支气管哮喘患儿血清肿瘤坏死因子α及其可溶性受体1和2的检测及临床意义

【目的】 观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及其可能性受体(sTNF-R1和sTNF-R2)在支气管哮喘患者中的表达,探讨它们在支气管哮喘炎症机制中的作用。 【方法】 采用ELISA法检测哮喘急性发作期和哮喘缓解期患儿及健康对照组儿童血清TNF-α、sTNF-R1和sTNF-R2的蛋白浓度。 【结果】 哮喘急性发作期组血清TNF-α、sTNF-R1 和sTNF-R2的蛋白浓度[分别为(3.19±1.68)、(4.69±2.30)、(14.32±6.19)] ng/mL显著高于对照组[(1.96±0.86)、(2.07±0.86)、(4.75±1.68)] ng/mL (P均＜0.01);哮喘缓解期组sTNF-R1 和sTNF-R2的蛋白浓度[分别为(2.59±1.21)、(11.57±4.78)] ng/mL显著低于哮喘急性发作期组(分别为P＜0.01和＜0.05),而TNF-α的蛋白浓度(2.75±1.31) ng/mL与哮喘急性发作期组相比差异无统计学意义(P>0.05);哮喘缓解期组TNF-α和sTNF-R2的蛋白浓度显著高于对照组(P均＜0.01),而sTNF-R1的蛋白浓度与对照组相比差异无统计学意义。sTNF-R1与sTNF-R2的表达水平呈显著正相关(n=99,r =0.239,P＜0.05),但sTNF-R1和sTNF-R2的表达水平分别与TNF-α之间无显著相关性(P>0.05)。 【结论】 TNF-α、sTNFR1和sTNFR2可能参与了哮喘的炎症发病过程,哮喘患者血清TNF-α、sTNF-R1和sTNF-R2水平增高可能被作为病情活动的指标之一。     

支气管哮喘大鼠肺内c-fos蛋白表达和神经肽含量相关性研究

目的 探讨支气管哮喘大鼠肺内c-fos蛋白表达和神经肽P物质(substance P, SP)和血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide, VIP)含量及分析之间的相关性。方法 32只SD大鼠随机分成正常对照组、哮喘非急性发作期组、哮喘急性发作组和地塞米松干预组。采用免疫组织化学进行组织学观察, 采用酶联免疫吸附试验法测定肺泡灌洗液中SP和VIP的浓度。结果 哮喘大鼠肺泡灌洗液中SP浓度较正常对照组显著增高(P＜0.000 1), VIP浓度显著降低(P＜0.000 1), 哮喘恢复组、哮喘急性期发作组及地塞米松干预组肺组织中c-fos蛋白光密度值与肺泡灌洗液SP浓度呈正相关(r分别为0.908、0.967、0.865, P<0.05或<0.001), 与肺泡灌洗液VIP浓度呈负相关(r分别为-0.974、-0.949、-0.962, P均≤0.001)。结论 哮喘大鼠肺内c-fos蛋白表达、神经肽含量与哮喘发作有关。     

胸腺和活化调节趋化因子在哮喘大鼠中的作用及布地奈德干预的影响

目的 探讨胸腺和活化调节趋化因子(thymus and activation regulated chemokine, TARC)在哮喘大鼠中的作用及吸入布地奈德干预对TARC的影响。方法 30只SD大鼠采用随机区组设计分为正常对照组、哮喘组及布地奈德干预组。以卵清白蛋白(ovalbumin, OVA)致敏激发法制备大鼠哮喘急性模型, 干预组于14 d雾化吸入布地奈德进行干预。于最后1次雾化后24 h, 尾静脉取血, 支气管肺泡灌洗留取灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF), 留取右肺组织标本。行血清和BALF中细胞计数, 应用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清和BALF中上清液中嗜酸粒细胞(Eos)、IL-4及TARC的水平。采用免疫组化法测定肺组织中TARC及IL-4蛋白的表达。结果 1) 哮喘组大鼠血清及BALF中的Eos、IL-4和TARC水平均高于对照组(P<0.05);肺组织中IL-4及TARC的蛋白表达也高于对照组(P<0.05);布地奈德干预后上述各项指标值均低于哮喘组(P<0.05), 布地奈德干预组的各项指标与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。2)哮喘组大鼠肺组织中TARC的蛋白表达与IL-4呈正相关(r=0.50, P<0.05)。结论 哮喘大鼠中TARC含量明显增高, 吸入布地奈德可降低TARC的水平。提示TARC在哮喘的发病中起重要的作用, 下调TARC可能是激素治疗哮喘的一个重要机制。     

