汉滩病毒感染EA.hy926细胞上调固有免疫相关分子表达的研究

目的　探讨汉滩病毒（hantaan virus, HTNV）感染EA.hy926细胞诱导抗病毒固有免疫相关分子的表达,为建立HTNV感染的细胞模型提供依据。方法　将HTNV感染EA.hy926细胞,利用间接免疫荧光和实时荧光定量PCR技术于不同感染时间段,检测EA.hy926细胞中模式识别受体、细胞因子及抗病毒相关分子的mRNA表达水平。结果　HTNV感染EA.hy926细胞后,随着感染时间的持续,核蛋白mRNA相对表达倍数显著上调,且不同感染时间段差异具有统计学意义（P＜0.05）;与未处理组相比,HTNV感染EA.hy926后,Toll样受体3、RIG-I和MDA5模式识别受体mRNA相对表达倍数均显著上调（P均＜0.05）,IL-6、IL-10、IFN-β和CCL5细胞因子mRNA相对表达倍数均显著上调（P均＜0.05）,ISG15、MxA、OAS1、IFITM1和IFITM3抗病毒相关分子mRNA相对表达倍数均显著上调（P均＜0.05）。结论　HTNV感染EA.hy926细胞后,可上调抗病毒固有免疫相关分子的表达,该细胞可以作为体外HTNV感染的细胞模型。     

苦荞麦总黄酮对软脂酸诱导的EA.hy926细胞Bcl-2表达的影响

目的研究苦荞麦总黄酮对软脂酸诱导的人脐静脉血管内皮细胞株(EA.hy926)Bcl-2表达的影响。方法苦荞麦总黄酮作用于高浓度软脂酸刺激下的EA.hy926细胞,RT-PCR技术检测Bcl-2 mRNA表达水平,免疫组织化学方法检测Bcl-2蛋白的表达情况。结果与对照组相比,模型组细胞Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组相比较,苦荞麦总黄酮组与二甲双胍组细胞Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01);苦荞麦总黄酮组与二甲双胍组之间无显著差异(P>0.05)。结论苦荞麦总黄酮可以促进EA.hy926细胞Bcl-2基因及蛋白的表达发挥抑制凋亡的作用。     

替罗非班通过上调miR-22保护ox-LDL诱导的脐静脉内皮细胞损伤

目的探讨替罗非班对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的脐静脉内皮细胞(EA.hy926)损伤的影响和可能机制。方法采用低、中、高剂量的替罗非班作用于ox-LDL诱导的EA.hy926细胞,采用细胞计数法(CCK-8)、流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-22表达水平。酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平。转染miR-22模拟物上调EA.hy926细胞中miR-22表达水平,采用上述方法检测上调miR-22对ox-LDL诱导的EA.hy926细胞损伤的影响。结果替罗非班作用于ox-LDL诱导的EA.hy926细胞后,细胞存活率显著升高,凋亡率显著降低,细胞培养上清液中TNF-α和IL-6含量显著降低,miR-22表达显著升高(P0.05)。上调miR-22表达后,ox-LDL诱导的EA.hy926细胞培养上清液中TNF-α和IL-6含量显著降低,细胞存活率显著升高,凋亡率显著降低(P0.05)。结论替罗非班能够减轻ox-LDL诱导的脐静脉内皮细胞凋亡和炎症反应,其机制可能与上调miR-22表达有关。     

槲皮素对软脂酸诱导的EA.hy926细胞eNOS合成的影响

目的研究槲皮素对软脂酸诱导EA.hy926细胞e NOS合成的影响。方法体外培养EA.hy926细胞,分正常对照组、模型组、槲皮素组、二甲双胍组,采用RT-PCR法及免疫组化法,测定各组细胞e NOS m RNA和蛋白表达。结果模型组细胞e NOS m RNA和蛋白表达显著低于正常对照组(P0.05),药物组与模型组相比e NOS m RNA及蛋白表达显著增加(P0.05),药物组间差异无统计学意义(P0.05)。结论槲皮素对软脂酸诱导EA.hy926细胞e NOS合成具有显著促进作用。     

