20(S)-原人参二醇对肝癌生长的抑制作用及对癌细胞凋亡的影响

目的探讨原人参二醇（Ppd）抑制肿瘤生长和促进肿瘤细胞凋亡作用及其机制。方法建立肝癌动物模型，将实验动物分为五组；对照组、阳性药组、Ppd低剂量组（Ppd25mg／kg）、Ppd中剂量组（Ppd50mg／kg）、Ppd高剂量组（Ppd100mg／kg），2W后处死动物测定肿瘤的重量和体积并做组织切片进行原位末端标记染色（TUNEL）。结果Ppd给药组肿瘤生长被抑制，其肿瘤体积、重量均较对照组减小（P〈0．01），TUNEL结果显示Ppd100ms／kg给药组细胞凋亡数量与对照组之间存在显著性差异（P〈0．01）。绪论Ppd具有抑制肿瘤细胞的增殖的作用，其作用机制的可能是促进肿瘤细胞的凋亡。     

20(s)-原人参二醇对肝癌血管内皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子蛋白表达的影响

目的 探讨20(s)-原人参二醇(Ppd)对肝癌血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响.方法 建立肝癌动物模型,将实验动物分为五组,每组10只,分对照组、环磷酰胺组(CTX)、20(s)-原人参二醇25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg给药组,给药二周后处死动物.称肿瘤重量及肿瘤体积,制成组织切片,以备免疫组化应用.结果 与对照组相比,给药组VEGF、bFGF表达受到抑制,肿瘤的重量及体积明显减轻,组间有显著性差异(P＜0.01).结论 提示Ppd抑制了VEGF、bFGF蛋白的表达,抑制了肿瘤生长.     

20(S)-原人参二醇对肝癌间质血管密度和肿瘤细胞增殖活性的影响

探讨20(S)-原人参二醇对肝癌间质微血管密度和肿瘤细胞增殖活性的影响。建立肝癌动物模型,将实验动物分为五组,每组10只,分对照组、环磷酰胺组、20(S)-原人参二醇25mg/kg、50mg/kg、100mg／kg给药组,给药二周后处死动物,称肿瘤重量及肿瘤体积,制成组织切片,以备免疫组化应用。与对照组相比,给药组肿瘤间质血管密度低,其细胞增殖活性亦低,肿瘤的重量及体积明显减少,组间有显著性差异(P<0．01)。提示20(S)-原人参二醇抑制了肝癌间质血管密度及肿瘤细胞增殖活性,从而抑制了肿瘤生长。     

20(S)-原人参二醇对胃癌血管形成的抑制作用

目的探讨20(S)-原人参二醇(Ppd)对胃癌血管密度、血管内皮生长因子(VEGF)及其基因表达的抑制作用。方法建立胃癌动物模型,将实验动物分为5组:对照组、环磷酰胺组、Ppd 25、50、100 mg/kg给药组,每组8只,给药4 w后处死动物,制成组织切片以备免疫组化及原位杂交。结果对照组肿瘤间质血管密度增高,VEGF及其mRNA呈高表达,且VEGF蛋白及mRNA的表达同肿瘤间质血管密度呈正相关,而Ppd给药组各指标均降低,且呈剂量依赖性,较对照组存在显著差异(P0.01),且50 mg/kg以上剂量组的抑制作用较环磷酰胺组强(P0.01)。结论 Ppd能够抑制肿瘤组织中VEGF及其mRNA的表达,而抑制肿瘤血管的形成。     

