黄芪对老龄小鼠神经细胞凋亡作用的研究

目的 研究黄芪对老龄小鼠脑神经细胞凋亡作用。方法 用TUNEL观察老年小鼠神经细胞凋亡率，并用免疫组织化学法检测相关基因表达，采用原子吸收法测定脑线粒体Ca^2 。以黄芪水煎剂灌胃老龄小鼠30d，观察黄芪对老年小鼠神经细胞凋亡作用的影响。结果 老龄小鼠有典型的凋亡特征，与黄芪比较细胞凋亡率有差异，老年鼠bcl-2表达下调。线粒体钙明显降低。结论 黄芪对老龄小鼠脑神经细胞凋亡有明显的抑制作用。     

白术、附子、肉桂合剂对老年小鼠脑细胞凋亡作用的实验研究

目的　研究白术、附子、肉桂合剂对老年小鼠脑细胞凋亡作用及相关基因表达的影响。方法　用TUNEL法观察老年小鼠神经细胞凋亡率 ,并用免疫组织化学法检测相关基因表达 ,比色法测定脑线粒体细胞色素C(cytC)。以白术、附子、肉桂合剂灌胃老年小鼠 30d ,观察合剂对老年小鼠脑细胞凋亡的影响。结果　老年小鼠有典型的凋亡特征 ,bcl 2表达下调 ,线粒体cytC明显降低。结论　白术、附子、肉桂合剂对老龄小鼠脑神经细胞凋亡有明显的抑制作用。     

黄芪对老年小鼠脑线粒体Mn-SOD、MDA及脑细胞凋亡影响的实验研究

目的 研究黄芪对老年小鼠脑抗氧化系统的影响。方法 用TUNEL法观察老年小鼠神经细胞凋亡率，并检测脑线粒体锰超氧化物歧化奠(Mn-SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。以黄芪水煎剂灌胃老年小鼠30d，观察黄芪对老年小鼠上述指标的影响。结果 老年小鼠Mn-SOD活性降低,MDA含量升高,具有典型的凋亡特征，与老年组比较黄芪组脑线粒体Mn-SOD活性升高，MDA含量降低，凋亡细胞数减少．结论 黄芪通过抗氧化作用抑制老年小鼠脑神经细胞凋亡。     

白术附子肉桂合剂对老年小鼠脑线粒体细胞色素C氧化酶、细胞色素C的影响

目的　从能量代谢及抗氧化系统的角度探讨白术、附子、肉桂合剂 (简称合剂 )对老年小鼠脑作用的机制。方法　检测脑线粒体丙二醛 (MDA)、细胞色素C(CC)含量以及锰 超氧化物歧化酶 (MnSOD)、细胞色素C氧化酶 (CCO)活性 ,以合剂灌喂老年小鼠 ,并检测其对上述指标的影响。结果　老年小鼠脑线粒体MDA、CC含量降低 ,MnSOD和CCO活性增高。结论　合剂具有抗氧化作用 ,并能增加细胞功能。     

白术、附子、肉桂合剂对老年小鼠脑线粒体Ca~(2+)和脑细胞凋亡的影响

目的从Ca2+与细胞凋亡角度探讨白术、附子、肉桂合剂对老年小鼠脑细胞保护作用。方法将昆明种小鼠分为青年组、对照组和合剂组,合剂组按11.6 g/kg灌服白术、附子、肉桂合剂(简称合剂),30 d后检测脑线粒体Ca2+,以及脑细胞凋亡率。结果与青年组比较,对照组脑线粒体Ca2+的含量减低(P0.01);与对照组比较,合剂组脑线粒体Ca2+的含量升高(P0.01),脑凋亡细胞减少(P0.05)。结论白术、附子、肉桂合剂能增加老年小鼠脑线粒体Ca2+含量,降低脑细胞凋亡数,改善脑细胞功能。     

