齐墩果酸靶向Bcl-2诱导鼻咽癌细胞发生线粒体主导的凋亡

目的 探索齐墩果酸(OA)对高分化鼻咽癌细胞CNE-1的抑制作用并阐明其机制。方法 选择不同浓度OA处理CNE-1细胞，CCK-8实验检测细胞活力，膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染法和流式细胞术分析细胞凋亡情况。检索数据库ChEMBL筛选OA调控细胞凋亡的潜在靶点，通过Western印迹检测细胞凋亡相关蛋白表达情况。结果 OA导致CNE-1细胞活力降低与细胞凋亡增加。靶标预测发现抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2是OA的潜在靶点。Western印迹结果也证实OA导致线粒体凋亡相关蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3水平增加，而Bcl-2水平下降。结论 OA能够靶向Bcl-2通过线粒体途径诱导鼻咽癌细胞CNE-1的凋亡，有望作为鼻咽癌治疗的候选药物。     

骨关节炎治疗进展

骨关节炎(OA)分为原发性和继发性两种。有X线表现而无症状者为放射学OA，有症状者则为症状性OA，后者是临床诊治的主要对象。现就其治疗进展情况简述如下。     

骨关节炎发病中的软骨免疫机制

骨关节炎(osteoarthritis，OA)长期以来一直被认为是由于年龄的增长及生物机制的改变而引起关节退行性改变的一种疾病。然而近年来的研究显示，免疫机制参与了OA的发病过程，免疫炎症反应的证据反应在OA患者的许多临床表现。尽管滑液中的总细胞数少于类风湿关节炎(RA)，然而多数的OA关节滑液中仍然有较高的单个核细胞数及增高的免疫球蛋白和补体。滑膜组织显示慢性炎症的改变，包括滑膜组织由于炎症细胞的浸润致使滑膜组织增厚．进一步而言．OA滑膜的改变相似于早期RA的改变。     

抑制PI3K/AKT/GSK-3β信号通路对冈田酸诱导原代星形胶质细胞衰老情况的影响

目的 研究冈田酸(OA)诱导的原代星形胶质细胞中通过抑制磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/糖原合成激酶(GSK)-3β信号通路对p21、p53衰老蛋白表达水平和衰老阳性细胞表达的影响，探讨OA诱导星形胶质细胞衰老情况及相关机制。方法 免疫荧光鉴定原代星形胶质细胞，CCK8法筛选OA药物浓度，然后用LY294002、OA分别处理或联合处理细胞，Western印迹测定细胞中p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β、p21、p53蛋白表达水平的变化及β-半乳糖苷酶染色检测衰老阳性细胞。结果 免疫荧光鉴定原代星形胶质细胞结果显示其纯度达到95%以上，CCK8法筛选出OA药物处理浓度为30 nmol/L,OA组中p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β、p21、p53蛋白表达较正常对照组显著升高(P<0.05),衰老阳性细胞数明显增加，但LY294002+OA组p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β、p21、p53蛋白表达水平较OA组明显降低，并且衰老阳性细胞数也明显减少(P<0.05)。结论 通过OA处理能使星形胶质细胞发生衰老，LY294002处理能通...     

中国骨关节炎流行病学研究现状及规范

骨关节炎(OA) 是最常见的关节疾病，随着世界人口老龄化和肥胖问题的加剧，OA 的患病率逐年增加。中国 的OA 流行病学研究虽然多次进行了多地区的调查研究，但数据相差较多，这可能与调查采用的诊断标准不一致和 检测方法不标准有关。剖析这些问题的根源，从OA 的流行病学诊断标准入手，规范OA 的影像学检查方法，同时不 仅进行横断面研究还要进行队列研究，以及多关节、多地区、多民族的调查研究，不断完善中国OA 的流行病学资料， 有利于明确中国OA 的患病率及致病危险因素，为早期预防和诊治并减少OA 的发生发展提供有力依据。     

