单羧酸转运蛋白基因对肿瘤细胞内pH值及生长特性的调节作用

目的 以反义技术抑制肿瘤细胞的单羧酸转运蛋白基因第一亚型(MCT1)表达,观察其对肿瘤细胞内pH值(pHi)调节、乳酸转运及生长性质的影响.方法 (1)应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从人肺癌细胞系A549中扩增MCT1目的 基因片段,将克隆的基因片段反向插入逆转录病毒载体pLXSN,构建反义表达重组载体pLXSN-MCT1,并对其进行DNA测序验证.(2)通过电穿孔法将pLXSN、重组载体pLXSN-MCT1转染于肺腺癌细胞系A549中,经G418筛选转染细胞阳性克隆.用PCR方法 鉴定pLXSN-MCT1重组载体在基因组的转染整合及表达;以分光光度法测定细胞内pH及乳酸含量变化,并以细胞生长曲线研究细胞的生长情况.结果 (1)对所构建的重组载体进行双酶切电泳分析及DNA序列分析证明反义载体构建成功.(2)与未转染的A549细胞比较,转染MCT1反义表达重组体的细胞pHi降低、乳酸显著升高(P＜0.001);且细胞的生长受到明显抑制.结论 单羧酸转运蛋白MCT1基因在肿瘤细胞pHi调节、乳酸转运及细胞的生长中起着重要的调节作用.     

葡萄糖影响丁酸钠诱导结肠癌细胞凋亡和增殖抑制作用及其可能机制

目的观察葡萄糖对丁酸钠诱导结肠癌细胞凋亡和增殖抑制作用效果的影响,并探讨这种影响的可能机制。方法细胞生存率的检测采用MTT法,流式细胞仪法检测细胞凋亡。RT-PCR方法检测单羧酸转运蛋白1（MCT1）和葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）mRNA的表达情况。结果低葡萄糖浓度培养条件下可以诱导结肠癌细胞HT-29凋亡,并影响其生长,且葡萄糖能够明显抵制丁酸钠诱导凋亡和增殖抑制作用,同时葡萄糖轻度抑制GLUT1 mRNA表达,对MCT1 mRNA也有一定抑制作用。结论葡萄糖浓度变化能够明显影响丁酸钠诱导凋亡和增殖抑制作用,这种影响可能与葡萄糖和丁酸钠在细胞内浓度变化有关。     

Neuropilins-1和Neuropilins-2在人脑胶质瘤中的表达

目的探讨人脑胶质瘤组织中Neuropilins-1、2(NRP-1、2)的表达情况。方法采用免疫组织化学染色的方法检测不同病理分级的脑胶质瘤及5例正常脑组织中NRP-1及NRP-2的表达情况,并结合细胞学观察进行两者的相关性分析。结果 NRP-1及NRP-2在正常脑组织中均不表达,而在脑胶质瘤组织中的表达均明显增高(P<0.05);不同病理级别脑胶质瘤中NRP-1及NRP-2的表达不同,并随肿瘤级别的升高,其表达也明显升高(P<0.05)。结论 NRP-1/NRP-2的表达强度随脑胶质瘤恶性程度的增加而增强,与脑胶质瘤的发生发展密切相关。     

乳腺浸润性导管癌组织中Bag-1、Bcl-2、Bax的表达变化及意义

目的观察乳腺癌浸润性导管癌(IDC)组织中Bag-1、Bcl-2、Bax的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测85例IDC及其癌旁组织中的Bag-1、Bcl-2、Bax。结果 DC组织中Bag-1、Bcl-2、Bax阳性表达率分别为92.9%(79/85)、78.8%(67/85)、74.1%(63/85),癌旁组织中分别为58.8%(50/85)、58.8%(50/85)、67.1%(57/85)。IDC组织中Bag-1、Bcl-2阳性表达率与癌旁组织比较,P均<0.05。Bag-1表达与IDC肿瘤直径有关(P<0.05)。IDC组织中,Bag-1、Bcl-2表达呈正相关(r=0.512,P<0.05)。结论 IDC组织中Bag-1、Bcl-2高表达,二者在乳腺癌的发生发展中发挥作用。     