复方健耳剂干预小鼠老年性耳蜗感音神经细胞凋亡径路

目的探讨中药复方健耳剂干预老年性耳蜗感音神经细胞凋亡作用可能径路。方法选择刚断奶C57BL/6J小鼠15只随机分为2月龄对照组、7月龄对照组、7月龄中药组各5只,其中2月龄对照组、7月龄对照组每日饮用自来水直到出生后2、7个月止,7月龄中药组每日饮用中药复方健耳剂直到出生后7个月止。各组期满立刻取出耳蜗,利用实时聚合酶链反应技术,检测耳蜗Fas配体(L)、细胞色素(cyt) C基因、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3表达量。结果 7月龄对照组耳蜗cyt C、Fas L、caspase-3表达量均显著高于7月龄中药组和2月龄对照组(P<0. 05)。结论 C57BL/6J小鼠老年性耳蜗感音神经细胞凋亡可能均通过线粒体或细胞膜途径介导caspase引起程序性细胞死亡。该中药防治老年性聋关键作用机制之一可能与保护线粒体,防止cyt C外泄或稳定细胞膜,抑制Fas L,以阻止其触发caspase引起细胞程序性死亡径路有关。     

Lipofectamine2000转染pSiRNA-STAT3质粒对脑神经胶质瘤C6细胞的作用

目的研究Lipofectamine2000下转染p SiRNA-STAT3质粒对脑神经细胞C6的作用。方法取对数生长期的C6细胞随机分为Mack组、Scramble组和p SiRNA-STAT3组采用MTT法检测C6细胞在不同时间段(6、8、10 h)细胞增殖活性;荧光显微镜观察吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)检测细胞凋亡及线粒体膜电位变化。结果 Lipo2000转染p SiRNA-STAT3质粒在8 h时对C6细胞具有明显的抑制作用;镜下观察p SiRNA-STAT3组可见典型的细胞凋亡形态学特征性改变;线粒体膜电位显著降低。Mock组与Scramble组比较无统计学意义(P0.05);p SiRNA-STAT3组与Scramble组比较差异显著(P0.05)。结论 Lipo2000转染p SiRNA-STAT3质粒可能通过降低线粒体膜电位,抑制肿瘤细胞增殖并促进细胞凋亡,发挥抗肿瘤生长的作用。     

非糖尿病大鼠急性心肌梗死后急性高血糖对心肌细胞线粒体膜电位和细胞色素C的影响

目的 研究急性心肌梗死后急性高血糖对大鼠心肌细胞线粒体膜电位和细胞色素C的影响.方法 结扎40只雄性SD大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌梗死模型后随机分为4组:生理盐水组、高糖1组、高糖2组和胰岛素组,另取10只SD大鼠为假手术组,术中监测血糖水平,实验终点观察各组大鼠细胞凋亡指数、线粒体和胞浆内细胞色素C表达以及线粒体膜电位变化.结果 与假手术组比较,余各组细胞凋亡指数表达均增高,线粒体膜电位均降低;胞浆细胞色素C表达增加而线粒体内细胞色素C表达减少(P<0.05).与高糖2组比较, 其余各组细胞凋亡指数显著减低,线粒体膜电位显著增高,细胞色素C胞浆表达显著减少而线粒体表达显著增加(P<0.05).生理盐水组组、胰岛素组、高糖1组细胞凋亡指数、线粒体膜电位、胞质和线粒体中细胞色素C表达量差异无显著性(P>0.05).结论 急性心肌梗死后急性高血糖可能通过线粒体途径显著促进细胞凋亡,注射胰岛素降低血糖能有效地减少细胞凋亡.     

五味子纳米醇提液对衰老小鼠脑神经细胞DNA损伤的保护作用

目的探讨衰老小鼠脑神经细胞凋亡、DNA损伤和bcl-2基因的表达及五味子醇提取液对上述指标的影响。方法D-半乳糖致衰小鼠为研究对象,观察五味子及其纳米微粒的醇提液对脑组织SOD活性、MDA含量、神经细胞凋亡及DNA损伤,bcl-2基因的表达情况。结果衰老小鼠脑神经细胞MDA含量、DNA损伤率和细胞凋亡率明显增加(P<0.01),SOD活性及bcl-2基因表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。灌服五味子醇提取液可提高SOD活性,降低MDA含量,增强神经细胞DNA损伤的修复能力,减少凋亡细胞数,增加bcl-2基因表达;五味子纳米微粒醇提液疗效优于常规醇提液。结论五味子醇提取液对D-半乳糖致衰小鼠脑神经细胞具有保护作用。     

