川芎嗪、顺铂对人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响及机制探讨

目的观察川芎嗪、顺铂对小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法将对数生长期的NCI-H446细胞分为A、B、C、D组。A组常规培养,B组加入川芎嗪培养液100μg/ml,C组加入顺铂培养液2μg/ml,D组加入上述浓度的川芎嗪及顺铂培养液,均继续培养72 h。流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,Westernblot法检测各组细胞中的Bcl-2、p53。结果 A组NCI-H446细胞凋亡率为5.23%±1.01%、Bcl-2蛋白为0.87±0.003 5、p53蛋白为0.19±0.002 3,B组分别为16.37%±1.23%、0.58±0.004 8、0.31±0.001 4,C组分别为19.2%±1.51%、0.32±0.003 9、0.46±0.002 5,D组分别为21.2%±1.79%、0.23±0.001 9、0.62±0.002 7。B、C、D组与A组相比,P均〈0.05;D组与B、C组相比,P均〈0.05。结论川芎嗪、顺铂联合应用可诱导小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡,可能与其降低Bcl-2表达水平、升高p53表达水平有关。     

Survivin T34A对乳腺癌细胞株4T1增殖和凋亡的影响

目的 观察Survivin基因第34位苏氨酸（Thr）突变成丙氨酸（Ala） 形成的显性负突变体Survivin T34A的抗肿瘤作用及机制.方法 将小鼠高转移性乳腺癌细胞株4T1培养至对数生长期后随机分为A、B、C、D四组,A组加入PBS,B、C、D组分别加入以6 μg阳离子脂质体包裹的Wild Survivin质粒、PORF-9 null质粒、Survivin T34A质粒各2 μg进行转染.48 h后MTT法检测细胞生存率,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 D组观察到细胞凋亡形态学的特征性改变,且其细胞生存率显著低于其余三组、细胞凋亡率显著高于其余三组（P均＜0.05）.结论 Survivin T34A质粒可通过抑制肿瘤细胞生长并诱导其凋亡发挥抗肿瘤作用,此为乳腺癌的生物治疗提供了新思路.     

TIMP-3基因转染的血管平滑肌细胞移植对心肌梗死后心脏形态和功能的影响

目的: 观察基质金属蛋白酶组织抑制因子3 (tissue inhibitor-3 of matrix metalloproteinases,TIMP-3)基因转染的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)移植,对大鼠心肌梗死后心脏形态和功能的影响。 方法: 取Wistar大鼠胸主动脉采用组织块贴壁法培养VSMCs。应用脂质体转染技术,将TIMP-3-pcDNA3.0重组质粒瞬时转染至VSMCs。另取雌性Wistar大鼠121只（体质量200～250 g）,其中93只建立急性心肌梗死模型。将存活的84只随机分成A、B、C 3组（每组28只）,即于心肌梗死后3 d,再次开胸并在梗死的心肌中分别注射含有3×106个TIMP-3基因转染的VSMCs（A组）、3×106个VSMCs（B组）或改良Eagle培养基（Dulbeccos modification of Eagles medium Dulbecco,DMEM培养基）（C组）各0.3 ml,121只中剩余的28只大鼠作为正常对照组（D组）,不做任何处置。基因转移4周后,进行超声心动图检测心脏的功能,然后获取心脏标本,计算心脏左室容积(left ventricular volume,LVV)和左室容积指数(left ventricular volume index,LVVI),最后进行心脏组织学观察。 结果: 成功分离、培养了VSMCs,纯度达98%,TIMP-3基因成功转入VSMCs中。基因转移4周,超声心动图检查发现,心脏功能的各项指标A组优于B组和C组,B组优于C组;但A、B、C 3组均差于D组（P均<0.05）。A、B、C和D组心脏LVV分别为(894.4±158.3)mm3、(1 126.5±284.7)mm3、(1 372.8±181.9)mm3和(420.2±39.6)mm3,LVVI分别为(2.957±0.362)mm3/g、(3.604±0.710)mm3/g、(4.538±0.259)mm3/g和(1.009±0.134)mm3/g,A、B、C 3组均明显大于D组,A、B组较C组明显减小,A组较B组明显减小（P均<0.05）。组织学观察显示,C组呈心肌梗死表现,B组梗死心肌内可见成簇的肌细胞,室壁较C组增厚;A组较B、C组梗死区缩小、室壁增厚,D组无异常。 结论: 大鼠心肌梗死后3 d,将TIMP-3基因转染的VSMCs移植入梗死心肌内,可明显改善心脏的形态及功能。     