缺氧诱导因子1、葡萄糖转运因子1在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨缺氧诱导因子1（HIF-1α）、葡萄糖转运因子1（Glut1）在乳腺癌中的表达及其临床意义.方法 用免疫组化法检测20例正常乳腺组织、20例不典型增生乳腺组织、60例乳腺癌组织中HIF-1α、Glutl的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征的关系.结果 HIF-1α、Glutl在乳腺癌和不典型增生乳腺组织中的阳性率明显高于正常乳腺组织（P＜0.05）.在乳腺癌组织中HIF-1α、Glut1 蛋白阳性表达率与组织病理学分级、临床分期及淋巴结转移有关（P＜0.05）,但与肿瘤大小无关;HIF-1α、Glut1蛋白表达在乳腺癌组织中呈正相关（P＜0.05）.结论 HIF-1α和Glutl蛋白的过表达共同参与了乳腺癌的发生、发展.     

乳腺癌组织中CD147、p-ERK、nm23的表达变化及意义

目的观察细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)及肿瘤抑制因子(nm23)在乳腺癌组织中的表达变化及意义。方法采用免疫组化二步法检测70例乳腺浸润性导管癌(IDC组)、20例导管内癌组织(DCIS组)及10例乳腺腺病组织(腺病组)中的CD147、p-ERK及nm23蛋白,并分析其与乳腺癌临床病理参数的关系。结果 CD147、p-ERK蛋白阳性表达率IDC组>DCIS组>腺病组,nm23蛋白阳性表达率IDC组相似文献   

结肠癌组织中Beclin1及Bcl-2表达变化及意义

目的观察结肠癌组织中Beclin1、Bcl-2表达变化,探讨其意义。方法手术治疗的结肠癌患者97例,术中分别取肿瘤组织、癌旁组织、距离肿瘤边缘6 cm以上的正常结肠组织;免疫组化法检测各组织中的Beclin1、Bcl-2,分析二者与结肠癌临床病理参数的关系。结果结肠癌组织中Beclin1、Bcl-2的阳性表达率分别为80.4%、75.3%,癌旁组织分别为60.8%、64.9%,正常结肠组织分别为36.1%、26.8%;结肠癌组织Beclin1、Bcl-2阳性表达率均高于癌旁组织及正常结肠组织(P均<0.01)。Beclin1表达与结肠癌肿瘤浸润深度、肿瘤直径、TNM分期有关(P均<0.01);Bcl-2表达与结肠癌肿瘤直径、TNM分期有关(P均<0.05)。结肠癌组织中Beclin1、Bcl-2表达呈正相关(r=0.324,P<0.01)。结论 Beclin1、Bcl-2高表达与结肠癌的发生及恶性生长行为相关,可作为预后不良的判断指标。     

乳腺癌组织中EGFRvⅢ、Tubulin-α的表达变化及意义

目的观察乳腺癌组织中表皮生长因子受体三型突变体(EGFRvⅢ)、中心体相关微管蛋白α(Tubulin-α)的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测30例正常乳腺组织(NB组)、50例导管原位癌(DCIS组)和50例乳腺浸润性导管癌(IDC组)组织中的EGFRvⅢ、Tubulin-α。结果 IDC组EGFRvⅢ、Tubulin-α阳性表达率分别为70%(35/50)、74%(37/50),DCIS分别为38%(19/50)、64%(32/50),NB组分别为0、3%(1/30);各组间EGFRvⅢ阳性表达率两两比较,P均<0.05;IDC组、DCIS组Tubulin-α阳性表达率高于NB组(P均<0.05),但IDC组与DCIS组比较,P>0.05。乳腺癌组织中,EGFRvⅢ、Tubulin-α的表达呈正相关(r=0.909,P<0.01)。结论乳腺癌组织中EGFRvⅢ、Tubulin-α高表达,二者在乳腺癌的发生发展过程中发挥作用。     

