“益肝浓缩煎剂”等活血化淤药抗大鼠肝纤维化作用实验研究

目的 研究“益肝浓缩煎剂”、丹参复方（丹参＋当时＋水蛭）、当时、水蛭对大鼠肝纤维化预防与治疗作用,并对其机制进行初步探讨。方法 以CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,造模前2周及造模结果后分别予相应药物进行防治,各持续10周;测定肝组织羟脯氨酸（Hyp）、丙二醛（MDA）含量,光镜、电镜观察肝脏病理形态变化。结果 “益肝浓缩煎剂”预防、治疗组Hyp、MDA显著降低（P＜0．05）;当归治疗组Hyp、MDA显著下降（P＜0．05）,胶原沉积无减轻（P＞0．05）;水蛭 各项指标均无好转（P＞0．05）;“益肝浓缩煎剂”预防组α－平滑肌肌动蛋白染色强度减弱。结论 “益肝浓缩煎剂”对大鼠肝纤维化具有明确防治作用;丹参复方对大鼠肝纤维化具有明确治疗作用,当归次之,仅Hyp、MDA显著下降,水蛭作用较差;上述疗效作用机制可能与抗脂质过氧化或抑制肝星状细胞活化有关。     

甲珠对肝纤维化大鼠氧化应激指标的影响

目的 观察甲珠对肝纤维化大鼠氧化应激指标羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(SOD)表达的影响及其抗纤维化机制.方法 采用40% CCl4皮下注射制备肝纤维化模型,并以甲珠不同剂量干预,测定肝Hyp、MDA、SOD水平,并通过光镜观察肝组织病理变化.结果 甲珠各组较模型组肝组织中Hyp、MDA显著降低;总SOD活性显著升高(P<0.05);肝组织氧化损伤程度明显改善(P<0.05);肝组织病理变化改善(P<0.05).结论 甲珠对CCl4诱导的大鼠肝纤维化有良好的防治作用.     

实验性肝纤维化大鼠MMPs和TIMPs mRNA表达及中药小柴胡汤的作用

目的 探讨大鼠肝纤维化过程中MMP-2、TIMP-1 mRNA表达及小柴胡汤对其的影响.方法 用40%的四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型,并用不同剂量的小柴胡汤进行干预.应用HE常规染色法对肝组织切片行组织病理学检查;应用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)半定量测定大鼠肝组织中MMP-2、TIMP-1 mRNA的表达.结果 (1)肝组织病理学检查结果显示:小柴胡汤治疗组与模型组相比,肝纤维化程度显著减轻.(2)病理模型组TIMP-1 mRNA与正常对照组比明显升高(P＜0.01);而MMP-2 mRNA却明显降低(P＜0.05).(3)小柴胡汤治疗组TIMP-l mRNA与模型组比显著降低(P＜0.01),而MMP-2 mRNA与模型组无差异(P＞0.05).结论 TIMP-1 mRNA在肝纤维化过程中升高;小柴胡汤能显著减轻大鼠肝纤维化程度,其可能通过下调TIMP-1 mRNA的表达发挥作用.     

绞股蓝总皂苷对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的防治作用

目的:观察绞股蓝总皂苷对四氯化碳( CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的防治作用.方法:采用CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型,分为正常组(Z,n=6)、模型组(M,n=8)、绞股蓝总皂苷组(J,n=8)、秋水仙碱(Q,n=8).造模6周末开始给药(股蓝总皂苷200mg/kg体重、秋水仙碱0.1mg/kg体重),给药3周.观察:①大鼠体重、肝脾比值的变化;②血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)活性、白蛋白( Alb)、总胆红素(TBil)含量、肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;③肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;④肝组织病理及胶原沉积情况.结果:①M组大鼠血清ALT、AST、GGT、TBil显著升高,Alb显著降低;J和Q组大鼠血清ALT、AST、GGT、TBil显著下降,Alb显著升高;②M组大鼠肝组织Hyp含量显著升高,J组及Q组大鼠肝组织Hyp含量显著下降;③肝组织HE染色显示:M组大鼠肝细胞脂肪变性,大量纤维结缔组织增生,假小叶形成.J组及Q组大鼠肝细胞脂肪变性减轻,纤维增生减少,少见完整假小叶结构.天狼星红染色显示:M组大鼠肝窦周胶原沉积明显,形成较厚汇管区和中央静脉间的纤维间隔,J组和Q组大鼠肝脏汇管区胶原纤维染较M组明显减轻;④M组大鼠肝组织SOD活性及GSH含量明显降低,MDA含量显著升高.J组大鼠肝组织SOD活性显著提高.结论:绞股蓝总皂苷具有显著抗CCl4诱导的大鼠肝纤维化及氧化损伤的作用.     

肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶9及其抑制因子1基因表达的动态变化及下瘀血汤对其影响

[目的]研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶9(MMP-9 mRNA)和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1 mRNA)基因表达的动态变化及下瘀血汤对其影响,探讨下瘀血汤抗肝纤维化的机制。[方法]猪血清腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型,造模8周后灌胃给予下瘀血汤流浸膏干预治疗,用药4周后和造模过程中的1、2、4、8周动态处死大鼠,获取标本,检测指标。[结果]与正常组相比,模型组1、8、12周MMP-9 mRNA表达明显降低(P0.05,0.01),2周MMP-9 mRNA表达显著升高(P0.01),4周表达无明显变化。与模型组12周相比,下瘀血汤组MMP-9 mRNA表达明显升高(P0.05)。与正常组相比,1、2、4、8和12周模型组TIMP-1 mRNA表达均有显著升高(P0.05,0.01))。与12周模型组相比,下瘀血汤组TIMP-1 mRNA表达显著降低(P0.01)。[结论]大鼠猪血清免疫性肝纤维化存在着MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA的动态变化,下瘀血汤可通过促进MMP-9 mRNA表达和抑制TIMP-1 mRNA表达而发挥抗肝纤维化的作用。     

强肝胶囊对大鼠实验性肝纤维化防治作用

目的 研究强胶囊对四氯化碳大鼠肝纤维化预防与防治作用。方法 以CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,造模前2周及结束后分别予强肝胶囊进行防治,各持续10周;测定肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量,光镜、电镜观察肝脏病理形态变化。结果 强肝胶囊预防、治疗组Hyp显著降低（P＜0．05）,胶原沉积及脂肪变性明显减轻（P＜0．05）,电镜显示强肝胶囊预防组肝细胞内脂滴明显减少,狄氏间隙内胶原纤维增生明显减轻。结论 强肝胶囊对大鼠肝纤维化具有明确防治作用。     

绞股蓝总皂苷对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶及其抑制物的影响

目的:观察绞股蓝总皂苷对CCl4(四氯化碳)诱导的大鼠肝纤维化基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)的影响。方法:采用CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型,分为正常组(n=6)、造模组(n=36),造模6周后,造模组大鼠死亡2只,剩余大鼠分为模型组(n=12)、绞股蓝总皂苷组(n=11)、秋水仙碱组(n=11)。造模第7周开始给药(剂量按公斤体重绞股蓝总皂苷200mg.kg-1.d-1、秋水仙碱0.1mg.kg-1.d-1),给药3周。观察:①大鼠一般情况变化;②肝组织羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp)含量;③肝组织天狼星红染色;④肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA):免疫组化染色;⑤肝组织MMP-2、MMP-9活性:明胶酶谱实验;⑥肝组织TIMP-1、TIMP-2蛋白表达:western-blot检测。结果:较之正常组,模型组大鼠肝组织Hyp含量显著增高,肝脏纤维增生明显,肝组织α-SMA阳性表达及肝组织MMP-2、MMP-9活性和肝组织TIMP-1、TIMP-2蛋白表达显著增加。而绞股蓝总皂苷组较模型组大鼠的肝组织Hyp含量和纤维增生程度显著降低、α-SMA阳性表达减轻,MMP-2、MMP-9活性和TIMP-1、TIMP-2蛋白表达均显著下降。结论:绞股蓝总皂苷有显著的抗肝纤维化作用,其机理与抑制肝星状细胞活化及调节胶原代谢有关。     

