IL-5及嗜酸粒细胞与人芽囊原虫病患者肠黏膜损伤关系的探讨

目的探讨IL-5及嗜酸性粒细胞与人芽囊原虫病患者肠黏膜损伤的关系。方法实验组为确诊为人芽囊原虫感染的30例患者,对照组为30例健康体检者。均做电子肠镜检查,用ELISA法检测肠黏膜组织匀浆中的IL-5水平。实验组取病变黏膜做病理检查,HE染色病理切片,并观察嗜酸性粒细胞的浸润情况。结果经电子肠镜检查,30例人芽囊原虫病患者均出现不同程度的肠道病变,表现为充血、水肿、糜烂、溃疡等。病理学观察病变组织有嗜酸性粒细胞浸润。实验组肠黏膜组织匀浆IL-5(45.75±24.1)pg/ml,对照组为(19.90±7.6)pg/ml,差异有统计学意义(t=5.603 0,P<0.01),且人芽囊原虫感染者肠黏膜组织匀浆IL-5水平随着浸润嗜酸性粒细胞数目增加而逐渐升高,人芽囊原虫感染度与嗜酸性粒细胞浸润数目呈正相关(rs=0.771 1,P<0.01)。结论人芽囊原虫感染能引起患者肠黏膜的病理改变,嗜酸性粒细胞浸润及细胞因子IL-5水平升高。IL-5和嗜酸性粒细胞在人芽囊原虫感染所致的肠黏膜损伤中起重要作用,且IL-5是人芽囊原虫感染引起免疫反应导致肠黏膜损伤的重要细胞因子之一。     

红花注射液对溃疡性结肠炎大鼠IL-4和IL-1β表达的影响

目的:观察红花注射液(injection of carthamus tinctorius,ICT)对2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)所致大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用,并通过观察ICT对大鼠结肠黏膜白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)蛋白及mRNA表达的影响,初步探讨其治疗UC的作用机制.方法:30只Wistar大鼠随机分为实验组、模型组和对照组3组,每组各10只,其中实验组和模型组大鼠分别用TNBS灌肠,以复制UC模型,同时实验组给予ICT干预治疗.疗程结束后,观察疾病活动指数(disease activity index,DAI),剖取大鼠8cm结肠,进行结肠大体形态评分,将标本进行HE染色,并进行组织学损伤评分;采用免疫组织化学染色及RT-PCR检测结肠IL-4和IL-1β蛋白及mRNA的表达.结果:实验组与模型组相比,UC大鼠的DAI、结肠黏膜的大体形态及组织学损伤明显改善(均P<0.05),实验组IL-4蛋白及mRNA的表达与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05),与模型组相比显著升高(P<0.05);模型组及实验组IL-1β蛋白及mRNA的表达较正常对照组显著升高(P<0.05),而实验组较模型组显著降低(P<0.05).结论:ICT对TNBS法诱导的大鼠UC有治疗作用,其机制可能是通过上调抗炎因子IL-4的释放和抑制促炎细胞因子IL-1β的表达而起作用.     