Beclin1、p62和Ki-67在乳腺浸润性导管癌患者中的表达及意义

目的探讨自噬相关蛋白(Beclin)1、自噬底物蛋白(p62)和增殖指数(Ki-67)在乳腺浸润性导管癌(IDC)患者中的表达及意义。方法选取沈阳医学院附属中心医院病理科IDC标本79例作为实验组,随机选取20例相应距肿瘤组织5 cm以上的正常乳腺组织为对照组,采用免疫组织化学链霉菌抗生素蛋白-过氧化物酶链接法(SP)检测两组中Beclin1、p62和Ki-67的表达水平,分析3种因子与IDC临床病理学参数的关系。结果实验组Beclin1阳性表达率[44.3%(35/79)]明显低于对照组[100%(20/20),P0.05];p62和Ki-67阳性表达率分别[58.2%(46/79)、51.8%(41/79)]明显高于对照组[10%(2/20)、5%(1/20),P0.01]。实验组中Beclin1和p62阳性表达与组织学分级及淋巴结转移相关(P0.05),而与患者发病年龄、肿瘤大小无关(P0.05)。实验组Ki-67阳性表达与组织学分级相关(P0.01),而与患者发病年龄、肿瘤大小及淋巴结是否转移无关(P0.05)。实验组中Beclin1与p62和Ki-67呈负相关(P0.01),p62和Ki-67呈正相关(P0.01)。结论 Beclin1、p62和Ki-67蛋白异常表达可能与乳腺癌恶性程度分级及侵袭力有关。     

卵巢癌组织中ABCF2、ABCG2阳性表达及意义

目的探讨ABCF2、ABCG2在卵巢癌组织中的阳性表达及其与化疗耐药的关系。方法选择卵巢癌患者94例,均行肿瘤细胞灭活术配合紫杉醇类与铂类联合化疗,并对化疗耐药情况进行随访。采用免疫组化SP法观察卵巢癌组织中ABCF2和ABCG2表达,观察其阳性表达与卵巢癌患者临床病理特征的关系。采用Logistic回归分析对化疗耐药的相关因素进行分析。结果卵巢癌组织中ABCF2阳性表达与肿瘤病理类型和肿瘤分级无关(P均>0.05),与肿瘤分期、化疗耐药情况有关(P均<0.05)。卵巢癌组织中ABCG2阳性表达与肿瘤病理类型、肿瘤分期、肿瘤分级无关(P均>0.05),与化疗耐药情况有关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,ABCF2和ABCG2阳性表达是卵巢癌患者发生化疗耐药的独立危险因素(OR分别为1.067和1.132,P均<0.05)。结论肿瘤组织ABCF2和ABCG2阳性表达可能是卵巢癌患者发生化疗耐药重要原因。     

胆道肿瘤组织中ubiquitin的表达及临床意义

目的研究人胆道系统肿瘤中泛素（ubiquitin）蛋白的表达与胆道系统肿瘤不同病理分型的关系及其临床意义。方法采用免疫组织化学法结合蛋白印迹技术检测人胆道肿瘤组织、正常胆道组织及炎性组织中泛素蛋白的表达,分析人胆道肿瘤组织中泛素蛋白的表达情况与不同临床病理情况之间的相关性。结果人胆道肿瘤组织中泛素蛋白的表达显著高于正常组织及炎性组织中泛素蛋白的表达（P〈0．05）。泛素蛋白的表达与病理组织学分级有明显相关性（P〈0．05）。结论泛素蛋白在人胆道肿瘤组织中表达水平升高,可能与胆道系统肿瘤的恶性程度、疾病的进程有密切的关系。     

NOB1在肝癌组织中的表达及意义

目的检测NOB1在肝癌组织中的表达情况,了解NOB1与肝癌临床病理特征的关系。方法收集2011年2月~(-2)015年5月于河北省保定市第一医院行肝癌手术的标本48例,收集肝硬化组织22例、正常肝组织22例作为对照,应用免疫组化SP法检测NOB1在不同肝组织中的表达情况,并分析肝癌组织中NOB1的表达与临床病理因素的关系。计数资料组间比较采用χ~2检验。结果 NOB1在肝癌组织中表达的阳性率(72.9%)明显高于肝硬化组织(36.4%)和正常肝组织(31.8%)(P值分别为0.004、0.001);在肝硬化组织和正常肝组织中的表达差异无统计学意义(P0.05)。NOB1表达阳性率在肿瘤直径5 cm组明显高于肿瘤直径≤5 cm组(χ~2=4.355,P=0.037),Edmondson分级Ⅲ、Ⅳ级明显高于Ⅰ、Ⅱ级(χ~2=5.127,P=0.024)。与患者年龄、性别、有无微血管浸润、有无淋巴结转移及临床TNM分期无关(P值均0.05)。结论 NOB1在肝癌组织中高表达,与肝癌的肿瘤大小、Edmondson分级密切相关,可作为肝癌重要的肿瘤标志物。     

