美满霉素对阿尔茨海默病大鼠认知能力和海马突触可塑性的影响

目的观察美满霉素对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠空间学习记忆和海马长时程增强(long-term potentiation,LTP)以及N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(N-methyl-D-aspartate receptor subunit 2B,NR2B)表达的影响,探讨美满霉素对AD大鼠神经保护的作用机制。方法选用健康雄性SD大鼠36只,随机分为对照组、模型组、美满霉素治疗组,每组12只。通过侧脑室注射Aβ25-35制作AD大鼠模型。Morris水迷宫检测各组大鼠空间学习记忆能力;在体电生理法记录各组大鼠海马LTP的诱导情况;免疫荧光组织化学法检测各组大鼠海马NR2B的表达。结果与对照组相比,模型组平均逃避潜伏期和第一次到达原平台的时间明显延长,穿环次数明显减少(P0.05),海马LTP幅度明显降低,NR2B表达明显减少(P0.05);与模型组相比,美满霉素治疗组平均逃避潜伏期和第一次到达原平台的时间明显缩短,穿环次数明显增加(P0.05),海马LTP幅度明显升高,NR2B表达明显增加(P0.05)。结论美满霉素可以通过促进海马LTP的形成,上调NR2B的表达,改善AD大鼠认知功能障碍。     

美满霉素对阿尔茨海默病模型大鼠认知功能的影响研究

目的 观察美满霉素对阿尔茨海默病模型（AD）大鼠认知功能和前额叶皮质葡萄糖调节蛋白（Glucose - Regulatedprotein 78,GRP78）和C/EBP同源蛋白( C/EBPhomologousprotein,CHOP）的表达的影响,探讨美满霉素对AD大鼠脑保护作用的机制。方法 侧脑室注射Aβ25-35建立AD大鼠模型。健康雄性 SD 大鼠随机分成对照组、模型组和美满霉素(50 mg/kg)治疗组。Morris水迷宫和跳台仪检测认知行为学改变,免疫荧光组织化学法和Western blotting法检测前额叶皮质GRP78与CHOP蛋白的表达,TUNEL法检测前额叶皮质神经细胞凋亡。结果 行为学检测结果显示,美满霉素可以明显改善侧脑室注射Aβ25-35导致的大鼠学习记忆障碍,提高认知功能;免疫荧光组织化学法和Western blotting法检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠前额叶皮质GRP78与CHOP表达均上调（P＜ 0.01）,与模型组比较,美满霉素治疗组大鼠前额叶皮质GRP78与CHOP表达明显减少（P＜ 0.01）;TUNEL法检测结果显示,与对照组相比,模型组大鼠前额叶皮质神经细胞凋亡数量显著增高（P＜0.05）;与模型组比较,美满霉素治疗组前额叶皮质凋亡细胞明显减少,但高于对照组（P＜0.05）。结论 美满美素可能通过降低AD大鼠脑组织GRP78与CHOP的表达,抑制内质网应激,减少神经细胞凋亡,改善AD大鼠认知功能,发挥脑保护作用。     