苦参素对实验性大鼠肝纤维化的防治作用

目的 :研究苦参素在体内的抗肝纤维化作用。方法 :用 CCl4 诱导大鼠肝纤维化模型 ,设正常对照组、模型组、苦参素预防组和治疗组 ,实验结束后分别测定肝功能 ,纤维化指标 : 型前胶原 (PC- )、层粘蛋白 (L N)、透明质酸 (HA) ,并作肝组织病理检查。结果 :苦参素可显著改善肝功能 ,降低 PC- 、L N、HA水平 ,组织学检查也显示具有抗肝纤维化作用。结论 :苦参素在体内具有抗肝纤维化作用 ,可望用于肝纤维化的防治。     

17β-雌二醇对大鼠肝纤维化影响作用的实验研究

目的探讨17β-雌二醇(E2)对大鼠肝纤维化及肝窦毛细血管化的影响作用及其分子生物学机制.方法健康Wistar大鼠80只,体重(200±17)g,分成三组.CCl4模型组(30只)以60?l4橄榄油剂行腹部皮下注射制备肝纤维化模型,每次2 ml/kg体重,每周2次.E2预防组(30只)CCl4组以同样方法制备肝纤维化模型,同时皮下注射E2,剂量为200μg/kg体重,每周1次.对照组(20只)给予生理盐水.每周处死各实验组大鼠4～6只,记录实验结果.自肝脏右叶取材,作常规H-E染色和Masson胶原染色、原位杂交和透射电镜检查,检测大鼠肝组织中NF-kB P65 mRNA基因表达情况.由图像分析仪半定量分析结果.结果CCl4模型组大鼠血清ALT、AST、球蛋白水平及大鼠肝纤维化程度明显高于E2预防组(P＜0.05),白蛋白水平在造模第12周末,明显低于E2预防组(P＜0.05).原位杂交结果显示,于CCl4造模第6周及第12周,大鼠肝组织中NF-kB P65 mRNA表达阳性染色细胞数分别为21.70%±5.93%和46.19%±6.73%;而在E2预防组则分别为15.36%±4.41%和31.51±6.02%,明显低于CCl4模型组(P＜0.05),E2可明显下调NF-kB P65 mRNA基因表达.与E2预防组比较,CCl4模型组大鼠肝细胞损害程度明显,可见大量细胞外基质沉积及胶原纤维.结论E2能下调大鼠肝组织NF-kB P65 mRNA基因表达,阻断HSC活化增殖信号传导通路,减少细胞外基质分泌与沉积.通过抗脂质过氧化作用,减少肝细胞损伤,改善肝功能,抑制肝窦毛细血管化,具有抗肝纤维化作用.     

苦参素调节Wnt/Jnk通路介导的糖代谢抑制肝星状细胞活化

目的探索苦参素(oxymatrine,OM)抗肝纤维化的分子机制。方法使用高糖培养基诱导肝星状细胞(HSC-T6)以及基质胶诱导的静息HSC-T6(M-HSC-T6)的活化,通过OM干预,观察细胞活性的变化。同时建立CCl_4诱导的大鼠肝纤维化模型(模型组),治疗组用OM干预,对照组正常喂养。行HE及Masson染色观察大鼠肝脏病理变化;通过荧光定量PCR及Western-Blot检测各组细胞以及大鼠肝组织α-SMA,Clol1A1以及己糖激酶2(HK2)、果糖激酶(PFKP)表达的变化;使用Western-Blot检测各组细胞以及大鼠肝组织总Jnk和pJnk的表达变化。结果高糖刺激能显著增强HSC-T6以及M-HSC-T6细胞活性,上调HK2、PFKP mRNA以及蛋白质的表达,促进Jnk磷酸化;模型组大鼠肝脏纤维化程度较对照组明显升高,肝组织HK2、PFKP mRNA以及蛋白质表达增加,Jnk磷酸化增强(P0.05)。与之相比,OM能显著抑制HSC-T6活性,改善大鼠肝脏病理变化,降低细胞以及大鼠肝组织HK2、PFKP mRNA及蛋白质表达,减少Jnk磷酸化(P0.05)。结论苦参素通过下调Wnt/Jnk介导的糖代谢过程,抑制HSC-T6的活化,从而延缓肝纤维化进展。     

