大黄(庶虫)虫丸抗慢性肝损伤及肝纤维化作用的实验研究

本文以CCl_4等因素所致大鼠肝损伤、肝纤维化为模型,以血清ALT活性、Alb含量、肝Hyp含量、肝组织HE和胶原染色光镜观察等为观察内容,分预防和治疗实验观察大黄廑虫丸的防治作用,并设西药秋水仙碱组对照。结果表明:大黄廑虫丸有较显著的抗慢性肝损伤作用及一定的抗肝纤维化作用。在抗肝损伤,保护肝功能方面,较秋水仙碱为优;但在抗肝纤维化方面,尚不及秋水仙碱作用强。     

益肝浓缩煎剂抗肝纤维化的实验研究

目的 :观察益肝浓缩煎剂及其组方中药丹参、黄芪对肝纤维化大鼠肝组织病变的影响 ,并探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法 :以皮下注射 4 0 % CCl4 花生油溶液诱导产生大鼠肝纤维化模型 ,并于益肝浓缩煎剂、丹参、黄芪应用治疗前后处死大鼠 ,留取肝组织标本 ,切片并 Masson染色 ,观察胶原纤维增生情况。结果 :益肝浓缩煎剂肝内胶原纤维增生程度明显减轻 ,其疗效优于丹参与黄芪组 :活血化瘀中药有明显抗肝纤维化作用 ;益气健脾中药具有一定的抗肝纤维化作用 ;活血化瘀中药抗肝纤维化作用优于益气健脾中药 ;益肝浓缩煎剂抗肝纤维化作用 ,优于单纯的活血化瘀中药或益气健脾中药。结论 :益肝浓缩煎剂具有良好的抗肝纤维化作用 ,能明显改善肝纤维化大鼠肝脏病变     

虫草菌丝抗肝纤维化的实验研究

目的:观察人工虫草菌丝对CCl_4中毒性肝纤维化的预防作用。方法:复制大鼠CCl_4中毒性肝纤维化模型,并以秋水仙碱作为阳性治疗对照,采用光镜、电镜观察肝脏组织学改变,测定血清ALT、Alb、G、HA、LN、肝组织Hyp含量。结果:虫草菌丝组肝细胞损害、肝脏脂肪变性、炎性细胞浸润的程度均较模型组轻,但再生肝细胞较多,有假小叶形成;其对肝功能、肝纤维化指标也有明显改善,但秋水仙碱的抗肝纤维化作用优于虫草菌丝。结论:虫草菌丝对肝脏CCl_4损伤具有一定保护作用,有较强促进肝细胞再生修复作用,同时在损伤肝组织中成纤维细胞及胶原纤维也明显增生,其与活血化瘀药有机伍用,可能是防治肝纤维化较理想的组合。     

肝纤维化几种病理染色方法及意义归纳

目的:归纳肝组织各种病理切片染色方法,探讨不同方法在大鼠肝纤维化病理诊断中的意义。方法:将实验大鼠分为正常组和模型组,每组各8只,模型组腹腔注射30%CCl4橄榄油溶液2. 0ml/kg,1次/4天,共7次,建立肝纤维化模型。取材肝组织制作病理切片,分别进行HE染色、弹力胶原纤维染色、网状纤维染色、Masson(马松)三色染色、天狼星红染色。结果:正常组大鼠肝组织各种染色均呈现正常形态。模型组大鼠肝脏切片HE染色示肝细胞变性、坏死,呈现大面积假小叶组织结构,属坏死后肝硬变;弹力胶原纤维染色示大量胶原纤维沉积,汇管区周围胶原纤维沉积,纤维条索较粗且染色着色较深,包裹,已形成假小叶;马松染色示大量蓝色胶原纤维沉积,自汇管区周围向外延伸,纤维条索较粗且染色着色较深,表明胶原纤维较多,已形成假小叶;网状纤维染色示网状纤维失去正常分布状态,自汇管区周围网状纤维塌陷、融合、增粗、包裹并已形成假小叶;天狼星红染色示各型胶原纤维自汇管区向外扩展,偏光镜下观察可见胶原沉积、扩展已形成假小叶,其中大量红色I型胶原纤维、绿色III型胶原,少量疏网状II型胶原纤维和淡黄色IV型胶原纤维。结论:HE染色可以观察细胞形态,弹力胶原纤维染色、网状纤维染色、Masson(马松)三色染色均能诊断肝纤维化,而天狼星红染色可以对肝纤维化组织中各型胶原纤维进行分型。     