BDNF修饰的骨髓间充质干细胞对缺氧缺血性脑损伤大鼠脑区BDNF/TrkB信号通路表达的影响与意义

目的探讨BDNF修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对缺氧缺血性脑损伤(HIBI)大鼠脑区BDNF-TrkB通路表达的影响与意义。方法将96只健康7日龄清洁级SD大鼠随机分为空白组、模型组、BMSCs干预组和BDNF-BMSCs干预组,每组各24只。模型组、BMSCs干预组和BDNF-BMSCs干预组采用颈动脉结扎和密封缺氧箱处理法制备HIBI模型,在此基础上,BMSCs干预组尾静脉注射BMSCs,BDNF-BMSCs干预组尾静脉注射BDNF基因修饰的BMSCs。采用Morris水迷宫实验观察大鼠逃避潜伏期和定位探索次数,采用多聚甲醛心脏灌注法取完整大脑,评估形态学评分,采用WB实验测定脑组织BDNF和TrkB的表达水平。结果与空白组相比,模型组、BMSCs干预组和BDNF-BMSCs干预组逃避潜伏期均延长,空间探索次数减少;与模型组相比,BMSCs干预组和BDNF-BMSCs干预组逃避潜伏期缩短,空间探索次数增多;与BMSCs干预组相比,BDNF-BMSCs干预组逃避潜伏期进一步缩短,空间探索次数进一步增多;组间差异均有统计学意义(均P0. 05)。与空白组相比,模型组、BMSCs干预组和BDNF-BMSCs干预组形态学评分升高,BDNF和TrkB蛋白表达水平降低;与模型组相比,BMSCs干预组和BDNF-BMSCs干预组形态学评分降低,BDNF和TrkB蛋白表达水平升高;与BMSCs干预组相比,BDNF-BMSCs干预组形态学评分进一步降低,BDNF和TrkB蛋白表达水平进一步升高,组间差异均有统计学意义(均P0. 05)。结论 BDNF修饰的BMSCs能够上调HIBI大鼠脑区BDNF-TrkB通路表达,从而发挥神经保护作用,促进疾病转归,具有较高的应用价值。     

叶酸缺乏与学习记忆及海马突触体膜流动性相关性研究

目的 :　探索叶酸缺乏对离乳大鼠学习记忆能力与海马突触体膜流动性的影响。方法 :　 5 4只刚离乳的健康雄性 SD大鼠 ,随机分成三组 :实验组 (FD)、对饲组 (PF)和对照组 (AL)。实验组饲去叶酸的 RHAA配方饲料 ,另二组饲以添加叶酸 8mg/ kg的 RHAA饲料 ,对饲组按实验组的进食量加以控制 ,对照组不控制进食。分别于饲养第 2和第 6 w末测定血清叶酸 (SFA)浓度和进行 Morris水迷宫测试大鼠的学习记忆能力 ,记录平均逃避潜伏期和分析原平台象限游泳距离占游泳总距离的百分比 ,分离海马突触体 ,透射电镜作形态学证实 ,用荧光物质 DPH标记突触体后测定荧光强度 ,后者反映突触体膜流动性。结果 :　实验第 2 w FD血清叶酸浓度降低 (P<0 .0 1 )。FD及 PF第 6 w时 SFA浓度明显低于 AL和 PF(P<0 .0 1 ) ,平均逃避潜伏期明显延长 ,原平台象限游泳距离百分比及海马组织突触体膜流动性均明显下降。与对照组比较 ,对饲组上述指标的改变不明显 (P>0 .0 5 )。相关分析结果 :海马结构分离突触体膜 r值与血清叶酸浓度、平均逃避潜伏期及原平台象限游泳距离百分比显著相关 (r=- 0 .5 2 7,P<0 .0 5 ;r=- 0 .45 1 ,P<0 .0 5 ;r=- 0 .5 79,P<0 .0 5 )。结论 :　 1 .叶酸缺乏可损害离乳大鼠的空间学习记忆能力和降低海马突触体膜?     

胃窦肌间Cajal间质细胞自噬研究伴抑郁的FD发病机制

目的:分析基于胃窦肌间Cajal间质细胞(Myenteric Interstitial Cells of Cajal,ICC-MY)自噬研究伴抑郁的功能性消化不良(Functional Dyspepsia,FD)的发病机制。方法:20只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组,每组10只。模型组采用慢性夹尾激惹刺激法制备FD大鼠模型。透射电镜观察两组大鼠胃窦肌间Cajal间质细胞内自噬体数量;免疫荧光法检测两组ICC-MY内Beclin1、微管相关蛋白1轻链3 B(microtubule-associated protein 1 light chain 3B,LC3B)蛋白的荧光强度。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠胃窦ICC-MY内自噬体数量多,Beclin1、LC3B蛋白的荧光强度显著升高(均P=0.000)。结论:伴抑郁的FD的发病机制可能与抑郁引起胃窦ICC-MY过度自噬有关。     