大鼠哮喘模型肺组织血红素氧合酶-1蛋白及基因表达

目的 探讨大鼠哮喘模型肺组织血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白及基因表达特点以及其与HO-1的活性之间的相关性.方法 清洁级雄性SD大鼠20只,随机分为对照组和哮喘组,每组10只.测定全血碳氧血红蛋白(COHb)的百分比含量;计算肺泡灌洗液(BALF)沉渣中细胞总数和分类;计数气道壁中浸润的炎性细胞数;用免疫组织化学染色法观察HO-1在哮喘大鼠肺组织的表达;用RT-PCR方法 检测哮喘大鼠肺组织HO-1基因表达.结果 HO-1阳性细胞主要定位于支气管上皮细胞及黏膜下巨噬细胞,气道平滑肌细胞偶有表达.2组表达HO-1的阳性细胞百分比分别为(5.03±1.22)%和(27.14±4.68)%;2组HO-1基因表达光密度比值分别为(0.32±0.05),(0.68±0.02);2组全血COHb的百分比含量分别为(0.45±0.35),(3.89±1.15);哮喘组HO-1蛋白、基因的表达水平以及全血COHb的百分比含量均显著高于正常组(P＜0.01).HO-1蛋白表达水平、基因表达水平与全血COHb的百分比含量均呈正相关(r=0.897,0.971,P＜0.01).结论 哮喘大鼠的肺组织HO-1蛋白基因表达水平显著增加,且反应HO-1活性的全血COHb的百分比含量亦显著增加,提示HO-1可能参与了哮喘的发病过程.     

髓系抑制性细胞与诱导型一氧化氮合成酶在哮喘小鼠肺组织中的表达及意义

目的:探讨髓系抑制性细胞(MDSCs)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在哮喘小鼠肺组织中的表达及意义。方法:将BALB/C小鼠随机分成哮喘组及对照组,每组10只。用卵清蛋白(OVA)致敏、激发建立小鼠哮喘模型,用HE染色观察两组小鼠肺组织病理改变;用免疫组织化学(免疫组化)方法检测小鼠肺组织中MDSCs积分光密度值平均值;用RT-PCR检测小鼠肺组织中iNOS mRNA的表达。结果:哮喘组可见气道壁增厚,炎性细胞浸润,对照组则无明显变化。哮喘组小鼠肺组织MDSCs、iNOS mRNA的表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:哮喘小鼠肺组织中MDSCs的聚集增加,iNOS的表达增多,MDSCs通过表达iNOS来实现其在哮喘小鼠气道炎症、气道高反应及免疫抑制等方面的重要作用。     

毛细支气管炎和急性上呼吸道感染患儿血清可溶性TRAIL及其受体TRAILR1、TRAILR4的表达

【目的】 观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体(sTRAILR1和sTRAILR4)在毛细支气管炎和急性上呼吸道感染患儿中的表达,探讨它们在呼吸道感染炎症机制中的作用。 【方法】 ELISA 法检测毛细支气管炎和急性上呼吸道感染患儿及健康对照组儿童血清sTRAIL、sTRAILR1和sTRAILR4的蛋白浓度。 【结果】 毛细支气管炎组和急性上呼吸道感染组患者血清中sTRAIL、sTRAILR1和sTRAILR4的蛋白浓度分别为(85±38)、(71±19)、(167±97);(78±28)、(61±15)、(139±72) pg/mL均显著高于对照组(55±19)、(45±14)、(56±38) pg/mL(P均<0.01);毛细支气管炎组sTRAILR1的蛋白浓度显著高于急性上呼吸道感染组(P<0.05),两组sTRAIL和sTRAILR4的蛋白浓度相比差异无统计学意义(P均>0.05)。sTRAILR1分别与sTRAIL、sTRAILR4的蛋白浓度呈显著正相关(n=102,r分别为0.236和0.409,P均<0.01)。 【结论】 毛细支气管炎和急性上呼吸道感染患儿血清中可溶性TRAIL及其受体TRAILR1和TRAILR4的表达增加,它们可能参与了呼吸道感染的炎症过程,TRAIL可能主要通过TRAILR1起作用,它们的表达水平增高可能被视为病情活动的指标之一。     

