化疗肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群水平分析

目的了解肺癌病人化学治疗后体内T淋巴细胞亚群的变化情况,为临床化疗和免疫调节提供依据和指导。方法用流式细胞术检测化疗后肺癌病人体内各T淋巴细胞亚群的百分比和绝对计数值,并和健康人群进行比较,进行综合分析。结果化疗的肺癌病人CD3^＋T淋巴细胞百分比为（64．43±12．48）％,CD4^＋T淋巴细胞百分比为（35．75±8．69）％,与对照组比较差异均有统计学意义（t=3．838,P=0．000;t=6．188,P=0．000）;CD8^＋T淋巴细胞百分比为（24．23±11．74）%,与对照组比较无统计学差异（P〉0．05）。但CD8^＋T淋巴细胞绝对计数与对照组比较,差异有统计学意义（t=8．473,P〈0．05）。结论化疗的肺癌病人免疫功能显著受损,而且以细胞免疫功能受损为主,临床上进行免疫调节时应考虑这一因素。     

供者肝内单个核细胞与肝移植后急性排斥反应的相关性研究

目的研究供者肝移植物内的单个核细胞（intrahepatic mononuclear cell,HMC）的表型分析和产生的细胞因子,及其对移植物急性细胞排斥反应（acute cellular reiection．ACR）的影响。方法采集2006年4月-2010年8月伦敦国王学院医院行原位肝移植的60例供者的HMC,采用流式细胞分析技术检测其表面免疫分子标志物和细胞因子,将其与上述移植物受者ACR的发生率进行相关性分析。结果HMC内CD4^＋／CD8^＋比值（均值0．5）明显低于健康者外周血比例（均值1．4）,证实细胞标本的肝源性。23．33％的患者在随访期发生了ACR。发生反应患者HMC内的自然杀伤（naturekiller,NK）细胞频率[（24．65±4．83）％]明显低于无排斥反应患者[（39．46_＋2．93）％],P=0．020,呈负相关（r=-0．321）。发生ACR患者HMC内产白细胞介素（interleukin,IL）-2的CD4^＋T淋巴细胞水平[（20．55±2．29）％]明显高于无排斥反应患者[（14．95±1．29）％],P=0．048;产IL-4的CD4＋T淋巴细胞水平[（6．5±0．84）％]高于无排斥反应患者[（3．85±0．41）％],P=0．006;产IL-17的CD8＋T淋巴细胞水平[（5．39±1．17）％]高于无排斥反应患者[（2．25±0．31）％],P=-0．025;产IL-4的CD8^＋T淋巴细胞[（7．05±0．73）％]高于无排斥反应患者[（4．51±0．56）％],P=0．041;产IL-23的CD8^＋T淋巴细胞[（3．0±0．64）％]高于无排斥反应患者[（1．74±0．24）％],P=0．031。结论供肝内的NK细胞、产IL-2、IL-4的CD4^＋T淋巴细胞、产IL-17、IL-4和IL-23的CD8^＋T淋巴细胞与肝移植患者发生ACR相关,上述细胞可能参与ACR的发生。     

成人隐匿性自身免疫性糖尿病与溃疡性结肠炎患者外周血T细胞亚群失衡的临床意义

目的 探讨LADA与溃疡性结肠炎（UC）患者外周血T细胞亚群变化及淋巴细胞失衡的临床意义. 方法 选取LADA、UC组各52例和健康对照（NC）组52名,采用单克隆抗体间接免疫荧光技术检测各组外周血淋巴细胞CD3＋、CD4＋、CD8＋亚群百分比. 结果 LADA、UC、NC组CD3＋亚群比较差异均无统计学意义[（62.29±4.97）％vs （63.49±5.12）％ vs （61.37±4.83）％,P＞0.05].UC组CD4＋亚群较LADA、NC组降低[（27.63±6.85）％ vs （35.87±5.92）％,P＜0.01;（27.63±6.85）％ vs（34.63±5.39）％,P＜0.01].LADA组CD8＋亚群较UC、NC组升高[（27.54±3.05）％ vs （22.21±3.46）％,P＜0.01;（27.54±3.05）％ vs （21.82±3.77）％,P＜0.01]. LADA、UC组CD4＋/CD8＋较NC组降低[（1.35±0.37） vs （1.78±0.44）,P＜0.01;（1.32±0.51） vs （1.78±0.44）,P＜0.01]. 结论 LADA、UC患者均出现淋巴细胞CD4＋、CD8＋亚群失衡,淋巴细胞亚群失衡参与两者发病,但具体机制不同.     