黄芪提取物对老年痴呆大鼠NF-kB信号通路相关蛋白表达的影响

目的研究黄芪提取物(EA)对老年痴呆(AD)大鼠NF-k B信号通路相关蛋白的影响。方法大鼠海马内注射Aβ25-35制备AD大鼠模型,实验分4组:对照组、模型组、黄芪组和西药治疗组。黄芪组和西药治疗组分别用黄芪提取物和脑复康灌胃,对照组和模型组用等量生理盐水灌胃。用Morris水迷宫测定各组大鼠的学习记忆能力,Western blot测定各组大鼠海马NF-k B、Ik B-a和caspase-3蛋白表达水平。结果模型组的逃避潜伏期延长,单位时间内跨越原平台次数减少,NF-k B和caspase-3蛋白表达升高,而Ik B-a蛋白表达降低,与对照组比较差异均有统计学意义(均P0.05);黄芪组的逃避潜伏期缩短,单位时间内跨越原平台次数增多,NF-k B和caspase-3蛋白表达降低,而Ik B-a蛋白表达升高,与模型组比较差异均有统计学意义(均P0.05),其作用效果与西药治疗组相当(P0.05)。结论黄芪提取物通过提高AD大鼠海马区Ik B-a的含量,使游离NF-k B的含量减少,激活caspase-3受到抑制,从而抑制了神经细胞的凋亡。     

经皮穴位电刺激对痴呆大鼠认知功能的影响及机制研究

目的从行为学、形态学、电生理学和分子生物学等不同层面观测经皮穴位电刺激(TEAS)对全脑缺血性痴呆大鼠认知功能的影响及相关机制研究。方法采用永久性结扎双侧椎动脉结合短时间阻断双侧颈总动脉建立痴呆大鼠模型,造模成功后根据随机数字表法将45只雄性SD大鼠分为:模型组(n=15)、安慰刺激组(n=15)和TEAS组(n=15)。治疗后进行Morris水迷宫行为学测试和跳台实验,记录各组大鼠海马长时程增强效应(LTP)。治疗4周后处死大鼠,留取大脑海马组织。应用Western Blot技术检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)的表达;采用光镜(HE染色)及电镜,观察各组大鼠海马CA1、CA3区细胞形态及神经元可塑性;免疫组化法(TUNEL染色)观察海马组织中细胞凋亡的变化。结果安慰刺激组和TEAS组水迷宫检测均显示全时程平均逃避潜伏期较模型组明显延长(P<0.05),TEAS组较安慰刺激组明显缩短(P<0.05);TEAS组和安慰刺激组与模型组相比较,原平台象限游泳路程比及游泳时间缩短明显,TEAS组较安慰刺激组明显延长(P<0.05)。安慰刺激组和TEAS组跳台实验均显示跳台潜伏期明显延长,错误次数明显减少(P<0.01);与安慰刺激组比较,TEAS组跳台潜伏期延长,错误次数减少(P<0.05)。TEAS组LTP,海马BDNF表达较安慰刺激组显著升高(P<0.01)。光镜下可见TEAS组海马CA1、CA3区神经细胞排列、层次数量、细胞受损程度均明显改善;电镜下可见TEAS组示病理改变基本同安慰刺激组,但髓鞘病理改变减轻,且突触间隙宽度及PSD的厚度等反映可塑性变化的重要指标高于该组,未见断裂现象;TUNEL检测显示安慰刺激组和TEAS组阳性细胞数目较模型组减少,且TEAS组减少更为明显。结论 TEAS可上调大鼠海马BDNF的表达,减少细胞凋亡的形成以促使LTP和突触的可塑性提高,使痴呆大鼠认知功能得到改善。     