音乐疗法与运动疗法对老年小鼠海马细胞凋亡影响的比较

目的探究音乐疗法与运动疗法对老年小鼠海马细胞凋亡的影响。方法昆明种10月龄雄性老年小鼠32只随机分为对照组(A组)、大强度运动组(B组)、中等强度运动组(C组)和音乐组(D组)各8只。A组正常饲养,B组和C组每周进行5次不同强度运动干预,D组每周进行5次音乐干预。实验8 w后,采用Tunnel免疫组化法观察小鼠海马组织凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和海马神经凋亡情况。结果与A相比较,C组和D组海马神经元Bcl-2表达显著升高(P0.05,P0.01),D组Bax表达显著降低(P0.05),C组和D组凋亡细胞数显著减少(P0.05,P0.01)。与B组比较,C组和D组海马神经元Bcl-2表达显著升高(P0.05),D组Bax表达显著降低(P0.05),海马凋亡细胞数显著减少(P0.01)。与C组比较,D组海马凋亡细胞数显著减少(P0.05)。结论音乐疗法和中等强度运动疗法有助于减少老年小鼠海马细胞凋亡,提示音乐疗法和中等强度运动疗法对神经退行性疾病有一定的防治作用,音乐疗法效果更好。     

线粒体与细胞凋亡的研究进展

线粒体在细胞凋亡和肿瘤的发生及耐药中有重要作用,线粒体信号转导通路在细胞能量代谢、细胞凋亡启动中的特殊地位,及线粒体DNA(mtDNA)突变与肿瘤耐药的密切关系,使探讨线粒体与肿瘤细胞凋亡的相关性研究具有重要的理论和临床意义。     

CDHS801光动力诱导膀胱癌细胞凋亡的机制探讨

目的探讨光敏剂CDHS801光动力诱导膀胱癌细胞凋亡的机制。方法将膀胱癌T24细胞分成A、B、C、D组。A组为空白对照组;B组与CDHS801避光孵育;C组仅予激光照射;D组与CDHS801共同孵育后接受激光照射。倒置相差显微镜和电镜下观察各组细胞凋亡情况,激光共聚焦显微镜检测JC-1荧光探针标记的线粒体膜电位,Western blot法检测细胞质中的细胞色素C。结果 D组细胞变小变圆,染色质浓缩,染色质凝集边集、有新月体形成;其余三组细胞正常。细胞JC-1探针检测显示D组发出绿色荧光,其余三组细胞发出橙红色荧光。Westernblot结果显示仅D组细胞质中检出了细胞色素C。结论 CDHS801光动力诱导膀胱癌T24细胞凋亡的机制是治疗后线粒体膜电位下降,线粒体通透性增加,细胞色素C由线粒体移位到胞质中,启动了线粒体途径的细胞快速凋亡。     

线粒体与缺氧缺血性脑细胞凋亡

凋亡是一种受到严格调控的细胞死亡形式。近年来的研究认为，线粒体在调控细胞凋亡中起关键作用：一方面，多种促细胞凋亡级联转导信号整合于由线粒体通透性转变激活的通路；另一方面，线粒体膜间隙内存储着大量的促凋亡分子，如细胞色素c、凋亡诱导因子和各种半胱天冬酶原等，它们在凋亡发生时释放到脑质中，引起凋亡级联反应。此外，线粒体功能障碍导致的能量产量变化可直接诱导神经元凋亡或坏死。     

