-1蛋白水平提高(P<0.01);中药组和西药组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论红景天明显增高AD大鼠海马组织中PSD-95、shank-1蛋白水平,从而影响突触可塑性,这可能是其改善AD大鼠学习记忆功能的作用机制之一。     

2型糖尿病大鼠睾丸PCNA表达的变化及丝胶的保护作用

目的观察2型糖尿病(T2DM)大鼠睾丸PCNA表达的变化及丝胶的保护作用。方法 30只雄性SD大鼠随机分为3组(n=10),正常对照组、模型组和丝胶组。链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM动物模型,以血糖≥16.7 mmol/L作为成模标准。模型成功建立后,模型组大鼠不再做任何处理;丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4 g.kg-1.d-1)灌胃35 d。ELISA法检测大鼠血清睾酮水平;SP免疫组化法和RT-PCR法分别检测睾丸PCNA蛋白和mRNA的表达。结果模型大鼠血清睾酮水平、睾丸PCNA蛋白和mRNA的表达均明显低于正常对照组大鼠(P<0.01);丝胶组大鼠血清睾酮水平、睾丸PCNA蛋白和mRNA的表达明显高于模型大鼠(P<0.01,P<0.05)。结论丝胶可通过上调睾丸PCNA的表达和提高血清睾酮水平,改善糖尿病大鼠的生精功能。     

高压氧治疗对一氧化碳中毒后迟发性脑病大鼠海马组织中炎症因子表达的影响

目的研究高压氧(HBO)治疗对一氧化碳中毒(COP)后迟发性脑病(DEACMP)大鼠海马组织中炎症因子表达的影响。方法将60只雄性SD大鼠随机分为空白对照组(NC组)、迟发性脑病组(DEACMP组)、高压氧治疗组(HBO组),每组16只,另12只备用补充。Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力;HE染色法观察各组大鼠海马组织神经元形态变化,评估损伤程度;Western blot法检测各组大鼠海马组织中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关蛋白p38MAPK、p65NF-κB表达水平;Elisa法检测各组大鼠海马组织中的白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的表达水平。结果 (1)在第7 d、14 d、20 d时,与NC组相比,DEACMP组、HBO组大鼠学习能力均出现不同程度下降(F=418.300、359.700、530.300,均P <0.01);HBO组学习能力均较DEACMP组高(P <0.05)。在第20 d时,DEACMP组、HBO组大鼠记忆能力出现不同程度下降(F=34.690,P <0.01);HBO组记忆能力较DEACMP组高(P <0.05);(2)大鼠海马组织HE染色发现,与NC组相比,DEACMP组、HBO组大鼠海马组织神经元出现不同程度的损伤,神经元排列松散,胞质疏松,部分神经元出现坏死、凋亡,HBO组大鼠海马组织神经元损伤程度较DEACMP组轻;(3) Western blot检测发现,DEACMP、HBO组大鼠海马组织中p38MAPK蛋白、p65NF-κB蛋白表达水平较NC组升高(F=547.800、982.500,均P <0.01);HBO组大鼠海马组织中p38MAPK蛋白、p65NF-κB蛋白表达均较DEACMP组下降(均P <0.05);(4)DEACMP、HBO组IL-1β、TNF-α、IL-6表达水平均较NC组升高(F=55.200、96.200、81.790,均P <0.01);HBO组大鼠海马组织中IL-1β、TNF-α、IL-6表达水平均较DEACMP组下降(P <0.05)。结论 COP后,大鼠海马组织神经元出现不同程度损伤,可能与海马组织中MAPK通路相关蛋白p38MAPK、p65NF-κB及IL-1β、TNF-α、IL-6等炎症因子表达水平升高有关。高压氧治疗能够减轻DEACMP大鼠海马组织神经元损伤程度,提高学习记忆能力,可能与调控MAPK/NF-κB通路,减少下游炎症因子表达水平相关。     

大豆异黄酮对AD模型大鼠认知功能及脑内胆碱能系统的影响

目的:探讨大豆异黄酮(SIF)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠认知功能及脑内胆碱能系统的影响。方法:30只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和SIF组,每组10只。各组按规定剂量灌胃给药后观察大鼠学习记忆能力的改变、海马形态学的改变以及海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的变化。结果:1.与假手术组比较,模型组大鼠学习记忆能力明显下降(P0.01),与模型组相比,SIF组大鼠学习记忆能力有所提高(P0.05)。2.假手术组HE染色可见大鼠海马锥体细胞排列整齐、均匀,细胞结构完整,形态正常;模型组可见海马锥体细胞脱失、排列紊乱,结构不清,部分胞核固缩、深染;SIF组海马锥体细胞排列较整齐、均匀,结构尚清晰,形态基本正常。3.与假手术组比较,模型组海马ChAT活性明显降低(P0.05),AchE活性有增加趋势,但无显著差异(P0.05);与模型组比较,SIF组海马ChAT活性明显提高(P0.05),但AchE活性变化不明显(P0.05)。结论:SIF能够改善AD模型大鼠认知功能,提高大鼠脑内ChAT活性,提示药物的作用可能与胆碱递质合成增加有关。     

糖基化终末产物对大鼠肾皮质基质金属蛋白酶2活性和表达的影响

的　研究糖基化终末产物 (AGEs)对肾皮质基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )活性及其mRNA表达的影响。方法　用链脲佐菌素制备大鼠糖尿病模型。大鼠血清蛋白与 0 .5mol/L葡萄糖孵育制备AGEs,分静脉注射AGEs(AGEs组 )、静脉注射大鼠正常血清 (阴性对照组 )和未注射大鼠 (对照组 ) 3组进行观察。ELISA测定肾皮质和血清AGEs含量 ,RT PCR检测MMP 2、金属蛋白酶组织抑制物 2 (TIMP 2 )mRNA表达水平 ,酶谱法测定MMP 2活性。结果　糖尿病大鼠肾皮质AGEs含量明显升高 ,MMP 2mRNA表达下降 ,TIMP 2mRNA表达上调 (均P <0 .0 1)。AGEs处理组大鼠肾皮质AGEs含量明显升高 (P <0 .0 1) ,MMP 2活性也明显下降 (均P <0 .0 5)。结论　AGEs通过降低大鼠肾皮质MMP 2的活性及其mRNA表达及增加TIMP 2mRNA表达 ,由此减少肾小球细胞外基质 (ECM )降解 ,可能是导致糖尿病肾病ECM积聚的原因之一