染矽尘大鼠肺组织纤维化及自噬相关蛋白的变化

目的 探讨游离二氧化硅(SiO2)粉尘暴露大鼠肺组织不同时间点自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(Microtubules associated protein 1 light chain 3,LC3)和酵母自噬相关基因6(Beclin1)的变化。 方法 将72只无特定病原体级(SPF)Wistar雄性大鼠随机分为溶剂对照组和SiO2模型组,模型组大鼠采用非暴露式气管滴注法一次性给予SiO2悬浮液建立矽肺模型,溶剂对照组大鼠给予等量生理盐水。造模后两组分别于1、7、14、21、28、60 d处死6只大鼠,用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察两组大鼠不同时间点肺组织常规病理变化和纤维化程度;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肺组织匀浆中转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-1和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平;用Western blot法检测肺组织中自噬相关蛋白LC3和Beclin1的相对表达水平。 结果 HE染色结果显示,模型组大鼠肺组织在第1天至第60天持续存在炎性反应,炎性评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Masson染色观察结果显示,模型组大鼠肺组织从第14天开始出现少量胶原纤维增生,至第60天可见大量胶原纤维,纤维化评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组大鼠肺组织未见胶原纤维增生。ELISA法测定结果显示,模型组大鼠在染尘后各时间点肺组织匀浆中IL-1、TNF-α和TGF-β的含量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,模型组大鼠肺组织Beclin1蛋白表达水平在第7、14、21、28和60天时呈下降趋势,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠肺组织LC3II/LC3I的比值在第1、7、14、21、28和60天时呈下降趋势,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 游离SiO2粉尘致大鼠矽肺发病过程中,自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达水平与矽肺的不同发展阶段有关。在大鼠染矽尘早期,肺组织以炎性变化为主;随着染矽尘大鼠纤维化程度的加重。     

BMSCs移植改善老年性痴呆大鼠空间记忆能力的实验研究

目的 探讨BMSCs移植对老年痴呆大鼠空间记忆能力的改善情况,为细胞移植治疗老年痴呆实验依据.方法 海马注射Aβ1-40蛋白制备AD动物模型,模型成功后移植BMSCs.Morris水迷宫检测大鼠行为学变化,采用BrdU、NSE和GFAP的免疫荧光双标技术观察移植的细胞生存及分化.结果 AD组大鼠逃避潜伏期较对照组明显延长(P＜0.05),移植BMSCs治疗后大鼠逃避潜伏期明显缩短(P＜0.01)；移植细胞后大鼠海马周围可见分化为NSE或GFAP阳性的细胞.结论 BMSCs移植AD大鼠后能在局部存活并分化,并且能够改善AD大鼠空间学习记忆能力.     

黄芪提取物对老年痴呆大鼠的学习记忆及基质金属蛋白酶-2,9的影响

目的探讨黄芪提取物对老年痴呆大鼠学习、记忆及海马组织中基质金属蛋白酶-2,9含量的影响。方法 2019年1月,通过向大鼠的侧脑室注射链脲佐菌素制备老年痴呆大鼠的动物模型,实验分成4组:对照组、模型组、黄芪提取物组及脑复康组。脑复康组和黄芪提取物组分别口服黄芪提取物和脑复康,对照组与模型组口服同样量的生理盐水,治疗时间为28 d。Morris水迷宫测定每组鼠的逃避潜伏期和穿台次数,免疫印迹实验测定各组大鼠海马组织中基质金属蛋白酶-2,9的含量。结果与对照组相比,模型组大鼠逃避潜伏期延长,而穿台次数减少(P0.01),海马组织中基质金属蛋白酶-2,9相对含量明显上升(0.731±0.081、0.698±0.072,P0.01)。与模型组相比,口服黄芪提取物的大鼠逃避潜伏期缩短,而穿台次数增加(P0.01),海马组织中基质金属蛋白酶-2,9相对含量均显著下降(0.326±0.039、0.304±0.045,P0.01)。结论黄芪提取物可降低老年痴呆大鼠海马组织中基质金属蛋白酶-2,9含量,有利于提高其学习与记忆功能。     

