补肾活血方中药对妊娠大鼠子宫内膜容受性的影响

目的:观察补肾活血方中药对妊娠大鼠子宫内膜容受性的影响.方法:选用妊娠SD大鼠随机分为空白组、模型组和中药组,于妊娠第l天模型组和中药组大鼠皮下注射米非司酮溶液1次(米非司酮溶液5 g/L,5 mg/kg)造成胚泡着床障碍模型,空白组皮下注射生理盐水1次(1 mL/kg).空白组和模型组从妊娠第l天起予生理盐水灌胃(6.7 mL/kg),2次,d,连续5 d.中药组从妊娠第1天起行补肾活血方中药灌胃(7.6g生药/kg),2次,d,连续5d.于妊娠第5天扫描电镜观察各组子宫内膜胞饮突发育情况,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测子宫内膜整合素αvβ3mRNA的表达,于妊娠第10天计数各组大鼠胚泡着床数.结果:模型组子宫内膜表面未见明显的胞饮突发育,表现为增生早期的子宫内膜变化.中药组可见发育中的胞饮突,发育形态明显超前于模型组,接近于空白组;模型组αvβ3mRNA表达水平(0.854 5±0.0747,0.3984±0.093 7)显著低于空白组(1.051 8±0.087 8,0.601 6±0.133 8)(P<0.01),中药组αvβ3mRNA表达水平(0.987 6±0.075 1,0.539 6±0.058 4)显著高于模型组(P<0.05);模型组胚泡着床数(4.63±3.66)显著低于空白组(12.63±2.07)(P<0.01),中药组胚泡着床数(10.75±2.44)显著高于模型组(P<0.01).结论:补肾活血方中药能明显改善胚泡着床障碍大鼠子宫内膜表面胞饮突的发育,并显著提高子宫内膜整合素αvβ3mRNA的表达,有助于子宫内膜容受性的建立,从而最终提高胚泡的着床率.     

补肾益气和血方中药对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜表面胞饮突表达的影响

目的　观察补肾益气和血方中药对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜表面胞饮突表达的影响。方法　选择 8～ 12周龄昆明小鼠 ,于妊娠第 4天 (Pd4 )晨 ,皮下注射米非司酮 ,制成胚泡着床障碍模型。然后将妊娠小鼠随机分为正常组、模型组和治疗组 ,治疗组从Pd1开始灌服中药 (补肾益气和血方 ) ,正常组和模型组则给予等量生理盐水灌服 ,模型组和治疗组于Pd4晨皮下注射米非司酮 ,正常组则注射等量生理盐水。采用扫描电镜观察各组小鼠在Pd4晚 2 1时 30分～ 2 2时 (第 1时间点 ,T1)和Pd5上午 9时 30分～ 10时 (第 2时间点 ,T2 ) ,共两个时间点子宫内膜表面胞饮突的表达。结果　模型组妊娠率 ( 2 5 % )较正常组 ( 90 % )显著降低 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,模型组平均着床胚泡数为 ( 7 7± 1 3)个 ,正常组为 ( 14 7± 1 4 )个 ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 0 1) ;治疗组的妊娠率 ( 5 5 % )及平均着床胚泡数 [( 12 3± 0 8)个 ]均较模型组显著增加 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。T1时正常组子宫内膜表面表达大量发育中的胞饮突 ,至T2时则表达大量发育完全的胞饮突 ;T1时模型组子宫内膜发育不同步 ,胞饮突仅在局部少量表达 ,至T2时则表达完全消失 ;T1时治疗组子宫内膜表面表达大量发育中的胞饮突 ,与正常组相比略延     

子宫内膜容受性相关调控因子的时序表达及功能

胚胎着床是复杂的程序化的生理过程。子宫内膜仅在极短时期内允许胚泡植入,此时子宫内膜达到最大胚泡种植容受性。子宫内膜容受性形成过程中受多种细胞因子、蛋白分子调控,这些特定调控因子在子宫内膜发育分化过程中呈现较为显著的时空表达特征,对内膜容受性形成有重要作用。相关细胞因子(白血病抑制因子、白细胞介素)、蛋白分子(胎盘蛋白、半乳糖凝集素-1)及特定转录因子(同源框基因)在子宫内膜容受性形成过程中伴随短暂、瞬间性高表达,其表达量为增生期的4～5倍,该时期与着床窗期时间一致,呈现出时空特异性。表明这几类生物活性分子可能与子宫内膜容受性形成密切相关。     