系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞亚群及Th1、Th2类细胞因子变化的临床意义

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血T淋巴细胞亚群及Th1、Tb2类细胞因子变化及其临床意义。方法选取SLE患者10例（SLE组）和查体健康者10例（对照组）,采用ELISA法检测其外周血IFN-γ、IL-10,采用流式细胞术检测CD4、CD8＋T淋巴细胞比例。结果SLE组IFN-γ、IL-10分别为（19．74±5．16）、（57．32±11．96）pg／ml,IFN-γIL-10为0．36±0．09;对照组分别为（13．87±4．08）pg／ml、（18．274-5．98）pg／ml、0．75士0．20;两组比较P均〈0．01。SLE组CD4＋为（43．14±6．08）％、CD8＋为（49．39±8．15）％、CD4＋／CD8＋为0．86±0．13;对照组分别为（52．89±7．65）％、（34．16±5．83）％、1．59±0．52,两组比较P均〈0．01。结论SLE患者T淋巴细胞亚群及Th1、Th2类细胞因子存在异常,这种变化可能是导致SLE发病的重要机制之一。     

抗病毒治疗对慢性丙型肝炎CD4^＋CD25^＋调节性T细胞频率和功能的影响

目的研究抗病毒治疗前后慢性丙型肝炎患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）频率和功能的变化。方法筛选HLA—A2阳性慢性丙型肝炎患者31例，给予聚乙二醇化干扰素α-2a（相对分子质量为40000）180μg每周1次皮下注射，联合口服利巴韦林。分别在治疗前和治疗结束随访24周时应用流式细胞仪检测患者CD4^＋CD25^＋ Treg细胞占外周血CD4^＋T细胞的频率，应用液闪计数仪检测其对HCV特异性CD8^＋T细胞增殖的抑制作用，ELISA法检测细胞培养上清γ干扰素（IFN-γ）水平的变化情况。结果治疗结束随访24周，患者外周血CD4^＋CD25^＋ Treg细胞频率为（9．6±3．0）％，明显低于治疗前的（11．0±2．3）％（t=2．028，P〈0．05）；持续病毒学应答（SVR）组CD4^＋CD25^＋ Treg细胞频率为（8．9±2．7）％，明显低于未获得SVR患者组的（10．4±2．3）％（t=3．324，P〈0．01）。抗病毒治疗后CD4^＋CD25^＋ Treg细胞抑制HCV特异性CD8^＋T细胞增殖的作用减弱。治疗后患者IFN-γ水平为（3959±577）pg／ml，明显高于治疗前的（1965±326）pg／ml（t=16．1，P〈0．01）；获得SVR患者组IFN-γ（6824±568）pg／ml，明显高于未获得SVR患者组的（2219±286）pg／ml（t=29．853，P〈0．001）。结论慢性丙型肝炎患者随着HCV RNA水平的下降，CD4^＋CD25^＋Treg细胞频率降低，抑制HCV特异性CD8^＋T细胞增殖的作用减弱。     

慢性HBV感染者T细胞亚群与CD28亚群的变化

目的检测不同类型乙型肝炎病毒（HBV）感染者T细胞亚群、CD28功能亚群的特点。方法选择CHB患者20例、肝功能正常的HBV携带者15例、肝功能正常的HBsAg携带者15例,以及健康献血员20例,使用流式细胞仪检测其外周血T细胞亚群及CD：。功能亚群。结果CHB患者、HBV携带者CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋、CD28^＋及CD8^＋CD28^＋T细胞计数均低于正常对照组（P〈0．05,P〈0．05,P〈0．01,P〈0．05;P〈0．05．P〈0．05,P〈0．01,P〈0．05）;HBsAg携带者CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋CD28^＋及CD8^＋CD28^＋T细胞计数与正常对照组无差别（P〉0．05）。结论慢性HBV感染者免疫功能不同造成不同形式的慢性感染方式。     