靶向HIF-2 siRNA对人胰腺癌BXPC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的观察靶向缺氧诱导因子2(HIF-2)的小干扰RNA(siRNA)对人胰腺癌BXPC-3细胞增殖和凋亡的影响。方法将BXPC-3细胞随机分为A、B、C组,A组转染HIF-2 siRNA、B组转染非特异性siRNA、C组不转染,分别予常氧、缺氧环境下培养;采用MTT法检测培养24、48、72、96 h时BXPC-3细胞的光密度(OD)值观察增殖情况,用流式细胞仪检测培养48 h时BXPC-3细胞凋亡率。结果在缺氧培养48 h时,A、B、C组细胞OD值分别为0.54±0.07、0.69±0.09、0.72±0.13,72 h时分别为0.55±0.11、0.88±0.07、0.88±0.05,96 h时分别为0.56±0.12、0.93±0.11、0.94±0.09;A组与B、C组比较,P均<0.05。在缺氧培养48 h时,A、B、C组细胞凋亡率分别为21.37%±0.17%、7.12%±0.03%、7.24%±0.07%;A组与B、C组比较,P均<0.05。在常氧状态下,各组细胞OD值及凋亡率无明显差别。结论缺氧状态下,靶向HIF-2 siRNA可抑制人胰腺癌BXPC-3细胞增殖,诱导其凋亡。     

单肺通气对大鼠肺组织结构、细胞凋亡的影响及机制探讨

目的观察单肺通气对大鼠肺组织细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法将42只雄性SD大鼠随机分成单肺通气(OLV)组(A组)18只、双肺通气组(B组)18只及对照组(C组)6只。C组自主呼吸;A组采用右侧OLV,其中6只(A1组)OLV 0.5 h、恢复通气0.5 h,6只(A2组)OLV 1 h、恢复通气0.5 h,6只(A3组)OLV 1.5 h、恢复通气0.5 h;B组采用双肺通气,其中通气1(B1组)、1.5(B2组)、2 h(B3组)各6只。取各组大鼠左侧肺组织,HE染色观察肺组织病理改变,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot法检测Caspase-3蛋白。结果与C组相比,A、B组大鼠肺泡充血水肿,肺间质增厚,随通气时间延长损伤逐渐加重,且A组变化更为明显。A1组大鼠肺组织细胞凋亡指数(AI)及Caspase-3蛋白相对表达量分别为0.13%±0.08%、0.22±0.02,A2组为6.17%±0.75%、0.34±0.01,A3组为16.00%±1.10%、0.69±0.01,B1组为0.15%±0.10%、0.22±0.01,B2组为0.18%±0.08%、0.23±0.01,B3组为4.83%±0.75%、0.28±0.01,C组为0.12%±0.08%、0.21±0.02;A2、A3、B3组与C组比较,P均<0.05;A2组与B2组、A3组与B3组比较,P均<0.05。结论单肺通气可导致肺组织结构的改变、细胞凋亡增加,可能与Caspase-3表达上调有关。     

猪心肌缺血后处理对心肌细胞凋亡及Bcl-2、BaX蛋白表达的影响

目的探讨猪心肌缺血后处理对细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法24只小型约克猪被随机分为4组,建立体外循环全心缺血再灌注模型。A组未行心肌缺血处理,B组于升主动脉阻断前进行心肌缺血预处理,C组再灌注开始前行缺血后处理,D组升主动脉阻断前行心肌缺血预处理及再灌注开始前行心脏缺血后处理,观察各组心肌细胞凋亡率及Bcl-2、Bax蛋白表达。结果心肌细胞凋亡率B组(10.46±0.91)%、C组(9.68±0.59)%和D组(11.35±1.37)%显著低于A组(19.75±1.81)%,差异有统计学意义(P<0.05);C组与B组或D组比较无统计学意义(P>0.05)。Bcl-2蛋白表达B组、C组和D组明显高于A组(P<0.05),Bax蛋白表达B组、C组和D组)明显低于A组(P<0.05)。B组、C组和D组间Bcl-2、Bax蛋白表达无统计学意义(P>0.05)。心肌细胞凋亡率与Bax/Bcl-2比值呈正相关(r=0.926,P<0.01)。结论缺血后处理可上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白的表达,抑制心肌细胞凋亡,减轻缺血再灌注损伤。     