罗格列酮与秋水仙碱对肝纤维化大鼠防护作用的比较

目的:探讨罗格列酮(RGZ)对实验性大鼠肝纤维化的防护作用.方法:采用四氯化碳(CCl4)腹腔注射诱导的大鼠肝纤维化模型,70只SPF级SD大鼠随机分为7组:正常对照组、模型组、罗格列酮组、罗格列酮预防组(小、中、大剂量组各10只)秋水仙碱组.应用HE染色、Masson染色、网状纤维染色观察大鼠肝纤维化的程度;生化法检测肝功能ALT、AST、Alb等;免疫组化染色法检测肝组织过氧化物酶体增生激活受体(PPAR-γ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达.结果:罗格列酮预防组大鼠与模型组相比,肝组织结构明显改善,纤维化增生程度减低,肝功能改善,肝组织内丙二醛(MDA)、TGF-β1的表达均降低;RGZ综合效果优于秋水仙碱.结论:RGZ可通过激活PPAR-γ途径,减轻氧化应激后继的肝纤维化病变,降低TGF-β1的表达,对肝纤维化有良好的防护作用.     

复方牛胎肝提取物对二甲基亚硝胺致大鼠肝纤维化的干预作用

目的:观察复方牛胎肝提取物(安珐特)对二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠肝纤维化的干预作用。方法:雄性Wistar大鼠29只,随机分为正常组(9只)、模型组(10只)、安珐特组(10只)。后两组大鼠行腹腔注射4周DMN复制肝纤维化模型。造模结束后,安珐特组大鼠按照成人用药量的8倍剂量灌胃,共4周,正常组和模型组大鼠灌胃等剂量的0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)。8周末处死大鼠,留取标本。全自动生化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、血清白蛋白(Alb);检测各组大鼠肝组织羟脯氨酸Hyp的含量;采用HE染色和天狼猩红染色法观察肝组织形态学。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TBi L、ALT、AST、γ-GT水平明显升高(P0.05),Alb水平明显下降(P0.05);大鼠肝组织HE染色可见肝脏内有大量炎性细胞浸润,肝窦狭窄,汇管区扩大,肝细胞排列紊乱,出现肿胀、变性坏死,肝组织内有明显出血现象;天狼猩红染色可见大鼠肝脏胶原增生明显,大量纤维间隔,向肝小叶伸展,分割包绕肝组织,形成假小叶;肝组织Hyp含量明显升高(P0.05)。与模型组比较,安法特组大鼠血清TBi L、ALT、AST均显著降低降低(P0.05),γ-GT水平有所降低,Alb水平有所升高,但差异无统计学意义;肝组织HE染色可见肝细胞变性坏死、出血、炎症细胞浸润等病理变化有不同程度的改善;天狼猩红染色可见纤维化程度有明显改善;肝组织Hyp含量明显降低(P0.05)。结论:安珐特对DMN诱导的大鼠肝纤维化形成有显著的抑制作用。     

益肝浓缩煎剂与强肝胶囊抗大鼠肝纤维化作用实验研究

目的:研究益肝浓缩煎剂、强肝胶囊对大鼠肝纤维化治疗作用,并对其机制进行初步探讨。方法:CCl_4诱导大鼠肝纤维化模型,造模结束后分别予相应药物进行治疗,持续10周,测定肝组织羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)含量,光镜观察肝脏病理形态变化。结果:与模型自然恢复组相比,益肝浓缩煎剂、强肝胶囊治疗组Hyp、MDA显著降低,胶原沉积明显减轻。结论:益肝浓缩煎剂、强肝胶囊对大鼠肝纤维化具有明确治疗作用,可促进胶原纤维降解,使早期肝纤维化逆转。其疗效作用机制可能与抗脂质过氧化有关。     