流式细胞术分析HIV-1高暴露持续血清阴性人群淋巴细胞亚群

目的了解经性传播途径高暴露不易感人群淋巴细胞亚群的差异,分析其与艾滋病病毒Ⅰ型（HIV-1）不易感的关系,探讨经性途径高暴露HIV不易感的免疫基础。方法收集37例经性传播途径高暴露HIV-1持续血清阴性者（Highly exposed and persistently remain seronegative,简称HEPS人群）、65例HIV-1感染者（简称HIV阳性人群）及128例健康对照人群（简称HC人群）的抗凝全血,用流式细胞仪检测相关淋巴细胞亚群,并分析其相关性。结果HEPS人群与HC人群外周血淋巴细胞亚群差异没有统计学意义;HIV阳性人群外周血CD4^＋T淋巴细胞数量、CD4/CD8比值显著低于HEPS和HC两组人群（P〈0.001）,CD8^＋T淋巴细胞数量则显著高于该两组人群（P〈0.001）;HIV阳性人群外周血CD19^＋B淋巴细胞、CD16^＋CD56^＋NK细胞数量显著低于HEPS人群和HC人群。HEPS人群的CD19^＋B淋巴细胞数量与CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数量呈显著正相关,而CD16^＋CD56^＋NK细胞数量与其CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数量无相关性。结论经性途径高暴露HIV-1持续血清阴性人群的淋巴细胞亚群,和健康对照人群比较无显著性差异,HIV感染可明显降低CD4^＋T淋巴细胞、CD19^＋B淋巴细胞和CD16^＋CD56^＋NK细胞数量。     

胃癌患者手术前后外周血T细胞亚群分布变化及意义

目的观察原发性胃癌患者手术前后外周血T细胞亚群分布变化及其意义。方法采用流式细胞术检测42例胃癌患者（胃癌组）手术前后及20例健康献血者（对照组）外周血T细胞亚群CD4^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD4^＋的水平。结果与对照组相比,胃癌组术前外周血CD4^＋细胞减少、CD4^＋／CD4^＋降低,而CD8^＋增多,P均〈0．05。与术前相比,胃癌组患者术后CD4^＋细胞增多、CD4^＋／Cd4^＋增高,CD8^＋细胞减少,P均〈0．05。结论胃癌患者外周血T细胞亚群分布异常,手术可逆转此异常。     