AD模型小鼠脑组织AQP4、SNTA1表达水平的变化及DADS的干预研究

目的探讨二烯丙基二硫化物(DADS)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠的干预作用,为AD的防治提供理论依据。方法将20只5月龄APPswe/PS1d E9双转基因鼠按窝别和体质量分为AD模型组和AD干预组,同时将野生型小鼠分为野生对照组和野生干预组,每组10只。干预组小鼠每日1次灌胃给予50 mg/kg DADS,AD模型组小鼠和野生对照组小鼠每日1次灌胃等量溶媒,连续处理6月。采用水迷宫和旷场实验测定小鼠神经行为学变化。免疫组化法分析大脑皮质β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积情况,q RT-PCR和Western blot法分别检测大脑皮质水通道蛋白4(AQP4)、α-互养蛋白(SNTA1)m RNA及蛋白的表达水平。结果与对照组相比,AD模型组小鼠水迷宫实验中定位航行逃避潜伏期延长、穿越平台次数减少,在旷场实验中中央停留时间延长、穿格次数和直立次数减少,大脑皮质Aβ沉积数量增多,AQP4m RNA及蛋白表达升高,SNTA1m RNA及蛋白的表达水平下降,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。与AD模型组相比,DADS干预组小鼠的定位航行逃避潜伏期缩短、穿越平台次数增多,中央停留时间缩短、穿格次数和直立次数增多,大脑皮质Aβ沉积数量减少,AQP4及SNTA1 m RNA及蛋白的表达水平上调,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论 AD模型小鼠大脑皮质AQP4表达升高,但SNTA1表达的降低可改变AQP4极性分布而影响AQP4的功能。DADS可明显减少AD模型小鼠大脑皮质Aβ沉积,改善认知能力,其作用机制可能与DADS调节AQP4表达及其极性分布有关。     

毛蕊花糖苷对CUMS大鼠学习记忆能力及突触可塑性的影响

目的 观察毛蕊花糖苷（acteoside）对慢性温和不可预知应激（chronic unpredictable mild stress,CUMS）大鼠学习记忆及突触可塑性的影响。方法 采用CUMS结合孤养的方式制备抑郁模型大鼠。成模后随机分为模型组、氟西汀（20mg/kg）组、毛蕊花糖苷低（30mg/kg）剂量组和高剂量（60mg/kg）组,每组12只,另取12只正常大鼠作为对照组。连续灌胃给药3周。糖水偏好实验和强迫游泳实验检测大鼠抑郁样行为;Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;在体电生理实验记录大鼠海马长时程增强（long-term potentiation,LTP）;免疫组织化学和免疫蛋白印迹法检测海马突触结合蛋白-1(synaptotagmin-1,Syt1) 的表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠糖水消耗率明显降低,强迫游泳不动时间明显延长,逃避潜伏期明显延长,海马LTP幅值明显降低,海马Syt1表达明显减少（P均＜0.05）;模型大鼠经毛蕊花糖苷灌胃3 w后,上述各项指标均得到有效逆转。结论 毛蕊花糖苷可能通过增加海马突触可塑性和Syt1的表达改善CUMS大鼠的学习记忆能力。     