子宫内膜容受性相关调控因子的时序表达及功能

胚胎着床是复杂的程序化的生理过程.子宫内膜仅在极短时期内允许胚泡植入,此时子宫内膜达到最大胚泡种植容受性.子宫内膜容受性形成过程中受多种细胞因子、蛋白分子调控,这些特定调控因子在子宫内膜发育分化过程中呈现较为显著的时空表达特征,对内膜容受性形成有重要作用.相关细胞因子(白血病抑制因子、白细胞介素)、蛋白分子(胎盘蛋白、半乳糖凝集素-1)及特定转录因子(同源框基因)在子宫内膜容受性形成过程中伴随短暂、瞬间性高表达,其表达量为增生期的4～5倍,该时期与着床窗期时间一致,呈现出时空特异性.表明这几类生物活性分子可能与子宫内膜容受性形成密切相关.     

米非司酮对围植入期小鼠子宫内膜中STAT3表达的影响

目的:探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)在小鼠胚泡植入过程中的生物学作用。方法:将孕鼠随机分为米非司酮组、溶剂组和空白对照组,用免疫组织化学技术和图像分析方法检测各组小鼠孕3～8 d子宫内膜中STAT3的动态表达,并对其进行半定量分析。结果:溶剂组和对照组小鼠子宫内膜中STAT3的表达在孕3 d明显增强,孕4 d达到峰值,且溶剂组和对照组间在孕3～8 d各时间点的表达差异无统计学意义;米非司酮组STAT3的表达较2个对照组显著降低(P<0.01),在孕4 d亦无表达高峰。结论:STAT3是介导胚泡植入的重要因子之一,米非司酮可能通过抑制孕激素与其受体结合而下调STAT3的表达,影响子宫内膜容受性的建立,阻碍胚泡顺利植入。     

GnRH-a控制性超促排卵(COH)对小鼠着床期Hoxa-10基因表达的影响

目的:研究GnRH-a长方案控制性超促排卵(COH)对小鼠妊娠率、胚胎着床率及着床期HOXA-10基因表达的影响,探讨COH影响胚胎着床的机制。方法:实验动物随机分为实验组(GnRH-a+hMG+hCG)和对照组(生理盐水),雌、雄合笼后观察小鼠阴栓率,于着床期取小鼠子宫,观察妊娠率及胚胎着床数,计算着床率;应用RT-PCR、Real-time PCR方法及免疫组织化学法分别检测小鼠着床期子宫内膜Hoxa-10 mRNA及蛋白的表达。结果:实验组小鼠阴栓率及妊娠率均明显低于对照组(P<0.01),实验组胚胎着床数高于对照组(P<0.01),但胚胎着床率较对照组显著降低(P<0.05),着床期小鼠子宫内膜Hoxa-10mRNA及蛋白表达下降,与对照组比较均有明显差异(P<0.05)。结论:GnRH-a长方案COH可引起小鼠着床期子宫内膜Hoxa-10表达下降,导致子宫内膜容受性降低,从而影响小鼠妊娠及胚胎着床。     

着床窗期宫腔镜下子宫内膜形态与性激素及其受体表达的研究

目的:探讨着床窗期宫腔镜下子宫内膜形态与性激素及其受体表达的关系.方法:对55例不孕患者及16例正常生育者在排卵后7～9天,行宫腔镜子宫内膜形态的检查,并检测血雌二醇、孕酮及内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR).结果:不孕组宫腔镜下子宫内膜血管及腺体发育较对照组差,差异有统计学意义(P＜0.05).内膜差组腺上皮细胞ER表达较内膜佳组弱,差异有统计学意义(P＜0.05);内膜差组间质PR表达较内膜佳组弱,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:不孕患者子宫内膜ER、PR的低表达,可能是导致子宫内膜腺体和血管网发育不良的重要原因之一.通过宫腔镜观察子宫内膜腺体和血管形态是一种较好的、简单可行的评估子宫内膜容受性的方法.     

