蚕蚀性角膜溃疡角膜及邻近球结膜的免疫组织化学研究

用免疫组化技术对１４例蚕蚀性角膜溃疡的病变角膜及邻近球结膜标本的人类白细胞ＤＲ抗原（ＨＬＡ－ＤＲ）表达及Ｔ淋巴细胞亚群进行检测，发现有大量的角膜和球结膜的上皮细胞、角膜基质细胞异常地表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原，同时，辅助性Ｔ细胞／抑制性Ｔ细胞（Ｔ＿Ｈ／Ｔ＿Ｓ）比例较正常对照组明显增高。结果提示，周边部角膜和球结膜主要组织相容性Ⅱ类抗原（ＭＨＣ－Ⅱ）的异常表达以及Ｔ＿Ｈ／Ｔ＿Ｓ升高导致过强的自身免疫反应，可能是本病发病的直接原因。     

正常人泪腺免疫细胞的研究

目的 研究正常人泪腺组织细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达及郎格罕细胞（Ｌａｓｎｇｅｒｈａｎ’ｓｃｅｌｌ,ＬＣ）,Ｔ淋巴细胞亚群的特征。方法 采用链菌素－过氧化物酶法同０例正常人泪腺组织,结果 腺叶,腺管周围有淋巴细胞聚集灶,其中ＣＤ４占多数,间质中淋巴细胞以ＣＤ８为主,同时见少数腺上皮细胞表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原,相应部位Ｔ淋细胞浸润严重,间质散在极少量ＬＣ。结论 免疫反应中泪腺聚集灶中的淋巴细胞更重要,正常     

γ—干扰素诱导角膜上皮细胞和内皮细胞HLA抗原在体外表达的实验研究

目的了解γ－干扰素对角膜细胞ＨＬＡ抗原表达的影响。动态观察角膜细胞间ＨＬＡ－ＡＢＣ抗原和ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的量变关系。方法采用ＡＣＡＳ－５７０粘附式细胞分析仪和间接免疫荧光技术，对体外原代培养的正常成人角膜上皮和内皮细胞ＨＬＡ－ＡＢＣ位点和ＨＬＡ－ＤＲ位点抗原表达的相对量进行测定。结果在体外，γ－干扰素可诱导角膜上皮细胞和内皮细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的异常表达，同时使ＨＬＡ－ＡＢＣ位点抗原表达量增加；经γ－干扰素诱导后，上皮细胞的ＨＬＡ－ＡＢＣ抗原及ＨＬＡ－ＤＲ抗原的表达量均较相应的内皮细胞表达量高；且两种细胞的ＨＬＡ－ＡＢＣ抗原表达量增高幅度较小，而ＨＬＡ－ＤＲ抗原增高幅度较大。结论角膜细胞ＨＬＡ抗原的异常表达可能是角膜移植排斥反应发生的主要原因；γ－干扰素在角膜移植排斥反应发生时充当重要角色。     

Vogt-小柳-原田综合征与HLA-DR4、DRw53相关的研究

目的：探讨ＨＬＡ－ＤＲ４、ＨＬＡ－ＤＲｗ５３抗原与Ｖｏｇｔ－小柳－原田综合征的相关性。方法：用聚合酶链反应一系列引物法对６１例Ｖｏｇｔ－小柳原田综合征和１０２个健康人进行ＨＬＡ－ＤＲ４、ＨＬＡ－ＤＲｗ５３分型。结果：患者ＨＬＡ－ＤＲ４、ＨＬＡ－ＤＲｗ５３阳性率分别为４５．９０％和６２．２９％,正常对照组阳性率则分别为１４．７１％和３８．２４％,患者与正常对照之间有显著性差异。结论 Ｖｏｇｔ－小柳原田综合征与ＨＬＡ－ＤＲ４和ＨＬＡ－ＤＲｗ５３有密切的相关性。     

Graves眼病眼眶组织HLA-DR和HSP-70表达的研究

目的 了解Ｇｒａｖｅｓ眼病患者眼部组织的相容性抗原ＤＲ（ＨＬＡ－ＤＲ）和热休克蛋白（ＨＳＰ－７０）的表达检其与病程和治疗的关系。方法 收集Ｇｒａｖｅｓ眼病患者的眼外肌的表达差异。结果 ＨＬＡ－ＤＲ在眼外肌的纤维母细胞、血管内皮细胞和润的淋巴细胞表达，以未治病人的眶组织为明显；ＨＳＰ－７０在肌细胞和纤维母细胞表达，病程短的病人其表达增强。结论 眼外肌细胞和纤维母细胞可能都是Ｇｒａｖｅｓ眼病自身免疫反     

