兔颈动脉球囊损伤后内膜增生的实验研究

目的　制作兔颈动脉球囊损伤后再狭窄模型 ,观察兔颈动脉球囊损伤后内膜增生的动态变化 ,探讨再狭窄的可能机制。方法　健康雄性家兔 40只 ,随机分为正常对照组 ( 10只 ) ,实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 ,实验组行右颈总动脉血管成形术 ,并分别于术后第1、2和 4周处死实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 ,第 4周同时处死对照组兔。光镜下观察内膜损伤后形态学变化 ,并进行图像分析。结果　与对照组比 ,实验组内膜面积呈持续性显著增加 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,管腔面积从第 2周开始呈持续性显著减少 (P <0 0 1)。结论　兔颈动脉球囊损伤能较好的模拟再狭窄形成过程 ,球囊损伤后内膜增生是管腔狭窄的主要因素     

核因子-kB在高脂饮食兔颈总动脉球囊损伤后的动态变化及其与内膜增生的关系

目的观察高脂饮食兔颈总动脉球囊损伤后核因子kB（NF-kB）表达的变化及其与动脉内膜增生的关系。方法对高脂饮食兔颈总动脉球囊损伤后不同时间段的颈总动脉标本采用组织形态学方法检测内膜增生；采用原位杂交方法检测损伤血管NF-kB mRNA的表达。结果（1）球囊损伤后，内膜面积随时间逐步增生，中层各时段均未见明显变化，内膜／中层比率随时间逐步增长。对照侧内膜轻度增生但明显较损伤侧轻（P〈0．05）。（2）球囊损伤后6h即可见NF-kB表达，并于2周达高峰，4周仍有较强表达。NF-kB在损伤侧表达均强于对照侧（P〈0．05）。结论高脂饮食免颈总动脉球囊损伤后，NF-kB被激活，从而引起炎症反应，导致内膜增生可能是再狭窄发生的重要机制之一。     

核因子-κB在高脂饮食兔颈总动脉球囊损伤后的动态变化及其与内膜增生的关系

目的观察高脂饮食兔颈总动脉球囊损伤后核因子κB(NF-κB)表达的变化及其与动脉内膜增生的关系。方法对高脂饮食兔颈总动脉球囊损伤后不同时间段的颈总动脉标本采用组织形态学方法检测内膜增生;采用原位杂交方法检测损伤血管NF-κB mRNA的表达。结果⑴球囊损伤后,内膜面积随时间逐步增生,中层各时段均未见明显变化,内膜/中层比率随时间逐步增长。对照侧内膜轻度增生但明显较损伤侧轻(P<0.05)。⑵球囊损伤后6 h即可见NF-κB表达,并于2周达高峰,4周仍有较强表达。NF-κB在损伤侧表达均强于对照侧(P<0.05)。结论高脂饮食兔颈总动脉球囊损伤后,NF-κB被激活,从而引起炎症反应,导致内膜增生可能是再狭窄发生的重要机制之一。     

针刺对再狭窄血管平滑肌中原癌基因c-myc及c-foc mRNA表达的影响

目的探讨针刺对家兔实验性动脉血管平滑肌细胞c-myc及c-foc基因表达的影响。方法家兔随机分为正常对照组(8只),再狭窄组(24只)。再狭窄组应用PTCA球囊导管对实验兔行双侧髂动脉内膜剥脱以建立动脉粥样硬化模型,术后1月髂动脉造影示50%以上狭窄者再行PTCA球囊扩张术,以建立再狭窄模型成功后,然后将造模动物随机分成模型组、针刺组、普罗布考组,每组8只。自术前2d～术后14d为1疗程,针刺内关(双)、厥阴俞(双)、心俞(双)、膻中、足三里(双)等穴。标本石蜡切片,免疫组化,DAB显色,苏木素复染。观察各组血管平滑肌细胞c-myc、c-foc基因表达。结果模型组平滑肌细胞c-myc及c-foc基因表达明显高于正常组(P0.01);针刺组c-myc及c-foc基因表达低于模型组(P0.01)。结论针刺能抑制再狭窄兔血管平滑肌细胞增殖,抑制c-myc及c-foc基因表达,调节平滑肌凋亡,可能是针刺预防动脉再狭窄的作用机制之一。     