保胎液对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜降钙素表达的影响

目的:观察保胎液对胚泡着床障碍模型小鼠子宫内膜降钙素水平的影响.方法:采用米非司酮小鼠受精卵着床障碍模型.将孕鼠随机分为正常组、模型组、西药组和保胎液(高、中、低3种剂量)治疗组,从妊娠第1天起分别给予0.9％氯化钠溶液、地屈孕酮和保胎液(高、中、低3种剂量)灌胃治疗.于妊娠第4天上午皮下注射米非司酮,每只0.08 mg.正常组不予任何处理.于妊娠第5天取小鼠的子宫组织,运用实时荧光定量PCR技术检测小鼠子宫内膜降钙素的含量.结果:模型组降钙素表达量与正常组、中药高剂量组、中剂量组及西药组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).中药高、中剂量组分别与西药组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);中药中剂量组与正常组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);中药中剂量组降钙素水平明显高于高、低剂量组(P＜0.05).结论:保胎液可以调节小鼠子宫内膜降钙素的表达量,特别是中剂量效果最明显,从而改善受精卵着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进受精卵着床.     

补肾活血方中药对妊娠大鼠子宫内膜容受性的影响

目的：观察补肾活血方中药对妊娠大鼠子宫内膜容受性的影响。方法：选用妊娠SD大鼠随机分为空白组、模型组和中药组,于妊娠第1天模型组和中药组大鼠皮下注射米非司酮溶液1次（米非司酮溶液5g／L,5mg／kg）造成胚泡着床障碍模型,空白组皮下注射生理盐水1次（1mL／kg）。空白组和模型组从妊娠第1天起予生理盐水灌胃（6．7mL／kg）,2次/d,连续5d。中药组从妊娠第1天起行补肾活血方中药灌胃（7．6g生药／kg）,2次/d,连续5d。于妊娠第5天扫描电镜观察各组子宫内膜胞饮突发育情况,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测子宫内膜整合素αvβ3mRNA的表达,于妊娠第10天计数各组大鼠胚泡着床数。结果：模型组子宫内膜表面未见明显的胞饮突发育,表现为增生早期的子宫内膜变化,中药组可见发育中的胞饮突,发育形态明显超前于模型组,接近于空白组;模型组αvβ3mRNA表达水平（0．8545±0．0747,0．3984±0．0937）显著低于空白组（1．0518±0．0878,0．6016±0．1338）（P〈0．01）,中药组俚届3mRNA表达水平（0．9876±0．0751,0．5396±0．0584）显著高于模型组（P〈0．05）;模型组胚泡着床数（4．63±3．66）显著低于空白组（12．63±2．07）（P〈0．01）,中药组胚泡着床数（10．75±2．44）显著高于模型组（P〈0．01）。结论：补肾活血方中药能明显改善胚泡着床障碍大鼠子宫内膜表面胞饮突的发育,并显著提高子宫内膜整合素αvβ3mRNA     

温肾活血方改善胚胎着床障碍小鼠子宫内膜容受性的研究

目的:探讨温肾活血方对胚胎着床障碍模型小鼠妊娠结局及子宫内膜容受性的影响。方法:由米非司酮建立胚胎着床障碍模型小鼠200只,随机分为正常(N)组、模型(M)组、中药低剂量(L)组、中药高剂量(H)组和孕酮(P)组各40只。妊娠第1~4日早晨,H组、L组小鼠灌胃给予0.3 m L水煎剂,N组、M组小鼠每日以等体积生理盐水灌胃,P组小鼠以配制的黄体酮-橄榄油剂按照2 mg/只进行颈后皮下注射,妊娠第4日上午9︰00造模,N组小鼠颈后皮下注射0.1 m L橄榄油溶剂,其他各组小鼠颈后皮下注射米非司酮-橄榄油剂0.1 m L(1.93 mg/kg米非司酮)。分别于妊娠第4日、第5日、第8日上午9∶00脱颈椎处死每组各10只小鼠,检测妊娠率、着床位点数、子宫内膜组织形态、雌激素(E_2)及其受体(ER)、孕激素(P)及其受体(PR)、胞饮突。结果:N组着床位点数多于其它各组,H组与N组比较无统计学差异(P0.05)。子宫内膜发育水平N组最优,H组接近N组,M组滞后。妊娠第4日,N组的E_2、P和ER、PR的表达水平与M组比较无统计学差异(P0.05),低于P组与H组(P0.01);妊娠第5日,N组的E_2、P和ER、PR的表达水平显著高于M组(P0.05),N组的ER水平与P、H、L三组比较无统计学差异(P0.05),N组的PR高于P组和L组(P0.05),与H组比较均无统计学差异(P0.05)。P组P水平高于其它组(P0.01),E_2水平与ER结果相吻合。M组胞饮突发育滞后,H组胞饮突发育程度接近N组,P组偶见退化期胞饮突。结论:温肾活血方能够改善子宫内膜容受性,且其效果优于黄体酮。     