红细胞膜软骨寡聚基质蛋白抗原抗体力学检测在膝骨关节炎早期诊断中的作用

目的运用原子力显微镜(AFM)探针修饰上软骨寡聚基质蛋白(COMP)抗体检测骨关节炎(OA)高危人群、OA早期患病组红细胞膜上COMP抗原间相互作用力,探讨这种方法在OA早期诊断中的作用。方法对62例单侧膝关节OA早期患者、9例OA高危人群及8名正常人抽取静脉血,采用ELISA法测定血清样本中COMP的水平。同时分离红细胞,运用AFM探针修饰上COMP抗体检测与红细胞膜上抗原的相互作用力。结果 OA早期患者血清中COMP含量明显高于正常人和OA高危人群(P<0.05),但OA高危人群与正常人差异无统计学意义(P>0.05)。COMP血清学检测无法区分OA高危人群与正常人。OA早期患者、正常人、OA高危人群红细胞膜COMP黏附力和弹性模量差异均有显著差异。OA高危人群红细胞COMP力学性能已经明显增加,当发生OA时,黏附力和弹性模量参数达到峰值。结论运用AFM探针修饰上COMP抗体检测与红细胞膜上抗原的相互作用力可以作为临床早期诊断OA的特异性方法,可以作为OA高危人群的初筛。     

白细胞介素-18在骨关节炎滑膜细胞中的表达及意义

目的 了解白细胞介素(IL)-18在骨关节炎(OA)患者和非OA患者滑膜细胞中表达的差异.方法 取OA患者(22例)与非OA患者(8例)关节滑膜组织,分别原代培养滑膜细胞,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)定量检测2组滑膜细胞培养上清液中IL-18蛋白的表达水平,采用免疫细胞化学方法 定性观察IL-18在2组滑膜细胞问表达的差异,统计学处理采用t检验.结果 ELISA检测OA患者细胞培养上清液中IL-18的含量为(63.9±21.4)pg/ml, 非OA患者细胞培养上清液中IL-18的含量为(17.7±1.5)pg/ml,2组比较差异有统计学意义(t=10.044,P<0.01);免疫细胞化学方法 显示在OA患者滑膜细胞中IL-18蛋白的表达呈阳性.胞质为棕黄色深染,而在非OA患者滑膜细胞中胞质淡染.结论 IL-18在OA关节滑膜细胞中表达上调, 提示IL-18可能直接参与了OA的发病过程.     

脂肪量和肥胖相关基因对骨关节炎软骨细胞凋亡和炎症反应的影响

目的探究脂肪量和肥胖相关基因(FTO)对骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡和炎症反应的影响。方法分析人正常软骨组织样本与OA软骨组织样本中FTO的表达差异, 分离并培养原代OA软骨细胞, 并构建OA大鼠模型, 从临床、动物和细胞水平检测FTO表达。利用FTO敲低慢病毒(sh-FTO)和m6A甲基化抑制剂(cycloleucine)处理细胞, 检测细胞中m6A含量和炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平;流式细胞术检测OA软骨细胞凋亡情况, 蛋白质免疫印迹(Western blot)检测凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果与正常对照比较, 人OA软骨组织、OA大鼠软骨组织及OA软骨细胞中FTO的mRNA和蛋白表达均显著上升(均P<0.05)。敲低FTO后, 原代OA软骨细胞中m6A水平上升, IL-6、TNF-α水平显著降低, 细胞凋亡率降低, 凋亡蛋白Bax表达显著下调, Bcl-2表达显著上调;而cycloleucine干预能显著降低OA软骨细胞中m6A水平, 增加IL-6、TNF-α的丰度, 促...     

低氧诱导因子-1α对老年骨关节炎软骨细胞活性的影响

目的探讨低氧诱导因子(HIF)-1α与老年骨关节炎(OA)软骨细胞增殖和凋亡的关系。方法选择老年OA患者84例,另选健康人群80例作为对照。免疫组织化学方法检测HIF-1α、bcl-2蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)在OA和正常软骨细胞中的表达,分析其对OA软骨细胞增殖和凋亡的影响。结果 OA组HIF-1α阳性表达率为83.9%,明显高于正常对照组(χ2=30.312,P=0.000)。正常软骨细胞中bcl-2蛋白表达量明显高于OA软骨细胞。TUNEL法检测细胞凋亡结果显示,OA软骨组中细胞凋亡碎片明显多于正常软骨细胞,正常组软骨细胞凋亡指数为7.16±9.01,而OA组软骨细胞凋亡指数为39.7±7.23,两者差异显著(P0.05)。PCNA计数,OA组中软骨细胞增殖活性明显低于正常组。结论 HIF-1α表达与OA软骨细胞活性密切相关,可能通过调控bcl-2蛋白及PCNA影响软骨细胞的增殖与凋亡。     