不同浓度TGF-β对内皮细胞锌指基因ZNF580表达的影响

目的探讨不同浓度转化生长因子(TGF-β)对内皮细胞锌指基因ZNF580表达的影响。方法以不同浓度(0.25⁴ ng/ml)的TGF-β刺激EA.hy926内皮细胞12 h,提取细胞总RNA,通过半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析ZNF580基因在内皮细胞中的表达情况。结果成功提取内皮细胞总RNA并进行RT-PCR反应;当TGF-β浓度从0.254 ng/ml)的TGF-β刺激EA.hy926内皮细胞12 h,提取细胞总RNA,通过半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析ZNF580基因在内皮细胞中的表达情况。结果成功提取内皮细胞总RNA并进行RT-PCR反应;当TGF-β浓度从0.25² ng/ml逐渐增加时,ZNF580的表达呈逐渐下降趋势(P<0.05,P>0.01);但继续增加TGF-β刺激浓度至4 ng/ml,ZNF580的表达又有所回升(P<0.05)。结论随TGF-β刺激浓度逐渐升高,EA.hy926内皮细胞中ZNF580基因表达呈先降低后升高变化,表明ZNF580很可能是受TGF-β信号转导通路调控的核转录因子,ZNF580和Smad2间的相互作用及ZNF580转录活性的改变可能进一步影响下游相应靶基因的转录,进而影响内皮细胞的功能。     

磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路介导葛根素改善缺氧复氧损伤的作用及机制

目的:探讨磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路介导葛根素改善缺氧复氧损伤的作用及机制。方法:应用噻唑蓝法筛选出合适的葛根素以及PI3K抑制剂LY294002干预人脐静脉内皮细胞EA.hy926的浓度。分为对照组、缺氧复氧组、缺氧复氧+葛根素组(葛根素组),缺氧复氧+葛根素+LY294002处理组(葛根素+抑制剂组),每组均设3个复孔。应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测葛根素预处理细胞后以及葛根素预处理细胞的同时加入LY294002后对B细胞淋巴瘤/白血病-(2Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化天冬氨酸蛋白水解酶-(3cleaved caspase-3)、活化天冬氨酸蛋白水解酶-9(cleaved caspase-9)、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)、Akt蛋白表达的影响。应用实时荧光定量PCR检测葛根素预处理对EA.hy926细胞缺氧复氧后天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)和Bcl-2信使核糖核酸(m RNA)表达的影响。应用Hoechest染色检测葛根素预处理对EA.hy926细胞凋亡的影响。结果:葛根素(10-7mol/L)明显升高缺氧复氧后EA.hy926细胞活力(P0.001),并显著上调Bcl-2蛋白水平的表达,下调Bax、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3蛋白水平的表达(P均0.01)。与缺氧复氧组相比,葛根素预处理后,p-Akt蛋白表达水平明显升高(P0.01)。加入LY294002(10μmol/L)后p-Akt蛋白表达水平下降,且抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平下降,促凋亡蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、Bax的表达水平升高(P均0.01)。结论:葛根素对缺氧复氧诱导的EA.hy926细胞凋亡具有抑制作用,其抑制作用可能与其对PI3K/Akt信号通路的调控有关。     

阿托伐他汀钙对EA.hy926细胞全基因表达谱的影响及生物信息学分析

目的探讨阿托伐他汀钙对体外培养人脐静脉内皮细胞EA.hy926细胞基因表达谱的影响及作用的分子机制。方法取EA.hy926细胞分实验组和对照组,实验组采用10μmol/L阿托伐他汀钙体外干预人脐静脉内皮细胞EA.hy926 24h,用Affymetrix HG-U133plus 2.0全基因组表达芯片检测阿托伐他汀钙对EA.hy926细胞基因表达谱的影响。并运用基因富集分析(GSEA)软件、DAVID基因功能聚类分析软件及Cmap数据库对芯片数据进行分析,对相关靶基因进行实时定量PCR验证。结果与对照组比较,实验组基因芯片分析筛选出差异表达倍数>2倍的基因649个,其中上调基因295个,下调基因354个。经DAVID及GSEA基因富集分析显示,阿托伐他汀钙广泛下调了细胞周期调控相关基因,上调了Kruppel样转录因子等血管保护基因,Cmap数据库分析显示,阿托伐他汀钙与组蛋白去乙酰化酶抑制剂及白藜芦醇呈正相关的联强度高。结论阿托伐他汀钙从多角度发挥抗动脉粥样硬化作用,作用机制可能与组蛋白去乙酰化酶抑制剂及白藜芦醇相似。     

