κ-阿片受体激活后通过caveolin-eNOS途径抑制由软脂酸钠诱导的内皮损伤

目的 探讨κ-阿片受体在对抗软脂酸钠（sodium palmitate,SP）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤中的作用及其作用机制。 方法 体外培养HUVECs并分为6组即正常对照组、κ-阿片受体激动剂U50,488H组、SP组、SP+U50,488H组、SP+U50,488H+κ-阿片受体阻断剂nor-BNI组、SP+U50,488H+eNOS抑制剂L-NAME组。检测各组细胞生存率、测定各组caveolin-1、eNOS的蛋白表达水平,以及NO的产生及细胞凋亡情况。 结果 与正常对照组相比,SP组细胞的生存率明显降低（P<0.01）,caveolin-1的蛋白表达显著增加（P<0.01）,eNOS的活性明显受到抑制（P<0.05）,NO生成量大幅下降（P<0.01）,细胞凋亡显著增加（P<0.01）;而κ-阿片受体激动剂U50,488H可以显著抑制SP的上述作用,使细胞生存率升高（P<0.01）,caveolin-1的蛋白表达均显著降低（P<0.05或P<0.01）,eNOS的蛋白表达显著增加（P<0.05）,NO生成量显著增多（P<0.01）,细胞凋亡明显减少（P<0.01）。U50,488H的作用可被κ-阿片受体阻断剂nor-BNI或NO合酶抑制剂L-NAME所阻断（P<0.05或P<0.01）。 结论 激活κ-阿片受体能够抑制软脂酸钠诱导的内皮损伤,其机制可能与下调caveolin-1表达,增强eNOS活性有关。     

缺血/再灌注心肌к阿片受体的变化及其与抗I/R性心律失常的关系

目的 观察κ阿片受体(κ opioid receptor,κ-OR)在抗大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia and reperfusion,I/R)中的变化及其与抗I/R性心律失常的关系。方法 将48只SD大鼠随机分为6组,每组8只,即对照组、U50,488H组、I/R组、U50,488H+I/R组、BNI+U50,488H+I/R组和BNI+I/R组,用于建立在体的大鼠I/R模型,观察κ-OR激动剂U50,488H对大鼠心肌I/R模型室性心律失常的影响。另取18只SD大鼠随机分为6组,每组3只,即对照组、假手术组、再灌注即刻组、60、180和360 min组,用于RT-PCR及Western blot检测I/R处理后心肌组织中κ-OR mRNA转录及其蛋白的表达。结果 对照组偶发早搏,I/R组心律失常的发生率明显增加(P<0.01)。给予U50,488H可以明显降低I/R引起的室速和室颤的发生率(P<0.01)及心律失常的评分(P<0.05)。U50,488H抗心律失常的作用可被选择性的κ-OR拮抗剂nor-BNI完全阻断(P<0.01),而nor-BNI本身对I/R所致心律失常没有影响。RT-PCR的结果发现,κ-OR mRNA的转录水平在再灌注的即刻、再灌注后60及180 min时,明显高于对照组(P<0.01),在60 min时达到高峰,360 min时恢复到正常水平。Western blot检测表明,在再灌注的即刻、再灌注后60,180 和360 min时,κ-OR蛋白的表达量均明显高于对照组(P<0.05)。结论 在心肌I/R时,κ-OR基因的转录和其蛋白表达的水平明显上调,可能与其抗I/R性心律失常的作用相关。     

U50,488H对高脂大鼠血管内皮功能的影响

目的 探讨κ-阿片受体（κ-OR）选择性激动剂U50,488H对高脂大鼠血管内皮功能的影响及其机制。方法 成年SD大鼠分别饲以正常和高脂饲料14周,腹腔隔日注射U50,488H和κ-OR阻断剂nor-BNI,麻醉后下腔静脉取血,检测总胆固醇（TC）及低密度脂蛋白（LDL）的水平。透射电子显微镜观察动脉内皮细胞和平滑肌细胞的超微结构改变。观察胸主动脉对内皮依赖性血管舒张剂乙酰胆碱（ACh）及内皮非依赖性血管舒张剂（SNAP）的舒张反应。结果 高脂饲料喂养可引起大鼠血清TC和LDL显著升高;主动脉血管内皮依赖性舒张功能显著降低。透射电镜下可见动脉内皮细胞和平滑肌细胞的超微结构出现损伤。U50,488H可显著减轻高脂血症引起的血管内皮依赖性舒张功能障碍和动脉内皮细胞与平滑肌细胞超微结构损伤,κ-OR阻断剂nor-BNI可以阻断U50,488H的上述作用。结论 高脂血症大鼠存在内皮功能障碍,U50,488H可通过激活κ-OR改善高脂血症导致的内皮结构改变和功能障碍。     