hHGF基因修饰的hUC-MSCs移植在急性心肌梗死模型心肌损伤修复中的作用

目的观察人肝细胞生长因子（hHGF）基因修饰的人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）移植在急性心肌梗死模型心肌损伤修复中的作用。方法用携带hHGF基因的腺病毒基因表达载体以150感染强度（MOI）转染hUC-MSCs,获得hHGF基因修饰的hUC．MSCs。30只广西巴马小型猪制作急性心肌梗死模型。造模成功后的24只猪随机分为A、B、c、D组各6只。C组采用微量注射器将hUC-MSCs悬液经心外膜呈矩阵分布多点注入梗死组织,D组以同样方法注入hHGF基因修饰的hUC．MSCs悬液,B组注入等量PBS,A组只造模。术后6周,经核素心肌灌注显像法检测心肌灌注与心脏功能变化;Masson三色法检测存活心肌,免疫组化法检测新生血管光密度。结果A、B、C、D组灌注质量缺损百分率差值（AMDP）分别为4．33％±1．86％、3．67％±1．21％、-0．83％±1．17％、-0．17％4-1．33％,左室射血分数差值（ALVEF）分别为-9．17％4-2．48％、-9．33％±2．73％、1．00％±3．22％、0．50％±2．26％,C、D组与A、B组的AMDP、ALVEF比较,P均〈0．001。A、B、c、D组在梗死交界区域存活的心肌累计光密度（IOD）值分别为313914±4794、31520±4164、72271±4844、79862±3603,新生血管IOD值分别为1363±157、1380±95、4271±398、4782±225,C、D组与A、B组比较,P均〈0．001;D组与C组比较,P〈0．05。结论hHGF基因修饰的hUC-MSCs可在急性心肌梗死模型的梗死区域内部分存活,在促进血管新生的同时减轻心肌纤维化,改善梗死区域的心肌存活和收缩功能,抑制心室重塑的发生。     

沉默结缔组织生长因子表达对肝星状细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察靶向沉默结缔组织生长因子(CTGF)表达对肝星状细胞(HSC)-T6增殖、凋亡的影响。方法将HSC-T6细胞随机分为3组,A、B组分别转染CTGF siRNA及无义序列4~6 h,C组不转染;培养24 h,采用RTPCR法检测CTGF mRNA,MTT法检测细胞增殖速度,Annexin V/PI双染色法测算细胞凋亡率,Western blot法检测细胞中Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白。结果 A组CTGF mRNA表达量(0.12±0.03)明显低于B组(0.87±0.07)和C组(0.85±0.09),细胞增殖速度(0.21±0.05)明显慢于B组(0.38±0.04)和C组(0.39±0.05),细胞凋亡率(37.5%±0.6%)高于B组(0.9%±0.3%)和C组(1.1%±0.2%),Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达量(29.2±0.8,26.4±2.7)均低于B组(66.7±1.7,64.7±0.9)和C组(68.4±1.7,66.1±2.2),P均<0.05。结论 靶向沉默CTGF基因可抑制HSC-T6细胞增殖,促进其凋亡,并显著减少Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的合成和分泌。     