黄芪提取物对老年痴呆大鼠海马区COX-2和iNOS表达的影响

目的 研究黄芪提取物对老年性痴呆(AD)大鼠学习记忆能力的影响及其作用机制。 方法 SD大鼠海马内注射Aβ25-35制备AD大鼠模型,实验分5组:正常对照组、模型组和不同浓度的黄芪组（20、40 和80 mg/kg）。黄芪组在造模前后均用黄芪提取物灌胃。用Morris水迷宫测定各组大鼠的学习记忆能力,Western blot测定各组大鼠海马COX-2和iNOS蛋白表达。 结果 模型组的逃避潜伏期延长,单位时间内跨越原平台次数减少,海马COX-2和iNOS的表达水平升高,与正常对照组比较均有统计学差异(P＜0.05);不同浓度黄芪组的逃避潜伏期均缩短,单位时间内跨越原平台次数均增多,且呈剂量依赖性;COX-2和iNOS表达水平均下降,并且随着黄芪浓度的增加COX-2和iNOS表达水平降低越明显,与模型组比较差异均有统计学意义 (P＜0.05)。 结论 经过黄芪提取物的治疗,老年痴呆大鼠的学习记忆能力得到了明显提高,其机制可能是黄芪提取物通过抑制COX-2、iNOS等信号转导途径,减轻Aβ25-35毒性作用。     

“通督调神法”针刺对局灶性脑缺血大鼠认知功能的影响

目的观察"通督调神法"针刺对局灶性脑缺血大鼠认知功能的影响。方法 40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组("通督调神法"针刺治疗)和西药组(尼莫通灌胃),后三组参照改良Longa法制备左侧MCAO模型,采用Morris水迷宫进行行为学检测。结果与假手术组比较,模型组的逃避潜伏期明显增加,平台穿越次数明显减少(均P<0.05);与模型组比较,针刺组的逃避潜伏期明显缩短,平台穿越次数明显增加(均P<0.05);与西药组比较,针刺组第4天测试的逃避潜伏期缩短,平台穿越次数增加(均P<0.05)。结论 "通督调神法"针刺能改善局灶性脑缺血大鼠的学习、记忆功能。     

黄芪提取物对老年痴呆大鼠海马组织中iNOS的表达及NO含量的影响

目的研究黄芪提取物对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织中诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的表达和NO含量的影响及其作用机制。方法 SD大鼠海马内注射Aβ25-35制备AD大鼠模型,实验分4组:假手术组、模型组、黄芪组和西药治疗组。黄芪组和西药治疗组分别用黄芪提取物和脑复康灌胃,假手术组和模型组用等剂量生理盐水灌胃。用Morris水迷宫测定各组大鼠的学习记忆能力;Western blot测定各组大鼠海马组织中i NOS蛋白的表达;硝酸还原酶法检测各组大鼠海马组织中NO含量。结果模型组的逃避潜伏期延长,单位时间内跨越原平台次数减少,海马组织中i NOS的表达水平及NO含量均升高,与假手术组比较,差异均有统计学意义(P0.05);黄芪组逃避潜伏期均缩短,单位时间内跨越原平台次数均增多;i NOS表达水平及NO含量下降,与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.05),其作用效果与西药治疗组相当(P0.05)。结论黄芪提取物对Aβ25-35所致AD模型大鼠学习记忆障碍具有明显的改善作用,其机制可能是黄芪提取物通过抑制i NOS的表达和NO的生成,减轻Aβ25-35毒性作用所致脑组织神经元损伤,从而改善AD的学习记忆障碍。     

黄芪颗粒对老年痴呆大鼠基质金属蛋白酶9及钙蛋白酶活性的影响

目的探讨黄芪颗粒对老年痴呆大鼠海马组织中基质金属蛋白酶-9的含量及钙蛋白酶活性的影响。方法通过向大鼠的侧脑室注射链脲佐菌素制备老年痴呆大鼠的动物模型,实验分成4组:对照组、模型组、黄芪颗粒组及脑复康组。脑复康组和黄芪颗粒组分别口服黄芪颗粒和脑复康,对照组与模型组只口服同样量的生理盐水,治疗时间为28天。Morris水迷宫测定每组鼠的逃避潜伏期和穿台次数,免疫印迹实验测定各组大鼠海马组织中基质金属蛋白酶-9的含量;酶学法测定大鼠海马组织中钙蛋白酶活性。结果与对照组相比,模型组大鼠逃避潜伏期延长,而穿台次数减少(P0.05);海马组织中基质金属蛋白酶-9相对含量明显上升(0.71±0.08)(P0.05);钙蛋白酶活性增加(2.98±0.48)(P0.05)。与模型组相比,口服黄芪颗粒以及脑复康组的大鼠逃避潜伏期缩短,而穿台次数增加(P0.05);海马组织中基质金属蛋白酶-9相对含量均显著下降(均P0.05);钙蛋白酶活性降低(均P0.05)。结论黄芪颗粒可通过降低老年痴呆大鼠海马组织中基质金属蛋白酶-9含量和钙蛋白酶活性来减少神经细胞凋亡,从而提高其学习与记忆功能。     