针刺对高脂血症大鼠主动脉内皮NF-κB表达的影响

目的 探讨高脂饮食诱导的高脂血症大鼠主动脉内皮NF-κB的表达情况以及针刺对主动脉NF-κB表达的影响.方法 17只刚断乳的SD大鼠经高脂喂养12 w后检测血清血脂谱、一氧化氮(NO)和髓过氧化物酶(MPO),按体重随机分为模型组(8只)和针刺组(9只),干预4 w后检测主动脉NO、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、NF-κB,并设普食对照组(9只).结果 高脂喂养12 w后,高脂大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、MPO明显高于普食对照组(P＜0.01),血清NO低于普食对照组(P＜0.05);干预4 w后,模型组大鼠主动脉MDA、NF-κB均明显高于对照组(P＜0.05),NO和SOD明显低于对照组(P＜0.05);针刺后主动脉MDA、NF-κB明显降低(P＜0.05),NO和SOD明显增加(P＜0.05).结论 高脂饮食诱导的高脂血症大鼠主动脉内皮的NF-κB表达增强,针刺能够通过抑制NF-κB的表达改善高脂饮食对主动脉内皮的损伤.     

κ-阿片受体激动剂U50,488H抑制缺血/再灌注心肌线粒体分裂的作用及机制

目的研究外源性κ-阿片受体激动剂U50,488H对缺血/再灌注心肌线粒体分裂的影响及机制。方法将SD大鼠随机分为6组:假手术（Sham）组，心肌缺血/再灌注（MI/R）组，MI/R+κ-阿片受体激动剂U50,488H（MI/R+U）组，MI/R+κ-阿片受体阻断剂nor-BNI+U50,488H（MI/R+N+U）组，MI/R+磷脂酰激醇3-激酶（pi 3-kinases，PI3K）抑制剂wortmannin+U50,488H（MI/R+W+U）组，MI/R+蛋白激酶B（protein kinase B, Akt）抑制剂MK2206+U50,488H（MI/R+M+U）组。血清肌酸激酶（creatine kinase, CK）试剂盒检测血清CK水平；三苯基氯化四氮唑（triphenyte-trazoliumchloride, TTC）-伊文氏蓝双染检测心肌梗死面积；Western blotting检测细胞内磷酸化PI3K、磷酸化Akt（Ser 473）、磷酸化线粒体动力学分裂相关蛋白（dynamin-related protein, Drp）1（Ser 637）的表达；透射电镜观察线粒体形态。结果与Sham组相比，MI/R组血清CK水平明显升高（P<0.01），出现明显的心肌梗死（P<0.01），磷酸化PI3K、磷酸化Akt表达增加（P<0.05），磷酸化Drp1表达降低（P<0.01），线粒体分裂明显增加（P<0.01）；与MI/R组相比，MI/R+U组血清CK水平明显降低（P<0.01），心肌梗死面积减小 （P<0.01），磷酸化PI3K、磷酸化Akt和磷酸化Drp1的表达显著增加（P<0.01），线粒体分裂减少（P<0.01）。给予nor-BNI、wortmannin或MK2206后，U50,488H的上述作用均被阻断。结论缺血/再灌注可引起心肌损伤和线粒体分裂增加，κ-阿片受体激活后通过PI3K-Akt通路使Drp1磷酸化增加，抑制缺血/再灌注心肌的线粒体分裂，减轻心肌损伤。     