抗纤软肝胶囊对大鼠肝纤维化肝星状细胞活化及凋亡的影响

目的探讨抗纤软肝胶囊对大鼠肝纤维化肝星状细胞(HSC)活化及凋亡的影响。方法将32只清洁级SD大鼠采用随机数字表法分为正常对照组和肝纤维化建模组各16只。建模组大鼠皮下注射四氯化碳(CCl_4)诱导大鼠肝纤维化,正常对照组以同样方法注射等量植物油,随后将正常对照组随机分为正常组8只,药物组8只,建模组随机分为模型组8只,治疗组8只。药物组、治疗组均给予抗纤软肝胶囊治疗,其他组同期灌服相当量的生理盐水。应用苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色观察各组肝脏病理组织学改变;检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ-C型胶原(Ⅳ-C)及Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)水平;RT-PCR法或流式细胞术检测各组血清体外对HSC-T6细胞中α平滑肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子(TGF)-β1 mRNA表达以及细胞凋亡水平的影响。结果与模型组大鼠比较,治疗组大鼠肝脏的肝纤维化程度减轻;治疗组血清ALT、AST、HA、LN、IV-C、PC-Ⅲ水平明显低于模型组,而ALB水平明显高于模型组(均P<0.05);体外实验发现药物组及治疗组α-SMA和TGF-β1 mRNA的表达水平显著低于正常组及模型组(均P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,药物组及治疗组HSC-T6的凋亡水平显著高于正常组及模型组(均P<0.05)。结论抗纤软肝胶囊通过参与调控HSC的活化及凋亡,可发挥对肝纤维化大鼠的治疗作用。     

扶正利湿解毒法体内外逆转肝纤维化

目的:观察扶正利湿解毒法基本方(简称基本方)对肝纤维化的逆转作用.方法:采用DMN诱导大鼠肝纤维化,造模结束后随机分为模型对照组,秋水仙碱组,基本方高剂量组,基本方中剂量组及基本方低剂量组并分组给药,同时设空白对照组.灌胃3wk后检测肝组织Hyp,ALT水平;HE,Masson染色.采用HSC-T6细胞培养,药物作用24h后光镜下观察拍照,检测药物对细胞的抑制率并在电镜下观察药物浓度为2g/L时细胞的变化.结果:基本方高、中剂量均可使大鼠肝组织Hyp,血清ALT显著下降(Hyp:213.73±58.05μg/g,245.95±67.70μg/g vs 317.37±42.06μg/g,P<0.01,P<0.05;ALT:33.56±8.16 kU/L,42.38±14.99 kU/L vs 58±10.32 kU/L,P<0.01,P<0.05);Masson染色肝纤维化分级评分显示,基本方高,中剂量均可使肝纤维化程度显著降低(2.33±0.87,2.63±0.74 vs 3.70±0.67,P<0.01,P<0.01),同时显著改善肝组织炎症、出血及纤维沉积;光镜观察及抑制率检测显示基本方呈剂量依赖性抑制HSC-T6细胞增值.电镜显示基本方主要导致HSC-T6细胞凋亡.结论:基本方显示了显著的体内外逆转肝纤维化作用.     

排钱草对大鼠实验性肝纤维化的影响

目的:观察排钱草水、醇提取物对肝纤维化的影响。方法:在给大鼠皮下注射CCl_4进行肝纤维化模型制作的同时给予排钱草水、醇提取物(相当于每日原生药5g/ke、3g/kg),给药6周后检测大鼠肝组织羟脯氨酸(Hyp)及血清中谷丙转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)活性,血清蛋白电泳测定γ-球蛋白,并观察肝脏的组织病理改变,与联苯双酯进行药效对照。结果:排钱草水、醇提取物的高、低剂量组和联苯双酯组均能显著降低肝脏Hyp含量及血清ALT、ALP的活性,降低γ-球蛋白以维持白/球(A/G)比值,对大鼠肝细胞坏死和胶原纤维增生亦有显著减轻作用。结论:排钱草水、醇提取物能减轻CCl_4致大鼠的肝脏损害,有利于减轻肝纤维化。     

大黄素对肝纤维化大鼠血清透明质酸的影响

目的:研究大黄素对肝纤维化大鼠血清透明质酸的影响。方法:采用40％四氯化碳(CCl_4)给大鼠皮下注射制备肝纤维化模型,并以小、中和大剂量大黄素治疗,通过放射免疫法测定大鼠血清透明质酸。结果:大黄素组血清透明质酸显著低于模型组。结论:大黄素能降低肝纤维化大鼠血清透明质酸。     

甘草酸二铵对二甲基亚硝胺诱导肝纤维化大鼠肝脏胶原增生沉积的影响

目的观察甘草酸二铵的抗肝纤维化作用。方法二甲基亚硝胺腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,以甘草酸二铵7mg/100g体重灌胃治疗,每日1次,共4周,并以γ干扰素为对照药物。观察大鼠体重、肝脾重量等一般情况;肝脏苏木精-伊红染色与丽春红胶原染色,分级分期观察肝组织的炎性坏死与胶原纤维沉积变化;检测血清肝功能变化与肝组织羟脯氨酸含量。结果模型大鼠肝脏胶原纤维间隔形成,肝小叶与肝窦内胶原增生沉积明显;脾脏明显增大;血清ALT活性升高,肝组织羟脯氨酸含量上升。甘草酸二铵可显著降低模型大鼠肝组织羟脯氨酸含量,减轻肝脏内胶原纤维增生沉积,降低血清ALT活性。与γ干扰素比较作用无明显差异。结论甘草酸二铵有良好的抗二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化效果,其作用机制可能与药物减轻肝脏炎症,抑制肝脏羟脯氨酸与胶原生成有关。     

