膈下迷走神经切断术对腹腔注射乙酸致内脏痛大鼠孤束核及胸髓中Fos蛋白表达的影响

目的 探讨迷走神经在内脏痛觉信息传入通路中的作用。方法 将SD大鼠随机分为5组：空白对照组，腹腔注射乙酸刺激组（内脏痛组）、腹腔注射牛理盐水组、迷走神经切断术后＋内脏痛组和假手术后＋内脏痛组（每组6只）。应用免疫组化染色方法，观察各组动物Fos在巾枢延髓孤束核及胸髓的表达。结果 免疫组化染色发现：腹腔注射乙酸刺激组较空白对照组和腹腔注射生理盐水组Fos阳性反应数日在中枢延髓孤束核及胸髓背角浅层表达明显增高；迷走神经切断术后内脏痛组Fos反应数目在孤束核的表达明显减少，而在胸髓背角浅层表达有所增加；假手术后＋内脏痛组与内脏痛组之间Fos表达无明显差异。结论 大鼠腹腔注射乙酸诱发内脏伤害性刺激信息主要是由迷走神经向延髓孤束核传递的，起主导作用；胸髓亦参与了该内脏伤害性刺激的信息传递。     

替加色罗对结肠炎诱导的大鼠腰骶髓Fos、P物质和降钙素基因相关肽表达的影响

背景:临床研究发现,替加色罗可以明显改善肠易激综合征患者的腹部不适和腹痛,但其调节内脏感觉的机制目前尚不清楚。目的:观察替加色罗对结肠炎诱导的大鼠腰骶髓Fos、P物质(SP)和降钙素基因相关肽(CGRP)表达的影响,探讨替加色罗降低内脏敏感性的作用途径。方法:成年雄性Sprague-Dawley大鼠24只,以三硝基苯磺酸灌肠诱导结肠炎并随机分为实验组1:替加色罗灌胃,每天2mg/kg;实验组2:替加色罗灌胃,每天1mg/kg;对照组:生理盐水灌胃,2.0ml/d。连续灌胃7天后,采用免疫组化方法检测大鼠腰骶髓Fos、SP和CGRP的表达。结果:结肠炎可诱导对照组大鼠腰骶髓(L5～S1)背角深层Fos表达以及背角浅层SP和CGRP表达。实验组1大鼠腰骶髓背角Fos阳性神经元数(22.0±7.7)和SP密度(12.5%±1.4%)显著低于对照组(62.2±18.9和35.9%±8.9%,P<0.05),CGRP密度(1.2%±1.1%)与对照组(2.8%±2.4%)相比无显著差异。实验组2大鼠腰骶髓背角Fos、SP和CGRP的表达与对照组相比均无显著差异。结论:替加色罗可以明显减少结肠炎诱导的大鼠腰骶髓背角Fos和SP的表达,其降低内脏敏感性的作用可能与抑制脊髓背角SP的表达有关。     

食管扩张刺激后兔食管内脏感觉改变及其中枢机制的实验研究

目的 探讨食管扩张刺激后兔食管内脏感觉改变及P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)、5-羟色胺(5-HT)、Fos蛋白在中枢神经系统的作用.方法 新西兰白兔20只分为三组:食管扩张组(A组,n=8)和对照组(B组,n=6),分别给予0.9cm食管球囊扩张及假手术刺激,每次持续30 s,每日2次,共14 d,以及空白对照组(C组,n=6).采用动物行为学评分评价食管内脏感觉改变,免疫组化法观察幼兔食管下段黏膜、脊髓和脑组织中神经递质CGRP、SP、5-HT及Fos蛋白的表达.结果 动物食管机械扩张后,在行为学评分为1、2、3分时,A组球囊直径较B、C组明显减小(P＜0.05);A组食管、脊髓和延髓孤束核(NTS)的SP表达明显高于B、C组(P＜0.05),而B、C组间差异无统计学意义(P＞0.05);A组食管黏膜、脊髓、NTS、中脑导水管周围灰质(PAG)、丘脑的CGRP、Fos阳性细胞数较B、C组明显增多(P＜0.05);在食管和脊髓,A组5-HT的表达较B、C组显著升高(食管:27.67±3.27比11.00±1.79和11.17±1.33;脊髓24.00±5.22比11.33±2.94和11.83±2.48,P＜0.01),而在PAG,B组(17.67±2.07)和C组(16.83±2.32)5-HT的表达较A组(13.17±2.04)增多(P＜0.05).在脊髓,CGRP与Fos、SP与Fos、CGRP与SP有明显的相关性(相关系数分别为0.813、0.779、0.772,P值分别为0.025、0.034、0.036).结论 持续的食管扩张可引起食管内脏敏感性增高,食管的机械扩张刺激通过脊髓、NTS、PAG、丘脑传导,且SP、CGRP、5-HT等在食管内脏感觉发生中发挥着重要作用.     