急性心肌梗塞患者外周血IL-2、sIL-2R水平及动态变化的研究

本文测定了30例急性心肌梗塞患者外周血白细胞介素2（IL-2）及其游离受体（sIL-2R）水平，并进行动态观察，实验结果表明，发病后48h内IL-2水平最低，而sIL-2R水平最高，与正常对照组比较有显著性差异（P＜0.001）；发病后72hIL-2水平开始升高，sIL-2R水平开始下降，至2～3周时两者水平逐渐趋于正常，与对照组比较无显著性差异（P＞0．05）。研究表明急性心肌梗塞与机体免疫应答密切相关。     

基质金属蛋白酶在类似人类2型糖尿病大鼠肾病中的研究

目的 动态研究基质金属蛋白酶－2（MMP－2）和其体内特异的抑制物－金属蛋白酶组织抑制剂－2（TIMP－2）在类似人类2型糖尿病大鼠肾组织的改变。方法 利用免疫组织化学观察Ⅳ型胶原在肾小球的表达,酶谱法测定肾皮质MMP－2的活性,蛋白印迹法检测肾皮质TIMP－2的含量,Northern Blot观察肾皮质MMP－2和TIMP－2的基因表达。结果 类似人类2型糖尿病大鼠肾小球Ⅳ型胶原成分表达增强,肾皮质MMP－2基因表达减弱（P＜0．01）;其活性进行性减少（P＜0．0001）,而TIMP－2基因表达（P＜0．01）及其含量逐渐增加（P＜0．01）。结论 类似人类2型糖尿病大鼠肾组织MMP－2活性进行性降低、TIMP－2含量增加,两者比例失衡为肾小球ECM成份沉积的重要原因之一,基质降解减弱也参与了2型糖尿病大鼠肾脏病变的发生和发展。     

CDX2 MUC2在胃黏膜肠上皮化生组织中的表达情况及其临床意义研究

目的 探讨尾型同源盒转录因子2(CDX2)、黏蛋白2(MUC2)在胃黏膜肠上皮化生组织中的表达情况及其临床意义.方法 选择2011年1月至2014年5月于宁夏医科大学总医院消化内科就诊并行内镜活检的152例患者,根据病理检查结果将其分为非萎缩性胃炎组(32例)、萎缩性胃炎组(31例)、低级别上皮内瘤变组(24例)、高级...     

家族性高胆固醇血症的临床研究——Ⅲ.家族性高胆固醇血症息者的心血管改变

本文对11例家族性高胆固醇血症患者进行了临床心血管改变的研究,发现二维超声心动图对观察和随访这些患者的心血管改变最敏感,且二维超声心动图改变,心绞痛症状和心血管杂音与患者年龄和血浆高密度脂蛋白胆固醇水平有一定的关系。     

应激性胃粘膜出血与血浆血栓素、前列环素和胃泌素水平的关系

目的　探讨应激性胃粘膜出血与血浆TXA2 、PGI2 和胃泌素 (G)水平的关系。方法　 2 0只SD大鼠随机分成实验组和对照组 ,每组 10只 ,禁食 2 4小时后 ,实验组放在 2℃冰水中应激 4小时 ,对照组不给刺激。应激结束后麻醉大鼠 ,分别取血 2ml分离血浆 ,放免法测定TXB2 (TXA2 的稳定代谢物 )、6 酮 PGF1a(PGI2 的衍生物 )和G水平 ;另取大鼠胃沿小弯剪开 ,肉眼观察胃粘膜有无出血灶 ,用pH值试纸测定胃液酸碱度。结果　 8只实验鼠胃粘膜见片状出血灶 ,对照组鼠胃粘膜无出血性改变 ;两组鼠胃液pH值测定无明显差异。实验组血浆TXB2 、6 酮 PGF1a和G水平分别为 15 45 11±14 2 89、16 2 80± 42 13和 112 75± 2 3 6 8,对照组分别为 96 6 5 0± 5 18 48、3 5 6 0 0± 91 0 6和 2 47 14± 5 3 6 0 ,两组分别比较均具有显著意义 (P <0 0 1)。结论　大鼠应激性胃粘膜出血与血浆TXA2 水平升高和PGI2 水平降低有关 ;而与胃酸分泌无关。     