姜黄素治疗大鼠肝纤维化及其对肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响

目的 观察姜黄素治疗肝纤维化的效果及其对肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响,探讨两者间的关系.方法 以四氯化碳腹腔注射的方法制作大鼠肝纤维化模型,姜黄素治疗组大鼠于第9周起分别给予姜黄素10、20、40 mg/100 g灌胃,设立正常对照组、溶剂对照组、模型组和丹参组,检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PC-Ⅲ)含量,肝组织行HE和Masson胶原染色,光镜下观察肝脏病理学改变,并按肝纤维化半定量计分系统(SSS)进行评分.免疫组织化学染色观察肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化,专业图像分析软件进行分析.结果 与模型组比较,姜黄素治疗组大鼠肝纤维化时异常升高的ALT、AST、HA、LN、PC-Ⅲ明显降低(P＜0.05);大鼠肝纤维化的病理学改变明显改善,肝纤维化评分明显降低(P＜0.05),接近正常组;肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显降低,且这种效果随着姜黄素剂量的增大而增强.结论 姜黄素具有治疗大鼠肝纤维化的作用;增强胶原纤维降解可能是其重要的作用机制之一.     

氯沙坦抗大鼠肝纤维化的研究

目的 :研究血管紧张素Ⅱ 1型受体拮抗剂氯沙坦对二甲基亚硝胺 (DMN)诱导的肝纤维化大鼠模型的疗效及可能的机制。方法 :制备DMN诱导的大鼠肝纤维化模型 ,同时应用氯沙坦灌胃 ,共 8周。肝组织进行常规HE及Masson三色染色。测定血清肝功能及透明质酸 (HA)。大鼠肝组织Ⅰ型胶原 (ColⅠ )、Ⅲ型胶原 (ColⅢ )及转化生长因子 βl(TGF β1)mRNA的水平用RT PCR方法检测。结果 :氯沙坦可明显改善肝纤维化的程度 ,降低血清ALT及HA的水平 (P <0 .0 1)。同时模型组ColⅠ、ColⅢ及TGF β1mRNA的水平明显高于正常对照组 ,氯沙坦治疗组明显低于模型组 (P <0 .0 0 1)。结论 :氯沙坦具有良好的抗肝纤维化作用 ,且能够抑制肝组织ColⅠ、ColⅢ及TGF β1mRNA的水平 ,从而发挥其抗肝纤维化的作用。     

红芪多糖抗肝纤维化的药效作用

目的 研究红芪多糖对大鼠肝纤维化的药效作用.方法 Wistar大鼠用二甲基亚硝胺(DMN)建立肝纤维化模型.将大鼠随机分为正常组、模型组、红芪多糖高、中、低剂量组、黄芪多糖组、红芪水煎液组.采用酶联免疫法检测血清谷丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST),肝组织Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、羟脯氨酸(Hyp)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)含量,HE和Masson染色观察肝组织形态变化,测定胶原纤维面积百分比.结果 与模型组比较,红芪多糖各组ALT、AST、HA、Hyp、LN、PCⅢ、Ⅳ-C含量均明显降低(P＜0.05或P＜0.01),镜下观察肝纤维化明显减轻,胶原纤维面积明显减少(P＜0.05或P＜0.01).结论 红芪多糖能明显改善肝组织纤维化,具有抗肝纤维化作用.     

软肝缩脾丸对肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ，Ⅲ型胶原基因调节及蛋白表达的影响

目的：阐明软肝缩脾丸对肝纤维化大鼠肝脏胶原基因调节及蛋白表达的影响,探索;肝纤维化发生的分子生物学机理,方法：采用免疫组化和原位杂交技术分别测定各组肝纤维大鼠治疗前后肝脏I,III型胶原的基因调节和蛋白表达,结果CCl4模型组大鼠肝脏,I,III型胶原mRNA及蛋白水平明显高于治疗组,正常组大鼠肝组织无1例阳性,结论：软肝缩脾丸治疗可显著降低肝纤维化大鼠肝脏I,III型胶原基因和蛋白表达,从而发挥其抗肝纤维化作用。     