大鼠结肠慢性炎性刺激诱导腰骶髓和延髓Fos的表达及其意义

目的　探讨实验性大鼠结肠慢性炎性刺激诱导腰骶髓和延髓中Fos的表达及其意义。方法　成年雄性SD大鼠 ,实验组 (n =1 6 )予三硝基苯磺酸 (TNBS)灌肠诱导结肠炎 ,实验对照组 (n =8)予生理盐水灌肠 ,空白对照组 (n =2 )不予任何刺激 ;分别在灌肠后 3、7、1 4和 2 8d ,采用免疫组化法观察实验组大鼠腰骶髓和延髓中Fos阳性神经元的数量和分布 ,并与对照组进行比较。结果　TNBS灌肠诱导Fos表达多数分布在脊髓背角深层 (Ⅲ～Ⅳ和Ⅴ～Ⅵ层 )和由孤束核、腹外侧区及网状结构形成的延髓内脏带中。TNBS灌肠后 3d ,脊髓和延髓中Fos表达无明显增多。灌肠后 7和 1 4d ,脊髓和延髓中Fos表达明显多于实验对照组 (P <0 .0 5 )。灌肠后 2 8d ,延髓中Fos表达下降 ,与对照组无明显差异 ,部分大鼠脊髓中Fos阳性神经元数 (5 4 .1± 1 6 .3)仍明显多于对照组 (1 2 .2± 2 .6 ,P <0 .0 5 )。结论　脊髓Fos阳性神经元可能在结肠慢性炎性刺激引起的内脏高敏感性中起作用 ,而延髓可能不是内脏高敏感性形成的主要部位。     

交感神经和肌间神经丛在胃电刺激调控胃慢波中的作用

目的研究胃交感神经及肌间神经丛在电刺激调控胃慢波活动中的作用,确定胃电起博的神经机制和作用环节,为今后起搏器的深入研究打下基础。方法10只雄性wistar大鼠随机分为对照组和电刺激组,各5只。全部大鼠植入浆膜电极,电刺激组大鼠行胃电刺激至胃慢波被完全控制。植入电极组不行电刺激。采用免疫组化S P法检测并比较两组大鼠胃窦肌间神经丛和脊髓后角C fos蛋白表达。结果电刺激组大鼠胃慢波全部被完全控制,所需能量为2 70±80 .6ms ,2mA。2组大鼠脊髓中间内侧核,中间外侧核均未见C fos阳性神经元,而后角浅层均见散在C fos表达,比较无显著性差异(P >0 .0 5 )。植入电极组胃窦肌间神经丛未见C fos阳性神经元,电刺激组胃窦肌间神经丛可见C fos阳性神经元。结论适宜参数的胃电刺激可完全控制大鼠胃慢波。肌间神经丛参与胃电刺激调控胃慢波,而交感神经则无明显作用。     