人芽囊原虫感染大鼠的方式改良及病理切片观察

目的建立人芽囊原虫感染大鼠动物模型。方法将30只雄性SD大鼠随机分为对照组和4个感染组(10~5、 10~6、 10~7和10~8),每组6只。4个感染组分别灌服人芽囊原虫滋养体10~5、 10~6、 10~7和10~8个/鼠,对照组灌服等量PBS。感染后第3天开始收集粪样,于洛克氏-鸡蛋-血清(LES)培养基中培养72 h后镜下观察,PCR和测序确认感染前后虫株的基因型。感染后第3～18天连续收集5次大鼠粪样培养观察,记录阳性鼠感染情况。感染后第21天将大鼠全部无痛处死,分别收集十二指肠、空肠、回肠、结肠和盲肠等肠段的内容物培养72 h后观察,计算其最终感染数和感染密度;并取不同部位的组织进行切片,苏木精-伊红(HE)染色后观察肠道内是否存在虫体。采用皮尔森相关性分析比较各肠段寄生数目的相关关系。结果 10~5、 10~6、 10~7和10~8感染组中确定感染人芽囊原虫的大鼠数目分别为2、 3、 5和6只。其中10~5感染组感染后第6天检出阳性结果,其余感染组第3天检出阳性,对照组均为阴性。PCR及序列比对证实,感染大鼠分离的人芽囊原虫与感染所用虫株均为ST7型。肠道内容物培养结果显示,回肠、盲肠和结肠的内容物均成功培养出人芽囊原虫,且盲肠与结肠内的虫数之间呈正相关,盲肠与结肠内容物培养获得的人芽囊原虫数呈正相关性(r=0.541, P 0.01),其余肠段未发现人芽囊原虫。HE染色结果显示,盲肠有人芽囊原虫寄生并存在黏蛋白,未发现虫体入侵、炎细胞浸润、黏膜糜烂等病理损伤;其余肠段未发现人芽囊原虫寄生。结论采用人芽囊原虫滋养体可成功建立大鼠感染模型。灌服10~5个人芽囊原虫滋养体可成功感染大鼠, 10~8个滋养体的感染效果稳定,各组随着感染人芽囊原虫数量的增加,感染的大鼠数也增加。     

人芽囊原虫对实验感染昆明小鼠肠黏膜超微结构的影响

目的 观察昆明小鼠感染人芽囊原虫后肠黏膜超微结构的改变，探讨人芽囊原虫的致病机制。 方法 20只昆明小鼠随机分为4组：A和D组为接受免疫抑制剂（地塞米松）处理，B组不用地塞米松处理，C组为正常对照组。A组和B组经口感染20⁴人芽囊原虫包囊等，C组和D组灌注等量Locke氏液作为对照。感染6 d后，剖杀各组小鼠取回盲部肠黏膜处理后，扫描和透射电镜下观察其超微结构。 结果 扫描电镜下见A、B两组人芽囊原虫寄生在小鼠回盲部肠腔和肠黏膜表面，个别虫体入侵肠黏膜及肠黏膜皱襞，部分肠黏膜微绒毛呈局灶性破坏；透射电镜下见部分吸收细胞表面微绒毛数目减少，吸收细胞和杯状细胞线粒体水肿，粗面内质网扩张、脱颗粒，间质内淋巴细胞浸润及嗜酸粒细胞增多。A组病变程度比B组重，C组和D组未见异常。 结论 感染人芽囊原虫的昆明小鼠回盲部肠黏膜超微结构有严重的损害，肠黏膜损伤程度受机体免疫状态的影响。     

感染人芽囊原虫昆明鼠肠粘膜的病理改变

目的通过观察昆明鼠感染人芽囊原虫后肠粘膜病理变化,探讨人芽囊原虫的致病机制。方法从腹泻患者粪便中分离培养人芽囊原虫。15只昆明鼠分为3组:A组为接受免疫抑制剂处理组,B组为非免疫抑制剂处理组,经口感染人芽囊原虫1 .6×105个/鼠,观察小鼠感染情况及肠粘膜的病理变化;C组为健康对照组。结果实验鼠人芽囊原虫检出率90 %(9/10) ,虫体主要寄生在小鼠回盲部肠腔和肠粘膜表面,个别虫体侵入肠粘膜上皮,部分肠粘膜充血水肿,腺体增生,粘液分泌增强,可见有炎症细胞浸润,偶见局灶性肠粘膜坏死。病变程度免疫抑制剂处理组比未接种免疫抑制剂处理组重。结论感染人芽囊原虫的昆明鼠回盲部肠粘膜发生病理损害,病变程度受宿主机体免疫状况的影响。     

