慢病毒介导沉默食管癌细胞53BP1基因表达对裸鼠移植瘤放射敏感性的研究

背景与目的：p53结合蛋白1(p53 binding protein,53BP1)在多种正常组织和肿瘤细胞中有表达,与放射线照射后细胞周期阻滞有关。体外实验证实抑制53BP1的蛋白表达可有效地消除肿瘤细胞照射后引起的周期阻滞,增加放射敏感性。但体内实验国内尚未见相关报道。该研究旨在探讨沉默食管癌细胞53BP1基因对裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法：将48只BALB/c/nu裸鼠按随机数字表法分为对照组、单纯照射组、空载体组、空载体加照射组、沉默53BP1组以及沉默53BP1加照射组,每组8只,于裸鼠皮下接种相应食管癌细胞ECA109,制备裸鼠模型,给予15 Gy放射线单次照射,受照后1 h每组处死3只裸鼠,将肿瘤标本按蛋白[质]印迹法(Western blot)及流式细胞分析要求处理,Western blot检测移植瘤组织中CHK1、CHK2和磷酸化CHK2-T68的表达,流式细胞术分析裸鼠肿瘤组织中细胞周期分布和细胞凋亡。观察各组剩余裸鼠移植瘤照射后的生长情况,移植瘤体积变化情况。结果：所有接种裸鼠均成活并有肿瘤形成,各组之间肿瘤体积大小差异无统计学意义(F=0.67,P=0.69);单纯照射组和空载体照射组裸鼠的肿瘤生长速度慢于未照射组(P=0.02),沉默53BP1加照射组裸鼠的肿瘤生长速度最慢(P=0.03),沉默53BP1加照射组的相对生长速率较空载体加照射组和单纯照射组降低,生长抑制率增加(P=0.01)。沉默53BP1加照射组的q值为1.45;沉默53BP1加照射组裸鼠体内CHK1和CHK2的蛋白表达产物未见明显变化(P=0.71),CHK2-T68的磷酸化水平较单纯照射组和空载体照射组明显下降(P=0.03),各组裸鼠的瘤组织中细胞周期分布和凋亡率差异无统计学意义(P=0.45)。结论：体内研究显示沉默53BP1基因可以提高食管癌放射敏感性。     

沉默HMGB1 基因对裸鼠人上皮性卵巢癌移植瘤生长的抑制作用

目的：探讨高迁移率族蛋白B1（high mobility group box 1，HMGB1）基因对裸鼠人上皮性卵巢癌移植瘤生长的影响。方法：选取对数生长期的人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3 细胞建立裸鼠人上皮性卵巢癌移植瘤模型，将造模成功的裸鼠随机分成对照组和HMGB1-siRNA 组，分别在接种细胞后第7、9、11、14、16 天于荷瘤鼠腋下注射等量的生理盐水和HMGB1-siRNA。3 周后颈椎脱臼法处死裸鼠、分离肿瘤组织，测量肿瘤的体积并绘制肿瘤生长曲线，以Tunel 染色法检测移植瘤细胞的凋亡情况，Western blotting 检测移植瘤组织中HMGB1、STAT3、p-STAT3 的表达水平，免疫组化染色技术检测移植瘤组织中VEGF-A的表达和微血管形成情况。结果：与对照组相比，HMGB1-siRNA组的肿瘤体积增长速度减缓，第21 天起HMGB1-siRNA组的肿瘤体积显著小于对照组（P<0.05）；HMGB1-siRNA 成功敲降了移植瘤组织细胞中HMGB1 mRNA的表达，移植瘤组织中HMGB1-siRNA组的细胞凋亡率较对照组显著升高[ （34±8）% vs（6±2）%，P=0.04]，HMGB1 和p-STAT3 表达显著降低（P<0.05），VEGF-A表达和微血管数均显著低于对照组（均P<0.05）。结论：敲降HMGB1 基因可能通过抑制HMGB1/STAT3 信号通路降低VEGF-A的表达和微血管形成，从而促进肿瘤组织细胞凋亡和减缓移植瘤生长。     