肝细胞DNA损伤诱导蛋白DDI2的单克隆抗体制备及鉴定

目的制备鼠抗DDI2蛋白单克隆抗体,并对其在细胞和组织中的定位进行初步研究。方法利用体外原核表达的DDI2蛋白,免疫BLAB/c小鼠,制备单克隆抗体。利用免疫组织化学技术明确该蛋白在组织中的定位。结果利用杂交瘤细胞技术,成功制备了两株DDI2单克隆抗体细胞系2H3、2B2。表达纯化的单克隆抗体具有较高的免疫活性。与正常对照组相比,肝损伤组织中该蛋白表达增强,且高表达于门脉周围肝实质细胞,并主要表达于细胞核。结论 DDI2的表达与四氯化碳诱导的肝损伤有关,损伤肝细胞主要表达于肝实质细胞的细胞核。     

质子泵抑制剂对胃粘膜环氧化酶-2表达的影响

目的探讨质子泵抑制剂(PPI)对大鼠胃粘膜环氧化酶—2(COX-2)表达的影响。方法 1.大鼠经胃管给予Rabeprazole(雷巴拉唑),Lansoprazole(兰索拉唑),Pantoprazol(潘妥拉唑),50mg/kg,对照组给予0.5％碳氧甲基纤维素(carboxymethyllulose,CMC),5ml/kg每天一次,连续14天,应用免疫印渍检测胃粘膜COX-1和COX-2表达水平。2.连续14天给予0.5mg/kg,5mg/kg或50mg/kg的兰索拉唑,对照组给予0.5％CMC,应用酶免疫测定法(EIA)检测大鼠胃粘膜中前列腺素E_2(PGE_2)含量,并观察兰索拉唑对酒精所致急件胃粘膜损伤的保护作用.3.特异性COX-2抑制剂(NS-398)对大鼠胃粘膜PGE_2合成及胃粘膜保护作用的影响.结果 1.PPI显著地增加大鼠胃粘膜COX-2的表达水平而不影响COX-1的表达。2.胃粘膜中PGE_2含量,对照组为266±81pg/gwet tissue:0.5mg/kg,5mg/kg 50mg/kg的兰索拉唑组分別为427±32 pg/g,483±121 pg/g(p<0.05 vs.对照组),614±82pg/g(p<0.01 vs.对照组).3.酒精对大鼠胃粘膜的损伤指数.对照组为3.78±0.29％,0.5mg/kg～50mg/kg的兰索拉唑组分别为3.01±0.38％(p<0.05、vs.对照组).2.16±0.40％(p<0.005 vs.对照组)和0.96±0.20％(p<0.005 vs.对照组)。4.NS398有效地阻断了兰索拉唑诱导的PGE_2合成及胃粘膜保护作用。结论 PPI通过诱导胃粘膜COX-2表达,增加PGE_2合成而发挥胃粘膜保护作用。     

结核病与mIL-2R、sIL-2R的表达

目的探讨结核病与膜白介素-2受体(mIL-2R)、可溶性白介素-2受体(sIL-2R)表达水平的关系。方法采用生物素-链霉亲和素(Biotin-Streptavidin,BSA)系统及双抗体夹心ELISA法检测结核病患者mIL-ZR及sIL-2R的表达水平。结果结核病患者PHA诱导前后 mIL-2R水平分别为(3.28±1.35)％和(29.18±5.86)％,与对照组相比,差异有显著性(P<0.01和P<0.05);结核病患者血清中sIL-2R水平为(474.3±102.5)％,与对照相比,差异有显著性(P<0.01)。有空洞型肺结核的mIL-2R、sIL-2R表达水平的变化较无空洞者更为明显(P<0.01)。无空洞型肺结核,与结核性胸膜炎、肾结核的mIL-2R、sIL-2R表达水平相似,差异无显著性(P>0.05)。结论结核病患者体内mIL-2R表达水平降低,sIL-2R水平升高,结核病患者体内存在明显细胞免疫功能低下,其外周血单个核细胞(PBMC)对PHA的诱导反应能力降低。结核的病变部位、病变程度及预后与患者的mIL-2R、sIL-2R表达水平有一定关系。