Vogt-小柳原田综合征与HLA-DR4、DRw53相关的研究

目的 探讨ＨＬＡ－ＤＲ４、ＨＬＡ－ＤＲｗ５３抗原与Ｖｏｇｔ－小柳原田综合征的相关性。方法 用聚合酶链反应一系列引物对对６１例Ｖｏｇｔ－小柳原田综合征和１０２例健康人进行ＨＬＡ－ＤＲ４、ＨＬＡ－ＤＲｗ５３分型,结果：患者ＨＬＡ－ＤＲ４、ＨＬＡ－ＤＲｗ５３阳性率分别为４５．９０％和６２．２９％,正常对照组阳性率则分别为１４．７１％和３８．２４％,患者与正常对照组之间差异有显著性意义（Ｐ〈０．０５）。结     

Graves眼病患者球后组织免疫组化研究

目的：为了探讨Ｇｒａｖｅｓ眼病的确切发病机制。方法：应用单克降抗体人类白细胞ＤＲ抗原（ＨＬＡ－ＤＲ）、巨噬细胞（ＣＤ６８）、第八因子相关性抗原（Ｆ８／８６）、Ｔ细胞（ＣＤ３）、辅助性／诱导Ｔ细胞（ＣＤ４）、抑制性／细胞毒Ｔ细胞（ＣＤ８）、Ｂ细胞（ＣＤ２０）对１４例Ｇｒａｖｅｓ眼病患者球后组织主要为眼餐肌标本冰并或石蜡切用碱性磷酸酶－抗碱磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）法进行免疫组织化学研究，５例正常人眼外肌作     

FK506在眼科的应用

ＦＫ５０６是继环孢霉素Ａ后出现的又一新型强效免疫抑制剂。它能有效地抑制Ｔ淋巴细胞产生可溶性介质ＩＬ－２、ＩＬ－３和ＩＦＮ－γ有抑制Ｋ细胞和巨噬细胞的形成，抑制Ｉａ抗原的表达，还可能抑制ＩＬ－２和ＩＬ－２受体在Ｔ细胞表面的表达，从而选择性地抑制Ｔ细胞介导的免疫反应。其免疫抑制疚为环孢霉素Ａ的１００倍。现已用于科疾病的治疗。本对ＦＫ５０６的免疫药理学作用、实验以及临床应用进行了综述。     

HLA-B27抗原与前葡萄膜炎的相关性及其临床意义

探讨ＨＬＡ－Ｂ２７抗原与前葡萄膜炎的相关性及可能的意义。方法用多聚酶链反应（ＰＣＲ）和微量淋巴细胞毒试验对２０例伴有关节强直性脊椎炎（ＡＳ）的急性前葡萄膜炎（ＡＡＵ）、６７例ＡＡＵ、７０例慢性前葡萄膜炎和７０８个健康人进行ＨＬＡ－Ｂ２７分型。结果ＡＳ伴有ＡＡＵ和单纯的ＡＡＵ患者ＨＬＡ－Ｂ２７阳性率分别为７０％和４９．２５％,显著高于对照组（２．９７％,Ｐ〈０．００１）,慢性前葡萄膜炎患者中ＨＬＡ－     

Vogt—Koyanagi—Harada综合征患者HLA—DR4抗原及基因检测方法比较

对３３例ＶＫＨ患者同时进行ＨＬＡ－ＤＲ４抗原的检测与基因ＰＣＲ扩增，其阳性频率分别为２３３（７６％）及２４／３３（７３％），ＤＲ４－ＰＣＲ扩增法特异性强，结果可靠，为一种敏感。有效的ＨＬＡ的系统检测方法。     