人CD40 ligand基因真核表达质粒的构建及对人肝癌细胞HepG2的促凋亡作用

目的:构建含人CD40ligand(CD40L)基因的真核表达载体,并使之在人肝癌细胞HepG2中表达,研究CD40L稳定表达对HepG2细胞的影响.方法:从人外周血单个核细胞总RNA中经RT-PCR扩增出人CD40L基因,经过酶切连接进入真核表达载体pcDNATM3.1/myc-His(-)A制备重组质粒.重组质粒经酶切及测序证实人CD40L基因成功克隆进入真核表达载体pcDNATM3.1/myc-His(-)A,并进一步转入大肠杆菌(E.coliDH5a)大量扩增.实验分4组,A组HepG2细胞转染重组质粒,B组HepG2细胞转染不含CD40LcDNA的空质粒,C组HepG2细胞正常培养,D组HepG2细胞加入G418作为转染对照.RT-PCR及流式细胞术鉴定A,B,C3组细胞表面CD40L和CD40的表达后,A,B,C3组细胞分别设6个复孔培养72h后,流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期分布和Fas表达.结果:测序结果显示人CD40L基因真核表达质粒CD40L-pcDNATM3.1/myc-His(-)A构建成功.流式细胞术检测A组HepG2细胞表面CD40L表达为39.7%,CD40表达为15.4%;B和C组细胞表面仅有CD40表达,分别为31.7%和28.5%.A组细胞凋亡率45.0±0.3%,B,C组均未发生明显凋亡(P<0.01).与C组细胞比较,A组细胞周期分布主要阻滞在G1期(90.4±1.3%vs60.6±1.5%,P<0.01),S期(6.32±1.0%vs12.0±0.7%)和G2/M期分布(3.3±0.7%vs27.3±1.2%)均有减少(P<0.01).A组细胞Fas表达率(27.8±1.5%)较B组(3.2±0.8%)和C组(4.2±1.0%)明显上调(P<0.01).结论:我们构建的人CD40L基因真核表达质粒CD40L-pcDNATM3.1/myc-His(-)A可以在人肝癌细胞HepG2中稳定表达,CD40L对于HepG2细胞具有促凋亡的作用,这可能与CD40L-CD40作用后导致HepG2细胞Fas表达上调和细胞周期阻滞有关.     

p15~(INK4B)基因对人胰腺癌细胞系BxPC3增殖的影响

目的 探讨p15~(INK4B)(p15)基因转染对人胰腺癌细胞系BxPC3细胞增殖的影响.方法 采用脂质体将pCDNA3.1(+)-p15质粒及阴性对照pCDNA3.1(+)-neo质粒转染BxPC3细胞,以亲本细胞作为对照组.应用RT-PCR检测细胞p15 mRNA表达;Western blotting检测细胞p15蛋白表达;MTT法检测细胞增殖;透射电镜观察细胞超微结构变化;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率.结果 p15转染组细胞恢复p15 mRNA和蛋白表达.培养第2天生长被抑制,至第7天,生长抑制率达47.9%.G_0/G_1期细胞占(61.56±3.96)%,显著高于空质粒转染组的(47.44±6.35)%和对照组的(49.22±7.23)%(P<0.05).出现明显的G,凋亡峰,细胞凋亡率为(5.27±1.04)%,显著高于空质粒转染组的(0.11±0.06)%和对照组的(0.09±0.07)%(P<0.05).透射电镜观察到p15转染组发生细胞凋亡.结论 体外p15基因转染可以抑制人胰腺癌细胞系BxPC3细胞增殖,并能诱导其凋亡.     

Schwann细胞对大鼠坐骨神经缺损后脊髓前角运动神经元保护作用观察

目的观察Schwann细胞（SC）脊髓内移植对大鼠坐骨神经缺损后脊髓前角运动神经元的保护作用并探讨机制。方法取2 d龄SD大鼠坐骨神经培养、纯化、传代SC,并行纯度鉴定。另取48只SD大鼠制作坐骨神经缺损模型,随机均分为实验组和对照组。实验组大鼠于脊髓腹角注射SC;对照组给予等量生理盐水。两组分别于术后1、4、8周各取8只大鼠,取L4～6段脊髓,观察运动神经元数目并计算存活百分率,电子显微镜下观察神经元的超微结构。结果 SC经培养纯化后纯度为95.6%±2.5%。实验组伤侧神经元数目较对照组明显增加,运动神经元存活率为87.2%±4.6%,高于对照组的58.4%±5.4%（P〈0.01）。实验组神经元细胞器及大部分神经纤维的髓鞘结构较对照组清晰完整。结论 SC对大鼠坐骨神经缺损后的脊髓前角运动神经元具有保护作用,其机制可能是促进脊髓运动神经元的存活和再生。     

Target tissue production and axonal transport of neurotrophin-3 are reduced in streptozotocin-diabetic rats