20(s)-原人参二醇、人参皂苷Rh_2及人参皂苷Rg_3抗肿瘤作用的对比

目的对比20(s)-原人参二醇(Ppd)与人参皂苷Rh2(Rh2)及人参皂苷Rg3(Rg3)的抗肿瘤作用。方法建立小鼠肝癌H22、Lewis肺癌及黑色素瘤B16三种移植瘤动物模型,将小鼠随机分成11组,对照组给予0.5%羧甲基纤维素钠,阳性药组给予环磷酰胺(CTX)30 mg/kg,Ppd、Rh2及Rg3三个剂量组均给予相应受试药25、50、100 mg/kg。阳性药组隔日腹腔注射给药1次,其余各组均每日灌胃给药1次,给药容积为20 ml/kg,连续10 d。每天记录小鼠体重,末次药后称取小鼠体重及肿瘤重量并计算肿瘤抑瘤率。结果 Ppd、Rh2及Rg3在25、50、100 mg/kg剂量下,对肝癌H22、Lewis肺癌及黑色素瘤B16均有一定的抑瘤作用,仅Ppd在50、100 mg/kg剂量下对肝癌H22、Lewis肺癌及黑色素瘤B16抑制效果明显,其抑瘤率超过40%,Rh2与Rg3的抑瘤率无明显差别。结论 Ppd、Rh2及Rg3对小鼠三种移植瘤均具有抗肿瘤活性,以Ppd的抗肿瘤作用最明显,Rh2与Rg3之间无明显差别。     

20(S)-原人参二醇抑制肝癌血管内皮生长因子及其基因的表达

目的 探讨20（S）-原人参二醇（Ppd）对肝癌血管内皮生长因子（VEGF）及其基因表达的抑制作用。方法 建立肝癌动物模型，将实验动物分为5组：对照组、环磷酰胺组、Ppd25、50、100mg／kg给药组，每组10只，给药2w后处死动物，制成组织切片以备免疫组化及原位杂交。结果 对照组肿瘤间质血管密度增高，VEGF及其mRNA呈高表达，且VEGF蛋白及mRNA的表达同肿瘤间质血管密度呈正相关，而Ppd给药组各指标均降低，且呈剂量依赖性，较对照组存在显著差异（P〈0．01），且50mg／kg以上剂量的抑制作用较环磷酰胺强（P〈0．01）。结论 Ppd能够抑制肿瘤组织中VEGF及其mRNA的表达，而抑制肿瘤血管的形成。     

Endostatin转基因双歧杆菌口服剂对胃癌生长影响的实验研究

目的探讨Endostatin转基因双歧杆菌口服冻干粉剂(ETB-2)对裸鼠人胃癌模型的抑瘤效应,并探讨其抑瘤机制.方法人胃癌细胞株MKN-45接种于BALB/L裸鼠建立动物模型;裸鼠随机分为6组,每组6只,采取灌胃给药.接种后根据肿瘤体积绘制肿瘤生长曲线;给药满4周后处死动物并计算抑瘤率.用免疫组化方法检测微血管密度(MVD)和增殖细胞核抗原(PCNA);用DNA原位末端标记(TUNEL)方法检测细胞凋亡.结果对照组抑瘤率为0,MVD为5.83+0.83,细胞凋亡率为1.3%±0.1%;氟铁龙组抑瘤率为41.1%,MVD为5.70±0.67,细胞凋亡率为2.7%+0.2%.ETB-2高剂量次日给药组抑瘤率为47.5%,MVD为3.90±0.67,细胞凋亡率为13.9%±0.7%,2周给药组抑瘤率为43.2%,MVD为4.28±0.49,细胞凋亡率为13.9%+0.6%;低剂量次日给药组抑瘤率为36.0%,MVD为4.58±0.31,细胞凋亡率为7.7%±1.1%.结论ETB-2可显著抑制胃癌生长,其机制可能是抑制肿瘤内微血管形成,使肿瘤细胞增殖下降,诱导肿瘤细胞凋亡,促进肿瘤细胞坏死,其作用具有量效关系.     