钙拮抗剂改善铁诱导的小鼠神经干细胞系C17.2细胞凋亡

背景脑中铁超负荷诱导氧化损伤见于出血性脑卒中和神经退行性障碍,神经干细胞是治疗这种障碍的充满前景的干预策略。铁超负荷对干细胞影响及探寻保护策略是亟待解决的问题。钙通道扮演铁超负荷时进入神经细胞的替代通道,推测钙拮抗剂可改善铁超负荷对神经干细胞的毒性作用。目的探讨铁超负荷对小鼠神经干细胞系C17.2细胞的细胞活性、凋亡及细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的影响;研究钙拮抗剂对铁诱导C17.2细胞损伤是否具有保护作用。方法以小鼠神经干细胞系C17.2细胞为细胞模型。XTT比色法检测细胞活性;Annexin V/碘化丙啶(PI),活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3及线粒体膜电位(JC-1)流式细胞仪检测细胞凋亡;抗磷酸化-ERK1/2流式细胞仪检测ERK磷酸化水平。结果铁超负荷呈浓度(0.15~1.80mmol/L)及时间(24~48h)依赖趋势减少C17.2细胞活性,诱导细胞凋亡,caspase-3活化及线粒体损伤;钙拮抗剂(氟桂利嗪或尼莫地平)可以显著改善0.60mmol/L三氯化铁超负荷诱导的C17.2细胞早期凋亡细胞百分数及总死亡细胞百分数,减少caspase-3活化及线粒体损伤,增加细胞活性(均P0.05)。0.60mmol/L超负荷铁可以显著诱导C17.2细胞ERK磷酸化,钙拮抗剂(氟桂利嗪或尼莫地平)显著抑制铁超负荷所诱导的C17.2细胞ERK磷酸化。结论铁超负荷可诱导小鼠神经干细胞系C17.2细胞ERK磷酸化,导致线粒体介导的凋亡。钙拮抗剂可抑制上述过程,改善铁诱导的C17.2细胞凋亡。     

线粒体DNA与细胞凋亡相关性研究进展

细胞凋亡亦称程序性细胞死亡是一种重要的生命现象,不仅出现在生理情况下,更与肿瘤、自身免疫性疾病及退行性神经病变等多种疾病密切相关。细胞凋亡过程中许多重要事件与线粒体有关,例如半胱氨酸蛋白酶家族激活剂的释放(如细胞色素C)、电子传递链的变化、线粒体跨膜电位的消失、异常的细胞氧化-还原反应及促进凋亡或抑制凋亡的bcl- 2家族的参与等。而线粒体又受核DNA( n DNA)和线粒体DNA( mt DNA)的双重控制,其中mt DNA控制线粒体的呼吸作用等基本特征。因此,近年来mt DNA与细胞凋亡之间的相关性研究日益受到重视,现将其研究进展综…     

乌头碱中毒后脑神经细胞凋亡的实验研究

目的观察乌头碱中毒后不同时间段内脑损害程度，以期为法医学鉴定提供形态学依据。方法用35只Wistar大鼠制作乌头碱中毒模型，通过HE染色及凋亡细胞检测技术对乌头碱中毒后大鼠脑的病理变化进行系统研究，并将研究结果进行计算机病理学图像分析。结果大鼠在染毒后的不同时间段内，脑神经细胞凋亡数均高于正常对照组（P〈0．05），且细胞凋亡数在染毒后不同时间段亦不相同（P均〈0．05）。结论乌头碱中毒在临床症状不明显及毒物分析难以检测的情况下，应用凋亡细胞检测技术可成功检测出脑神经细胞病理学变化。     

老年小鼠先天性潜伏感染人巨细胞病毒致大脑皮质细胞凋亡的研究

目的 观察先天性人巨细胞病毒（HCMV）潜伏感染至老年，对小鼠大脑皮质细胞凋亡的影响。方法 选择鼠龄为24个月HCMV先天性感染中枢神经系统模型小鼠。分为3组，每组6只，分别为：HCMV先天性潜伏感染老年鼠组（潜伏感染组）、HCMV先天性潜伏再激活感染老年鼠组（潜伏再激活感染组）和健康对照老年鼠组（健康对照组）。采用透射电镜、TUNEL法和流式细胞仪检测分析各组小鼠大脑皮质细胞凋亡情况。结果 电镜检测发现，同健康对照组比较，潜伏感染组和潜伏再激活感染组部分神经元细胞核染色体固缩、核物质碎片化、凋亡小体形成等特征性凋亡改变。TUNEL法和流式细胞仪检测发现健康对照组凋亡细胞最少，潜伏感染组凋亡细胞比率较健康对照组升高，而潜伏再激活感染组凋亡细胞最多；t检验潜伏感染组、潜伏再激活感染组与健康对照组凋亡率比较，差异均有统计学意义（均为P〈0．01）。结论 先天性感染HCMV后长期潜伏在小鼠的大脑皮质，至老年后可诱导细胞凋亡。     