软脂酸对EA.hy926细胞一氧化氮合成的影响及六味地黄丸的干预效应

目的研究软脂酸(PA)对EA.hy926内皮细胞一氧化氮(NO)合成和内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)表达的影响及六味地黄丸(LWDHP)含药血清的干预作用。方法将培养的EA.hy926细胞分组,采用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(NAPDH)依赖性硝酸盐还原酶法测定细胞裂解上清液NO含量;RT-PCR及Western印迹检测细胞内eNOS mRNA和蛋白的表达。结果 PA损伤的细胞裂解液中NO含量减少,与正常对照组比较差异显著(P<0.01)。2.5%LWDHP含药血清组NO含量进一步减少,5%、10%LWDHP含药血清组及二甲双胍(MET)组均能显著增加细胞裂解液中NO含量,与PA组比较有差异显著(P<0.01),但三者之间互相比较无显著性差异(P>0.05)。同时PA组细胞内eNOS mRNA和蛋白的表达显著减少(P<0.01),LWDHP和MET组细胞内eNOS mRNA和蛋白表达量增加(P<0.01)。结论 LWDHP含药血清能够刺激PA损伤的EA.hy926细胞eNOS mRNA和蛋白的表达,从而有效促进NO的合成,发挥其保护作用。     

抗内皮细胞抗体介导的内皮细胞损伤机制

目的探讨抗内皮细胞抗体（antiendothelial cell antibody，AECA）对内皮细胞凋亡的影响及重组α-烯醇化酶对内皮细胞凋亡的阻断作用。方法以EA．hy926细胞（内皮细胞永生细胞）提取物蛋白为抗原，采用免疫印迹法检测并筛选47000-AECA阳性患者血清，用蛋白G亲和层析法纯化IgG，在体外诱导内皮细胞凋亡，观察重组α-烯醇化酶对凋亡的阻断作用。结果含47000-AECA IgG在体外可诱导内皮细胞凋亡，荧光染色可见明显的核形态变化及典型的凋亡小体；含47000-AECA系统性红斑狼疮患者的IgG作用于EA．hy926细胞24、48和72小时后，凋亡率均明显高于相同剂量正常人kG作用EA．hy926细胞的凋亡率；而经重组α-烯醇化酶预处理后EA．hy926细胞凋亡率则明显降低。含47000-AECA IgG作用于EA．hy926细胞8小时后，AnnexinV^＋细胞数明显增加，并随IgG作用时间和浓度的增加而升高；而经重组α-烯醇化酶预处理的含47000-AECA IgG作用于EA．hy926细胞后，AnnexinV^＋细胞有所减少。结论AECA在体外可诱导内皮细胞凋亡，引起内皮细胞损伤；重组α-烯醇化酶可部分阻断47000-AECA体外诱导内皮细胞凋亡的作用，α-烯醇化酶是AECA识别的自身抗原之一。     

系统性血管炎抗内皮细胞抗体与抗中性粒细胞胞质抗体的相关性初探

目的以来源于大小血管内皮细胞的两种永生细胞株为底物,检测系统性血管炎血清中抗内皮细胞抗体(AECA),分析其与抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)的相关性。方法细胞酶联免疫吸附试验(Cyto-ELISA)法检测血清中AECA;间接免疫荧光法(IIF)及抗抗体结合内皮细胞表面的蛋白酶3(PR3)、抗MPO-ELISA检测血清中ANCA;IIF及抗PR3、抗MPO-ELISA检测细胞株中PR3及MPO;反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞株中PR3及MPOmRNA。结果AECAEA(EA.hy926为底物所测AECA)阳性率33.6%(41/122),AECAHMEC(HMEC-1为底物所测AECA)37.7%(46/122),ANCA35.3%(43/122),AECAEA或AECAHMEC与ANCA串联诊断系统性血管炎敏感性分别为59.8%(73/122)或60.7%(74/122)。AECAEA与ANCA,AECAHMEC与ANCA分别行配对字2检验,差异均无显著性(P>0.05),符合率仅分别为49.2%及51.6%。EA.hy926和HMEC-1中蛋白水平及mRNA水平均无PR3和MPO的表达。结论EA.hy926与HMEC-1中无PR3、MPO蛋白水平的表达,ANCA与AECA可能是两种相互独立的抗体,串联检测可提高诊断敏感性。     