哮喘气道重构时平滑肌细胞增殖周期的研究

目的探讨哮喘气道重构时平滑肌细胞增殖周期的改变及意义。方法建立大鼠哮喘模型,支气管-肺组织行HE染色,光镜及图像分析系统研究支气管内管壁、气道平滑肌的病理改变,流式细胞仪检测气道平滑肌细胞增殖周期分布。结果⑴哮喘组大鼠支气管内管壁厚度、平滑肌层厚度较对照组明显增厚(P<0.01)。⑵哮喘组大鼠G0/G1期气道平滑肌细胞比例显著低于对照组(P<0.01);S期、G2/M期气道平滑肌细胞比例显著高于对照组(P<0.01)。结论哮喘气道重构时平滑肌细胞异常增殖,处于增殖状态的细胞比例明显增多,抑制平滑肌细胞的细胞周期转换有可能阻止气道重构,可望成为治疗哮喘的新途径。     

内皮中性粒细胞激活肽-78在哮喘大鼠中性粒细胞中的表达及意义

目的观察大鼠哮喘内皮中性粒细胞激活肽-78(ENA-78),表达及布地奈德对其的影响,探讨中性粒细胞(NEU)参与哮喘发作的可能作用机制。方法采用大鼠哮喘模型,随机分成哮喘组、对照组、布地奈德组,流式细胞术测定血NEU ENA-78的表达。结果哮喘组(97.65±13.99)MFI NEU ENA-78的平均荧光强度显著高于对照组(50.79±8.66)MFI(P<0.01);布地奈德组(75.81±6.10)MFI NEU ENA-78的平均荧光强度显著性低于哮喘组,且高于对照组(均P<0.01),NEU ENA-78的表达水平与支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数呈显著正相关(n=29,r=0.781,P<0.01)。结论哮喘大鼠NEU ENA-78的表达水平增加,NEU可能通过ENA-78参与哮喘发作的炎症过程;布地奈德可能部分通过下调NEU ENA-78,从而减轻哮喘气道炎症。     

铅对发育期大鼠海马DMT1基因及蛋白表达的影响

【目的】 探索铅对发育期大鼠中枢神经神经系统海马组织的影响。 【方法】 48只健康的雄性1月龄SD大鼠,随机分为四组给予醋酸铅溶液:对照组[0 mg/(kg·d)]、低铅组[2 mg/(kg·d)]、中铅组[20 mg/(kg·d)]、高铅组[200 mg/(kg·d)],灌胃6周后处死,以石墨炉原子吸收法检测血铅,以反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测海马组织中二价金属转运蛋白-1(divalent metal transporter protein-1, DMT1)的mRNA表达,以免疫印迹法(western blot)检测DMT1蛋白的表达水平。 【结果】 铅处理组血铅水平均明显高于对照组(P＜0.01);铅处理组大鼠海马组织DMT1的mRNA均有表达,中、高铅组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05或＜0.01);DMT1蛋白的表达水平与血铅含量呈正相关(P＜0.01)。 【结论】 铅对发育期大鼠海马组织DMT1基因及蛋白表达具有诱导作用。     

血微、常量元素水平与儿童支气管哮喘的相关性研究

【目的】 观察支气管哮喘患儿全血锌、铁、钙、镁、铜、铅、锰、硒等微、常量元素含量的变化,并探讨其在支气管哮喘发病机制中的意义。 【方法】 采用原子吸收光谱法检测1 986例支气管哮喘患儿和856例正常对照组儿童全血锌、铁、钙、镁、铜、铅、锰、硒8种元素含量,并对检测结果作比较分析。 【结果】 支气管哮喘患儿组锌、铁和钙含量较正常对照组低,血铅含量较正常对照组高,两组间差异有统计学意义(P＜0.05);而铜、镁、硒、锰两组间差异无统计学意义(P＞0.05)。在哮喘的急性发作期,血锌、钙含量低于缓解期(P＜0.05)。 【结论】 锌、铁、钙缺乏,铅暴露增加,是造成哮喘患儿免疫功能减低、免疫调节紊乱的重要原因,在治疗中需适当补充锌、铁、钙,减少铅暴露。     