κ-阿片受体激动剂U50488H对内皮素-1所致大鼠室性心律失常的影响

目的:研究κ-阿片受体选择性激动剂U50488H是否可通过调节内皮素-1(ET-1)表达的水平,进而影响c-Src蛋白酪氨酸激酶(PTK)的表达以实现抗心律失常的作用。方法:将42只大鼠随机分为7组(每组6只):正常对照组、U50488H组、U50488H+nor-BNI组、nor-BNI组、ET-1组、ET-1+U50488H组及ET-1+U50488H+nor-BNI组。左心室及股动脉插管观测大鼠心率(HR)、动脉压(ABP)、左心室内压(LVP)及心脏收缩和舒张功能(±LVdp/dtmax)等血流动力学指标,并计算大鼠室性心律失常的发生情况和大鼠的死亡率。实时荧光定量PCR检测ET-1及ET-1受体(ETRA)mRNA表达;Western blot测定ETRA及下游分子c-Src PTK的表达水平。结果:U50488H可显著抑制ET-1所致大鼠ABP、LVP以及心脏收缩、舒张功能的升高,并可显著降低ET-1所致大鼠室性心律失常的发生率和死亡率(P<0.01),以及抑制心肌ET-1 mRNA的水平(P<0.01)。给予ET-1后,磷酸化(P)-c-Src PTK的表达水平升高,U50488H可显著降低c-Src PTK的水平以及ET-1引起的P-c-Src PTK表达的水平(P<0.05),此作用可被κ-阿片受体阻断剂nor-BNI所阻断。结论:κ-阿片受体选择性激动剂U50488H可抑制ET-1所致大鼠室性心律失常发生。该作用可能与抑制ET-1及其下游分子c-Src PTK的表达有关。     

硫化氢对自发性高血压大鼠血管炎症反应的调节作用

目的 探讨新型气体信号分子硫化氢(H2S)对自发性高血压大鼠(SHR)血管炎症反应的调节作用.方法 4周龄Wistar-Kyoto(WKY)雄性大鼠和SHR雄性大鼠分为4组:WKY大鼠对照组、SHR对照组、SHR+硫氢化钠(NaHS,H2S供体)组及SHR+炔丙基甘氨酸(PPG,H2S生成关键酶抑制剂)组,饲养至9周.尾容积法测清醒时大鼠血压,免疫组织化学方法检测主动脉内皮细胞膜细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)和核转录因子抑制因子-α(IκB-α)的蛋白表达,原位杂交分析检测主动脉内皮细胞ICAM-1 mRNA的表达.结果 SHR对照组血压显著高于WKY对照组(P<0.05),主动脉内皮细胞ICAM-1、ICAM-1 mRNA、胞核NF-κB p65明显高(P均<0.01),胞浆IκB-α蛋白表达明显低(P<0.01).SHR+NaHS组血压显著低于SHR对照组,主动脉内皮细胞ICAM-1、ICAM-1 mRNA、胞核NF-κB p65蛋白表达明显低(P<0.05),胞浆IκB-α蛋白表达明显增高(P<0.05),SHR+PPG组主动脉内皮细胞ICAM-1、ICAM-1mRNA、胞核NF-κB p65蛋白表达更高(P<0.05),胞浆IκB-α蛋白表达显著低(P<0.05).结论 H2S可通过抑制SHR血管炎症发挥抗高血压效应.H2S的抗血管炎症效应可能通过上调IκB-α的表达,降低NF-κB p65的表达,抑制ICAM-1 mRNA的转录和蛋白表达实现.     