香烟烟雾提取物对CD4^＋T细胞向Th17细胞和调节性T细胞分化的影响

目的观察香烟烟雾提取物（CSE）对CD4^＋T细胞向Th17细胞和调节性T细胞分化的影响,为探索香烟烟雾暴露导致气道慢性炎症的机制提供实验依据。方法采用免疫磁珠法分离纯化健康志愿者外周血CD4^＋T细胞,以1×10^6／ml细胞密度接种于96孔培养板,分为以下8个组①空白对照组;②T细胞刺激剂组：加入T细胞刺激剂抗人CD3／28抗体微磁珠;③T细胞刺激剂CSE干预组：CD3／28＋2%CSE;④细胞因子组：CD3／28＋细胞因子;⑤细胞因子CSE干预组：CD3／28＋细胞因子＋2％CSE;⑥芳香烃受体（AHR）激动剂6-甲酰基吲哚[3,2-b]咔唑（FICZ）组CD3／28＋细胞因子＋FICZ;⑦AHR拮抗剂白藜芦醇组：CD3／28＋细胞因子＋2％CSE＋白藜芦醇;⑧溶剂对照组：CD3／28＋细胞因子＋DMSO。细胞因子为含TGF-β/IL-1β／IL-6／IL～23的混合细胞因子,以诱导Th17细胞和调节性T细胞分化。培养5d后,收集细胞,采用流式细胞术检测细胞表面分子CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋细胞（Treg细胞）,以及胞内细胞因子IL-17＋的CD4^＋T细胞（Th17细胞）,计算各种刺激培养条件下,诱导生成的Th17及Treg细胞占CD4^＋T细胞的百分比。结果①CSE对Th17细胞分化的影响：空白对照组Th17细胞比例为（0．69±0．12）％,加入T细胞刺激剂后为（1．32±0．12）％,在此基础上加入CSE的干预组IL-17＋细胞比例升高为（2．17±0．24）％,（t=3．21,P〈0．01）;细胞因子组IL-17＋细胞比例为（1．35±0．08）％,而在此基础上加入CSE的干预组Th17细胞升高为（2．58±0．39）%（t=3．13,P〈0．01）。②CSE对Treg细胞分化的影响：在空白对照组中,Treg细胞占CD4^＋T细胞中的比例为（0．21±0．19）％,在加入T细胞刺激剂后,Treg细胞比例升高（3．59±0．37）％,加入细胞因子后,Treg细胞比例明显增加（5．85±0．76）％;在继续加入CSE干预后,Treg细胞比例明显减少（3．07±0．33）％（t=3．74,P〈0．01）;同样,T细胞刺激剂CSE干预组也出现Treg细胞比例减少（2．19±0．19）％,（t=2．71,P〈0．05）。③AHR活化对Treg细胞和Th17细胞分化的影响：AHR激动剂FICZ组的Treg细胞比例明显低于细胞因子组[（2．60±0．40）％,（5．85±0．76）％]（t=4．18,P〈0．01）,但Th17细胞比例升高[（2．86±0．43）％,（1．35±0．08）％]（t=3．65,P〈0．01）。AHR阻断剂白藜芦醇组中的Treg细胞比例和Th17细胞比例均低于细胞因子组,分别为[（0．33±0．14）％,（5．85±0．76）％],（t=7．71,P〈0．01）和[（0．42±0．07）％,（1．35±0．08）％],（t=8．87,P〈0．001）,并且和空白对照组接近,在细胞培养第5天通过7-AAD-AnnexinV对该组细胞检测并未发现细胞异常凋亡或死亡情况,结合该组细胞培养过程中的镜下形态推测该实验组CD4^＋T细胞的分化增殖受到白藜芦醇抑制。结论CSE可促进CD4^＋T细胞向Th17细胞分化,并抑制Treg细胞分化,这一过程可能通过AHR诱导。     

多发性骨髓瘤患者T细胞共刺激分子表达和调节性T细胞检测及意义

目的通过检测多发性骨髓瘤患者外周血T细胞共刺激分子CD28表达及CD4^＋CD25^high调节性T细胞（Tregs）水平,探讨其免疫功能状态及临床意义。方法采用流式细胞术检测38例多发性骨髓瘤患者及20例健康志愿者外周血T细胞亚群cD。表达和CD4^＋CD25^high Tregs水平。分别采用透射免疫比浊法、溴甲酚绿法及速率法测定患者血清β2-微球蛋白（β2--MG）、白蛋白（Alb）及乳酸脱氢酶（LDH）水平。结果与正常对照组相比,多发性骨髓瘤患者外周血CD4＋T细胞百分率降低、CD8^＋T细胞百分率升高、CD4／CD8比值降低（P〈0．05或P〈0．01）,进一步研究发现CD4^＋和CD8^＋T细胞CD28表达均较对照组明显下降,而CD4^＋CD25^high Tregs百分率显著升高（P〈0．05,P〈0．01）。CD4^＋和CD8^＋T细胞CD28表达在进展期明显低于稳定期（P均〈0．01）,而CD4^＋CD25^high Tregs在稳定期和进展期间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。多发性骨髓瘤患者CD4^＋T细胞CD28表达、CD8^＋T细胞C28表达均与其血清β2-MG水平呈负相关,而与Alb水平呈正相关（P〈0．05,P〈0．01）,CD4^＋CD25^high Tregs与Alb水平呈负相关（P〈0．05）。结论多发性骨髓瘤患者存在T细胞亚群共刺激分子CD28表达缺陷和CD4^＋CD25^high Tregs扩增,并与病情进展及预后存在一定相关性。     