CGRP在大鼠胃痛觉过敏形成机制中的作用

目的:探索降钙素基因相关肽(CGRP)相关的干预措施对胃痛觉过敏的影响,了解CGRP在胃痛觉过敏形成过程中发挥的作用．方法:成年SD古大鼠,均植入胃内气囊．观察伤害性扩张或CGRP iv对大鼠疼痛阈值的影响:观察由上述措施诱发内脏过敏的大鼠在给予CGRP受体特异性拮抗剂hCGRP8-37后疼痛阈值的变化:观察不同剂量CGRP和hCGRP8-37对疼痛阈值的影响．结果:CGRP iv后胃疼痛阈值为11．7±2．6 mmHg,对照组疼痛阈值为19．2±2．0 mmHg,生理盐水对照组则为18．3±2．5 mmHg,实验组与其他两组比较尸均<0．05．CGRP使大鼠的疼痛阈值降低．hCGRP8-37能逆转伤害性扩张和CGRP引起的内脏敏感性增高,该作用呈剂量依赖性(r=0．821,P<0．01)．结论:胃扩张刺激能引起胃敏感性增高,在此过程中CGRP具有重要的作用．     

结肠黏膜低度炎症大鼠的内脏感觉变化及帕罗西汀的影响

目的探讨帕罗西汀对结肠低度炎症(low grade mucosal inflammation,LGMI)大鼠内脏敏感性的影响及机制。方法将48只SD大鼠按是否诱导出结肠低度炎症分为2大组:每组24只,建模方式为8%葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮用5天,再予蒸馏水饮用7天。每组再按是否予帕罗西汀干预细分为2小组:每组12只,干预方式为2 mg.kg-1.d-1连续灌胃14天。通过结肠内置气囊进行结肠扩张实验(CRD),观察大鼠腹肌收缩反射(AWR)并评分。处死大鼠,免疫组化法观察腰骶部脊髓c-Fos蛋白、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)表达情况。结果与非炎症组相比,低度炎症组大鼠的AWR评分及c-Fos、SP、CGRP表达均有显著升高(P0.05)。使用帕罗西汀干预后,低度炎症组大鼠的AWR评分、c-Fos、SP的表达与空白对照组无显著差异,而CGRP的表达仍比空白组显著升高(P0.05)。结论低度炎症可增加大鼠结肠的内脏敏感性,帕罗西汀可以降低结肠低度炎症大鼠的内脏敏感性,其机制可能与抑制脊髓水平c-Fos、SP、CGRP信号传递有关。     

糖尿病大鼠胃窦胆碱能神经元与胃动力障碍的关系

目的 探讨链脲佐菌素(STZ)-糖尿病大鼠胃动力障碍和胃肌间神经丛胆碱能之间的关系.方法 45只SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组和胰岛素组.成模后16 w测定大鼠胃动力,观察胃肌间神经丛胆碱能神经元的形态变化.结果 与对照组比较,糖尿病组大鼠胃动力减弱(P<0.01),胃窦肌间神经丛胆碱能神经元计数显著降低(P<0.01).与糖尿病组相比较,胰岛素组胃动力显著增高 (P<0.05),胃窦肌间神经丛胆碱能神经元平均光密度显著增高(P<0.05),胆碱能神经元计数有改善的趋势(P>0.05).结论 STZ-糖尿病大鼠胃动力障碍可能与胃肌间神经丛胆碱能神经损伤有关,胰岛素治疗能在一定程度上改善糖尿病胃动力障碍.     