坎地沙坦对肝纤维化大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白-2表达的影响

目的 研究血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂(ARB)坎地沙坦对大鼠四氯化碳(CCl4)肝纤维化模型的疗效,观察坎地沙坦对肝纤维化大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)的影响.方法 制备CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型同时应用坎地沙坦灌胃,共8周.留取各组的血和肝组织,通过HE及Masson染色观察各组肝纤维化的程度.采用SABC免疫组织化学方法检测大鼠肝组织中IGFBP-2的表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中IGFBP-2的水平.结果 经CCl4诱导成功建立大鼠肝纤维化模型.随着肝纤维化程度的进展,IGFBP-2在肝组织中阳性表达增强(P<0.05);坎地沙坦治疗组IGFBP-2阳性表达较肝纤维化模型组均减弱(P<0.05).结论 坎地沙坦具有良好的抗肝纤维化作用,可能与IGFBP-2降低有关.     

鳖甲煎丸对肝纤维化大鼠作用机制研究

[目的]探讨鳖甲煎丸抗肝纤维化的作用机制.[方法]采用复合因素建立肝纤维化大鼠模型.将大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、鳖甲煎丸高剂量组、鳖甲煎丸等剂量组.秋水仙碱组[0.11mg/（kg·d）]、鳖甲煎丸高剂量组[2.2 g/（kg·d]及鳖甲煎丸等剂量组[1.1 g/（kg·d]分别予以相应药物灌胃,模型组及正常组给予等剂量的0.9％氯化钠灌胃,共6周.采用比色法检测血清丙氨酸氨基转移酶,天冬氨酸转氨酶（ALT、AST）水平,苏木精-伊红染色观察肝组织病理学变化及肝纤维化程度,免疫组化方法检测肝组织瘦素、瘦素受体表达水平.[结果]鳖甲煎丸能降低大鼠血清ALT、AST水平,减轻肝脏炎症及纤维化程度（均P＜0.01）;抑制模型大鼠肝组织瘦素及瘦素受体的表达（P＜0.01）.[结论]鳖甲煎丸能有效减轻模型大鼠肝纤维化的病理程度.其作用机制可能与降低大鼠血清ALT、AST水平,抑制大鼠肝组织瘦素及瘦素受体的表达密切相关.     

银杏叶提取物抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的 :探讨银杏叶提取物对实验性大鼠肝纤维化的预防及治疗作用机制。方法 :采用四氯化碳腹腔注射诱导的大鼠肝纤维化模型 ,60只Wistar大鼠分为 5组 :模型组、银杏叶干预组、银杏叶治疗组、银杏叶组 ,另设正常对照组 ,应用HE染色观察大鼠肝组织的改变及Von Gieson胶原纤维特殊染色观察肝纤维化程度 ,生化法检测肝功能丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天冬氨酸氨基转移酶 (AST)、白蛋白 (ALB)水平 ,硫代巴比妥酸 (TBA)法检测肝组织丙二醛 (MDA)的含量 ,免疫组织化学染色法检测肝组织I型胶原、转化生长因子 β1(TGF β1 )的表达。结果 :银杏叶干预及治疗组与模型组相比 ,肝组织结构明显改善 ,纤维化增生程度减轻 ,肝功能改善 ,肝组织内MDA的含量以及I型胶原、TGF β1 的表达均明显低于模型组 (P <0 .0 1 )。结论 :银杏叶提取物可通过其抗氧化作用抑制肝星状细胞激活和转化 ,降低I型胶原、TGF β1 的表达 ,从而抑制和逆转肝纤维化形成     

RKIP在胆总管结扎肝纤维化大鼠肝脏组织的表达

目的 研究RKIP在胆总管结扎肝纤维化大鼠肝脏组织中的表达.方法 SD大鼠60只,随机分为模型组(48只)、对照组(12只).运用胆总管结扎方法 制作大鼠肝纤维化模型,模型组分别于结扎后1、2,3、4 w麻醉动物,假手术组与4 w模型组同批麻醉,留取肝脏标本.组织切片经HE和Masson三色染色检测病理变化,westem印迹和免疫组织化学方法 检测RKlP在肝组织的表达,用westem印迹方法 检测RKIP和ERK的磷酸化水平.结果 HE和Masson三色染色结果 证明胆总管结扎大鼠肝纤维化模型制作成功.随着肝纤维化程度增高RKIP表达下降,RKIP和ERK的磷酸化水平则相应增加.结论 胆总管结扎大鼠肝纤维化过程中肝脏组织Raf-1/MEK/ERKl,2信号转导途径的激活与RKIP的蛋白表达下降和磷酸化增加有关.