复方莪术油微球肝动脉栓塞治疗大鼠移植性肝癌的机制

目的研究复方莪术油微球(CCAO-MS)肝动脉栓塞治疗大鼠移植性肝癌的机制。方法制备45只大鼠移植性肝癌模型,随机分为生理盐水组、空白微球组、复方莪术油微球组,每组15只。经肝动脉插管分别灌注0.2⁰.3 ml生理盐水、空白微球(B-MS)10 mg/kg、CCAO-MS10 mg/kg。末端脱氧核苷酸转移酶介导化DUTP缺口末端标技技术(TUNEL)法检测肝癌大鼠肝肿瘤细胞凋亡情况,免疫组织化学法检测肿瘤组织表达增殖核抗原(PCNA)和半胱氨酸天门氨酸蛋白酶(Caspase)-3的影响。结果 CCAO-MS经肝动脉栓塞给药可明显促进肝肿瘤细胞的凋亡,下调肿瘤组织PCNA的表达,上调肿瘤组织Caspase-3表达。结论 CCAO-Ms经肝动脉栓塞对大鼠移植性肝癌的治疗作用与下调PCNA的表达,上调Caspase-3的表达,从而抑制肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤组织的凋亡有关。     

苦参总碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的利用心肌缺血再灌注损伤致大鼠心肌细胞凋亡模型研究苦参总碱(TASF)对心肌细胞的保护作用。方法 80只雄性大鼠随机分组,连续给药7 d,末次给药1 h后除空白组动物外,其余动物结扎左冠脉前降支30 min,再灌注6 h,通过血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门天冬氨酸氨基转移酶(AST),心肌病理学、电镜、TUNEL染色及Bcl-2、Bax蛋白表达的检测对TASF保护心肌的作用进行评估。结果与模型组相比,80 mg/kg TASF能够有效降低血清中CK、LDH、AST的含量(P<0.05),40 mg/kg TASF能够有效降低血清中LDH、AST的含量(P<0.05);80 mg/kg和40 mg/kg TASF能够减少缺血再灌注导致的心肌细胞结构的破坏;80 mg/kg TASF可以减少缺血再灌注导致的心肌细胞凋亡(P<0.05),其机制可能与增加Bcl-2蛋白的表达,降低Bax蛋白表达有关。结论 TASF对心肌缺血再灌注引起的心肌细胞损伤具有保护作用,其机制可能为调控Bcl-2、Bax基因表达抑制心肌细胞凋亡。     

环氧合酶-2抑制剂抗胃癌作用的实验观察及其抑制血管生成的研究

目的观察环氧合酶2抑制剂在动物体内的抗胃癌生长作用并探讨其与胃癌血管生成的关系,研究其作用机制。方法建立人胃癌细胞SGC7901裸鼠种植瘤模型,随机分成三组,给予非甾体消炎药舒林酸和选择性环氧合酶2抑制剂塞来昔布干预;用免疫组化法检测细胞增殖(PCNA的表达)和微血管密度(VWF和CD34的表达),用TUNEL法检测凋亡。结果舒林酸和塞来昔布均显著抑制胃癌种植瘤的生长,两组肿瘤体积从第2周开始即显著小于对照组,对照组为(608.9±288.8)mm3,舒林酸组为(351.5±227.0)mm3,塞来昔布组为(108.3±105.4)mm3(P<0.01);细胞增殖指数对照组为17.5±8.3,舒林酸组为13.6±7.4,塞来昔布组为9.8±5.0,处理组明显低于对照组(P<0.05);三组凋亡指数分别为2.5±1.6、4.8±5.3和5.6±3.5,对照组低于处理组(P<0.05);微血管密度分别为5.6±3.0、2.8±2.2和2.5±2.3,处理组较对照组降低(P<0.01),但两处理组之间各项比较均未达显著差异。结论环氧合酶2抑制剂在体内具有显著抗胃癌效应,并可能与抑制血管生成有关,环氧合酶2抑制剂的抗癌机制可能为增加凋亡、抑制增殖及减少血管生成。     