葡萄籽原花青素对糖尿病大鼠心肌糖基化终末产物受体和结缔组织生长因子的影响

目的 探讨葡萄籽原花青素(GSPE)对糖尿病大鼠心肌糖基化终末产物受体(RAGE)、核转录因子κB(NF-κB)和结缔组织生长因子(CTGF)的影响.方法 将链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠30只随机分为两组,糖尿病未治疗组(糖尿病1组)和糖尿病GSPE治疗组(糖尿病2组,每日给予GSPE 250 mg/kg灌胃)各15只;正常大鼠20只随机分为正常对照组(对照l组)和正常GSPE治疗组(对照2组,每日给予GSPE 250 mg/kg灌胃)各10只,24周后采血检测空腹血糖(FBG)、糖基化终末产物(AGEs),免疫组织化学染色和Western blot测定心肌NF-κB蛋白的表达,并应用Westernblot测定各组心肌RAGE和CTGF的蛋白表达变化.结果 糖尿病1组FBG、血清AGEs含量较对照1组显著升高(P＜0.05),经GSPE治疗后,血清AGEs含量显著降低(P＜0.05),而FBG降低差异无统计学意义;糖尿病1组心肌组织RAGE、NF-κB和CTGF蛋白表达较对照1组显著升高(P＜0.05),GSPE能够显著抑制RAGE、NF-κB和CTGF蛋白表达.结论 GSPE对糖尿病心肌病具有保护作用,其可能机制与抑制糖尿病大鼠AGEs-RAGE、NF-κB和CTGF的表达有关.     

姜黄素调控糖尿病小鼠主动脉平滑肌大电导钙激活钾通道β1亚基蛋白表达的研究

目的:探讨姜黄素对糖尿病小鼠主动脉平滑肌大电导钙激活钾通道β1亚基(BK-β1)蛋白表达的影响及可能的机制。方法:以注射链脲霉素的方法制备糖尿病小鼠模型,将雄性C57/BL6J小鼠分为4组:对照组、姜黄素对照组、糖尿病组和姜黄素糖尿病组,每组15只。姜黄素对照组和姜黄素糖尿病组给予姜黄素100 mg/(kg·d)灌胃,对照组和糖尿病组给予5%的羧甲基纤维素钠灌胃。灌胃8周后,Western blot检测腹主动脉BK-β1、肌肉环指蛋白1(MuRF1)、核因子κB1(NF-κB1)/p50和NF-κB/Rel家族成员RelA/p65的表达水平;免疫组化检测腹主动脉BK-β1和MuRF1的表达水平;动脉血管舒张反应性实验检测腹主动脉对BK通道激动剂NS-1619的反应性。结果:与对照组相比,糖尿病组的BK-β1的表达显著降低,MuRF1、NF-κB1/p50和RelA/p65的表达显著增加,腹主动脉血管环对NS-1619的舒张反应性降低(P0.05);与糖尿病组相比,姜黄素糖尿病组的BK-β1的表达显著增加,MuRF1、NF-κB1/p50和RelA/p65的表达显著降低,腹主动脉对NS-1619的舒张反应性显著改善(P0.05)。结论:姜黄素通过抑制MuRF1上调糖尿病小鼠主动脉平滑肌BK-β1表达,改善腹主动脉对NS-1619的舒张反应性,其机制可能与其抑制NF-κB的表达有关。     

活血降糖胶囊对T2DM大鼠主动脉粥样硬化血管壁核因子-κB表达的影响

目的观察活血降糖胶囊对2型糖尿病(T2DM)大鼠并发主动脉粥样硬化血管壁核因子-κB(NF-κB)表达水平的调控作用。方法选1月龄SD大鼠45只,随机取8只为空白组(灌服等量蒸馏水),其余为实验组,成模大鼠随机分为中药组[灌服活血降糖胶囊悬浮液1.44g/(kg.d)和模型组(灌服等量蒸馏水)。每天灌胃1次,连续治疗30d后,取主动脉做常规石蜡切片,免疫组化观察其核因子-κB(NF-κB)表达的程度。结果模型组主动脉内膜出现典型粥样硬化病变,活血降糖胶囊中药组动脉膜受损程度有所减轻。模型组主动脉血管壁NF-κB表达明显增加,活血降糖胶囊中药组均可降低其主动脉NF-κB表达(P<0.05)。结论活血降糖胶囊可降低动脉粥样硬化大鼠主动脉壁NF-κB表达的作用,发挥对抗血管壁的炎性损伤作用。     