Summary Neurotrophin-3 (NT-3) acts as a target-derived neurotrophic factor for large calibre sensory neurones and plays a role in the maintenance of the adult phenotype of proprioceptive and mechanoreceptive fibres. Large fibre sensory neuropathy is common in diabetes mellitus and the aim of this study was to determine whether endogenous NT-3-dependent neurotrophic support was sub-optimal in the streptozotocin-diabetic rat. NT-3 gene expression was analysed by Northern blotting and ELISA in hindlimb skeletal muscle and found to be decreased by up to 70 % (p < 0.05) in rats with 4–6 weeks of diabetes compared to aged-matched controls. Treatment of other diabetic rats with insulin prevented development of deficits of both NT-3 protein and of its mRNA. The deficits in target tissue production of NT-3 were coincident with significant decreases in its anterograde and retrograde axonal transport in sciatic nerve at 6 weeks of diabetes. The mRNA expression in lumbar dorsal root ganglia of the specific receptor for NT-3, trkC, was also down-regulated at 12 weeks of diabetes by 50 % (p < 0.05). The observed decreases in NT-3 target tissue production and related axonal transport suggest that large calibre sensory neurones expressing trkC may be receiving sub-optimal neurotrophic support in experimental diabetes. [Diabetologia (1998) 41: 300–306] Received: 12 August 1997 and in revised form: 7 November 1997     

黄芪皂甙Ⅳ联合ADSC对坐骨神经缺损后大鼠运动功能的修复作用

目的 探讨黄芪皂甙Ⅳ联合脂肪源性干细胞（ADSC）对大鼠坐骨神经缺损后运动功能恢复的影响.方法 将40只清洁级雄性SD大鼠随机分为4组各10只,4组均采用化学萃取脱细胞方法制备大鼠缺损脱细胞神经支架（ARSN）.ARSN组注入等剂量DMEM于ARSN;黄芪皂甙Ⅳ组注入等剂量DMEM于ARSN,并于术前5 min及术后12、24 h腹腔注射黄芪皂甙Ⅳ（20 mg/kg）;ADSC组注入等剂量ADSC（1×10^6/mL）于ARSN;黄芪皂甙Ⅳ＋ADSC组同时采用黄芪皂甙Ⅳ组、ADSC组的方法.用各组的神经移植体桥接长1 cm坐骨神经两断端间的缺损造模,术后8周取材.检测各组坐骨神经功能指数（SFI）、神经电生理参数（神经传导速度、潜伏期、波幅）及胫前肌湿重比率.结果 与ARSN组比较,黄芪皂甙Ⅳ组、ADSC组和黄芪皂甙Ⅳ＋ADSC组术后各时点SFI增高,神经传导速度增快,潜伏期缩短,波幅增大,胫前肌湿重比率增高（P均＜0.05）;与黄芪皂甙Ⅳ组比较,黄芪皂甙Ⅳ＋ADSC组术后56 d SFI增高,神经传导速度增快,潜伏期缩短,波幅增大,胫前肌湿重比率增高（P均＜0.05）.结论 黄芪皂甙Ⅳ联合ADSC移植能促进大鼠神经再生和运动功能恢复,其作用优于单独应用黄芪皂甙Ⅳ或ADSC.     

桡神经浅支端侧吻合修复尺神经高位损伤的研究

目的通过动物实验探讨感觉神经移位一期联合修复尺神经高位（肘关节以上）损伤,手内在肌组织学变化及吻合口神经病理学变化。方法选用成年雄性猕猴6只,以上肢为研究单位,6只动物双侧上肢随机分为3组,每组4侧上肢。 A组（实验组）：于上臂上段切断尺神经,再重新端端吻合。于远端切断桡神经浅支,移位于腕部与尺神经（外膜开窗）作端侧吻合。 B组（对照组）：于上臂上段切除尺神经3 cm,两断端分别折叠结扎,腕部处理同A组。 C组（对照组）：上臂部尺神经处理同A组,腕部不作神经移位。观察术后猴尺神经所支配的手内在肌萎缩程度。取术后1个月、3个月、6个月、12个月猴尺神经支配的手内在肌端侧吻合口、端侧吻合口以远的神经干及小鱼际肌组织,做成切片,光镜下观察其显微结构的变化。结果术后12个月观察到A组雄猴手内在肌恢复自主活动,术侧手内在肌肌肉萎缩不明显;B组术侧手内在肌肌肉萎缩,程度较C组轻;C组术侧手内在肌肌肉明显萎缩。组织学观察结果显示,术后A组神经纤维数量、密度随时间延长而逐渐增加。 B组术后神经纤维数量、密度达到一定数值后无明显变化,但未见肌肉出现变性坏死现象。 C组神经纤维数量明显减少,肌纤维数量亦明显减少,最终大部分肌纤维萎缩伴玻璃样变,间质出血,肉芽组织形成。结论感觉神经移位能有效防止手内在肌萎缩、变性、纤维化,为高位损伤修复后的尺神经的再生、长入创造了良好条件。     