白藜芦醇抑制海马β-APP表达改善大鼠学习记忆

目的探讨白藜芦醇(resvertrol,Res)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)大鼠学习记忆及β-淀粉样前体蛋白(β-APP)表达的影响。方法采用去卵巢合并D-半乳糖(100 mg/kg)注射制备AD大鼠模型,60只雌性Wistar大鼠随机分为模型组、白藜芦醇低、中、高剂量组(20、40、80 mg/kg)、戊酸雌二醇组(0.8 mg/kg)及假手术组(蒸馏水),连续灌胃12周,利用Morris水迷宫检测大鼠空间记忆能力;Western blot检测大鼠海马中β-APP表达。结果随着训练天数增加,各组大鼠逃避潜伏期逐渐缩短,与模型组比较,白藜芦醇80 mg/kg组、戊酸雌二醇组大鼠逃避潜伏期[分别为(16.49±4.18)、(17.05±2.71)s]明显缩短,穿越平台次数[分别为(3.90±0.97)、(3.44±0.63)次]明显增加(P<0.05),白藜芦醇各组大鼠在目标象限内停留时间延长(P<0.05);白藜芦醇20、40、80 mg/kg组大鼠海马β-APP蛋白表达水平[分别为(0.57±0.054)、(2.63±0.50)、(0.28±0.043)]较模型组(0.27±0.057)明显下降(P<0.05)。结论白藜芦醇可以改善AD大鼠的空间记忆能力,其机制可能与抑制海马β-APP的表达有关。     

饮水高碘对雄性子代大鼠学习记忆能力及海马神经细胞自噬的影响

目的探讨高碘染毒对雄性子代大鼠学习记忆及海马神经细胞自噬的影响。方法将24只SPF级雌性SD孕鼠随机分为4组,分别为对照(自来水)组及500、2 500、5 000μg/L碘酸钾染毒组,每组6只。自妊娠至仔鼠出生后第21天,孕鼠经自由饮水方式进行染毒。断乳后,将雄性仔鼠继续按与母鼠相同的染毒处理,直至第六个月末。采用Morris水迷宫实验观察雄性仔鼠学习记忆能力,Western Blot法检测雄性仔鼠海马神经细胞自噬相关蛋白的表达。结果在定位航行实验中,与对照组比较,各碘酸钾染毒组大鼠到达平台的潜伏期均延长,仅5 000μg/L碘酸钾染毒组大鼠到达平台的总路径较长,差异均有统计学意义(P0.05);而各组大鼠的游泳速率无明显改变。且随着碘酸钾染毒浓度的升高,仔鼠到达平台潜伏期、总路径均呈延长趋势。在空间探索实验中,与对照组比较,各碘酸钾染毒组大鼠水迷宫空间探索时间比例均下降,2 500、5 000μg/L碘酸钾染毒组路径比例均下降,差异有统计学意义(P0.05);且随着碘酸钾染毒浓度的升高,仔鼠水迷宫空间探索时间、路径比例均呈下降趋势。与对照组比较,2 500、5 000μg/L碘酸钾染毒组雄性仔鼠海马神经细胞LC3-Ⅱ、Beclin1和p62蛋白的表达水平均较高,差异有统计学意义(P0.05);且随着碘酸钾染毒浓度的升高,雄性仔鼠海马神经细胞LC3-Ⅱ、Beclin1的表达水平均呈上升趋势。结论高碘可损伤雄性子代大鼠的学习记忆能力,并且引起雄性子代大鼠海马神经细胞自噬的改变。     