兔颈动脉损伤后再狭窄与p53蛋白关系的研究

目的 探讨p53蛋白在血管损伤后再狭窄形成过程中的作用.方法 建立兔颈动脉球囊损伤模型,30只家兔随机分为两组：假手术组（n=6）、血管损伤后1、7、14及28 d组（n=24）.采用HE染色方法 观察血管内膜增生情况,免疫组化检测血管壁p53蛋白的表达.结果 假手术组p53的DD值为（20.02±4.86）×10-3,手术组中7、14、28 d的内膜及中膜的p53的DD值分别为（10.84±12、8.12±1.26、7.08±0.28）×10-3与（1.67±0.57、1.09±0.84、1.05±0.64）×10-3.与假手术组相比,球囊损伤后颈动脉内膜面积逐渐增加,血管壁p53表达减少（P＜0.01）,但在新生内膜层的p53表达水平高于中膜层（P＜0.01）.结论 p53参与了血管损伤后的修复过程,可能与PTCA术后血管再狭窄有关.     

氟伐他汀对兔颈总动脉球囊损伤后血管壁内膜增生及其CD40表达的影响

目的探讨氟伐他汀对兔颈总动脉球囊损伤后血管壁内膜增生及其CD40表达的影响.方法对16只新西兰雄性大白兔行右侧颈总动脉球囊成形术,分为两组,一组饲以氟伐他汀10mg·kg-1·d-1,一组饲以普通饮食,分别于球囊损伤后2周、4周处死,抽取血标本及双侧颈总动脉标本,两组左侧颈总动脉为阴性对照组.采用组织形态学检测内膜增生,采用免疫组织化学方法检测CD40表达.结果氟伐他汀治疗组球囊损伤后2周及4周内膜增生面积显著小于对照组(P＜0.01),两组间中层面积无明显区别.氟伐他汀组2周、4周时血管壁CD40蛋白的表达显著低于对照组.阴性对照组未见内膜增生及CD40表达.结论氟伐他汀可显著减低球囊损伤后血管壁内膜增生程度,抑制球囊损伤后血管壁CD40的表达.     

低分子量肝素抑制球囊损伤后兔血管内膜增生的实验研究

目的:探讨不同剂量、不同给药时间低分子量肝素(LMWH)对兔髂动脉内膜损伤后内膜增生和血管平滑肌细胞增殖的影响.方法:将96只纯种雌性家兔分为空白对照组6只(A),实验对照组18只(B)、小剂量(60u/Kg)LMWH组36只(C)、大剂量(120u/Kg)LMWH组36只(D).根据不同给药时间,C、D组分别分成三个亚组.三组均经左侧股动脉,近心端插入3FFogarty球囊导管,反复拉动导管制备髂动脉内膜损伤模型.分三批于用药后72h、14d和28d提取髂动脉标本;利用计算机成像系统测量内膜厚度,抗SMCα-ActinABC免疫组织化学方法行5-BrdU单抗标记和verhoff方法联合测定SMC增殖指数.结果:A组内膜厚度平均41.35±7.06μm;未见5-BrdU标记的阳性细胞.B、C、D组内膜厚度均明显高于A组(P＜0.01).C、D组的内膜厚度和SMC增殖指数高于B组,有显著性差异(P＜0.05),并可见5-BrdU标记的阳性细胞.C和D组比较,前者的内膜厚度和SMC增殖指数均小于后者,但两者间无统计学差异,P＞0.05.结论:兔髂动膜球囊导管损伤后,内膜明显增生,平滑肌细胞增殖;LMWH可抑制其血管内膜增生和平滑肌细胞增殖,尤其是小剂量、损伤后早期用药.     