Cyclophilin D在氧化应激下人视网膜色素上皮细胞中的表达

目的　检测氧化应激下人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ,ＲＰＥ）细胞内ＣｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＤ的表达,初步探索ＲＰＥ细胞氧化损伤保护新靶点。方法　培养细胞系ＡＲＰＥ１９及人原代ＲＰＥ细胞,相差显微镜下观察细胞形态,应用激光共聚焦显微镜免疫荧光法鉴定细胞。不同浓度Ｈ２Ｏ２（０μｍｏｌ·Ｌ－１、１００μｍｏｌ·Ｌ－１、５００μｍｏｌ·Ｌ－１、１ｍｍｏｌ·Ｌ－１）处理细胞２４ｈ后,应用ＲＴ-ＰＣＲ检测ＣｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＤ在细胞内的表达。随后预先在部分细胞中加入３μｍｏｌ·Ｌ－１环孢素Ａ（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ,ＣｓＡ）处理３０ｍｉｎ后再加入不同浓度Ｈ２Ｏ２（８０μｍｏｌ·Ｌ－１、１６０μｍｏｌ·Ｌ－１、３２０μｍｏ·Ｌ－１）２ｈ,即ＣｓＡ＋Ｈ２Ｏ２组,应用乳酸脱氢酶（ｌａｃｔｉｃｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ,ＬＤＨ）法检测细胞致死率,并与Ｈ２Ｏ２组的ＬＤＨ释放量相比较。结果　培养的ＡＲＰＥ１９和人原代ＲＰＥ细胞均表达ＲＰＥ细胞特异性抗体ＲＰＥ６５。１００μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ２Ｏ２处理细胞２４ｈ后ＣｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＤ表达量明显升高,当Ｈ２Ｏ２浓度增加到５００μｍｏｌ·Ｌ－１时,ＣｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＤ表达量降低,１ｍｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ２Ｏ２处理时,ＣｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＤ表达水平未见增加。在各Ｈ２Ｏ２ 组组间,ＬＤＨ的释放量随着Ｈ２Ｏ２ 浓度的升高而增加;与Ｈ２Ｏ２ 组相比,ＣｓＡ＋Ｈ２Ｏ２组ＬＤＨ的释放水平明显降低（Ｐ＜０．０５）。结论　氧化应激下ＲＰＥ细胞内ＣｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＤ的表达升高,该蛋白表达的增加可能进一步导致氧化应激下细胞的死亡,ＣｓＡ可能成为ＲＰＥ细胞保护的新策略。     

增殖细胞核抗原与bc1-2在培养的人视网膜色素上皮细胞的表达

目的观察培养的人视网膜色素上皮细胞（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｓ，ＲＰＥ）的增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｃｅｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）和ｂｃ１－２的表达。方法用ＳＡＢＣ法对培养的人ＲＰＥ作鼠抗人ＰＣＮＡ单抗及兔抗人ｂｃ１－２抗体免疫组织化学染色。结果ＲＰＥ在接种后２４小时和４８小时，ＰＣＮＡ的阳性率分别为３１．２％和５０．６％，阳性染色位于细胞核内，斑块状。ｂｃ１－２的表达为７６％～９０％，阳性染色在细胞浆，细颗粒状。结论培养中一半ＲＰＥ有ＰＣＮＡ抗原表达，提示这些细胞处于Ｓ期；ｂｃ１－２抗原在大多数ＲＰＥ表达阳性。这些生物标记物可能与培养的ＲＰＥ生长活性有关。     

玻璃体视网膜增殖性病变与HLA

摘要对３０例视网膜脱离（ＲＤ）患者及１００名健康人进行了ＨＬＡⅠ类抗原检测，并结合临床表现进行分析，发现视网膜脱离患者ＨＬＡ－Ａ１、Ａ３１、Ｂ５、Ｂｗ４６四种抗原较正常对照组高（Ｐ＜０．０５）。在ＲＤ患者中上述四种抗原阳性者ＰＶＲ形成和手术失败率明显高于４种抗原阴性者（Ｐ＜０．０５）。而且４种抗原有２种以上抗原阳性者ＰＶＲ的发生率增高至９０％，手术失败率及视网膜脱离复发率也增至６０％。结果提示视网膜脱离患者ＰＶＲ形成同全身ＨＬＡ变化有一定关系。     

葡萄膜炎患者血清中可溶性白细胞介素Ⅱ受体的研究

本文采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法，检测了１３例葡萄膜炎患者血清中ＳＩＬ－２Ｒ的含量，结果表明：病人组ｓＩＬ－２Ｒ为２９０．２±１６７．４ｕ／ｍｌ，对照组为１８４±２１ｕ／ｍｌ，二者相比有显著差异（Ｐ＜０．０１）。葡萄膜炎患者血清中ｓＩＬ－２Ｒ的水平明显高于正常人，说明患者的细胞免疫功能低下与ｓＩＬ－２Ｒ有密切关系。该结果提示ｓＩＬ－２Ｒ可能是通过阻断ＩＬ－２的活性，抑制ＩＬ－２介导的细胞免疫反应，造成宿主的细胞免疫功能低下，从而导致葡萄膜炎的发病。     