沙美特罗替卡松粉吸入剂治疗中、重度儿童哮喘的临床疗效观察

【目的】 了解沙美特罗替卡松粉吸入剂(商品名:舒利迭)治疗中、重度儿童哮喘的临床治疗效果。 【方法】 收集了2009年1月-2010年3月本院哮喘门诊及住院的中、重度哮喘患儿46例,分别于吸入舒利迭治疗前及治疗3个月后,做肺通气功能及评价患儿临床控制情况。 【结果】 1)治疗3个月后肺通气功能明显改善:FEV₁、PEF、FEF₂₅、FEF₅₀、FEF₇₅、MMEF_75/25治疗前分别为(1.31±0.59)、(3.05±1.33)、(2.39±1.17)、(1.30±0.69)、(0.52±0.28)、(1.08±0.60) L/S, 吸入舒利迭治疗3个月后分别为(1.90±0.59)、(4.45±1.35)、(3.80±1.17)、(2.34±0.80)、(0.98±0.39)、(2.10±0.82) L/S(治疗前、后比较t值依次为4.80、5.02、5.78、6.67、6.57、6.80;P均＜0.001);其中28例(60.9%)肺通气功能恢复正常,一项异常7例(15.2%),2项异常4例(8.7%),3项异常5例(10.9%),4项和5项异常各1例(2.2%),6项均异常0例;2)吸入舒利迭治疗3个月后87%(40例)的患儿达到临床控制,8.7%(4例)的患儿部分控制,4.3%(2例)未控制。 【结论】 吸入舒利迭可显著改善中、重度儿童哮喘临床症状及肺通气功能,是治疗年长儿童中、重度哮喘较为理想的药物,值得临床推广应用。     

西安地区118例哮喘患儿家长行为调查及其干预效果分析

【目的】 了解西安地区儿童哮喘患儿家长对哮喘认知水平和行为现状,采取有针对性的行为干预措施,并分析其效果,为哮喘规范治疗和管理提供依据。 【方法】 采用问卷形式进行调查,选取本院儿童哮喘门诊就诊且哮喘规范化治疗超过6个月的哮喘患儿。 【结果】 118例问卷显示:1)患儿一般情况:患儿首次喘息发病年龄平均为(5.1±3.7)岁,首次喘息发作距确诊哮喘时间为(2.3±1.6)年;患儿中有50.8%合并过敏性鼻炎、50.6％有湿疹、28.8％有哮喘家族史; 2)哮喘患儿家长行为:56.6%知道在哮喘急性发作时应该吸入速效β2受体激动剂治疗,96.6%在哮喘没有症状时会坚持用药。在选择哮喘长期治疗药物种类时,有51.7%选择吸入激素与长效β2受体激动剂联合制剂、39.6%单独吸入激素、20.6%口服白三烯拮抗剂、13.7%使用抗过敏药物。家长不愿意给患儿使用长期控制哮喘药物原因,60.3%是担心对生长发育产生影响、22.4%是担心对药物产生依赖;3)给予哮喘知识和行为低于平均得分的46例进行干预,干预后家长哮喘知识、态度和行为得分明显提高(P>0.01)。 【结论】 今后应做好哮喘患儿及家长的管理和宣教工作,提高家长的哮喘知识,改善其态度和行为水平,促进患儿的干预效果。     

哮喘儿童的主观生活质量及社会适应能力评定分析

【目的】 了解哮喘患儿主观生活质量及社会适应能力,为提高患儿的主观生活质量及社会适应能力提供指导依据。 【方法】 采用ISLQ及SAB量表,对68例年龄7~12.5岁的中、重度处于缓解期的哮喘患儿进行主观生活质量及社会适应能力的心理测试。 【结果】 反映主观生活质量的8个维度中哮喘患儿有6个维度得分明显低于对照组(P<0.05或<0.01);社会适应商数低于对照组(P<0.05),尤其以社会/自制因子与对照组差异极显著(P<0.001)。 【结论】 哮喘患儿主观生活质量和社会适应能力明显低于对照儿童,应针对患儿不同的心理特点进行综合干预,力求提高生活质量和适应能力。     