糖尿病大鼠动脉粥样硬化核转录因子-κB活化作用的研究

目的：探讨核转录因子（NF）-κB在糖尿病大鼠动脉粥样硬化病变形成中的作用。方法：Wistar大鼠随机分三组：链脲佐菌素诱导的糖尿病组（DM组）、n-乙酰半胱氨酸（NAC）治疗组（NAC组）、对照组（C组）。分别于4周、8周、12周、16周检测血糖、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、糖化血红蛋白（HbA1C）水平。于相应时间分别处死大鼠并分离和摘取主动脉，采用SP免疫组化或电泳迁移率变动分析（electrophoretic mobility shift assay，EMSA）方法测定主动脉内皮NF-κB的DNA结合活性。结果：（1）DM组、NAC组的血糖及HbA，C水平显著高于C组（P〈0．01）；（2）DM及NAC两组的TC、TG在4周、8周无显著变化，TC、TG、在12周、16周时显著高于C组（P〈0．01）；（3）在12周、16周时NF-κB结合活性，ICAM-1表达在DM大鼠主动脉校对照组明显增强（＋＋），NAC组较DM组减弱（＋）；（4）HE染色在DM组于12周、16周时出现AS的早期病理改变，而在NAC和C组未发现AS的病理改变。结论：（1）DM大鼠主动脉存在NF-κB的激活，并启动下游靶基因粘附分子ICAM-1的表达，进而导致大鼠AS的发生、发展，因此，NF-κB的激活可能是导致DM大鼠AS的始动因子之一；（2）高血糖是NF-κB不适当激活的又一因素，因此，早期有效的控制血糖是防治DM鼠AS的基本策略。     

Dysregulation of the endothelial nitric oxide synthase-soluble guanylate cyclase pathway is normalized by insulin in the aorta of diabetic rat

Antiatherogenic effects of nitric oxide (NO) are mediated by activation of soluble guanylate cyclase (sGC) and are impaired by diabetes in animals and humans. We investigated whether uncontrolled diabetes and insulin therapy effect expression and function of the main enzymes of the endothelial nitric oxide (eNOS)-sGC signaling pathway in vivo. Expression and function of eNOS, sGC and protein kinase G (PKG) were studied by Western blot analysis and vasorelaxation to NO-donor in thoracic aortas from control (CON) and streptozotocin (SZT)-induced diabetic rats during uncontrolled diabetes (DM) and insulin treatment (INS) for 8 weeks. Protein level of eNOS was increased (+300%, P < 0.05), while sGC (-50%) and PKG (-65%) proteins were reduced (P < 0.03) in aortas of DM. Insulin treatment normalized these defects resulting in eNOS, sGC and PKG aortic protein content comparable to control. In aortic rings, diethylamine NONOate (DEA-NONOate)-induced vasorelaxation was attenuated (P< or =0.05) in DM compared to control and returned to normal in INS. Thus, experimental diabetes decreases sGC and PKG expression and their NO-dependent activation in aorta despite overexpression of eNOS. These abnormalities are normalized by insulin treatment and improved metabolic control.     

TNF-α、NF-κB诱导糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及雷帕霉素干预影响（英文）

目的：探讨糖尿病大鼠肾组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）、核转录因子-κB（NF-κB）对肾组织细胞凋亡的诱导以及雷帕霉素干预的作用。方法：选择2型糖尿病大鼠（GK大鼠）20只,均分为糖尿病模型组（DM组）,雷帕霉素治疗组（DMR组,建立糖尿病模型后给予雷帕霉素治疗）;另选择10只Wistar雄性大鼠作为正常对照组。分别在4周、8周后检测各组肾组织细胞凋亡情况,NF-κB,TNF-α的表达水平以及血脂、血糖水平。结果：模型制作后4周、8周,与正常对照组和DMR组比较,DM组大鼠肾组织细胞凋亡数[RCA,4周（0.217±0.031）、（0.272±0.031）比（0.545±0.031）、8周（0.358±0.031）、（0.350±0.031）比（0.811±0.031）]均明显增多,NF-κBp65[OD：4周（0.160±0.027）、（0.131±0.027）比（0.411±0.027）、8周（0.232±0.027）、（0.275±0.027）比（0.634±0.027）]、TNF-α[OD：4周（0.242±0.027）、（0.275±0.027）比（0.617±0.027）、8周（0.385±0.027）、（0.342±0.027）比（0.912±0.027）]表达均明显升高（P均〈0.01）。相关分析显示,肾组织NF-κBp65与TNF-α,RCA与TNF-α,NF-κBp65均呈正相关关系（r=0.956,0.953,0.886,P均〈0.01）。结论：糖尿病病大鼠的肾细胞凋亡显著增加,雷帕霉素干预组肾细胞凋亡显著减少,NF-κB、TNF-α表达显著增加,其保护作用可能是NF-κB、TNF-α阻滞细胞的凋亡。     