家兔颈总动脉剥脱术后新生内膜增殖和血管重塑动态变化模型的研究

目的探索再狭窄(RS)的发病机制进行干预研究,复制家兔颈总动脉内膜损伤后不同时间点内膜增殖和血管重塑动态变化模型。方法选用家兔70只行颈总动脉内膜球囊损伤,分别检测未损伤侧(N)和损伤后1d、3d、5d、7d、14d、28d、35 d管腔面积(LA)、内膜和中膜厚度及面积、以及外弹力膜横截面积(EELA)。结果损伤后1d可见动脉内皮剥脱;3d管腔内表面可见增殖的血管平滑肌细胞(VSMC);5~7 d新生内膜(NI)形成并增厚,14 d以后NI厚度及面积逐渐增加,至35 d达最大,同时细胞外基质(ECM)也逐渐增加。损伤后3~14 d中膜厚度及面积逐渐增加,其中14 d中膜面积明显大于N,28~35 d趋于降低。LA于损伤后5~7 d开始减少;14 d以后明显小于N。损伤后1~7 d EELA逐渐增大,至14 d达最大,28 d后开始回缩。结论家兔颈总动脉球囊损伤能较好的模拟RS形成过程,内膜增殖与血管重塑均是RS形成的主要病理机制。     

球囊成形术后氯沙坦对兔血管内膜增殖及巨噬细胞表达的影响

目的　通过观察AT1受体的特异性拮抗剂氯沙坦 (Losartan)对兔腹主动脉球囊成形术后内膜增殖和巨噬细胞表达的影响 ,探讨氯沙坦治疗血管再狭窄的机制。方法　采用内皮剥脱加高脂饮食 (含 1 5 %胆固醇 )喂养 8周制作兔腹主动脉粥样硬化膜型 ,然后对狭窄部位行球囊成形术。术后氯沙坦组给予氯沙坦 10mg·kg-1·day-1口服 ,对照组喂生理盐水。 4周后取腹主动脉行组织形态学观察 ,用免疫组织化学方法分析巨噬细胞。结果　对照组内膜厚度 /中膜厚度比值为 0 65± 0 17,氯沙坦组则减少为0 44± 0 11(P <0 0 1) ,对照组内膜面积 /中膜面积比值为 0 74± 0 16,氯沙坦组则减少为 0 5 4± 0 13(P <0 0 1)。氯沙坦组新生内膜中巨噬细胞数亦较对照组显著减少 (P <0 0 1)。结论　氯沙坦通过抑制AngⅡ的作用进而抑制巨噬细胞的浸润 ,抑制炎症反应 ,从而减轻再狭窄     

氟伐他汀对血管球囊损伤后MMP-9和TIMP-2表达的影响

目的　探讨氟伐他汀抑制再狭窄的作用机制。方法　将 48只大白兔随机分为 3组 ,正常对照组 :喂饲基础饲料 ;单纯球囊损伤组 :喂饲基础饲料 +球囊损伤右颈总动脉 ;氟伐他汀干预后球囊损伤组 :喂饲基础饲料 +氟伐他汀 10mg·kg-1 ·d-1 +球囊损伤右颈总动脉。各组又分为 3d、7d、14d、3 0d组 ,分别于第 3d、7d、14d、3 0d采用原位杂交方法检测血管损伤后基质金属蛋白酶 -9(MMP -9)和金属蛋白酶组织抑制剂 -2 (TIMP -2 )mRNA表达情况。结果　MMP -9和TIMP -2mRNA在正常对照组几乎不表达 ;血管损伤后中膜第 3d开始表达 ,第 7d达高峰 ,第 14d、3 0d内膜有少量表达 ,氟伐他汀干预后MMP -9明显降低 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,但TIMP -2mRNA表达无明显变化。结论　氟伐他汀可通过减少血管损伤后基质金属蛋白酶 -9的表达 ,抑制平滑肌细胞增殖、迁移 ,从而达到防治再狭窄的作用     