IL-17及其相关细胞因子在腹型过敏性紫癜患儿外周血和肠黏膜中的变化

背景肠黏膜屏障的损伤、免疫系统紊乱可能是腹型过敏性紫癜(henoch-schonlein purpura, HSP)的重要发病机制之一,然而免疫因子与肠黏膜屏障损伤的关系尚不清楚.目的探讨外周血、肠黏膜白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)及其相关细胞因子的变化在腹型HSP发病机制中的作用,以及了解肠道菌群失调与腹型HSP发病机制的关系.方法选取26例急性期腹型HSP患儿为观察组, 16例健康体检儿童为健康对照组,收集两组儿童外周血、粪便标本;选取20例接受胃镜检查的急性期腹型HSP患儿为病例组,8例胃镜检查无明显黏膜病变的儿童为对照组,收集两组儿童十二指肠黏膜组织.采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中辅助性T细胞-17(Th17)、细胞毒性T细胞-17(Tc17)细胞比例; ELISA检测血浆IL-17、IL-6、IL-23、γ-干扰素(IFN-γ)细胞因子含量; HE染色观察十二指肠黏膜活检组织病理改变;RT-PCR及免疫组化法检测十二指肠黏膜IL-17、IL-6、IL-23、IFN-γ mRNA及蛋白表达水平;细菌16S rDNA法检测肠道粪便中双歧杆菌、大肠杆菌的数量.结果观察组Th17与Tc17细胞比例均较健康对照组显著增高(P0.05).观察组血浆IL-17、IL-6、IL-23水平均较健康对照组显著增高(P0.05).病例组十二指肠黏膜组织病理改变主要为非特异性慢性炎症,部分可见血管炎性病变.病例组十二指肠黏膜IL-17、IL-6、IFN-γ mRNA及蛋白表达水平较对照组显著增高(P 0.05).观察组双歧杆菌数量、双歧杆菌/大肠杆菌比值较健康对照组显著下降(P0.05).结论 IL-17及其相关细胞因子参与了腹型HSP患儿全身及肠黏膜局部的炎症反应,肠道菌群失调可能促进IL-17介导的炎症反应过程.与腹型HSP的发病及肠黏膜屏障损伤有关.     

感染后肠易激综合征模型小鼠肠道组织中Th1/Th2的漂移

目的 观察感染后肠易激综合征(PI-IBS)模型小鼠肠道组织中Th1细胞因子白细胞介素(IL)-12和Th2细胞因子IL-4表达的变化.方法 30只成年雄性NIH小鼠,分为对照组(8只)和模型组(22只).模型组予以旋毛虫幼虫囊胞感染,每周测量小鼠体重,于感染后8周通过腹壁回撤反应(AWR)评分评估小鼠对结直肠扩张的内脏敏感性.感染后8周处死所有小鼠,取空肠、末端回肠、近端结肠和远端结肠行病理切片,HE染色观察肠道炎症情况.应用RT-PCR和Western印迹法检测肠道各部位组织中IL-12和IL-4的mRNA和蛋白表达量.结果 模型组感染后2周体重增长率为-1.08%±1.08%,明显低于正常组(3.09%±1.35%,P<0.05),感染后8周体重变化与对照组差异无统计学意义(P>0.05).模型组感染后2周肠道炎症明显,感染后8周肠道无明显炎症表现.在结直肠扩张压力为30、45和60 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)时,模型组AWR评分均高于正常组(P<0.05);模型组疼痛阈值低于正常对照组(P<0.05).模型组小鼠末端回肠和近端结肠组织中IL-12 mRNA及蛋白表达量均高于对照组(P<0.05);IL-4 mRNA及蛋白在各肠段中的表达均低于对照组(P<0.05).结论 PI-IBS小鼠肠道组织中存在Th1/Th2平衡漂移,为PI-IBS的治疗提供新的思路.     