尿Ⅱ型胶原羟基端交联肽水平与椎间盘退变及骨性关节炎的相关性

目的探讨尿关节软骨标志物Ⅱ型胶原羟基端交联肽(CTX-Ⅱ)水平与椎间盘退变(IVDD)及骨性关节炎(OA)的相关性。方法选择2013年5月至2014年5月该院收治的IVDD和OA患者各50例,选取体检健康者50例作为对照组,采用Pfirrmann分级标准和Kellgren/Lawrence(K/L)评分标准分别对IVDD和OA患者评分,利用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组患者血清CTX-Ⅱ表达水平,并分析患者分级与CTX-Ⅱ水平的相关性。结果 IVDD组和OA组尿中CTX-Ⅱ水平高于对照组(P0.05),而IVDD组与OA组无显著差异(P0.05);IVDD组及OA组患者尿中CTX-Ⅱ水平随分级增加而增加(F=66.161,42.223,P0.05),且存在相关性(r=0.605,0.754,P0.05)。结论血清CTX-Ⅱ表达水平随IVDD和OA病情加重而升高,可以作为评估IVDD和OA病变程度的指标。     

性激素和细胞因子与骨关节炎及骨质疏松的关系

骨性关节炎(OA)和骨质疏松(OP)无论从发病部位、病理和生化上均有很大不同,但与性激素均有关。内源性性激素可能是OA高危因素之一,不少研究者认为OA的发生对OP是保护因素。白介素(IL)-1β能促进软骨和滑膜组织基质金属蛋白酶(MMP)s的表达,具骨吸收作用。IL-1、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α是引起OA炎性病变及软骨降解的重要因素。白血病抑制因子(LIF)能影响关节软骨代谢,参与滑膜炎性病变及骨重建过程,是OA发病的重要调节因子。     

实验性急性肺损伤大鼠脑组织中Gq/11蛋白的动态变化

目的 观察急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠脑组织中Gq/11蛋白的动态改变,从分子水平研究油酸(OA)性ALI导致脑损伤以及ALI导致多器官功能障碍综合征的可能机制,为ALI和多器官功能障碍综合征的发病机制提供实验和理论依据.方法 用尾静脉注射OA法复制ALI大鼠模型,将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C组)和实验组(OA组),OA组又根据不同时限将其分为30 min、60 min、90 min和120 min 4个亚组.观察检测各组大鼠血气(pH、PaO2、PaCO2)、平均动脉压(MABP)、血浆及脑组织乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA).免疫印迹法检测各组大鼠脑组织中的Gq/11蛋白含量.结果 Gq/11蛋白含量:除OA30 min组外,其余OA各组随着时间延长较C组分别增加至(141.85±33.82)%、(165.84±30.27)%、(174.31±32.52)%(P<0.01).除OA 30 min组外,其余OA各组血浆MDA含量均较c组升高(P<0.01);OA 30 min组和OA 60 min组脑组织MDA含量与C组比较差异无统计学意义,OA 90 min组和OA 120 min组脑组织MDA含量较C组升高(P<0.01).OA各组血浆LDH活性均较C组升高(P<0.01);除OA 30 min组外,其余OA各组脑组织LDH活性均较C组升高(P<0.01).脑组织CK活性在60 min时达到峰值(P<0.01),以后呈下降趋势.结论 ALI可导致远隔器官脑的损伤,引起细胞信号转导功能异常和脑代谢及形态的变化,Gq/11蛋白的高表达变化可能参与了ALl过程及脑损害的病理性信号转导.     