汉滩病毒感染与整合素β3表达的相关性

目的　探讨整合素 β3表达与汉滩病毒 (HTNV)感染的关系。 方法　将人整合素 β3、αv及αⅡb真核表达载体分别及共转染至CHO细胞 ,采用间接免疫荧光测定 (IFA)、流式细胞计数(FCM)检测外源基因的表达 ;然后用HTNVA9株感染稳定转染的CHO细胞 ,应用IFA和FCM检测病毒抗原。结果　整合素 β3在共转染组细胞中高效表达 ,且目的蛋白主要定位于细胞膜上 ;β3单转染组目的蛋白虽有一定量的细胞膜表达 ,但表达量低于共转染组 (P <0 0 5 ) ;αv和αⅡb单转染组目的蛋白的表达量明显低于共转染组 (P <0 0 1) ,且定位发生变化。病毒感染率共转染细胞较高 ,CHO/αvβ3和CHO/αⅡbβ3细胞分别为 6 0 1%和 5 5 9% ;未转染 β3的细胞感染率较低 ,CHO细胞仅为 1% ;而单转染 β3细胞介于两者之间 ( 38 7% )。结论　汉滩病毒感染率与整合素 β3表达水平密切相关 ,整合素 β3可以促进HTNV的入胞作用     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人脐静脉内皮细胞超微结构及细胞间黏附分子1表达的影响

目的通过观察牙龈卟啉单胞菌脂多糖(PgLPS)对人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)的影响,探讨PgLPS在动脉粥样硬化(AS)的发生发展过程中可能发挥的作用。方法本文以EA.hy926细胞为研究对象,随机提取2～4代增殖旺盛的细胞进行实验(n=5),用不同浓度(0.01、0.1、1、10 mg/L)PgLPS刺激EA.hy926细胞,用细胞增殖检测试剂盒(CCK8)检测PgLPS对其细胞增殖影响,用透射电镜观察PgLPS对其细胞结构变化的影响,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清可溶型细胞间黏附分子1(sICAM-1),以及用Western-blot法检测细胞膜结合型细胞间黏附分子1(mICAM-1)的表达。结果当PgLPS浓度达到1 mg/L时,作用时间为24 h以上即可抑制EA.hy926细胞增殖(P0.05);PgLPS浓度达到0.1 mg时透射电子显微镜可观察出现符合内皮细胞焦亡的改变;低浓度和高浓度PgLPS均能促进内皮细胞sICAM-1的表达增加(P0.01),其中0.1 mg/L组sICAM-1表达水平最高,且上清液中的sICAM-1浓度随着PgLPS作用时间的延长而递增;Western-blot法检测结果显示PgLPS浓度达到1、10 mg/L时内皮细胞mICAM-1的相对表达量明显下降;在PgLPS浓度为10 mg/L时,不同的刺激时间作用下,各组mICAM-1的表达差异无统计学意义。结论 PgLPS可以抑制人脐静脉内皮细胞增殖,使其发生焦亡的形态学改变,促进其sICAM-1的表达。     

棕榈酸对EA.hy926细胞胆固醇代谢相关基因表达的影响及机制

目的研究棕榈酸(PA)对内皮细胞株EA.hy926胆固醇代谢的影响,检测胆固醇流出、胆固醇胞内转化、脂蛋白摄入以及信号通路相关基因表达的变化。方法体外培养内皮细胞株EA.hy926,分为白蛋白(ALB)对照组和PA处理组。采用实时荧光定量PCR法检测ATP结合盒转运体A1(ABCA1)、ABCG1、27-羟化酶、清道夫受体A1(SR-A1)、SR-B1、CD36、凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、肝X受体α(LXRα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达变化。结果和ALB对照组相比,10、20、30μmol/L PA处理组ABCG1 mRNA水平显著下降(P0.01),20、30μmol/L PA处理组CD36、LOX-1 mRNA水平显著升高(P0.05)。与ALB对照组相比,10、20、30μmol/L PA处理组LXRαmRNA水平显著下降(P0.001、P0.05、P0.001),10μmol/L PA处理组PPARγmRNA水平显著下降(P0.05)。而10、20、30μmol/L PA处理EA.hy926细胞未显著影响ABCA1、SR-A1、SR-B1、27-羟化酶的表达。结论 PA能够改变内皮细胞EA.hy926细胞胆固醇流出和脂蛋白摄入相关基因的表达,其机制与LXRα和PPARγ信号途径有关。     