阿奇霉素对支气管哮喘小鼠气道重构及转化生长因子-β1表达的影响

目的 观察阿奇霉素对哮喘小鼠气道重构指标、转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）表达的影响,探讨阿奇霉素对哮喘小鼠气道重构的影响.方法 30只雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、阿奇霉素治疗组（C组）,每组各10只,复制哮喘模型后收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,行白细胞（TOT）,嗜酸性粒细胞（EOS）计数;医学图像分析软件观测支气管总管壁面积（Wat）、内壁面积（Wai）、平滑肌面积（Wam）;SABC免疫组化法检测肺组织TGF-β1的表达.结果 B组BALF中嗜酸性粒细胞明显高于其他组（8.12±0.54 vs 0.70±0.40,8.12±0.54 vs 0.87±0.25,P＜0.01）;C组气道Wat、Wai、Wam均较B组减轻（10.15±0.95 vs 15.36±0.85,4.16±0.32 vs 10.64±1.03,3.77±0.15 vs 7.97±0.17,P＜0.01）,但较A组加重;B组TGF-β1（168.58±21.71 vs 130.47±18.22 vs 126.30±16.15）表达最强,C组减弱,A组微弱;TGF-β1的表达与EOS%（r=0.840,P＜0.01）、Wat（r=0.735,P＜0.01）、Wam（r=0.870,P＜0.01）呈正相关.结论 阿奇霉素可抑制哮喘小鼠气道重构,可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现的.     

石家庄地区儿童支气管哮喘急性发作的常见诱因调查分析

【目的】 探讨石家庄地区儿童支气管哮喘常见的诱因及预防对策。 【方法】 对入选的哮喘病例从生后首次喘息开始追溯,分为婴幼儿组(<3岁)和儿童组(≥3岁),通过统一问卷调查,分析常见的诱因。并对入选的患儿在治疗缓解后1周行皮肤过敏原点刺试验,分析常见的过敏原。 【结果】 首次发病年龄主要集中在6岁以内,特别是3岁以内,发病诱因主要是呼吸道感染,多发季节为秋冬季,好发时间为夜间及凌晨,婴幼儿组发病率为93.5%,儿童组发病率为54%,两组比较差异有统计学意义(χ²=46.122,P<0.01);吸入激素自行减量及停药是诱发哮喘的另一重要诱因,婴幼儿组为30.1%,儿童组为44.4%,两组比较差异有统计学意义(χ²=4.952,P<0.05);居住/接触的环境过敏原导致哮喘发作,婴幼儿组为26.2%,儿童组43.7%,两组比较差异有统计学意义(χ²=7.497,P<0.05);虽然运动是诱发哮喘的重要诱因之一,但两组间比较差异无统计学意义(χ²=2.744,P>0.05);共有446例患儿过敏原皮试阳性,占96.3%,尘螨阳性率在婴幼儿组较高为46.8%,在儿童组为35.0%,柳树花粉阳性率在儿童组较高为37.4%,在婴幼儿组为19.8%,尘螨和柳树花粉在婴幼儿组和儿童组差别均有统计学意义(χ²＝5.417,12.849,P均＜0.01); 【结论】 呼吸道感染是儿童哮喘最常见的诱因,尤其是婴幼儿。随着年龄增大,非感染因素逐渐成为诱发哮喘的主要诱因。减少呼吸道感染,改善环境,避免接触过敏原,遵医嘱正确使用控制哮喘的药物,是减少哮喘发作的有效措施。     

ORMDL3和MMP-9在慢性支气管哮喘气道重塑中的作用机制及布地奈德的干预作用

目的 研究布地奈德(BUD)对慢性哮喘小鼠支气管上皮细胞的血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,及其对气道重塑的干预作用。方法 应用BALB/C小鼠随机分为对照组、哮喘组、BUD组,用OVA(卵清蛋白)和氢氧化铝建立哮喘小鼠模型,为进一步了解布地奈德对气道重塑的干预机制,第21天BUD组小鼠在OVA激发前30 min吸入布地奈德。12周后,用苏木精-伊红染色(HE staining)分析气道壁厚度改变,Masson染色观察气道胶原沉积,通过免疫组织化学染色法(immunohistochemistry staining),蛋白质印迹法(western blot),实时荧光定量PCR(real-time PCR)测定小鼠支气管上皮细胞ORMDL3,MMP-9的表达含量。结果 12周后,哮喘组和BUD组的气道壁厚度增加,胶原蛋白沉积,ORMDL3,MMP-9表达明显高于对照组,BUD组气道病理改变程度和ORMDL3,MMP-9的升高幅度均不及哮喘组。经相关性分析可发现,MMP-9表达增加与ORMDL3基因的表达上调具有相关性,并且二者的表达增高与气道壁厚度有明显相关性。结论 布地奈德可能通过下调ORMDL3,MMP-9基因的表达,抑制慢性哮喘气道重塑进程。