雌激素受体亚型ERα、ERβ在乳腺癌中的表达

目的研究雌激素受体亚型ERα、ERβ在不同乳腺组织中的表达及其在浸润性乳腺癌中与肿瘤病理参数和生物学标志物之间的关系。方法选取70例乳腺癌(其中8例原位癌、44例浸润性导管癌、18例浸润性小叶癌)、15例乳腺增生、15例正常乳腺组织石蜡标本,用免疫组织化学法检测ERα、ERβ、C-erbB-2的表达情况。结果 (1)乳腺癌组织中的ERα阳性表达率明显高于正常乳腺及乳腺增生组织;晚期乳腺癌患者ERα阳性表达率明显低于早期患者;C-erbB-2阳性患者的ERα阳性表达率明显减低。(2)乳腺癌组织中的ERβ阳性表达率明显低于正常乳腺及乳腺增生组织;在浸润性乳腺癌中淋巴结转移阳性者、C-erbB-2表达阳性者的ERβ阳性表达率明显高于对照组患者。结论 ERα在乳腺癌的发生发展中可能起到促进作用,ERα的阳性表达与一些预后良好因素相关。ERβ可能对维持乳腺组织的正常生理功能起着重要作用,其与某些预后不良因素可能相关。     

分化抑制因子Id1在老年女性乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的 探讨老年乳腺浸润性导管癌中分化抑制因子(Id)1的表达及临床意义.方法 采用免疫组化S-P法检测10例正常乳腺、60例浸润性导管癌组织中Id1的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征的关系.结果 Id1在老年乳腺浸润性导管癌中的表达率(18.07±11.10)%,较正常乳腺组织中表达率[(1.39±1.57)%]显著性增高(P＜0.01);Id1在Ⅰ、Ⅱ级老年乳腺浸润性导管癌中表达阳性率显著低于Ⅲ级[分别为(12.55±5.12)%、(16.46±8.88)%和(37.61±6.84)%,P＜0.01)];Id1在老年乳腺浸润性导管癌中的表达与ER、PR表达呈负相关(r=-0.529,P＜0.01;r=-0.483,P＜0.01),而与CerbB-2表达、患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移无关(P>0.05).结论 Id1的表达增强可能与老年乳腺浸润性导管癌的发生发展有关,Id1的检测有助于老年乳腺浸润性导管癌的诊断和恶性程度的判断.     

乳腺癌组织中Survivin、Ki67的表达变化及意义

目的 观察乳腺癌组织中凋亡抑制蛋白生存素(Survivin)、细胞核增殖抗原(Ki67)的表达变化,并探讨其意义.方法 采用免疫组化法检测10例正常乳腺组织(正常组)、20例乳腺增生性病变组织(增生组)和82例乳腺癌组织(肿瘤组)中的Survivin、Ki67,分析两指标的相关性;观察Survivin阳性表达与乳腺癌临床病理参数及预后的关系.结果 与正常组比较,增生组及肿瘤组Survivin OD值、Ki67标记指数(LI)明显升高(P均＜0.01);与增生组比较,肿瘤组Survivin OD值、Ki67 LI明显升高(P均＜0.01).Spearman相关性分析显示Survivin表达与Ki67表达呈正相关(r=6.821,P＜0.05).Survivin阳性表达与乳腺癌TNM分期及淋巴结转移相关(P均＜0.05).与Survivin阴性表达患者比较,Survivin阳性患者5年生存率明显降低(P＜0.05).结论 乳腺癌组织中Survivin、Ki67表达增加;Survivin和Ki67的高表达在乳腺癌的发生、发展中起重要作用,两者可作为判断其预后的参考指标.     