普拉梭菌对溃疡性结肠炎不典型增生患者Treg细胞水平及IL-23/IL-17轴的影响北大核心CSCD

目的研究普拉梭菌(Faecalibacteriumprausnitzii)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)不典型增生患者调节性T细胞(Treg)水平及白介素23(IL-23)/白介素17(IL-17)轴的影响。方法收集25例UC不典型增生患者和20例健康对照者的新鲜粪便以及UC不典型增生患者病变、正常肠黏膜组织。提取新鲜粪便中的细菌基因组DNA,采用实时荧光定量PCR检测普拉梭菌基因拷贝数,采用免疫组化和Western blot检测组织IL-17和IL-23表达水平,采用流式细胞术检测全血Treg细胞水平,比较不同组受试者普拉梭菌含量以及Treg、IL-23、IL-17的差异性,采用Pearson相关分析普拉梭菌含量与Treg细胞水平及IL-23/IL-17的关系。结果UC不典型增生组患者新鲜粪便普拉梭菌含量以及全血Treg细胞水平均显著高于对照组(均P<0.01);病变肠黏膜组织IL-17和IL-23表达水平均显著高于正常组织(P<0.01)。Pearson分析显示,粪便中普拉梭菌含量与外周血Treg细胞水平呈正相关性(r=0.526,P<0.01),而与组织中的IL-23、IL-17水平呈负相关性(r值分别为-0.474和-0.487,均P<0.01)。结论普拉梭菌可改善UC不典型增生患者结肠组织病理学状态,其机制可能为促进Treg细胞的表达以及抑制IL-23/IL-17轴。     

人芽囊原虫病患者肠黏膜表皮生长因子水平及其临床意义

目的检测人芽囊原虫感染者肠黏膜表皮生长因子(EGF)的水平,探讨EGF与肠黏膜损伤程度的关系。方法感染组为确诊人芽囊原虫感染者44例,对照组为健康体检者40例,均经电子肠镜检查肠黏膜病变情况,并用ELISA法检测肠黏膜组织匀浆EGF水平。结果电子肠镜检查可见人芽囊原虫感染者的肠黏膜有不同程度病变,表现为充血、水肿、糜烂、溃疡等。感染组EGF为(559.60±178.5)pg/ml,对照组为(977.58±215.5)pg/ml,差异有统计学意义(t=9.7136,P<0.01)。且EGF水平随着肠黏膜病变严重程度的增加而逐渐降低。结论人芽囊原虫感染能引起患者肠黏膜的病理改变及肠黏膜EGF水平降低。人芽囊原虫感染所致肠黏膜损伤可能与原虫的侵入及黏膜中EGF的减少有关。EGF在人芽囊原虫病肠道损伤的修复中起重要作用。     

人芽囊原虫病患者肠粘膜损伤及其粘膜细胞因子的测定

目的探讨人芽囊原虫感染引起的肠粘膜病变及其分泌细胞因子IL-8、IL-18、GM-CSF水平变化的病理意义。方法经粪便检查确诊为人芽囊原虫感染的30例患者做电子肠镜检查,取病变粘膜做病理检查。用ELISA法检测人芽囊原虫感染者和30例正常对照者肠粘膜组织匀浆中的IL-8、IL-18和GM-CSF水平。结果电子肠镜检查人芽囊原虫感染者均出现肠道病理改变,病变部位主要在左半结肠、直肠,病变程度与人芽囊原虫感染度呈正相关(rs=0.8538,P<0.001);病理切片检查多数粘膜呈慢性炎症或溃疡病变。患者肠粘膜组织匀浆中IL-8、IL-18、GM-CSF水平均显著高于正常人,且随人芽囊原虫感染度的加重逐渐升高。结论人芽囊原虫感染能引起患者肠粘膜病理改变和细胞因子IL-8、IL-18、GM-CSF水平的升高,且与感染程度相关。人芽囊原虫感染诱导并调节肠上皮细胞的免疫反应,细胞因子可能起重要作用。     

Expression of IL-23 and IL-17 and effect of IL-23 on IL-17 production in ankylosing spondylitis