小鼠外吐小体免疫原性与1型糖尿病的相关性

目的研究外吐小体免疫原性及其与1型糖尿病病程的相关性。方法采用超滤、高速离心法分离6～15周龄NOD小鼠MIN6β细胞系以及原代胰岛胶质细胞来源的外吐小体,分为对照组、外吐小体组,以Westernblotting分析蛋白表达,以流式细胞术检测外吐小体刺激抗原递呈细胞后表型变化和细胞因子释放水平,掺入。３[H]以检测T淋巴细胞增殖水平,酶联免疫斑点法检测脾细胞受外吐小体刺激干扰素（IFN）－γ阳性T细胞克隆数和NOD小鼠病程的相关性。组间比较采用t检验。结果（1）外吐小体具有典型球状囊泡结构并携带1型糖尿病自身抗原谷氨酸脱羧酶65（GAD65）蛋白;（2）外吐小体组（11．5％）较对照组（2．6％）组织相容性抗原Ⅱ和CD。分子双阳性抗原递呈细胞增加;（3）外吐小体组CD11b＋、CD11c＋和B220＋亚群细胞的白细胞介素6（IL-6）均高于对照组,分别为：（115．0±2．4）比（25．3±2．9）pg／ml,（64．7±3．0）比（22．9±1．4）pg／ml,（10．7±1．2）比（6．3±O．6）pg／ml（均P〈0．05）;（4）外吐小体组CD11b＋、CD11c＋和B220＋亚群细胞的肿瘤坏死因子α（TNF—α）均高于对照组,分别为：（125．0±8．6）比（29．7±1．6）pg／ml,（108．0±6．7）比（16．7±2．1）pg／ml,（24．2±1．4）比（13．5±1．7）pg／ml（均P〈0．01）;（5）外吐小体组CD4阳性T细胞亚群高于阴性对照组[外吐小体10μg/ml组：（21510±1704）cpm,1μg／ml组：（4450±304）cpm,阴性对照组：（575±64）cpm,均P〈0．01],且IFN－γ阳性T细胞克隆数在雌性NOD小鼠随鼠龄呈递增趋势。结论外吐小体具有活化自身反应性T细胞功能并与1型糖尿病病程密切相关。     

慢性丙型肝炎患者Ⅰ型树突状细胞、淋巴细胞亚群的特点及临床意义

目的对慢性丙型肝炎患者Ⅰ型树突状细胞（dendritic cell 1,DC1）、淋巴细胞亚群的免疫学特点进行研究。方法对18例慢性丙型肝炎患者及18名健康献血员外周血进行DC1分离、体外诱导培养及特异性DC1表面标志测定,同时对患者淋巴细胞亚群及各项生化指标和病毒载量进行检测,并对部分患者治疗前后的指标进行比较。结果体外培养可诱导出大量的DC1。表达于慢性丙型肝炎患者DC1表面的共刺激分子（CD80、CD86、CD1a）及MHC-Ⅱ类分子（HLA-DR）的水平均明显降低（患者分别为14．82％±13．32％、18．68％±13．76％、6．33％±4．98％和29．14％±14．00％;正常人分别为76．46％±12．25％、84．38％±9．72％、89．56％±8．96％和92．47％±9．34％）,2组间差异有统计学意义（P〈0．01）;患者CD4^＋T淋巴细胞数量较正常对照组升高（P〈0．001）、CD8^＋T淋巴细胞数量降低（P〈0．01）,CD4^＋／CD8^＋比值高于健康人（P〈0．001）,CD16＋56＋NK细胞低于健康人水平（P〈0．01）;慢性丙型肝炎患者ALT值与DC1数量、HBVDNA水平与DC1数量之间均存在负相关趋势;3例完成6个月仪一干扰素治疗的患者,外周血单核细胞（PBMC）体外诱导培养产生的DC1数量均升高。结论慢性丙型肝炎患者DC1功能低下可能是HCV持续感染和免疫耐受的重要原因之一。HCV持续感染患者的淋巴细胞亚群发生变化,加重了丙型肝炎的慢性化。     