活血祛瘀方对兔腹主动脉内膜损伤后VEGF的影响

目的 探讨活血祛瘀方对家兔血管内皮损伤后血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法 将健康新西兰大耳白兔40只,随机分为模型组(n=11)、中药组(n=12)、西药组(n=11)、空白组(n=6),模型组、中药组、西药组高酯饲料喂养4周后行腹主动脉内膜剥脱术造模。术后各组予正常饲料喂养,中药组予活血祛瘀方灌胃4周,西药组予舒降之、阿司匹林灌胃4周,模型组、空白组予生理盐水灌胃4周。造模术4周后处死家兔取腹主动脉观察动脉病理形态学改变,用免疫组化法观察各组对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。结果 与模型组比较,中药组抑制VEGF表达。结论 活血祛瘀方使兔腹主动脉内膜损伤后对血管内膜增殖早期VEGF有拮抗作用,提示其对血管内皮损伤有一定保护作用,为抗经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)术后再狭窄提供实验数据。     

血管内皮生长因子和转化生长因子β1在兔动脉损伤后内膜中表达及意义

目的观察血管内皮生长因子基因(VEGFmRNA)和转化生长因子β1基因(TGF-β1mRNA)在兔颈动脉球囊损伤后内膜增生过程中的动态表达,探讨VEGF和TGF-β1与兔颈动脉球囊损伤后再狭窄的关系。方法健康雄性家兔40只,随机分为正常对照组(10只),实验I、II、III组(每组各10只),实验组行右颈总动脉血管成形术,并分别于术后第1、2和4周各处死实验I、II、III组,第4周同时处死对照组兔。用光镜观察内膜损伤后形态学变化,用原位杂交技术动态观察血管壁VEGFmRNA和TGF-β1mRNA的表达情况,并进行图像分析。结果与对照组比,实验组内膜面积呈持续性显著增加(P<0.05),管腔面积从第2周开始呈持续性显著减少(P<0.01)。对照组VEGFmRNA呈弱阳性表达,TGF-β1mRNA无表达。实验组VEGFmRNA呈弱阳性表达,与对照组比差异无统计学意义(P>0.05),但TGF-β1mRNA呈持续高表达(P<0.01)。结论TGF-β1参与促进兔颈动脉球囊损伤后内膜增生和管腔狭窄,VEGF不参与兔颈动脉球囊损伤后内膜增生和管腔狭窄。     

HRT对去势雌兔动脉血管的影响及血管VEGF表达的研究

[目的]探讨HRT对去势、高脂饮食雌兔动脉血管的影响及去势雌兔行HRT后血管内皮生长因子(VEGF)表达与动脉粥样硬化病变的关系.[方法]以去势雌性大白兔作为雌激素缺乏模型,喂食高脂饲料复制动脉粥样硬化症.并行HRT后测定兔血脂、观察主动脉血管病理形态学变化及免疫组化sp法检测VEGF.32只兔共分为4组,每组8只,A假手术组,B模型组行双侧卵巢切除术(OVX);C倍美力组,OVX后补充倍美力;D尼尔雌醇 安宫黄体酮组.OVX后补充尼尔雌醇 安宫黄体酮.[结果]各组兔TC、LDL-C、HDL-C指标与正常比较均有不同程度增高.各组与正常兔比较以上指标P＜0.01;B、C、D与A组比较P＜0.05;C、D与B组比较P＞0.05.各组兔胸主动脉血管均见不同程度AS病交,脂质斑块形成;免疫组织化学染色表明各组兔血管内膜斑块区可见不同程度VEGF阳性表达,且AS斑块病变程度与VEGF阳性表达程度里正相关.[结论]无论应用HRT与否,去势雌兔在进食高脂饲料后均可发生高脂血症,引起AS,VEGF阳性表达,HRT并不能抑制VEGF表达.进而表明在本实验条件下HRT无益于动脉粥样硬化症的预防和治疗.     