高位胸段硬膜外阻滞对心房颤动自主神经重构的影响

目的:观察高位胸段硬膜外阻滞(HTEB)对长期右心耳快速起搏诱发心房颤动(房颤)犬心房自主神经重构的影响,并探讨心房肌神经生长因子(NGF)在心房自主神经重构中的作用。方法:18只犬随机分为假手术组、对照组和HTEB组。对照组和HTEB组犬给予持续快速心房起搏建立房颤模型,HTEB组给予硬膜外腔注射0.5%利多卡因行高位胸段硬膜外阻滞。通过Masson染色检测犬心房肌胶原容积分数(CVF)改变,免疫组化法测定犬心房肌神经生长相关蛋白43(GAP43)及酪氨酸羟化酶(TH)表达,蛋白免疫印迹法检测犬心房肌NGF、GAP43及TH蛋白表达情况。结果:与对照组相比,右心耳快速起搏6周后,HTEB组犬心房肌CVF值显著降低;GAP43及TH神经萌出量显著减少(P0.05);NGF、GAP43及TH蛋白表达量显著减少(P0.05~0.01)。与假手术组比较,HTEB组犬心房肌CVF值显著增加;GAP43及TH神经萌出量显著增加(P0.05~0.01);NGF、GAP43及TH蛋白表达量显著增加(P0.05)。结论:长期右心耳快速起搏诱发犬房颤致心房肌神经不均一萌出,诱发自主神经重构,而NGF在其中发挥重要作用。HTEB可有效阻止房颤犬心房肌NGF表达上调,减轻自主神经重构。     

肝衰竭大鼠胃窦胆碱能和氮能神经分布的变化分析

目的观察肝衰竭大鼠胃排空及胃窦肌间神经丛胆碱能和氮能神经的变化。方法 40只Wistar大鼠随机分为肝衰竭模型组和对照组,采用葡聚糖蓝-2000为标志物观察大鼠胃排空的变化,应用乙酰胆碱酯酶(AchE)和还原型辅酶Ⅱ硫辛酰胺脱氢酶(NADPH-d)组织化学染色及肌间神经丛全层铺片技术,观察肝衰竭大鼠胃窦肌间神经丛胆碱能和氮能神经的变化,并进行定量分析。计量资料以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用t检验。结果肝衰竭组大鼠胃排空明显减弱(163.00±25.68 vs 100.00±18.93,P0.01),胃窦肌间神经丛胆碱能阳性神经元数量减少,神经纤维变细,分布较稀疏,明显低于对照组(t=3.201,P0.01);氮能神经阳性神经元数量及神经纤维分布明显高于对照组(t=2.912,P0.01)。结论肝衰竭大鼠胃功能的减退与胃窦肌间神经丛胆碱能神经分布减少及氮能神经分布增加有关。     

妊娠时间与肺结核复发的相关性研究及诊治对策

目的 分析肺结核史患者妊娠时间和肺结核复发间相关性.方法 选取我院收治的有肺结核史的妊娠妇女576例作为研究对象,对其妊娠前肺结核治疗、治愈后妊娠时间、妊娠后复发肺结核等进行分析,总结有肺结核史育龄女性的妊娠时间和肺结核复发之间的关系.结果 肺结核治愈后不同时间段妊娠者的结核复发率比较,差异具有显著性（P＜0.05）,停药后间隔时间越久妊娠,肺结核复发的几率越小.结论 加强孕期痰菌检查,及早发现复发肺结核,提高母婴安全.     

我国骨关节结核诊治的回顾与展望

骨关节结核是危害人们健康的严重感染性疾病,近95％由他处结核病继发而来.罹患骨关节结核疾病后几乎均将致残,严重影响人们的健康、工作和生活.建国以来在党和国家的关心和支持下,骨关节结核的诊治水平取得了长足进步.时至今日,由于多种原因,学科发展和被重视程度受到一定的制约,同整个医疗行业的发展不相适应.回顾过去,展望未来,我们需要重新审视骨关节结核的诊治方法,努力推进骨关节结核诊疗技术的科学发展.     