破壁灵芝孢子粉对裸鼠移植性人乳腺癌的抑制作用

目的观察破壁灵芝孢子(GLS)粉对人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤生长增殖作用和TMSG-1 m RNA表达的影响。方法建立人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤模型,把30只成瘤裸鼠随机分为五组,每组6只,分别为不同剂量破壁GLS组(1.5、3、4.5 g/kg)、磷酰胺(CTX)模型组、生理盐水组。用药4 w后观察破壁灵芝孢子粉对裸鼠移植瘤体积、瘤重的影响,并计算抑制率;用流式细胞术(FCM)测定细胞增殖周期和细胞凋亡水平;用半定量RT-PCR检测肿瘤组织中TMSG-1 m RNA的表达。结果与对照组比较,中剂量和高剂量破壁GLS组(3、4.5 g/kg)、模型组的移植瘤重瘤体积与对照组比较显著减少(P<0.05),中剂量、高剂量破壁GLS组和模型组的肿瘤抑制率分别为36.7%、44.5%、54.2%;用药4 w后,癌细胞S期和G2/M期细胞所占比例下降,相应的G0/G1期细胞增加,药物抑制了细胞的正常增殖,凋亡实验显示药物组细胞凋亡率增加,药物组总体凋亡率高于对照组(P<0.05或P<0.01);RT-PCR结果,破壁GLS组(1.5、3、4.5 g/kg)可使TMSG-1 m RNA表达明显上调,与生理盐水组比较显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论破壁GLS粉具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用,同时上调MCF-7细胞裸鼠移植瘤组织中TMSG-1 m RNA的表达发挥潜在的抗肿瘤细胞转移的作用。     

三氧化二砷对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的试用三氧化二砷(As2O3)以提高胰腺癌的疗效。方法分别比较对照组和As2O3组裸鼠原位胰腺癌模型肿瘤体积、细胞增殖指数和细胞凋亡率。结果As2O3组肿瘤体积较对照组缩小31.2%。胰腺癌细胞增殖指数对照组为(21.05±2.18)%,As2O3组为(10.03±2.86)%(P<0.05);胰腺癌细胞凋亡率对照组(4.7±1.4)%,As2O3组(13.4±1.8)%(P<0.05)。结论As2O3体内能显著抑制胰腺癌的生长,其机制与抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡有关。     

雷公藤内酯醇抑制胰腺癌细胞生长及血管生成的实验研究

目的 探讨雷公藤内酯醇(TL)对胰腺癌细胞生长及肿瘤新生血管生成的抑制作用.方法 采用CCK-8试剂盒检测TL对胰腺癌SW1990细胞的生长抑制作用;采用TUNEL法检测TL对细胞凋亡的诱导作用;观察尾静脉注射TL对裸鼠移植瘤生长抑制作用和对瘤组织VEGF表达、微血管密度(MVD)的影响.结果 TL呈浓度和时间依赖性抑制SW1990细胞增殖,160 mg/ml的TL干预SW1990细胞24 h,细胞抑制率达50.6%,细胞凋亡率从对照组的9.6%升高到45.1%(P<0.01);TL0.5 mg/kg体重瘤内注射对移植瘤的抑瘤率达89.9%,瘤组织VEGF表达减少,MVD从36.25±8.64减少到9.87±3.34(P<0.01).结论 TL可显著抑制胰腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡;通过抑制肿瘤新生血管生成可抑制裸鼠SW1990细胞移植瘤的生长.     

环磷酰胺对胶质瘤体内生长的影响

目的探讨环磷酰胺(CTX)对胶质瘤体内生长的影响及其机制。方法建立Wistar大鼠胶质瘤模型,将其分为对照组(生理盐水腹腔注射)和给药组(CTX腹腔注射25 mg/kg),观察大鼠一般状态、体重的变化,检测肿瘤体积和重量变化,计算抑瘤率。Western印迹检测肿瘤组织中细胞周期蛋白(cyclin)D1蛋白的表达。结果给药组大鼠的一般状态较好,大鼠体重恢复;给药组肿瘤的体积缩小、重量降低,给药10 d时与对照组比较,有统计学意义(P0.05),计算其体积抑瘤率为38.59%。Western印迹显示,给药组表达cyclin D1蛋白减少,与对照组比较,有统计学意义(P0.05)。结论 CTX通过调控细胞周期蛋白cyclin D1来抑制胶质瘤的体内生长。     