The objective of this study was to investigate the expression of IL-23 and IL-17 and the influence of IL-23 on IL-17 production in ankylosing spondylitis (AS) patients. IL-23 and IL-17 levels in the serum and supernatants of cultured peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were determined by ELISA. IL-23p19 mRNA expression in PBMCs were analyzed using RT-PCR. The patients with AS at active stage showed elevated levels of IL-23 and IL-17 in the serum and supernatants of cultured PBMCs. A higher expression of IL-23p19 mRNA in PBMCs of AS patients was also observed. A significantly enhanced production of IL-17 in the supernatants of cultured PBMCs was found in the presence of recombinant IL-23 and this effect was more significant in patients with AS. The results suggest that IL-23 and IL-17 may play critical roles in the pathogenesis of AS and IL-23-stimulated production of IL-17 by PBMCs may be responsible for the development of AS.     

白细胞介素10基因转染对小鼠心脏移植排斥反应中细胞因子表达的影响

目的 :探讨白细胞介素 10 (IL 10 )基因转染对小鼠心脏移植排斥反应中IL 12、IL 15、IL 18和IL 4表达的影响。方法 :采用小鼠颈部心脏移植模型 ,随机分为 3组 :对照组、移植组和IL 10组。于术后第 5天取移植心脏 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)法观察IL 12、IL 15、IL 18、IL 4及IL 10的表达情况。结果 :移植组IL 12、IL 15、IL 18表达与对照组比较明显升高 ,IL 10、IL 4表达显著降低 (均P <0 .0 1)。IL 10组IL 12、IL 15、IL 18表达与移植组比较明显降低 ,而IL 4及IL 10表达显著升高 (均P <0 .0 1)。结论 :IL 10基因转染抑制心脏移植排斥反应主要与其抑制IL 12、IL 15、IL 18等Th1型细胞因子的表达 ,促进Th2型细胞因子IL 4的表达 ,使免疫反应由Th1型向Th2型偏移有关     

Prognostic values of IL-6, IL-8, and IL-10 in acute pancreatitis

GOALS: The prognostic importance of interleukin-6 (IL-6), IL-8, and IL-10 in the prediction of acute pancreatitis severity. BACKGROUND: Early assessment of severity in acute pancreatitis could help the patients who are at risk of developing complications. Unfortunately, the used prognostic scoring systems generally are only moderately accurate in assessing disease severity. STUDY: We studied 117 consecutive patients with a diagnosis of acute pancreatitis admitted to our hospital during the past 2 years. Laboratory parameters and cytokines were analyzed from serum taken routinely on admission. Severity criteria were noted for each patient using Ranson, Glasgow, and APACHE II scoring systems. Local and systemic complications, developed during a follow-up period, were classified by Atlanta criteria. RESULTS: IL-6 was the only parameter that statistically significantly predicted complicated acute pancreatitis (P<0.05). IL-8 and IL-10 and the 3 prognostic scoring systems used did not properly assess complicated versus noncomplicated acute pancreatitis. CONCLUSIONS: Our prospective study supported the potential importance of IL-6 in the early assessment of complicated acute pancreatitis, but also suggested that pancreatitis classified as complicated in a large number of patients could not be correctly predicted with the Ranson, Glasgow, and APACHE II scoring systems.     

囊尾蚴病患者IL-4、IL-5和IL-10水平检测

目的探讨白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素5(IL-5)和白细胞介素10(IL-10)在囊尾蚴病发病中的免疫学作用。方法用双抗体夹心(ELISA)法检测囊尾蚴病患者血清中IL-4、IL-5和IL-10水平。结果囊尾蚴病患者血清中IL-4、IL-5和IL-10水平分别为(152.3±31.2)、(256.4±23.3)和(343.9±20.8)ng/L,正常对照组血清中IL-4、IL-5和IL-10水平分别为(75.0±28.5)、(119.5±17.6)和(106.7±19.6)ng/L,2组比较差异均有统计学意义(t值分别为10.6、27.1和48.4,P<0.001)。结论囊尾蚴感染患者Th2型细胞因子表达水平失常,体液免疫功能升高,说明囊尾蚴感染可致宿主免疫功能紊乱。     