携带bFGF-siRNA质粒表达载体的生物降解支架防治兔颈动脉再狭窄的初步实验研究

目的初步探讨携带bFGF-siRNA质粒表达载体的生物降解支架防治兔颈动脉再狭窄的作用。方法经股动脉入路建立球囊损伤兔颈动脉狭窄模型,实验动物分组后分别植入裸生物降解支架和携带bFGF-siRNA质粒表达载体的生物降解支架,分别以光镜和电镜观察狭窄段血管病理形态学变化,计算血管中膜和内膜厚度。结果裸支架组和siRNA支架组血管内膜厚度明显较对照组小,且siRNA支架组和裸支架组相比,血管内膜厚度明显减小,但三组之间中膜变化不明显。结论携带bFGF-siRNA质粒表达载体的生物降解支架能有效防治兔颈动脉再狭窄的发生,其具体分子机制尚需进一步的检测。     

携带bFGF-siRNA质粒表达载体的生物降解支架防治兔颈动脉再狭窄的初步实验研究

目的 初步探讨携带bFGF-siRNA质粒表达载体的生物降解支架防治兔颈动脉再狭窄的作用。方法经股动脉入路建立球囊损伤兔颈动脉狭窄模型,实验动物分组后分别植入裸生物降解支架和携带bFGF-siRNA质粒表达载体的生物降解支架,分别以光镜和电镜观察狭窄段血管病理形态学变化,计算血管中膜和内膜厚度。结果裸支架组和siRNA支架组血管内膜厚度明显较对照组小。且siRNA支架组和裸支架组相比,血管内膜厚度明显减小,但三组之间中膜变化不明显。结论携带bFGF-siRNA质粒表达载体的生物降解支架能有效防治兔颈动脉再狭窄的发生,其具体分子机制尚需进一步的检测。     

32 P液体球囊血管内照射对血管损伤后管壁细胞增殖及其α-SM actin表达的影响

目的观察血管内液体球囊放射治疗对血管成形术后再狭窄的影响,同时通过观察放射治疗效应探讨放射治疗防止再狭窄发生的可能机制.方法雄性Wistar大鼠54只,随机分为三组,胸主动脉经球囊损伤组(损伤组),球囊损伤+32P液体球囊血管内照射组(按照射剂量分为20Gy组和28Gy组).使用免疫组化法检测血管壁增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)表达阳性细胞,即增殖细胞;以及血管壁外膜α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth Muscle Actin, α-SM actin)表达;用计算机图像分析方法观察血管组织形态学的变化,并对免疫组化结果进行定量分析.结果照射组与损伤组相比⑴14d,外弹力板围绕面积、管腔面积明显增大(P《0.05),且与照射剂量呈正相关;新生内膜面积明显减小(P《0.05),与照射剂量呈负相关(P《0.05);⑵3d管壁细胞的增殖明显受抑(P《0.05),且与照射剂量呈负相关;7d管壁细胞的增殖无明显受抑(P》0.05). ⑶7、14d管壁外膜α-SM actin表达明显减弱(P《0.05),与照射剂量呈负相关(P《0.05).结论在一定范围32P液体球囊血管内照射剂量与管腔面积、外弹力板围绕面积、新生内膜面积有相关性; 其部分机制可能是通过抑制管壁细胞增殖而抑制新生内膜的形成,以及通过抑制外膜α-SM actin表达而抑制血管负性重塑.     