As2O3对兔Vx2软组织肿瘤VEGF表达和肿瘤细胞凋亡的影响

目的 探讨不同剂量As2O3对Vx2软组织肿瘤细胞凋亡及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响及As2O3抗肿瘤的作用机制.方法 32只大白兔皮下软组织内肿瘤种植2 w后,随机分为实验组和对照组.实验组根据As2O3用药量不同分为1、2、4 mg·kg-1·d-1 3个亚组,每组8只,对照组注射生理盐水,连续给药7 d,停药后继续观察3 w后处死大白兔,采用MRI测量治疗前后肿瘤最大直径,分别于给药前及处死前行肝肾功能检查,检测As2O3对肝肾毒性作用;采用原位末端标记法(TUNEL法)检测肿瘤细胞的凋亡指数及VEGF染色法观测As2O3抑制肿瘤细胞VEGF表达的程度.结果 MRI显示对照组肿瘤随观察时间延长呈持续增大;实验组随着用药剂量增加,肿瘤增长缓慢(与对照组相比P＜0.05);1、2 mg·kg-1·d-1亚组与4 mg·kg-1·d-1亚组组间差异较明显(P＜0.05),1 mg·kg-1·d-1与2 mg·kg-1·d-1亚组组间差异不明显(P＞0.05).给药前及处死前行耳缘静脉取血,测定ALT、AST、BUN、Cr水平,给药前各组间差异不明显(P＞0.05),处死前基本恢复正常,组间差异不显著(P＞0.05).HE染色显示对照组肿瘤周围组织浸润明显,实验组周围组织浸润不明显;TUNEL法对照组肿瘤坏死周围细胞凋亡与治疗组比较差异显著(P＜0.05),1、2 mg·kg-1·d-1与4 mg·kg-1·d-1亚组组间差异较明显(P＜0.05),1 mg·kg-1·d-1与2 mg·kg-1·d-1亚组组间差异不明显(P＞0.05).VEGF染色法显示肿瘤细胞内VEGF表达随药物浓度增加而减少,与对照组相比差异显著(P＜0.05).结论 经腹腔注射As2O3能够控制Vx2软组织肿瘤增长,同时诱导肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管生成,并与剂量相关,其对肝肾功能毒性作用不明显.     

术前腹腔化疗对进展期胃癌细胞增值及凋亡的影响

目的探讨术前腹腔化疗对进展期胃癌细胞凋亡及增值的影响。方法40例进展期胃癌病人随机分为两组,每组20例。实验组手术前行腹腔化疗。两组手术标本检测增殖细胞核抗原和细胞凋亡,分别计算肿瘤细胞增殖指数和凋亡指数。结果腹腔化疗-手术组肿瘤细胞增殖指数为(43.5±3.6%),明显低于对照组的(57.8±5.4%),P<0.01,腹腔化疗-手术组肿瘤细胞凋亡指数为(13.2±3.8%),与对照组(5.7±2.6%)比,差异极显著(P<0.01)。结论进展期胃癌术前化疗可以抑制肿瘤细胞增殖,增加肿瘤细胞凋亡,控制肿瘤生长。腹腔化疗在临床应用安全有效。     

血管抑素和内皮抑素抑制肿瘤血管新生的动物实验研究

目的　建立小鼠背部开窗模型 ,在直视下观察肿瘤生长情况及血管抑素 (AS)和内皮抑素 (ES)对肿瘤的影响。方法　免疫组化测定血管内皮细胞生长因子 (VEGF)、细胞表面磷酸化糖蛋白 (CD34 )的表达 ,了解肿瘤血管生长的情况。结果　本实验肿瘤细胞移植 1 3d后 ,对照组所有小鼠移植肿瘤均生长状态良好 ,肿瘤的生长已使小鼠的行动发生困难 ;而给药组肿瘤小 ,行动不受限制 ,也未见到药物副作用的表现。给药组肿瘤的生长被明显抑制 ,其肿瘤体积小 ,重量明显减轻 .。高剂量给药组与对照组间有显著性差异 (P<0 .0 1 ) ;而且抑制肿瘤生长的作用亦明显高于低剂量对照组 (P<0 .0 1 ) ;高剂量给药组肿瘤中心发生坏死也比较明显。结论　成功建立开窗可视模型 AS、ES抑制肿瘤血管新生起重要作用。     