Serum IL-4, IL-10 and IL-6 levels in inflammatory arthritis

As the available in vitro and in vivo data suggest that interleukin (IL)-4 and IL-10 have immunosuppressive activity, our hypothesis was that serum IL-4 and IL-10 levels would correlate inversely with parameters of inflammation in patients with inflammatory arthritis. IL-4 was detected in the serum of 12 out of 140 patients with rheumatoid arthritis (RA), which was increased compared to the proportion found with patients with osteoarthritis (OA; P< 0.02). In addition, IL-4 was detected in the serum of 2 of 19 patients with systemic lupus erythematosus (SLE), 2 of 24 patients with psoriatic arthritis and 1 of 5 patients with Behçet's syndrome. No IL-4 was detected in patients with the following conditions: OA (58 patients), gout (17 patients), ankylosing spondylitis (6 patients), Reiter's syndrome (6 patients), polymyalgia rheumatica (6 patients), temporal arteritis (5 patients) and scleroderma (3 patients). No IL-10 was detected in any of the sera tested. We discuss the possible relevance of these results to the regulation of the immune response evident in inflammatory arthritis.     

IL-12及IL-10在桥本甲状腺炎发病机制中作用的研究进展

桥本甲状腺炎是一种常见的慢性自身免疫性疾病,表现为辅助性T细胞(Th)1占优势。 Th1类细胞因子白细胞介素(IL)-12表达增加,在该病的诱发及慢性迁延中起重要作用,Th2类细胞因子IL-10表达的下调也与该病有关,且随病情变化二者表达水平有所不同。因此,这些细胞因子可作为病情变化的监测指标,并且可通过调节细胞因子的表达水平从而使失衡的Th1／Th2细胞趋于平衡。这可能为桥本甲状腺炎的治疗开拓一条新途径。     

A complex of the IL-1 homologue IL-1F7b and IL-18-binding protein reduces IL-18 activity

IL-1F7 was discovered in expressed sequence tag databases as a member of the increasing family of proteins sharing sequence homology to IL-1alpha/beta, IL-1Ra, and IL-18. In the present study using immunohistochemical staining, IL-1F7 was localized in human peripheral monocytic cells, suggesting its role in immune regulation. Recombinant human IL-1F7b was shown to bind to the IL-18Ralpha but without IL-18 agonistic or antagonistic function. Using chemical cross-linking, we observed that, unlike IL-18, IL-1F7b fails to recruit the IL-18Rbeta chain to form a functionally active, ternary complex with the IL-18Ralpha chain. IL-1F7b shares two conserved amino acids with IL-18 (Glu-35 and Lys-124), which participate in the interaction of IL-18 with the IL-18Ralpha chain as well as the IL-18-binding protein (IL-18BP), a secreted protein that neutralizes IL-18 activity. In testing whether IL-1F7b interacts with IL-18BP, we unexpectedly observed that IL-1F7b enhanced the ability of IL-18BP to inhibit IL-18-induced IFNgamma by 25-30% in a human natural killer cell line. This effect was observed primarily at limiting concentrations of IL-18BP (3.12-12.5 ng/ml) and at a 50- to 100-fold molar excess of IL-1F7b. Similar results were obtained by using isolated human peripheral blood mononuclear cells. To study the molecular basis of this effect we performed binding studies of IL-1F7b and IL-18BP. After cross-linking, a high molecular weight complex consisting of IL-1F7b and IL-18BP was observed on SDS/PAGE. We propose that after binding to IL-18BP, IL-1F7b forms a complex with IL-18Rbeta, depriving the beta-chain of forming a functional receptor complex with IL-18Ralpha and thus inhibiting IL-18 activity.