克仑特罗对COPD大鼠膈肌细胞凋亡影响的实验研究

目的探讨克仑特罗对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠膈肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白Fas表达的影响。方法将雄性SPF级Wistar大鼠随机分为A、B、C三组,各组再分为造模前、造模2周、造模4周三个亚组。A组正常喂养;B、C组用气管注入脂多糖（LPS）加烟熏法造模;C组在造模基础上给予克仑特罗干预。用磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记及免疫组化法检测各组膈肌细胞凋亡率及Fas表达率。结果4周后,经肺HE切片证明B、C组造模成功。随时间推移,A组各亚组间细胞凋亡阳性率及Fas表达率无统计学差异,B、C组造模2周、4周亚组显著高于同期A组（P均〈0．01）,B、C组各亚组间无统计学差异;C组造模2周、4周亚组细胞凋亡阳性率显著低于同期B组（P〈0．05）。结论烟雾、LPS在COPD形成过程中参与膈肌细胞凋亡调控,克仑特罗可能通过抑制氧化应激反应和下调Fas表达减少膈肌细胞凋亡,对COPD所致的膈肌疲劳有一定治疗作用。     

复合维生素B对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经的传导速度及cAMP、cGMP含量的影响

目的探讨复合维生素B对糖尿病周围神经病变（DPN）大鼠坐骨神经的传导速度及cAMP、cGMP含量的影响。方法95只健康wistar大鼠,随机选取正常对照30只,其余65只以STZ腹腔注射建立糖尿病（DM）大鼠模型。将DM大鼠随机分为糖尿病对照组32只和复合维生素B治疗组33只,分别给予生理盐水和复合维生素B（20mg／kg）灌胃,连续8周,观察药物对DPN大鼠坐骨神经的传导速度及cAMP、eGMP含量的影响。结果复合维生素B治疗组大鼠坐骨神经传导速度明显提高,坐骨神经内cAMP、eGMP含量明显增加。结论复合维生素B对DPN大鼠周围神经功能有明显的保护作用。     

补肾活血中药干预下髓核移植接触神经根致大鼠诱发电位及神经显微结构的改变

目的探索补肾活血中药干预下,髓核移植接触神经根对大鼠诱发电位及神经显微结构的影响。方法 40只SD大鼠随机分成4组,A组取大鼠自体皮下筋膜脂肪无压迫下放置在L4-5神经根周围,滴加0.05ml生理盐水。B、C、D组取大鼠自体髓核组织,无压迫下放置在L4-5神经根周围,并分别滴加0.05ml生理盐水、中药（1.2g生药/ml）、地塞米松（1mg/ml）。分别在术前、术后检测大鼠术侧诱发电位。术后3d检测大鼠术侧诱发电位并处死大鼠,进行神经根的病理切片观察。结果感觉诱发电位：B、C组潜伏期延长,与A组比较有显著差异（P〈0.01）;D组与A组相比无显著差异。运动诱发电位：B、C组潜伏期延长,B组与A组比较有显著差异（P〈0.05）,C、D组与A组比较无显著差异。术前各组感觉及运动诱发电位波幅无显著差异,术后各组也无显著差异。神经显微结构观察：A、D组少量炎性细胞浸润;B组急性炎性反应,神经外膜水肿、大量炎性细胞浸润,髓鞘水肿;C组呈炎性反应,但不如B组明显。结论髓核接触神经根后可以引起急性炎症性表现,损伤神经传导功能,补肾活血中药可以抑制神经根及周围的急性炎性反应,减少神经损伤。     