MicroRNAs、uPA及MMP-3在骨关节炎患者滑膜组织中的表达及相关性

目的比较MicroRNAs、uPA及MMP-3在骨关节炎(OA)患者与正常关节滑膜中的表达差异,了解其在OA滑膜病变中的作用。方法采用实时定量PCR技术检测miR-27a、miR-140、uPA和MMP-3在33例OA患者与28例正常关节滑膜中的表达水平,并分析其相关关系。结果 OA组miR-27a、miR-140、uPA和MMP-3相对表达量分别为(1.63±0.93)、(0.94±0.60)、(3.52±1.79)和(4.91±1.86),非OA组miR-27a、miR-140、uPA和MMP-3相对表达量分别为(3.34±1.68)、(2.55±1.12)、(1.16±0.65)和(0.84±0.57),组间比较显示miR-27a、miR-140的表达OA组显著低于对照组(P<0.01),而uPA和MMP-3表达OA组明显高于对照组(P<0.01);OA组内各因子之间相关分析显示,miR-27a和uPA呈显著相关关系,相关系数为r=-0.699(P<0.01),miR-140和MMP-3呈显著相关关系,相关系数为r=-0.598(P<0.01);uPA和MMP-3之间也呈相关关系,相关系数为r=0.444(P<0.05)。结论 miRNA-27a、miRNA-140在OA患者滑膜中低表达,二者与在滑膜中呈现高表达的uPA和MMP-3分别呈现显著负相关关系,共同作用于OA滑膜和软骨退变过程。     

老年骨关节炎和骨质疏松症相关性的临床研究

目的分析老年人(≥60岁)骨关节炎(OA)与骨质疏松症(OP)的关系。方法 OA组126例,平均年龄(63.9±7.2)岁;对照组102例,平均年龄(65.8±6.7)岁。应用双能X线吸收法测定腰椎及股骨颈骨密度、Z值及T值,分析年龄与对应T值的相关性及OA与OP的相关性。结果 OA组平均T值为-0.9±2.3,对照组平均T值为-2.1±1.9,2组比较差异有显著性(P<0.05)。2组T值与年龄呈明显负相关。结论 OA延缓OP的发生,骨质疏松的程度随着年龄的增大而增加。     

天津市老年人膝关节骨关节炎流行病学调查

目的 了解天津市老年人膝关节骨关节炎(OA)的患病情况及相关危险因素. 方法 采用亚太地区风湿病协会联合会社区控制风湿病规划调查方法,应用《膝骨关节炎危险因素调查表》于2010年1月至2011年6月对天津市部分老年人共2038例进行调查. 结果 天津市老年人膝痛和膝关节OA的患病率分别为23.1％和21.7％.女性患病率为27.6％高于男性的16.1％(x2=46.893,P＜0.001),且随年龄增长患病率增高(x2=764.34,P＜0.001).膝关节OA组BMI(25.4±3.3)kg/m2高于非膝关节OA组(23.8±2.9)kg/m2(t=7.944,P＜0.001).女性膝关节OA患者绝经年龄(50.2±3.7)岁早于非膝关节OA患者(52.8±4.1)岁(t=7.665,P＜0.001).Logistic 回归分析显示年龄、性别、BMI、绝经年龄是膝关节OA的危险因素,进食蔬菜是膝关节OA的保护因素. 结论 年龄、女性、超重是膝关节OA的危险因素.     

伸膝制动骨关节炎动物模型软骨内胶原变化的观察

目的 对骨关节炎(OA)早期软骨内胶原变化进行动态观察，探时胶原变化与OA发病机制的关系。方法 采用兔膝关节伸直位制动OA模型，对制动10、20、30、40d的关节软骨进行透射电镜观察，Ⅱ型胶原原位杂交，I、Ⅱ、Ⅲ型胶原的免疫组织化学测定。结果 电镜观察显示OA关节软骨的破坏从切线层的细胶原纤维网开始，而切线层的细胶原纤维网不含细胞；原位杂交和免疫组织化学显示OA早期Ⅱ型胶原的表达和含量增加，而且增加主要发生在移行层和深层上部，二者染色灰度值随时间的变化是先递增，之后逐渐减少；OA关节软骨内有Ⅲ型胶原分泌，并呈增加趋势，但无I型胶原的分泌。结论 OA关节软骨的退变从切线层开始，切线层胶原破坏后难于修复可能是软骨退变重要原因。     