Effect of phosphorylation of MAPK and Stat3 and expression of c-fos and c-jun proteins on hepatocarcinogenesis and their clinical significance

AIM To study the effect of phosphorylation ofMAPK and Stat3 and the expression of c-fos andc-jun proteins on hepatocellular carcinogenesisand their clinical significance.METHODS SP immunohistochemistry was usedto detect the expression of p42/44~(MAPK), p-Stat3,c-fos and c-jun proteins in 55 hepatocellularcarcinomas (HCC) and their surrounding livertissues.RESULTS The positive rates and expressionlevels of p42/44~(MAPK), p-Stat3, c-fos and c-junproteins in HCCs were significantly higher thanthose in pericarcinomatous liver tissues (PCLT).A positive correlation was observed between theexpression of p42/44~(MAPK) and c-fos proteins, andbetween p-Stat3 and c-jun, but there was nosignificant correlation between P42/44~(MAPK) and p-Stat3 in HCCs and their surrounding livertissues.CONCLUSION The abnormalities of Ras/Raf/MAPK and JAKs/ Stat3 cascade reaction maycontribute to malignant transformation ofhepatocytes. Hepatocytes which are positive forp42/ 44~(MAPK), c-fos or c-jun proteins may bepotential malignant pre-cancerous cells.Activation of MAPK and Stat3 proteins may be anearly event in hepatocellular carcinogenesis.     

Effect of phosphorylation of MAPK and Stat3 and expression of c-fas and c-jun proteins on hepatocarcinogenesis and their clinical significance

AIM To study the effect of phosphorylation ofMAPK and Stat3 and the expression of c-fos andc-jun proteins on hepatocellular carcinogenesisand their clinical significance.METHODS SP immunohistochemistry was usedto detect the expression of p42/44MAPK, p-Stat3,c-fos and c-jun proteins in 55 hepatocellularcarcinomas (HCC) and their surrounding livertissues.RESULTS The positive rates and expressionlevels of p42/44MAPK, p-Stat3, c-fos and c-junproteins in HCCs were significantly higher thanthose in pericarcinomatous liver tissues (PCLT).A positive correlation was observed between theexpression of p42/44MAPK and c-fos proteins, andbetween p-Stat3 and c-jun, but there was nosignificant correlation between p42/44MAPK and p-Stat3 in HCCs and their surrounding livertissues.CONCLUSION The abnormalities of Ras/Rat/MAPK and JAKs/ Stat3 cascade reaction maycontribute to malignant transformation ofhepatocytes. Hepatocytes which are positive forp42/ 44MAPK, c-fos or c-jun proteins may bepotential malignant pre-cancerous cells.Activation of MAPK and Stat3 proteins may be anearly event in hepatocellular carcinogenesis.     

Replication and Inhibitors of Enteroviruses and Parechoviruses

The Enterovirus (EV) and Parechovirus genera of the picornavirus family include many important human pathogens, including poliovirus, rhinovirus, EV-A71, EV-D68, and human parechoviruses (HPeV). They cause a wide variety of diseases, ranging from a simple common cold to life-threatening diseases such as encephalitis and myocarditis. At the moment, no antiviral therapy is available against these viruses and it is not feasible to develop vaccines against all EVs and HPeVs due to the great number of serotypes. Therefore, a lot of effort is being invested in the development of antiviral drugs. Both viral proteins and host proteins essential for virus replication can be used as targets for virus inhibitors. As such, a good understanding of the complex process of virus replication is pivotal in the design of antiviral strategies goes hand in hand with a good understanding of the complex process of virus replication. In this review, we will give an overview of the current state of knowledge of EV and HPeV replication and how this can be inhibited by small-molecule inhibitors.     