种植窗期预测体外受精-胚胎移植结局指标的研究

目的 探讨种植窗期子宫内膜雌、孕激素受体（ER、PR）及血管内皮生长因子（VEGF）的表达与体外受精-胚胎移植（IVF—ET）结局的关系，选择能预测IVF—ET结局的良好而可靠的指标。方法 2004-05—2005-01对郑州大学第二附属医院生殖中心40例拟行IVF—ET妇女，在IVF—ET前1周期采用免疫组化SP法和组织学积分H—score方法对ER、PR和VEGF在种植窗期子宫内膜中的表达进行定位和半定量分析。按IVF—ET后是否妊娠将40例不孕患者分为两组：妊娠组和未妊娠组。结果 未妊娠组腔上皮、腺体PR表达较妊娠组强，差异有统计学意义（P〈0．05），间质PR表达较妊娠组弱，差异有统计学意义（P〈0．05）；妊娠组和未妊娠组子宫内膜ER表达差异无统计学意义（P〉0、05）；VEGF在子宫内膜中的表达妊娠组较未妊娠组高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 种植窗期子宫内膜腔上皮、腺体PR下调失败，间质PR表达减弱及子宫内膜VEGF的表达减弱可导致IVF—ET妊娠失败。种植窗期子宫内膜PR和VEGF的表达可作为预测妊娠是否成功的指标。     

雌、孕激素受体、生长激素受体、胰岛素样生长因子1受体与子宫内膜容受性的关系

辅助生殖技术(ART)经过近40年的发展,已取得突飞猛进的进展。但是临床妊娠率仍然徘徊在30%~40%。决定能否成功妊娠的因素主要包括2个方面,一是胚胎发育的质量,二是子宫内膜对胚胎的容受性。而在临床工作中,即使胚胎质量良好,种植率仍然不能令人满意。因此,如何提高子宫内膜容受性已经成为辅助生殖领域一个亟待解决的问题,了解影响子宫内膜容受性的相关因素,对于在种植窗期如何调节母体的内膜达到最佳的接纳胚胎的状态,具有重要的指导性意义。本文着重阐述子宫内膜容受性与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)、生长激素受体(GHR)之间的关系,期望对临床判断子宫内膜容受性有所帮助。     

HOXA-10、HOXA-11、Esr2、Pgr在控制性超排卵小鼠围着床期子宫内膜表达的研究

目的:检测同源框基因HOXA-10、HOXA-11以及雌激素受体Esr2、孕激素受体Pgr在控制性超排卵(COH)小鼠围着床期子宫内膜中的表达,探讨COH对子宫内膜容受性的影响。方法:将30只SPF级雌性昆明小鼠随机分为模型组(GnRH-a+HMG+HCG)和对照组(生理盐水),每组15只,造模成功后,计算子宫脏器指数,光学显微镜观察子宫内膜组织学变化;应用RT-PCR和Real-time PCR方法检测小鼠子宫内膜中HOXA-10、HOXA-11、Esr2、Pgr mRNA的表达。结果:模型组围着床期小鼠子宫脏器指数较对照组显著降低(P<0.05),子宫内膜发育延迟,子宫内膜成熟度及厚度降低;模型组小鼠HOXA-10、HOXA-11、Pgr mRNA表达较对照组显著下降(P<0.05),而Esr2 mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论:COH引起HOXA-10、HOXA-11、Pgr mRNA表达下降,Esr2mRNA表达升高,致使围着床期内膜准备不足,子宫内膜容受性下降。     

不孕症子宫内膜息肉雌激素受体和孕激素受体表达的研究

目的:探讨不孕妇女子宫内膜息肉中雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的表达及意义。方法:选择2009年9月至2010年4月在广东省计划生育专科医院就诊伴发子宫内膜息肉的50例不孕妇女(EP组)作为研究组,同期就诊宫腔镜检查正常的29例不孕妇女作为对照组。采用免疫组化方法测定ER和PR在子宫内膜息肉和正常增殖期子宫内膜中的表达,同时采用化学发光法测定所有患者血清的基础性激素(血清卵泡刺激素、黄体生成素、催乳素、雌二醇和睾酮)水平,并对两组的基本情况(年龄、不孕类型、不孕原因、不孕年限及取材时间)进行比较。结果:两组基础性激素水平和基本情况的比较中,仅EP组血清雌二醇水平显著高于对照组(223.39±125.47pmol/Lvs169.96±87.46pmol/L,P=0.046),其他各项指标的比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。ER和PR在子宫内膜息肉和增殖期子宫内膜中的表达比较,差异均无统计学意义(P=0.085,P=0.527)。结论:对于无月经改变的不孕症子宫内膜息肉,长期较高水平的雌二醇刺激可能与息肉形成有关,但子宫内膜息肉上ER、PR表达未见异常。     