丹参酮ⅡA对EA.Hy926氧化应激细胞模型自噬的影响及其时效关系的研究

目的:研究丹参酮ⅡA对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(EA.Hy926)氧化应激模型自噬效应的影响及时效关系。方法:1采用MTT法分别观察不同浓度ox-LDL(模型组)及丹参酮ⅡA(丹参酮组)对EA.Hy926细胞增殖的影响,明确ox-LDL及丹参酮ⅡA作用于EA.Hy926细胞的浓度;2采用荧光免疫法细胞技术及免疫印迹技术检测细胞内LC3蛋白不同时间点6h、12h、24h表达的变化。结果:100mg/L ox-LDL作用于EA.Hy926细胞24h造成明显氧化应激损伤,丹参酮ⅡA能减轻此损伤。LC3/DAPI复染发现丹参酮ⅡA组LC3自噬小体在6h、12h、24h形成较模型组增多,在12h表达最多。免疫印迹技术发现LC3A/B蛋白表达水平在12h及24h时明显增高,但在12h时自噬效应蛋白LC3A/B表达最为明显。结论:丹参酮ⅡA上调EA.Hy926氧化应激细胞模型的自噬,保护细胞氧化应激损伤,并存在时效关系。     

登革2型病毒调控血管内皮细胞凝血及抗凝系统相关蛋白的表达

目的观察登革2型病毒（DV2）对脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）表达组织因子（TF）、组织因子抑制物（TFPI）和血栓调节蛋白（TM）的影响.方法应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用生长良好的第二、三代细胞进行试验.应用CCK-8测定DV2感染对细胞活性的影响;应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞内TF、TFPI和TM mRNA水平.结果 DV2对细胞活力的影响与对照组相比差异无统计学意义.DV2感染HUVEC后6 h,TFPI mRNA水平显著下调（P＜0.05）,48 h恢复到正常水平.TF mRNA对照组不表达,DV2组各时相均有微量表达.而DV2组抗凝蛋白TM mRNA表达显著高于对照组（F=17.855,P=0.000）,24 h达到峰值（P＜0.05）,以后渐下降,72 h正常表达.结论 DV2急性下调TFPI mRNA和微量上调TF mRNA表达,启动外源性凝血途径,促进血液凝固;但DV2诱导高水平的TM可有效地增强抗凝活性,这有利于出血和血浆外渗.结果提示DV可诱导血管内皮细胞所调控的凝血系统失调,这可能在登革出血热/登革休克综合征（DHF/DSS）的出血机制中起重要作用.     

JC病毒小包膜蛋白VP2抗原及鼠多克隆抗体的制备

目的 构建JC病毒小包膜蛋白VP2的原核表达载体,表达纯化VP2蛋白,并制备其抗体.方法 用PCR方法从患者脑脊液中扩增JC病毒小包膜蛋白VP2基因,测序正确后克隆入pET-32a(+)原核表达载体,转化BL21大肠埃希菌,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达该蛋白并纯化.纯化的VP2蛋白免疫BALB/c小鼠,制备鼠多克隆抗体.结果 将pET-32a(+)-VP2重组表达载体分别转化BL21大肠埃希菌,经IPTG诱导后,表达出相对分子质量为58.5×10~3左右的重组融合VP2蛋白.聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示,IPTG诱导6～10 h重组蛋白表达水平较高.Western印迹证实其具有良好的抗原性,且免疫BALB/c小鼠后成功制备了鼠多克隆抗体.结论 成功构建原核表达载体pET-32a(+)-VP2并获得纯化VP2融合蛋白,并制备JC病毒小包膜蛋白VP2抗体,为进一步对VP2蛋白的功能及JC病毒流行病学调查等研究奠定了坚实的基础.     