YKL-40在骨关节炎发病中的作用

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是临床常见病和多发病,随着社会的老龄化其发病率越来越高。由于OA影像学改变比OA症状出现要迟,传统依据影像学改变加临床症状来诊断OA的方法不能及时早期诊断OA,故OA的早期诊断仍是骨科领域疑难问题之一。随着分子生物学发展,体液中的部分生物标志物(biomarker,BM)在OA诊断方面的作用日益受到国内外学者的重视,如透明质酸[1]、YKL-40。YKL-40是体液中可反映OA病情的BM之一。本文就YKL-40在OA诊断方面的研究做一综述。1YKL-40的来源、结构、分布和功能YKL-40是属于壳质酶蛋白家族的一种糖蛋白,但…     

IL-18及TNF-α与骨性关节炎关联性研究

目的探讨白介素-18(IL-18)及肿瘤坏死因子(TNF-α)在骨性关节炎(OA)发生发展中的临床意义。方法选取膝关节OA患者71例为OA组,健康成人30名为对照组。采用放射免疫学法检查关节囊滑液中IL-18及TNF-α含量,进行统计学分析。结果 OA组关节滑囊积液中IL-18及TNF-α显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。结论 IL-18及TNF-α参与了关节软骨破坏和滑膜炎症反应的病理过程。     

IL-1RⅠ IL-1RⅡ IL-1RAcP在骨关节炎滑膜中的表达及其生物学意义

目的探讨白细胞介素-1受体(IL-1R)家族中的3个成员IL-1RⅠ、IL-1RⅡ和IL-1R协同蛋白(IL-1RAcP)在骨关节炎(OA)滑膜中的表达和生物学意义。方法采用免疫组织化学和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了不同病程的107例OA患者膝关节滑膜组织中三者的表达情况。结果免疫组织化学显示IL-1RⅠ和IL-1RAcP在OA滑膜中强阳性表达,IL-1RⅡ在OA滑膜中阳性表达,在对照组中均呈阴性或弱阳性表达。RT-PCR显示IL-1RⅠ、IL-1RⅡ、IL-1RAcP在Ⅰ度OA滑膜中的表达均显著高于正常滑膜(P＜0．05),且IL-1RⅠ的表达显著高于IL-1RⅡ(P＜0．05),而与IL-1RAcP的差异无统计学意义(P＞0．05)。但在Ⅱ度和Ⅲ度OA滑膜中,IL-1RⅠ、IL-1RAcP的表达与在正常滑膜中的表达差异无统计学意义(P＞0．05),IL-1RⅡ在Ⅲ度OA滑膜中的表达显著高于正常组(P＜0．05)。结论IL-1RⅠ、IL-1RⅡ、IL-1RAcP在OA的发病机制中起着重要的作用,尤以IL-1RⅠ和IL-1RAcP为主,但其表达只在OA早期短期增加,与OA病情的发展可能无关。     

双醋瑞因与美洛昔康治疗老年膝骨关节炎的疗效比较

骨关节炎(OA)是导致老年人行动障碍的最常见原因之一。2000年欧洲抗风湿病防治联盟(EULAR)制定的膝关节OA治疗指南中,药物治疗的一线药物为对乙酰氨基酚和非甾类抗炎药(NSAIDs),长期应用可引起严重的胃十二指肠和肾脏损害,某些药物还具有破坏软骨作用;二线药物则有益于关节组织损伤的修复,常见的有硫酸葡聚糖胺、硫酸软骨素、透明质酸等,而且治疗OA的新药陆续问世,双醋瑞因(Diacerein)作为白细胞介素1(IL-1)的抑制剂,可显著缓解OA症状和有效修正结构,是属于改变OA症状和病情的慢作用药物,国内有研究报道双醋瑞因对于膝OA的多中心…