螺内酯对兔髂动脉球囊损伤后血管重塑的影响

目的揭示螺内酯对损伤的动脉血管壁血管重塑的影响。方法随机将20只雄性新西兰大白兔分为两组,构建兔髂动脉的球囊损伤模型。术后对照组只喂标准兔饲料,实验组喂标准兔饲料+螺内酯20mg·Kg-1·d-1研磨稀释后经口灌胃。术后4周,活体取损伤的动脉组织。制作常规病理切片,采用天地公司TD2000病理图像分析系统测定血管重塑的各项指标。结果实验组内弹力膜下面积、外弹力膜下面积较对照组增大(P<0.05)。实验组残余管腔面积、面积狭窄率较对照组有非常显著性差异(P<0.001)。两组中膜面积无显著性差异。结论螺内酯可改善兔髂动脉球囊损伤后血管重塑。     

HRT对去势雌兔冠状动脉粥样硬化影响的生化指标及病理形态学观察

[目的]观察激素替代疗法(HRT)对去势、高脂饮食雌兔血脂的影响及对冠状动脉血管的病理形态学改变,为激素替代疗法提供血管病理形态学变化依据.[方法]以去势雌兔作为雌激素缺乏模型,喂食高脂饲料复制动脉粥样硬化症,并行HRT后测定兔血脂及光镜下观察冠状动脉血管病理形态学变化.32只兔共分为4组,每组8只,A假手术组;B模型组,行双侧卵巢切除术(OVX);C倍美力组,OVX后补充倍美力;D尼尔雌醇+安宫黄体酮组,OVX后补充尼尔雌酵+安宫黄体酮.[结果]各组兔TC、LDL-C、HDL-C指标与正常比较均有不同程度增高.各组与正常兔比较以上指标P<0.01;B、C、D与A组比较P<0.05;C、D与B组比较P>0.05.各组兔心脏各级冠状动脉血管均见不同程度早期动脉粥样硬化症病变,D组最轻,A组较轻,B组及C组较重.[结论]去势后HRT对兔血脂影响及冠状动脉粥样硬化病变的影响与雌激素类型、激素配伍使用有关.     

葛根素和鸡豆黄素A对17β-雌二醇诱发的子宫内膜渗出的干预作用研究

目的:研究植物雌激素葛根素和鸡豆黄素A对17β-雌二醇诱发去卵巢大鼠子宫内膜渗出和血管通透性的影响.方法:将36只健康雌性SD大鼠随机分为6组(n=6):假手术组、卵巢切除组、17β-雌二醇组、17β-雌二醇+他莫昔芬组、17β-雌二醇+葛根素组、17β-雌二醇+鸡豆黄素A组,除假手术组外,其他各组大鼠摘除双侧卵巢后,分别皮下注射芝麻油、17β-雌二醇、17β-雌二醇+葛根素、17β-雌二醇+鸡豆黄素A、17β-雌二醇+他莫昔芬21天后取组织,比较不同处理组子宫内膜渗出变化和血清VEGF的浓度.结果:给予植物雌激素葛根素、鸡豆黄素A和他莫昔芬后,子宫内膜嗜酸性粒细胞的渗出减少,血清VEGF浓度降低.结论:植物雌激素葛根素和鸡豆黄素A可发挥雌激素拮抗作用,使血清VEGF浓度减小,可抑制外源性雌激素诱导的子宫内膜的渗出.     

奈西立肽对兔髂动脉球囊损伤后血管重塑及血浆醛固酮水平的影响

目的 揭示奈西立肽对损伤的动脉血管壁血管重塑与血浆醛固酮的影响.方法 随机将20只雄性新西兰大白兔分为两组,构建兔髂动脉的球囊损伤模型.术后对照组只喂标准兔饲料,实验组喂标准兔饲料＋奈西立肽0.1 mg/（kg·d）,皮下注射20 d.术后4周,活体取损伤的动脉组织.制作常规病理切片,采用天地公司TD2000病理图像分析系统测定血管重塑的各项指标.于术前、术后4周分别抽取静脉血测定血浆醛固酮水平.结果 实验组血管内弹力膜下面积、外弹力膜下面积较对照组增大（P＜0.05）.实验组残余管腔面积、面积狭窄率与对照组差异有统计学意义（P＜0.01）.两组中膜面积差异无统计学意义（P＞0.05）.实验组较对照组血浆醛固酮水平明显降低.结论 奈西立肽可改善兔髂动脉球囊损伤后血管重塑,可能通过降低血浆醛固酮水平起作用.