香菇多糖对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力影响

目的探讨香菇多糖(LNT)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆行为能力影响及机制。方法50只健康SD大鼠中随机抽取10只作为对照组(生理盐水),另40只大鼠用于制造AD模型,30只模型大鼠随机分为模型组(生理盐水)、香菇多糖高、低剂量组(50、10mg/kg);采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,试剂盒法测定大脑皮质超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及单胺氧化酶(MAO)含量,荧光抗体法检测大鼠海马c-fos蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠训练第5天逃避潜伏期[(63.67±5.19)s]明显延长、跨越平台次数[(2.09±1.22)次]明显减少(P0.01),大脑皮质CAT、SOD活力[分别为(4.98±1.32)、(9.39±2.52)U/mgpro]明显下降(P0.01),MAO含量[(68.62±9.67)nmol/100mgpro]明显升高(P0.01),海马组织中c-fos表达量明显升高(P0.01);与模型组比较,香菇多糖高剂量组大鼠训练第5天逃避潜伏期[(35.67±4.68)s]明显缩短、跨越平台次数[(4.89±1.01)次]明显增加(P0.01),大脑皮质CAT和SOD活力[分别为(7.18±1.19)、(13.45±2.21)U/mgpro]明显升高(P0.01),MAO含量[(38.33±6.53)nmol/100 mgpro]明显降低(P0.01),海马组织中c-fos表达量明显减少(P0.01)。结论香菇多糖对AD大鼠学习记忆能力具有一定改善作用,其机制可能与增强大鼠大脑抗氧化能力和降低c-fos蛋白表达有关。     

PI3KC3/Beclin1复合物对染矽尘NR8383细胞自噬的调控作用

[目的]探讨PI3KC3/Beclin1复合物在染矽尘大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)自噬中的调控作用。[方法]常规培养NR8383细胞,随机分为4组:对照组,矽尘组,3-MA组和3-MA干预组,分别孵育1、3、6、12、20 h后收集样品。采用蛋白免疫印迹方法检测自噬标记蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、自噬底物蛋白p62以及自噬相关蛋白Beclin1、PI3KC3;采用激光扫描共聚焦显微镜观察孵育不同时间的自噬免疫荧光表达情况;采用免疫共沉淀检测Beclin1复合物表达。[结果]免疫荧光结果显示,矽尘组LC3点状聚集绿色荧光亮斑随时间先增强后减弱,在6 h时荧光最强,且各时间点较对照组和3-MA干预组荧光亮斑增强;3-MA干预组LC3荧光标记绿色亮斑先增强后减弱,弱于矽尘组,但强于对照组。加入溶酶体抑制剂二磷酸氯喹后,各组LC3绿色荧光信号随时间均呈现增强的趋势。Western blot结果显示,矽尘组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值呈先增加后减少趋势,且在各个时间点均高于对照组(P 0.05);在LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值达最高的6 h时间点,矽尘组的值是对照组的248%,是3-MA组的372%。3-MA干预组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值也呈先增加后减少趋势;除1 h时间点外,余各时间点均低于矽尘组,但高于对照组(P 0.05);在LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值达最高的6 h时间点,3-MA干预组的值是矽尘组的90%,是对照组的223%。Beclin1、PI3KC3蛋白表达趋势与LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值一致,p62蛋白表达趋势与LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值相反。免疫共沉淀显示,矽尘组Beclin1与PI3K结合增加,3-MA干预后两者结合减少。[结论]矽尘诱导NR8383细胞的自噬活动随时间发生不同程度的改变,3-MA可下调矽尘诱导的NR8383细胞自噬活动,推测PI3KC3/Beclin1信号通路参与矽尘诱导肺泡巨噬细胞的自噬过程。