胰岛素抵抗和2型糖尿病大鼠主动脉内皮依赖性舒张功能及相关活性物质的变化

目的观察胰岛素抵抗和2型糖尿病大鼠胸主动脉内皮依赖性血管舒张功能和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、磷脂酰肌醇-3激酶（PBK）、蛋白激酶B（PKB）的变化,探讨胰岛素抵抗和高血糖状态下内皮功能障碍的发生机制。方法4～6周龄雄性SD大鼠高糖高脂喂养6周,建立胰岛素抵抗模型（IR组）,再从中取20只予小剂量链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型（DM组）,喂养8周后用正常血糖高胰岛素钳夹技术的葡萄糖输注率评价胰岛素抵抗,用大鼠离体主动脉环对乙酰胆碱的血管舒张反应来评价大鼠的内皮依赖性血管舒张功能,Gress重氮化反应法检测主动脉NO含量,免疫组化法检测主动脉eNOS阳性表达,RT—PCR方法检测主动脉PBK、PKB、eNOSmRNA表达,透射电镜检测大鼠主动脉超微结构变化,并检测空腹血糖、空腹胰岛素、甘油三酯和胆固醇水平,计算胰岛素敏感指数。结果（1）IR和DM组大鼠体重、空腹胰岛素、甘油三酯和胆固醇均较正常对照组显著高（P〈0．01）,胰岛素敏感指数、葡萄糖输注率显著低（P〈0．01）。（2）IR和DM组大鼠胸主动脉内皮依赖性血管舒张功能显著低于NC组（P〈0．05）,DM组又低于IR组,大鼠主动脉对乙酰胆碱诱导的最大舒张反应与空腹血糖、甘油三酯、胆固醇和空腹胰岛素呈显著负相关,与胰岛素敏感指数显著正相关（P均〈0．01）。（3）IR、DM组大鼠离体主动脉NO浓度及PBK、PKB、eNOSmRNA相对光密度较正常对照组显著低（P〈0．01）,而DM组上述指标又低于IR组（P〈0．05）。免疫组化显示IR、DM组主动脉eNOS阳性表达较正常对照组显著低（P〈0．01）。（4）IR和DM组大鼠胸主动脉透射电镜检查均可见内皮细胞和内皮下超微结构的病理改变。结论胰岛素抵抗和2型糖尿病大鼠存在内皮依赖性血管舒张功能下降和主动脉超微结构的病理改变,同时主动脉NO浓度、eNOS免疫组化阳性表达、PBK、PKB、eNOSmRNA表达也下降,提示PI-3K、PKB、eNOS表达下降致NO产生减少可能是胰岛素抵抗和高血糖内皮功能障碍的机制之一。     

SUMO4、NF-κB、IκB在2型糖尿病大鼠肾脏中的表达及意义（英文）

目的：探讨2型糖尿病大鼠肾脏组织小泛素相关修饰蛋白4（SUMO4）、核转录因子（NF）-κB、NF-κB的抑制因子（IκB）的表达及意义。方法：取10只40周龄的无特定病原体（SPF）级雄性自发性糖尿病（GK）大鼠,10只40周龄的SPF级雄性Wistar大鼠,通过HE染色法观察肾组织病变、免疫组化法观察肾组织的SUMO4与IκB、SUMO4与NF-κB表达情况。结果：GK大鼠的肾小球毛细血管球肥大,基底膜轻度增厚,肾小球系膜细胞增生、肥大,肾小管上皮细胞肥大。与正常Wistar大鼠比较,GK大鼠的肾脏NF-κB[（0.232±0.034）比（0.634±0.058）]、IκB[（0.242±0.027）比（0.712±0.078）]及SUMO4[（0.160±0.031）比（0.545±0.045）]的表达水平均明显升高（P均〈0.01）。结论：NF-κB、IκB及SUMO4在GK大鼠肾脏组织表达增多。从而推断在2型糖尿病大鼠肾脏SUMO可能抑制NF-κB转录活性,SUMO化可能成为治疗糖尿病肾脏微血管病变的一个新靶点。     