乳腺浸润性导管癌组织中BRCA1、Ki-67的表达变化及意义

目的观察乳腺浸润性导管癌（IDC）组织中乳腺癌易感基因1（BRCA1）、肿瘤增殖相关基因（Ki-67）的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测46例IDC组织中的BRCA1、Ki-67蛋白。结果IDC组织中BRCA1蛋白阳性19例（41．3％）,Ki-67蛋白阳性34例（74．9％）;BRCA1、Ki-67蛋白表达与IDC淋巴结转移和TNM分期有关（P均〈0．05）;相关分析显示,IDC组织中BRCA1、Ki-67蛋白表达呈负相关（r=-0．27,P〈0．01）。结论IDC组织中BRCA1低表达、Ki-67高表达,二者在IDC的发生发展中发挥重要作用。     

乳腺癌组织中VEGF、VEGF-D、VEGFR-3表达与血管及淋巴管生成的相关性探讨

采用免疫组化SP法检测37例乳腺浸润性导管癌(IDC)和30例正常乳腺组织中血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子-D(VEGF-D)、血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)的表达情况及微血管密度(MVD)、淋巴管密度(LVD),并进行相关性分析,结果乳腺IDC中VEGF、VEGFD、VEGFR-3阳性率均高于正常乳腺组织,且与MVD、LVD呈正相关.认为VEGF、VECF-D、VEGFR-3与乳腺IDC的发生、发展有关,其机制可能为促进乳腺组织中血管及淋巴管生成.     

乳腺浸润性导管癌中NM23、基质金属蛋白酶-2和-14的表达及意义

目的检测乳腺浸润性导管癌术后组织中肿瘤转移抑制基因NM23-H1(NM23)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-14的表达,分析其在不同临床病理特征中的意义。方法 65例乳腺浸润性导管癌作为观察组,40例乳腺原位癌作为对照组,40例正常乳腺组织作为正常对照组。三组术后均常规石蜡包埋组织,并应用免疫组化SP法检测组织中NM23、MMP-2和MMP-14的表达。结果三组中NM23、MMP-2和MMP-14的阳性率差别有统计学意义,观察组中NM23、MMP-2和MMP-14表达的阳性率与Ki67的表达、脉管侵犯和淋巴结转移密切相关,MMP-2和MMP-14表达的阳性率与胸壁侵犯有关。相关性分析显示观察组中NM23和MMP-2、MMP-14的表达具有负相关性。结论乳腺浸润性导管癌中NM23低表达、MMP-2和MMP-14高表达对促进肿瘤的形成和进展过程有重要意义,NM23与MMP-2、MMP-14可能具有一定的协同作用。     

转化生长因子-β1在乳腺纤维腺瘤中的表达及意义

目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)在乳腺纤维腺瘤组织以及其周围正常组织中的表达状况,探讨其在乳腺纤维腺瘤发病中的作用。方法标本来源为该科接受肿物切除术后病理诊断为乳腺纤维腺瘤的组织标本。收集新鲜组织标本20例(每例含肿瘤组织以及周围正常组织)液氮保存,采用逆转录定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测TGF-β1 mRNA表达水平。所获实验数据以Student's t检验进行统计分析。结果RT-q PCR结果显示乳腺纤维腺瘤组织中TGF-β1 mRNA的表达水平高于瘤旁正常组织(P=0.004)。结论乳腺纤维腺瘤组织中TGF-β1 mRNA的表达水平高于瘤旁组织,显示TGF-β1作为重要的间质发育的因子,也参与了纤维腺瘤的形成过程,其确切的作用过程仍待进一步的研究。     

乳腺癌组织中COX-2和C-erbB-2的表达变化及意义

目的探讨乳腺癌组织中环氧合酶（COX）-2和C-erbB-2的表达变化及其临床意义。方法用免疫组化方法检测40例乳腺增生组织、40例乳腺纤维瘤组织和96例乳腺癌组织、20例乳腺正常组织中的COX-2、C-erbB-2。结果COX-2、C-erbB-2在乳腺癌组织中的表达量明显高于其他乳腺疾病组织,且与乳腺癌淋巴结转移、肿瘤大小、临床分期、雌孕激素受体是否阳性有关。结论COX-2、C-erbB-2与乳腺癌关系密切,联合检测二者的表达可评价乳腺癌的预后。