人颗粒溶素对肝癌细胞SMMC-7721凋亡、线粒体跨膜电位及细胞色素C释放的影响

目的 构建携带人颗粒溶素(GLS)的真核表达质粒pBudCE4.1/GLS并研究其表达后对肝癌细胞SMMC-7721凋亡、线粒体跨膜电位与细胞色素C转位的影响. 方法 将RT PCR扩增出的人GLS编码基因克隆入pBudCE4.1载体中构建真核表达质粒pBudCE4.1/GLS并将其转染肝癌细胞株SMMC-7721,用RT-PCR、免疫细胞化学检测GLS的表达;用Hoechst法及电镜检测细胞的凋亡状况;用荧光染料MitocaptureTM检测线粒体跨膜电位,用Western blot法检测细胞色素C从线粒体的释放. 结果 成功构建了携带GLS的真核表达质粒pBudCE4.1/GLS,在转染的肝癌细胞株SMMC-7721中,从转录和翻译水半都检测到了目标基因GLS的表达产物;重组质粒转染SMMC-7721细胞后,细胞核染色质固缩,旱致密浓染的凋亡状态,线粒体膜跨电位下降并伴随有细胞色素C从线粒体至细胞质的释放. 结论携带人GLS的真核表达质粒在肝癌细胞SMMC-7721中表达后有致细胞凋亡作用,引起线粒体跨膜电位下降与细胞色素C的释放可能是其诱导肿瘤细胞凋亡的途径之一.     

黄芩甙对肝癌细胞BEL-7402线粒体膜电位、细胞内Ca2+和Cyt C的影响

目的:探讨线粒体损伤在黄芩甙诱导肝癌细胞凋亡中的作用及可能的机制.方法:应用细胞培养技术培养肝癌细胞BEL-7402,透射电镜观察线粒体的变化;应用流式细胞仪检测细胞凋亡百分率及线粒体膜 电位、细胞内Ca2 的改变.荧光发光法检测细胞色素(cytochrome C,Cyt C)含量,Bcl-2蛋白表达和流式细胞仪测定caspase-3活性.结果:黄芩甙诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡呈剂量依赖关系,线粒体结构出现明显改变:肝癌细胞线粒体膜电位降低,6 h、24 h、48 h分别为85.49±2.17、82.59±2.18、28.45±2.39;细胞内ca2 和cyt C的释放增加,Bcl-2蛋白表达下降和caspase-3活性增加.在6 h、24 h、48h时细胞线粒体膜电位,细胞内Ca2 和Cyt C的释放分别为(6 h:85.49±2.17、19.56±2.09、35.36±3.21:24 h:82.59±2.18、14.76±1.03、44.57±5.56:48 h:28.45±2.39、88.79±4.32、78.63±7.651.结论:线粒体损伤在黄芩甙诱导肝癌细胞凋亡中起重要作用,其机制可能为抑制肝癌细胞Bcl-2蛋白表达,促进caspase-3活性增加,使细胞内Ca2 增加,激发线粒体膜通透性转运孔开放,降低线粒体跨膜电位,促进Cyt C的释放.     

五味子纳米微粒水提液对半乳糖致衰老小鼠脑神经细胞保护作用的研究

目的 探讨五味子对衰老小鼠脑神经细胞的保护作用及其机制。方法 观察五味子及其纳米微粒水提液对D-半乳糖致衰小鼠脑组织SOD（超氧化物歧化酶）活性、MDA（丙二醛）含量；神经细胞凋亡及DNA损伤，凋亡相关基因bcl-2的表达情况。结果 衰老小鼠脑神经细胞MDA含量、DNA损伤率和细胞凋亡率明显增加（P〈0.01），SOD活性及bcl-2基因表达明显降低（P〈0.05，P〈0.01）。灌服五味子可提高SOD活性，降低MDA含量，增强神经细胞DNA损伤的修复能力，减少凋亡细胞数，增加bcl-2基因表达。且五味子纳米微粒水提液疗效优于常规剂型。结论 五味子对半乳糖致衰小鼠脑神经细胞具有保护作用。