EGFR对食管鳞癌放化疗后预后预测的意义

目的:通过检测食管鳞癌患者治疗前、后血清EGFR水平以及食管鳞癌组织中EGFR的表达情况,了解EGFR在预测食管鳞癌放化疗后预后中的价值。方法:收集我院2013年2月至2016年2月初治的食管鳞状细胞癌患者83例,以及患者血液标本及病理组织,应用ELISA法检测食管鳞癌患者治疗前和治疗后血液EGFR水平,应用免疫组化法检测肿瘤组织中EGFR的表达情况,通过随访,分析EGFR与近期疗效及远期生存的关系。结果:食管鳞癌患者治疗后血清EGFR水平较治疗前下降［（1.80±1.86）ng/ml vs （1.48±2.13）ng/ml］,但差异无统计学意义（P=0.185）。血清EGFR水平与分期、是否淋巴结转移有关(P＜0.05)。EGFR在83例食管鳞癌组织中的高表达率为65.1%,与分期、淋巴结状态、癌细胞分化状况有关(P＜0.05)。血清EGFR水平在癌组织EGFR高表达组中偏高［(2.25±2.06）ng/ml vs （0.98±1.02）ng/ml］,且差异有统计学意义。83例食管鳞癌患者行放化疗总的有效率为66.3%（55/83）,其中EGFR高表达组有效率低于低表达组（57.4% vs 82.8%）,且差异有统计学意义(P＜0.05)。83例食管鳞癌患者总的1、3、5年生存率分别为74.2%、38.4%、23.4%。其中EGFR高表达组1、3、5年生存率为69.6%、29.1%、12.2%,EGFR低表达组1、3、5年生存率为82.8%、54.4%、40.3%;同时EGFR低表达组中位生存时间高于EGFR高表达组（40.95月vs 21.53月）,提示EGFR低表达组生存率优于EGFR高表达组,差异有统计学意义（P=0.013）。结论:食管鳞癌患者血清和组织中EGFR均呈高表达,组织EGFR可能是食管鳞癌放化疗后的一个预后预测因子。     

人乳腺癌裸鼠移植瘤组织Duffy抗原趋化因子受体与Her-2蛋白表达相关性的探讨

目的:探讨人乳腺癌裸鼠移植瘤组织Duffy抗原趋化因子受体(DARC)与Her-2蛋白表达的相关性.方法:建立人乳腺癌裸鼠原位移植瘤模型,按细胞类型分为DARC低表达的MDA-MB-231裸鼠移植瘤、转染空质粒的MDA-MB-231(MDA-MB-231-vect)裸鼠移植瘤及转染DARC cDNA的MDA-MB-231(MDA-MB-231-DARC)裸鼠移植瘤.隔天观察裸小鼠的健康状况和肿瘤细胞的成瘤性,成瘤后每周测量1次各移植瘤的体积,至第2周及第4周时,分别处死各组实验动物8只,获取移植瘤,免疫组化检测原位移植瘤组织中DARC及Her-2蛋白表达;选取中国福利会国际和平妇幼保健院乳腺癌临床组织标本80例,通过免疫组化技术检测DARC和Her-2蛋白表达,并对其相关性进行分析.结果:虽然各组动物的成瘤率均为100%,但DARC转染后的 MDA-MB-231移植瘤(MDA-MB-231-DARC移植瘤)生长明显减慢(P=0.007),且裸鼠移植瘤组织中Her-2蛋白呈低表达,转染与未转染DARC的裸鼠移植瘤组织中Her-2蛋白表达差异有统计学意义,χ2=69.83,P=0.045;对人乳腺癌临床组织标本免疫组化检测结果显示,Her-2蛋白表达与DARC蛋白呈负相关,r=-0.464,P=0.026.结论:人乳腺癌裸鼠移植瘤组织中DARC的过表达抑制Her-2蛋白表达.     

西妥昔单抗联合顺铂对荷食管鳞癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的 探讨西妥昔单抗联合顺铂对人食管鳞癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 将食管鳞癌Eca-109细胞株接种于裸鼠皮下,制备裸鼠移植瘤模型.将裸鼠随机分成对照组、西妥昔单抗组、顺铂组和两药联合组.动态测量各组移植瘤体积,给药结束后取出瘤体称瘤体质量,计算抑瘤率.取血标本检测肿瘤标志CEA.采用蛋白质印迹法检测肿瘤组织中MAPK蛋白磷酸化水平.结果 对照组、西妥昔单抗组、顺铂组和联合用药组平均肿瘤体积分别为(2 056.3±787.3)、(1 642.0±850.3)、(1 540.7±427.7)和(1 299.3±583.8) mm3.析因分析显示,单药作用后肿瘤大小变化差异无统计学意义,P＞0.05,两药间无交互作用,F=0.160,P=0.691.对照组、西妥昔单抗组、顺铂组和联合用药组平均瘤质量分别为(1.84±0.75)、(1.70±0.90)、(1.27±0.51)和(0.95±0.25)g;西妥昔单抗处理后瘤体质量减轻,差异无统计学意义,F＝1.21,P=0.279;而顺铂组差异有统计学意义,F=10.382,P＝0.003;两药间无交互作用,F=0.211,P=0.649.对照组、西妥昔单抗组、顺铂组和联合用药组的抑瘤率分别为0、7.6％、31.0％和48.4％.西妥昔单抗和顺铂单药各自均能降低CEA表达水平,差异有统计学意义,P＜0.05;两药间无交互作用,F=0.601,P=0.443.药物干预后对照组、西妥昔单抗组、顺铂组和联合用药组P-MAPK蛋白表达量分别为1.530±0.77、0.791±0.08、1.705±0.12和0.901±0.85,西妥昔单抗明显下调了P-MAPK蛋白表达水平,F=669.332,P＜0.001;而顺铂上调了P-MAPK蛋白的表达,F=23.000,P＜0.001;两药联用后P-MAPK蛋白表达水平下降,两药之间无交互作用,F=1.207,P=0.279.结论 顺铂上调EGFR下游蛋白P-MAPK的活化,西妥昔单抗与顺铂联用表现为相加作用,抑制移植瘤生长作用优于单药组.     