HSK患者外周血T—淋巴细胞亚群与SIL—2R关系的研究

目的研究复发性单纯疱疹性角膜炎（ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｋｅｒａｔｉｔｉｓ，ＨＳＫ）患者外周血Ｔ－淋巴细胞亚群变化与血清可溶性白细胞介素－２受体（ｓｏｌｕｂｌｅｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＳＩＬ－２Ｒ）水平的关系。方法测定了３０例复发性ＨＳＫ患者外周血Ｔ－淋巴细胞亚群，同时检测血清ＳＩＬ－２Ｒ的水平并与２５例健康人做对照。结果复发性单纯疱疹性角膜炎患者ＣＤ３、ＣＤ４／ＣＤ８均值与正常对照组相比明显降低；血清ＳＩＬ－２Ｒ与对照组比较显著增高。结论复发性ＨＳＫ患者体内免疫功能低下，ＳＩＬ－２Ｒ水平升高可能是其原因之一，这也为免疫治疗提供了一定依据。     

哮喘,慢支和过敏性肺炎的支气管肺泡洗出液细胞学分析

目的 为了解支气管肺泡洗出液（ＡＢＬＦ）细胞学在哮喘、慢性支气管炎（慢支）和过敏性肺炎的特征。方法 分别对１６例哮喘、１５例慢支、１６例过敏性肺炎患者的ＢＡＬＦ中细胞分类计数、Ｔ淋巴细胞亚群及ＨＬＡ－ＤＲ进行了测定。结果 哮喘患者ＢＡＬＦ中嗜酸细胞及淋巴细胞表面ＨＬＡ－ＤＲ明显高于慢支和过敏性肺炎组（Ｐ〈０．０１）;过敏性肺炎的淋巴细胞,ＣＤ８＾＋细胞明显高于哮喘和慢支组（Ｐ〈０．０１）;慢支组中     

信号转导/转录激活因子3抗ARPE-19细胞氧化应激研究

目的　本研究旨在观察信号转导／转录激活因子３（ｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ／ａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ３,ＳＴＡＴ３）对视网膜色素上皮细胞（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍｃｅｌｌｓ,ＲＰＥ）氧化应激损伤的保护作用,并探讨ＳＴＡＴ３在年龄相关性黄斑变性（ａｇｅ-ｒｅ-ｌａｔｅｄｍａｃｕｌａｒｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ,ＡＭＤ）发病机制中的意义。方法　体外培养ＡＲＰＥ-１９细胞系,氧化低密度脂蛋白及Ｈ２Ｏ２干预培养细胞诱导氧化应激损伤,通过对细胞增殖、凋亡、活性氧族（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ,ＲＯＳ）水平及细胞衰老分析研究,评估氧化应激损伤对ＲＰＥ的影响;实时荧光定量技术分析氧化应激过程中ＳＴＡＴ３-ｍＲＮＡ表达状况;ＳＴＡＴ３过表达载体转染ＡＲＰＥ-１９细胞,烟酰胺预处理细胞再经Ｈ２Ｏ２及氧化低密度脂蛋白干预后通过对增殖、凋亡、ＲＯＳ及细胞衰老状态的分析,了解ＳＴＡＴ３抗ＲＰＥ氧化应激效果。结果　与对照组相比,Ｈ２Ｏ２和氧化低密度脂蛋白能显著增加ＲＯＳ水平,促使细胞衰老增加,细胞的增殖显著下降而细胞凋亡显著上升（均为Ｐ＜０．０５）。氧化应激状况下ＳＴＡＴ３上游产物表达上升,氧化低密度脂蛋白及Ｈ２Ｏ２组荧光表达强度分别是３．３±１．２及３．５±１．１,与对照组相比差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;ＳＴＡＴ３能保护ＡＲＰＥ-１９细胞抗氧化应激损伤,使细胞增殖增加、凋亡减少及ＲＯＳ累积,但不造成细胞衰老状况加剧,说明ＡＲＰＥ-１９细胞衰老不受ＳＴＡＴ３调节。结论ＳＴＡＴ３在细胞氧化损伤中能独立地发挥抗氧化应激作用,提示了ＳＴＡＴ３在ＡＭＤ治疗过程中的应用前景。     