雷帕霉素减少GK糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及其机制

目的观察糖尿病肾组织肿瘤坏死因子（TNF-α）、核因子（NF-κB）的表达及其与肾组织细胞凋亡关系以及雷帕霉素对其的影响。方法将20只GK大鼠随机分为DM组（n=10）、DMR组（n=10）,10只Wistar大鼠作为NC组。DMR组予以6mg／kg雷帕霉素灌胃,DM与NC组仅给予等量生理盐水灌胃。TUNEL法检测肾组织细胞凋亡。免疫组织化学法（IHC）检测肾组织TNF-α和NF-κB的表达。结果TUNEL法显示,NC组肾组织未见明显的凋亡细胞;4周及8周DM组凋亡数呈进行性增多（P〈0．01）。IHC显示,NC组肾组织TNF-α、NF-κBp65有轻微阳性表达;4周、8周DM组NF-KBp65、TNF-α表达有逐渐上升的趋势,均显著高于正常对照组（P〈0．01）。NF-κBp65、TNF-α阳性表达呈正相关（P〈0．01）;肾组织NF-a和NF-κBp65表达与肾组织细胞凋亡之间均呈正相关（P〈0．01）;与DM组比较,DMR组4周、8周组肾组织TNF-α和NF-κBp65的过度表达均被显著抑制（P〈0．01）,肾组织细胞凋亡数显著减少（P〈0．01）。结论NF-κB及其诱导的TNF-α在糖尿病肾病损伤中发挥重要作用,雷帕霉素可能通过抑制NF-κB和TNF-α的表达减少减轻肾组织细胞凋亡。     

核转录因子κB在糖尿病大鼠坐骨神经中的表达及其与传导速度的关系

目的研究核转录因子出（NF-κB）在糖尿病大鼠坐骨神经中的表达动态变化及其意义。方法建立糖尿病大鼠模型后，分别在实验1个月、3个月、6个月时测定坐骨神经的传导速度和NF-κB的表达量。结果（1）坐骨神经传导速度：与正常对照（NC）组相比，糖尿病模型1个月组大鼠坐骨神经传导速度未见明显下降，3个月、6个月组则明显下降（P〈0．05）；（2）EMSA电泳条带灰度分析：与NC相比，NF-κB表达在糖尿病各组均明显增强（P〈0．05）。结论NF-κB在糖尿病大鼠坐骨神经中持续活化，推断NF-κB在糖尿病周围神经病变的发病机制中起重要作用。     

NF-κB表达与糖尿病大鼠肺损伤的关系

目的探讨糖尿病大鼠肺脏的NF-κB表达情况及NF-κB的表达增强对肺脏损伤的程度。方法 30只10周龄SD大鼠随机分为正常对照组(A组,雌雄各5只)、糖尿病模型组(B组,雌雄各10只),采用链脲菌素诱导建立12周糖尿病大鼠模型。模型建立12周后,全部大鼠采用20%的乌拉坦1.35 g/kg腹腔内注射麻醉处死,并取左肺下叶固定切片。光学显微镜下观察肺组织炎症程度,免疫组织化学方法检测肺组织NF-κB表达的阳性面积百分比。结果 (1)肺部炎症观察:大多数正常对照组大鼠肺组织内未见炎症细胞。糖尿病模型组可见片状炎症细胞聚集,局部肺泡结构消失;(2)NF-κB的表达:NF-κB主要表达于气管、肺泡的上皮细胞内。正常对照组肺组织阳性表达明显弱于糖尿病模型组。分别对正常对照组和糖尿病模型组大鼠肺脏支气管上皮细胞和肺泡壁上皮细胞的NF-κB的表达做秩和检验(P0.05)具有明显统计学差异。结论 2型糖尿病大鼠模型肺组织内时炎症的改变程度较正常对照组相比明显加重,NF-κB的表达增加可能是糖尿病时肺脏病变的一个重要的危险因素。