RNAi沉默survivin基因对胰腺癌细胞增殖、凋亡和周期的影响

目的 应用RNAi技术沉默胰腺癌细胞株中survivin基因对肿瘤细胞凋亡、细胞周期和增殖的变化.方法 靶向survivin的RNAi载体转染胰腺癌细胞,Western印迹检测基因沉默效果,MTT法和流式细胞术检测细胞增殖、凋亡及细胞周期.结果 survivin基因沉默效率可达85%;MTT检测显示,干扰组survivin沉默细胞增殖抑制与非特异性质粒对照组相比显著增高(P<0.01).流式细胞术显示,干扰组细胞凋亡百分率显著高于非特异性质粒对照组(P<0.01);G_2/M期显著高于非特异性质粒对照组(P<0.01或P<0.05),而S期则显著降低(P<0.05).结论 survivin基因沉默可引起胰腺癌细胞周期阻滞,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖.     

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对裸鼠人食管鳞癌移植瘤的抑制作用

目的 研究乙酰肝素酶(Hpa)抑制剂反义脱氧寡核苷酸(ASODN)对食管癌裸鼠移植瘤的体内抑瘤作用.方法采用低分化食管鳞癌细胞TE-13接种裸鼠,构建食管癌皮下侵袭模型,随机分为1mg/kg ASODN组(A组)、2mg/kg ASODN组(B组)和生理盐水(NS,2ml/kg)对照组(C组),每组5只,分别在肿瘤接种区皮下注射相应剂量的ASODN和NS.观察肿瘤体积和肿瘤微血管密度(MVD),采用RT-PCR和免疫组化染色检测移植瘤中Hpa的表达.结果接种后第6天,所有裸鼠在接种部位均长出肿瘤.接种后第21天,A、B组肿瘤体积较C组明显缩小(P<0.01),A、B组抑瘤率分别为50.27%和49.67%.A、B组MVD较c组明显降低(P<0.01).A、B、C组Hpa mRNA阳性表达分别为0.43±0.01、0.45±0.12、1.33±0.05,Hpa蛋白阳性表达分别为45.60±4.57、43.40±7.80、121.20±11.90.A、B组Hpa mRNA、蛋白表达均较C组降低(P<0.01).结论应用ASODN可以抑制肿瘤生长,其作用机制可能在于抑制肿瘤Hpa mRNA、蛋白合成,从而抑制肿瘤血管新生.2mg/kg与1mg/kg Hpa ASODN比较,未能显示更强的抑瘤效果.     

黄芩茎叶总黄酮对阿尔茨海默病大鼠海马神经元Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨黄芩茎叶总黄酮(SSTF)对大鼠海马注射淀粉样蛋白Aβ25~35所致神经元Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。方法 40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、SSTF 50 mg/kg、100 mg/kg组,每组10只。模型组、SSTF组大鼠于灌胃第8天双侧海马注射Aβ10μg,对照组大鼠海马注射生理盐水,大鼠于灌胃20 d后处死。采用TUNEL法观察大鼠海马神经元凋亡;免疫组化、Western印迹检测海马组织中Bax、Bcl-2的表达,采用光密度值(IOD)表示实验结果。结果模型组大鼠海马细胞凋亡IOD较对照组明显升高(P0.01),50、100 mg/kg给药组IOD较模型组明显降低(P0.01);免疫组化及Western印迹结果显示模型组Bax表达较对照组明显升高(P0.01),SSTF 50、100 mg/kg组Bax表达较模型组明显降低(P0.01);模型组Bcl-2较对照组明显降低(P0.01),SSTF 50、100 mg/kg组Bcl-2表达较模型组明显升高(P0.01)。结论大鼠海马注射Aβ25~35可引起海马神经元凋亡,其机制可能与Aβ上调凋亡基因Bax表达、降低抗凋亡基因Bcl-2表达有关。SSTF可减轻Aβ引起的神经元凋亡,其机制可能与其调控Bax、Bcl-2表达有关。