心电图、心电向量图与冠状动脉造影结果对比分析

目的:通过分析心电图(Electrocardiogram,ECG)和心电向量图(Vectorcardiogram,VCG)的改变与冠脉造影（CAG）结果进行对比,探讨ECG、VCG在冠状动脉病变中的诊断价值。方法: 选择2008年1月~2009年12月临床拟诊断为冠心病患者108例,行常规ECG、VCG检查,并于1周内进行CAG,对检查结果依据各自的诊断标准进行判定,以CAG为标准诊断法,利用四格表法,计算相关评价真实性的指标并进行比较。结果: ①VCG检测的灵敏度、特异度、准确度显著高于ECG(P<0.05,P<0．01)。②ECG、VCG阳性率与冠脉病变支数组间比较:在单支病变、双支病变中,VCG阳性率明显高于ECG(P<0.05),左主干或三支病变无统计学意义;组内比较:ECG组左主干或三支病变组较单支病变、双支病变阳性率高(P<0.05,P<0.01);VCG组左主干或三支病变组较单支病变阳性率高(P<0.05);与双支病变阳性率比较无统计学意义;③ECG、VCG阳性率与冠脉病变程度组间比较:冠脉病变狭窄50%～69%的VCG阳性率明显高于ECG (P<0.05),其他两组阳性率比较无统计学意义;组内比较:ECG组冠脉病变狭窄≥90%较50%～69%、70%～89%的阳性率高(P<0.05,P<0.01); VCG组狭窄≥90%较50%～69%阳性率高（P<0.01),其他无统计学意义。结论: VCG对冠心病检测价值显著高于ECG。     

Detection and characterization of the product of hydroethidine and intracellular superoxide by HPLC and limitations of fluorescence

Here we report the structural characterization of the product formed from the reaction between hydroethidine (HE) and superoxide (O(2)(.-)). By using mass spectral and NMR techniques, the chemical structure of this product was determined as 2-hydroxyethidium (2-OH-E(+)). By using an authentic standard, we developed an HPLC approach to detect and quantitate the reaction product of HE and O(2)(.-) formed in bovine aortic endothelial cells after treatment with menadione or antimycin A to induce intracellular reactive oxygen species. Concomitantly, we used a spin trap, 5-tert-butoxycarbonyl-5-methyl-1-pyrroline N-oxide (BMPO), to detect and identify the structure of reactive oxygen species formed. BMPO trapped the O(2)(.-) that formed extracellularly and was detected as the BMPO-OH adduct during use of the EPR technique. BMPO, being cell-permeable, inhibited the intracellular formation of 2-OH-E(+). However, the intracellular BMPO spin adduct was not detected. The definitive characterization of the reaction product of O(2)(.-) with HE described here forms the basis of an unambiguous assay for intracellular detection and quantitation of O(2)(.-). Analysis of the fluorescence characteristics of ethidium (E(+)) and 2-OH-E(+) strongly suggests that the currently available fluorescence methodology is not suitable for quantitating intracellular O(2)(.-). We conclude that the HPLC/fluorescence assay using HE as a probe is more suitable [corrected] for detecting intracellular O(2)(.-).     

Overweight and Obesity and Progression of ADPKD

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大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和外源基因的导入

目的探讨绿色荧光蛋白基因转染骨髓间质干细胞的可行性。方法采用F icoll-PaqueTMP lus淋巴细胞分离液,根据细胞密度梯度原理,分离大鼠骨髓间充质干细胞(rM SC s)并进行体外原代培养和传代扩增,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,免疫细胞化学法对其初步鉴定。流式细胞仪分析转染效率。结果原代和传代培养的细胞呈现梭形外观,具有较强的生长增殖能力;细胞均一表达CD44、CD54、CD106、CD29抗原。电穿孔法转染rM SC s转染率为32.8%±3%。结论采用比重为1.077 g/L的F icoll-PaqueTMP lus能分离获得大鼠骨髓间充质干细胞,经原代培养和传代培养能够迅速扩增。电穿孔法具有较高的介导外源基因表达于rM SC s的效率。     

血清C-反应蛋白和红细胞分布宽度在AECOPD与稳定期的变化及意义

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者急性加重期入院、出院时血清C-反应蛋白(CRP)和红细胞分布宽度(RDW)与正常人的差异。方法分别检测健康老年组(年龄≥65岁)、COPD急性加重期患者入院、出院时CRP和RDW水平,比较组间各指标的差异。结果急性加重期患者入院、出院时CRP和RDW水平均高于健康老年组,入院时CRP水平高于出院时(P0.01),入院、出院时RDW水平无统计学差异。结论 CRP和RDW可一定程度评估COPD病情及反映病情变化。