T-ALL 患者骨髓 CD3＋4细胞的 Hes1基因表达、数量、增殖变化及机制探讨

目的：观察急性T淋巴细胞白血病（ T-ALL）患者骨髓CD3＋4细胞Hes1基因表达、数量、增殖的变化,并探讨其机制。方法收集8例初治T-ALL患者及4例正常供者（健康对照）骨髓样本,real time PCR检测Hes1基因的表达,密度梯度离心法获取单个核细胞,流式细胞术检测CD3＋4细胞比例及其细胞周期,免疫磁珠法分选CD3＋4细胞,体外集落形成实验（ CFC）检测其增殖能力。构建Hes1基因过表达逆转录病毒载体,感染正常供者骨髓CD3＋4细胞后,流式细胞术分析其细胞周期的改变,CFC检测其增殖的改变。结果 T-ALL患者、健康对照CD3＋4细胞Hes1基因表达分别为3．3±0．8、1,两者比较,P＜0．05;CD3＋4细胞比例分别为0．02％±0．003％、0．06％±0．005％,两者比较,P＜0．05;CD3＋4细胞处于S期的细胞比例分别为16．2％±0．98％、28．0％±1．12％,两者比较,P＜0．05;G0期比例分别为19．0％±0．9％、9．0％±0．5％,两者比较,P＜0．05;且患者来源CD3＋4细胞的体外集落形成减少。提高正常CD3＋4细胞中Hes1基因的表达后,细胞增殖减少,进入静止期。结论 T-ALL患者CD3＋4细胞比例下降,进入静止期,体外扩增能力下降,这可能与Hes1基因的表达上调有关。     

CD28-T细胞亚群在类风湿关节炎患者外周血和关节液中的表达

目的 探讨CD28-T细胞亚群在类风湿关节炎(RA)患者外周血和关节液中的变化和意义。方法 随机选择RA患者45例,取新鲜抗凝外周血单个核细胞(PBMC),其中15例同时提取关节液单个核细胞( SFMC),以流式细胞技术检测CD28-T细胞数量及其表面可诱导共刺激分子(ICOS)的表达。2 组间比较用独立样本t检验。结果 ①与PBMC相比,RA患者SFMC中CD4+CD28+ ICOS+、CD4+CD28-ICOS+、CD8+ CD28+、CD8+ CD28+ ICOS+T细胞明显升高[(36±19)％与(15±8)％,t=-4.234,P＜0.01;(2.1±2.2)％与(0.6±1.4)％,t=-3.143,P＜0.01;(62±15)％与(47±18)％,t=-2.885,P＜0.01;(9±9)％与(3±3)％,t=-2.131,P＜0.05];CD8+CD28-T细胞明显降低[(38±15)％与(54±18)％,t=2.975,P＜0.01];CD8+ CD28- ICOS+、C1D4+CD28+和CD4+CD28-T细胞无明显变化（P＞0.05）。②同一RA患者SFMC与PBMC相比,CD4+CD28+ICOS+、CD8+ CD28+T细胞明显升高[(38±18)％与(16±10)％,t=-4.065,P＜0.01;(61±16)％与(41±21)％,t=-2.883,P＜0.01];CD8+ CD28-T细胞明显降低[(39±16)％与(59±21)％,t=2.949,P＜0.01]。③缓解期与活动期RA患者相比,PBMC中CD4+CD28-、CD8+ CD28-、CD28-ICOS+T细胞无明显变化（P＞0.05）。结论 RA患者关节液中CD28-T细胞亚群失衡和ICOS分子表达异常,可能是导致RA关节损伤的重要机制。     