Graves眼病患者眼外肌组织免疫组化研究

目的探讨Ｇｒａｖｅｓ眼病发生机制。方法应用单克隆抗体人类白细胞ＤＲ抗原（ＨＬＡＤＲ）、巨噬细胞（ＣＤ６８）、第八因子相关性抗原（Ｆ８／８６），ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８，Ｂ细胞（ＣＤ２０）对１４位Ｇｒａｖｅｓ眼病患者眼外肌标本进行免疫组化研究。结果患者眼外肌间质中有大量的ＤＲ＋细胞，有大量巨噬细胞浸润，血管丰富、扩张，淋巴细胞浸润，以ＣＤ３＋细胞为主。结论提示患者眼外肌间质中ＨＬＡＤＲ抗原的异常表达在该病的发生发展中起重要作用。细胞免疫是局部炎症的重要原因。     

转化生长因子-β2（TGF-β2）诱导人视网膜色素上皮层细胞上皮-间质转分化中miRNA-29b的表达及意义

目的　探究转化生长因子-β２（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ-β２,ＴＧＦ-β２）诱导人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ,ＲＰＥ）层细胞上皮-间质转分化中ｍｉＲＮＡ-２９ｂ的表达变化及意义。方法　使用不同浓度ＴＧＦ-β２刺激ＲＰＥ细胞上皮-间质转分化后,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ、ＲＴ-ＰＣＲ检测成纤维化相关分子纤维连接蛋白（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｏｎ,ＦＮ）、神经钙粘连蛋白（ｎｅｒｖｅｃａｌｃｉｕｍａｄｈｅｓｉｏｎｐｒｏ-ｔｅｉｎ,Ｎ-Ｃａｄｈｅｒｉｎ）的表达。采用ＲＴ-ＰＣＲ检测不同浓度ＴＧＦ-β２及不同时间ＴＧＦ-β２（５μｇ·Ｌ－１）刺激ＲＰＥ细胞后ｍｉＲＮＡ-２９ｂ的表达。结果　ＴＧＦ-β２刺激后的ＲＰＥ细胞形态呈纤维化改变。在一定浓度范围内（１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１、１０μｇ·Ｌ－１）,随着ＴＧＦ-β２浓度的增加ＦＮ、Ｎ-Ｃａｄｈｅｒｉｎ及相应ｍＲＮＡ随之增加,１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１、１０μｇ·Ｌ－１组与对照组（０μｇ·Ｌ－１）相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）。ＴＧＦ-β２在一定浓度范围内（０μｇ·Ｌ－１、１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１）以剂量依赖的方式诱导ＲＰＥ细胞ｍｉＲＮＡ-２９ｂ表达的降低,１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１、１０μｇ·Ｌ－１组与对照组（０μｇ·Ｌ－１）相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）,在ＴＧＦ-β２浓度为５μｇ·Ｌ－１时ｍｉＲＮＡ-２９ｂ表达量最低。ＴＧＦ-β２在一定时间范围内（０ｈ、３ｈ、６ｈ、１２ｈ）以时间依赖的方式诱导ＲＰＥ细胞ｍｉＲＮＡ-２９ｂ表达的降低,３ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ组与０ｈ相比差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　一定范围内ＴＧＦ-β２以剂量和时间依赖的方式诱导ＲＰＥ细胞ｍｉＲＮＡ-２９ｂ的表达,为进一步研究ｍｉＲＮＡ-２９ｂ与ＴＧＦ-β２在ＲＰＥ细胞上皮-间质转分化过程中的相互作用提供理论基础。     

SIL－2R与角膜移植排斥反应的相关实验研究

本研究应用鸡对兔的角膜移植模型和ＦＬＩＳＡ方法动态测定手术前后血清中ＳＩＬ－２Ｒ水平变化，观察环孢霉素对ＳＩＬ－２Ｒ影响。结果显示：发生排斥反应时兔血清中ＳＩＬ－２Ｒ水平比术前明显增高，也比同时期无排斥反应兔增高（Ｐ＜０．０１），环孢霉素能抑制血清中ＳＩＬ－２Ｒ增高。上述结果提示血清中ＳＩＬ－２Ｒ水平变化与角膜移植排斥反应密切相关，环孢霉素能够有效抑制角膜移植排斥反应。