前列腺腺癌中整合素αvβ3、基质金属蛋白酶-2和-9表达及关系

目的检测前列腺腺癌中整合素αvβ3、基质金属蛋白酶(MMP)-2和-9表达,分析其相关性及在不同临床病理特征中的意义。方法观察组为58例前列腺腺癌患者,对照组为31例前列腺增生患者,均留取术后新鲜组织,两组中整合素αvβ3、MMP-2和MMP-9表达应用流式细胞术检测。结果整合素αvβ3、MMP-2和MMP-9在观察组中表达量明显高于对照组。观察组中整合素αvβ3、MMP-2和MMP-9表达量均与增殖指数、Gleason评分和转移相关。观察组中整合素αvβ3和MMP-2、整合素αvβ3和MMP-9的表达呈正相关。结论前列腺腺癌中存在着明显的整合素αvβ3、MMP-2和MMP-9的高表达,三种蛋白在肿瘤发生中可能有一定促进作用。整合素αvβ3可能通过对细胞外基质进行降解促进肿瘤进展。     

整合素αvβ3与肿瘤的分子显像及靶向治疗

整合素αvβ3是由2条多肽链组成的跨膜异二聚体糖蛋白.其在正常细胞表面低表达或不表达而在肿瘤细胞及肿瘤新生血管内皮细胞中高表达,这使得它成为肿瘤分子显像及治疗的靶位点.近年来多种针对整合素αvβ3的显像技术取得了长足进步:包括放射性核素的PET及SPECT显像,MRI 显像、超声显像及光学显像;以整合素αvβ3为靶点的靶向治疗包括单克隆抗体治疗、RGD肽类似物治疗及以整合素αvβ3为靶点的药物投放治疗.整合素ανβ3临床研究对开拓肿瘤诊断及治疗有着重要的意义.     

棕榈酸对EA.hy926细胞炎症反应相关基因表达的影响及机制

目的观察棕榈酸(PA)对内皮细胞株EA.hy926细胞炎症反应的影响,检测相关基因表达的变化并探讨其可能的信号途径。方法体外培养内皮细胞株EA.hy926,分为白蛋白对照组和PA处理组。改良MTT法检测PA孵育对EA.hy926细胞活性的影响,实时荧光定量PCR法检测白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)mRNA水平,ELISA法检测IL-6、IL-8和TNF-α浓度,Western blot检测磷酸化核因子κB(NF-κB)p65、NF-κB p65、核因子κB抑制蛋白(IκBα)水平。结果与白蛋白对照组相比,20、50、100μmol/L PA处理组的IL-1、IL-6、IL-8 mRNA水平显著升高(P0.05),50、100μmol/L PA处理组的TNF-α、MCP-1 mRNA水平显著升高(P0.05),20、50、100μmol/L PA处理组细胞培养上清液中IL-6和IL-8的浓度显著升高(P0.05),IκB蛋白水平显著降低(P0.05),NF-κB p65磷酸化水平显著升高(P0.05)。结论 PA能够导致EA.hy926细胞炎症反应,其机制可能与激活NF-κB信号途径有关。     

喉鳞状细胞癌患者癌组织Kindlin-2与整合素β表达的关系

目的 观察喉鳞状细胞癌组织中Kindlin-2与整合素β蛋白的表达及其临床意义,以指导预后判断及临床治疗.方法 收集85例喉鳞状细胞癌标本为观察组,60例正常喉黏膜为对照组,应用免疫组织化学技术检测两组Kindlin-2与整合素β蛋白表达.结果 喉鳞状细胞癌Kindlin-2与整合素β表达阳性率明显高于正常喉黏膜组织,Kindlin-2与整合素β表达与TNM分期、Ki67表达及淋巴结转移密切相关,喉鳞状细胞癌Kindlin-2与整合素β表达与患者生存密切相关.结论 Kindlin-2与整合素β在喉鳞状细胞癌发生发展中具有重要作用,联合检测Kindlin-2与整合素β可能与喉鳞状细胞癌预后密切相关.