支气管哮喘大鼠CD4^＋CD25^＋T细胞的变化及地塞米松干预作用的研究

目的研究支气管哮喘（简称哮喘）大鼠模型支气管肺泡灌洗液（BALF）、血液、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞的变化,及地塞米松对CD4^＋CD25^＋T细胞的影响。方法50只SD大鼠随机分为5组,空白对照（A）组,哮喘（B）组,地塞米松1（C）组、地塞米松2（D）组,地塞米松3（E）组。A组第1天给予腹腔注射生理盐水1ml,第15～21天每天给予生理盐水雾化。B、C、D、E组用卵蛋白建立哮喘大鼠模型,第1天,每只大鼠腹腔注射抗原1ml（卵蛋白1mg＋灭活百日咳杆菌9×10。个＋氢氧化铝干粉100mg）混悬液,第15～21天给予1％的卵蛋白雾化30min,C、D、E组于雾化后分别给予腹腔注射地塞米松0．2mg／kg、1mg／kg、2mg／kg。采用流式细胞仪检测的方法,观察大鼠体内BALF、外周血、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞的变化及使用不同剂量地塞米松后对其的影响。结果B组BALF、外周血、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞表达占CD4^＋T细胞的百分比分别是（42．21±5．62）％、（12．69±2．70）％、（11．15±1．05）％,A组结果分别是（18．76±5．85）％、（6．21±1．73）％、（7．85±2．13）％。B组与A组比较,差异均具有统计学意义（P〈0．01,P〈0．01,P〈0．05）;C组、D组、E组BALF中CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的百分比表达分别是（10．49±4．03）oA、（13．28±5．12）％、（7．51±5．39）％,显著低于A组和B组,（P〈0．05,P〈0．01）;外周血中,C组（6．03±1．43）％、D组（4．88±0．95）％与A组（6．21±1．73）％比较,差异无统计学意义,E组（3．49士0．62）％与C组、A组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。脾脏中,c组（7．25±1．82）%、D组（8．63±3．18）％与A组（7．85±2．13）％比较,差异无统计学意义,E组（3．38±1．37）％与C组、D组、A组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋T细胞在哮喘大鼠体内有明显的优势表达,可能是哮喘发病的机制之一。地塞米松可以抑制CD4^＋CD25^＋T细胞的表达。BALF内CD4^＋CD25^＋T细胞的变化与外周血和脾脏的变化具有一致性,监测外周血或脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞变化可了解肺部情况。     

慢性HIV-1感染者CD8细胞的铁死亡特点及其临床意义北大核心CSCD

目的 分析慢性HIV-1感染者外周血中CD8细胞的铁死亡水平,探讨CD8细胞铁死亡的临床意义。方法 利用流式细胞术检测HIV-1感染者和健康对照者外周血中CD8细胞的脂质过氧化水平,分析不同疾病状态下HIV-1感染者CD8细胞的不同记忆分化亚群及CXCR5+CD8细胞和CXCR3+CD8细胞的铁死亡情况,探究其变化特点及与疾病进展的关系。结果 纳入符合标准的30例未经ART的HIV-1感染者(TN),ART大于两年的免疫应答者(IR)17例,免疫无应答者(INR)9例与13例健康对照(HC),分析发现HC组和IR组相比TN组的CD8细胞的脂质过氧化水平显著升高(中位数TN vs. HC,0.068 85 vs. 0.041 16,P=0.000 8;TN vs. IR,0.068 85 vs. 0.045 06,P=0.001 6)。TN组CD8细胞EM亚群的脂质过氧化水平高于CM亚群、Naive亚群和EMRA亚群(中位数EM vs. CM vs. Na?ve vs.EMRA:0.083 14 vs. 0.061 19 vs. 0.071 27 vs. 0.063 09)。在TN组中,CXCR5+CD8细胞的脂质过氧化水平显著高于CXCR5-CD8细胞(中位数0.082 65 vs. 0.068 75, P<0.000 1),CXCR3+CD8细胞显著低于CXCR3-CD8细胞(中位数0.065 68 vs. 0.072 80,P<0.000 1)。TN组的CD8细胞脂质过氧化水平与CD4细胞计数具有显著负相关性(r=-0.470 1,P=0.008 8)。结论 在未经ART的HIV-1感染者中CD8细胞的铁死亡水平显著升高,其铁死亡水平与CD4细胞计数显著负相关,暗示了CD8细胞的铁死亡与HIV-1感染后的疾病进展程度有关。     

2型糖尿病患者外周血淋巴细胞亚群及Treg细胞检测及临床应用

目的探讨2型糖尿病患者外周血中T淋巴细胞亚群、NK细胞及CD：CD25＋Treg细胞的变化及其检测的临床应用。方法应用免疫荧光技术和流式细胞仪检测120例2型糖尿病患者及40例健康人外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞及CD4＋CD25＋Treg细胞的百分数并对结果进行统计学分析。结果与正常对照组比较,2型糖尿病患者无论是否合并血管病变外周血CD3＋、CD4＋／CD8＋、CD56＋CD55＋／CD3NK细胞、CD：CD25＋Treg细胞百分数降低（P〈0．05）,CD8＋／CD3＋细胞明显升高（P〈0．05）,CD4＋／CD3＋细胞无统计学差异（P〉0．05）;2型糖尿病无血管病变组与合并血管病变组间无统计学差异（P〉0．05）。结论2型糖尿病患者存在细胞免疫功能紊乱,应加强免疫功能监测,提高患者免疫功能。     