吻合口位置对周围神经端侧吻合术后神经再生的影响

目的观察吻合口位置对神经端侧吻合术后再生神经的影响。方法取新西兰大白兔58只,随机选10只为定位组,行胫神经干功能束鉴定,确定运动神经纤维集中、混合神经集中位置;余48只随机分为A、B组,各24只,切断腓总神经远端,并与外膜开窗的胫神经端侧缝合。A组为实验组,吻合口位于运动神经纤维集中处;B组为对照组,吻合口位于混合神经纤维集中处。于术后1、2、3个月,A、B组每次各取8只,于吻合口近端行电生理检测,取吻合口远端0.5 cm处的腓总神经进行组织学及抗神经丝蛋白免疫组化检测。结果光镜下可区分有髓神经纤维及无髓神经纤维团块并定位。随着术后时间延长,A、B组再生神经诱发电位的潜伏期逐渐缩短,波幅逐渐增大、肌湿重和肌纤维截面积逐渐增大、腓总神经有髓神经纤维数和神经束截面积显著增大,抗神经丝免疫组化阳性表达逐渐增强,且A组均优于B组。结论周围神经端侧吻合时,吻合口位于运动神经束集中处,其再生的运动神经纤维数目多,质量高,所支配肌肉的功能恢复较好。     

C4神经转位修复臂丛神经撕脱伤后C4节段脊髓组织中ChAT表达变化的研究

[目的]观察臂丛神经撕脱伤模型C4转位修复治疗后C4节段脊髓组织中乙酰胆碱转移酶(ChAT)的变化.[方法]Wistar大鼠30只,随机分为A、B、C组,各10只.A、B组建立臂丛神经撕脱伤模型.建模后,A组为实验组,行C4转位修复治疗;B为对照组,于椎间孔处切断C4和C6神经根后,不予吻合;C组为正常组,不进行手术.观察治疗后三组动物患肢功能;于术后3个月时,A组取C4、C6吻合口处神经0.5 cm,B组取C6断端0.5 cm神经,C组取C6神经根0.5 cm,均行HE染色,观察各组神经纤维情况;同时取三组动物C4段脊髓组织,采用免疫组化ABC法行ChAT染色,计数脊髓前角ChAT阳性运动神经元.[结果]①治疗后A组动物右侧前肢屈曲活动基本正常,肱二头肌未见萎缩;B组动物右侧前肢屈曲不能,呈伸直畸形,肱二头肌肌腹萎缩;C组动物正常.②HE染色后,A组可见多处再生神经纤维及髓鞘,分布均匀、致密,外膜连续,神经纤维排列较整齐;B组可见散在稀少神经纤维,排列紊乱无序,并有多处异物体形成;C组神经纤维分布均匀、致密,排列整齐.③A、B、C组C4脊髓前角ChAT免疫阳性运动神经元数分别为(23.27±3.35)、(19.53±2.97)、(25.53±3.42)个,A、C组与B组比较,P均＜0.05,A组与C组相近(P＞0.05).[结论]臂丛神经根性撕脱伤模型C4转位修复治疗后C4节段脊髓组织中ChAT 表达上调,这可能是C4转位修复治疗臂丛神经根性撕脱伤疗效好的原因之一.     

磁刺激疗法对坐骨神经损伤大鼠神经传导速度及损伤运动神经元内GAP-43表达的影响

目的探讨磁刺激疗法治疗坐骨神经损伤的临床效果及机制。方法将60只SD大鼠随机分为观察组、对照组各24只和假手术组12只,前两组制备坐骨神经损伤模型。制模后观察组给予表面场强为0．09T磁刺激,30min／d,1次／d;其余两组不予干预。各组分别于第2、4、8、12周采用免疫组化法检测L4-L5脊髓运动神经元内生长相关蛋白（GAP-43）表达,于12周末行电生理检查测定神经传导速度（MCV）。结果与对照组比较,观察组各时点GAP-43表达明显升高（P均〈0．05）,术后第12周再生神经传导速度加快、波幅升高、潜伏时缩短（P〈0．05）。结论磁刺激疗法能促进大鼠周围神经损伤后MCV的恢复,其机制可能为增加损伤脊髓运动神经元中GAP-43的表达。