Abnormal expression of estrogen receptor is associated with thin endometrium

Abstract

This study was conducted to investigate the association of estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PR) expressions with thin endometrium. Patients with endometrial thickness of less than 7?mm were classified as the study group, while the control group was comprised of patients with endometrial thickness of 7 to 14?mm. The expressions of ER and PR were detected with semi-quantitative immunohistochemical analysis, and the differences were compared between the two groups. The expression of ER was significantly decreased (p?<?.05) in the stromal cells of thin endometrium during both proliferative and secretory phases as compared to those of normal endometrium. Likewise, ER expression was found to be lower in the glandular cells of thin endometrium than those of normal endometrium during proliferative phase. However, no significant differences were observed for the expression of PR in both glandular and stromal cells between the two groups. Thin endometrium was associated with reduced expression of ER in stromal cells both during proliferative and secretory phase, but in glandular epithelial cells only during proliferative phase.     

子宫内膜癌雄激素受体表达及临床意义

目的:探讨子宫内膜癌组织中的雄激素受体(AR)的表达及其与临床病理特征和雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测41例正常子宫内膜、18例不典型增生及116例子宫内膜癌组织中AR、ER、PR的表达。结果:①子宫内膜细胞普遍存在AR的表达,在正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜、子宫内膜癌组织中阳性表达率逐渐增高,但差异无统计学意义(P=0.424)。②AR在子宫内膜癌中的表达随患者FIGO分期、组织病理分级的升高而下降(P=0.011;P=0.047),而与患者发病年龄、是否绝经、组织学类型、淋巴结有无转移、肌层有无浸润无明显关系(P>0.05)。③AR的表达与ER、PR的表达呈正相关(r=0.293,P=0.001;r=0.275,P=0.003)。结论:AR在子宫内膜癌的发生、发展中可能起重要作用,AR阳性表达者的生物学行为较好。     

生长激素对小鼠子宫内膜VEGF、LIF、MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的:探讨生长激素(GH)对子宫内膜容受性的作用。方法:将150只小鼠随机平均分成3大组:A组(动情后期组)、B组(假孕组)、C组(妊娠d4组);每大组再分为2亚组:第1亚组皮下注射GH1.5mIU/g,第2亚组注射等体积生理盐水;用免疫组化技术检测子宫内膜VEGF、LIF、MMP-9及TIMP-1的表达。结果:B组子宫内膜中,注射GH者LIF、VEGF、MMP-9及TIMP-1的表达呈阳性,强于其对照组,二者比较差异有显著性(P均<0.05);C组子宫内膜中,注射GH者LIF、VEGF、MMP-9及TIMP-1的表达呈强阳性,强于其对照组,二者比较差异有显著性(P均<0.05)。结论:GH可以提高小鼠着床期子宫内膜VEGF、LIF、MMP-9及TIMP-1的表达,从而改善子宫内膜容受性,提高临床妊娠率。     

子宫内膜异位症裸鼠模型子宫内膜的雌、孕激素受体表达

目的:建立子宫内膜异位症裸鼠模型,观察子宫内膜的雌激素受体(ERs)、孕激素受体(PRs)及其亚型的表达情况,为进一步探讨内异症子宫内膜孕激素抵抗的发生机制提供研究模型。方法:建立子宫内膜异位症裸鼠模型,分别于造模后1月、2月、3月取裸鼠子宫内膜,利用RT-qPCR和Western blot法检测其孕激素受体(PRA、PRB)和雌激素受体(ERα、ERβ)表达情况。结果:与对照组相比,内异症组裸鼠内膜的PRB和ERα表达降低,在造模后3月最明显;PR和ERβ表达升高,PRB/PRA和ERα/ERβ比值降低,均在造模后3月最明显。结论:子宫内膜异位症裸鼠模型是研究内异症的理想模型之一,造模后的裸鼠内膜存在孕激素抵抗。