弓形虫P30基因DNA免疫小鼠诱导的细胞免疫应答

目的用pcDNA_3－P30真核表达质粒直接免疫小鼠,观察所诱导的小鼠细胞免疫应答。方法大量制备量级质粒pcDNA_3－P30,经肌肉注射BALB／c小鼠,每隔3周接种1次,一共免疫3次。用MTT方法对脾脏的NK杀伤细胞率和淋巴细胞的转化率进行测定,采用免疫荧光法对CD4 、CD8 细胞进行测定。结果实验组NK细胞杀伤率为：70．0％±3．64,对照组及空白对照组分别为48．5％±6．06和470％±5．93,实验组NK细胞活性比对照组明显增高（P＜0．05）;ConA刺激小鼠淋巴细胞转化实验,实验组与对照组及空白对用级差异无显著性（P＞0．05）;对T淋巴细胞亚群CD4＋、CD8＋进行动态分析,可见随着感染时间的延长,CD8＋的数量逐渐上升,CD4＋／CD8＋的比率逐渐下降,实验组与对照组及空白对照有明显差异（P＜0．05）。结论重组质粒pcDNA3-p30免疫BALB／c小鼠可诱导一定的细胞免疫。     

多房棘球绦虫重组BCG-EmⅡ/3疫苗诱导小鼠脾细胞亚群变化的研究

目的 探讨多房棘球绦虫重组BCG—EmⅡ／3疫苗免疫和多房棘球绦虫（Em）原头节攻击后小鼠脾CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群的变化。方法 Balb／c小鼠随机分为疫苗皮下注射组、鼻腔接种组、空载体对照组、卡介苗（BCG）对照组和磷酸缓冲液（PBS）对照组。疫苗免疫8周时用Em原头节进行攻击，感染后18周杀鼠取脾，分离脾细胞，流式细胞仪检测脾CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群的百分比。结果 疫苗皮下注射组和鼻腔接种组的脾CD4^＋T细胞亚群比值分别为0．345±0．018、0．314±0．014，与PBS对照组（0．216±0．027）比较明显增高（q值分别为3．93、3．76，P〈0．01）；CD8^＋T细胞亚群比值分别为0．091±0．005、0．083±0．007，与PBS对照组（0．085±0．018）比较无明显变化（q值分别为0．92、0．89，P〉0．05）；CD4^＋／CD8^＋亚群比值分别为3．81±0．30、3．80±0．44，与PBS对照组（2．75±1．08）比较明显增高（q值分别为3.25、3．06，P〈0．01）。皮下注射组的CD4^＋和CD8^＋T细胞亚群数目显著高于鼻腔内接种组（q值分别为3．52、2．63，P〈0．01或〈0．05）。结论 CD4^＋T细胞亚群在多房棘球绦虫重组BCG-EmⅡ／3疫苗诱导的小鼠抗Em原头节攻击感染的保护性免疫机制中起关键作用。     

肝硬化患者外周血及腹水T淋巴细胞亚群的变化及意义

目的研究肝硬化患者外周血及腹水T淋巴细胞亚群的变化及意义。方法流式细胞仪测定31例肝炎后肝硬化患者外周血及腹水T淋巴细胞亚群，同时检测15例正常人的外周血T淋巴细胞亚群。结果肝硬化患者外周血T淋巴细胞（CD3^＋）、T辅助／诱导细胞亚群（CD4^＋）、T辅助淋巴细胞／T抑制淋巴细胞亚群（CD4^＋／CD8^＋）较正常对照明显降低（p＜0．01），腹水CD3^＋、CIM^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋较外周血显著降低（P＜0．001）。结论肝硬化患者外周血及腹水T淋巴细胞亚群存在明显异常，表现为全身及腹膜腔局部的免疫力低下。