食管鳞癌组织PTK6表达临床意义研究

目的探讨酪氨酸激酶-6(protein tyrosine kinase 6,PTK6)在食管鳞癌组织中的表达,及其与食管鳞癌发生发展及临床病理因素的相关性。方法采用免疫组织化学方法,检测2003-01-01-2005-12-01中山大学肿瘤防治中心胸外科切除的67例食管鳞癌及正常食管黏膜上皮组织中PTK6表达水平;在蛋白质和RNA水平检测7对手术切除的食管鳞癌及其癌旁组织标本中PTK6的RNA与蛋白表达情况。结果 PTK6在癌组织中的表达明显弱于癌旁正常黏膜组织,50.7%(34/67)的食管鳞癌组织中检测到PTK6蛋白高表达,73.1%(49/67)正常食管黏膜上皮组织中检测到PTK6蛋白高表达,两者差异有统计学意义,χ2=7.123,P=0.008。食管癌组织中PTK6表达水平与肿瘤浸润深度(χ2=0.647,P=0.03)和病理分级(χ2=0.577,P<0.001)密切相关,PTK6低表达组5年总生存率为31.9%,显著低于PTK6高表达组的77.3%,差异有统计学意义,P=0.021。RT-PCR及蛋白质印迹结果证实,无论是在基因水平还是蛋白水平,PTK6在食管鳞癌组织中均呈低表达。结论 PTK6在食管鳞癌的发生发展中起着重要作用,可能作为食管癌判断预后的独立预测因素。     

通路抑制剂LY294002对子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:观察磷脂酰肌醇3激酶通路抑制剂LY294002对子宫内膜癌裸鼠移植瘤细胞增殖、凋亡及p-AKT表达的影响.方法:体外培养人子宫内膜癌Ishikawa细胞,12只裸鼠皮下接种Ishikawa细胞后建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型,随机分为2组,每组6只,分别给予腹腔注射生理盐水和LY294002干预,观察2组移植瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算移植瘤体积、抑瘤率等,观察药物对移植瘤的抑制作用,移植瘤组织标本进行HE染色镜下观察移植瘤的坏死程度、范围及细胞凋亡情况,并用免疫组织化学方法检测移植瘤组织内p-AKT的表达.结果:1)用药组裸鼠移植瘤体积增长相对缓慢(2 027.30±251.16)mm3,对照组肿瘤体积增长明显(3 110.60±599.66)mm3,差异有统计学意义(t=4.082,P=0.005),且抑瘤率为(32.49±16.39)%.2)HE染色见用药组较对照组移植瘤细胞凋亡及坏死面积显著增加;免疫组化结果显示用药组p-AKT的表达低于对照组(χ2=6.133,P<0.05).结论:PI3K通路抑制剂LY294002能够抑制子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长,促进其凋亡.     

RECK基因和基质金属蛋白酶2在食管鳞癌中的表达及其临床病理意义

目的 探讨RECK基因和基质金属蛋白酶2(MMP-2)在食管鳞癌发生、发展中的作用.方法 收集河南省肿瘤医院食管鳞癌标本57例,同时取患者相应的癌旁正常食管黏膜组织作为对照.应用组织芯片法与免疫组织化学法,检测每例食管鳞痛标本和正常食管黏膜组织中RECK和MMP-2的表达情况.结果 RECK在食管鳞癌组织中的表达率为36.8%(21/57),在正常食管黏膜组织中的表达率为61.4%(35/57),两组间差异有统计学意义(χ2=6.879,P＜0.05);RECK的表达与患者的年龄、性别、肿瘤组织学分级、淋巴结转移无关(均P＞0.05),但与临床病理分期有关(P＜0.05).MMP-2在食管鳞癌组织中的阳性表达率为42.1%(24/57),在正常食管黏膜组织中的阳性表达率为19.3%(11/57),两组间差异有统计学意义(χ2=6.968,P＜0.05);MMP-2的表达与患者的年龄、性别、肿瘤组织学分级无关(均P＞0.05),但与肿瘤临床病理分期和肿瘤淋巴结转移有关(P＜0.05).此外,RECK和MMP-2在食管鳞癌中阳性表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 RECK和MMP-2的异常表达在食管鳞癌的发生中有重要作用,RECK的低表达和MMP-2的高表达与食管鳞癌临床病理进展有关.     

食管鳞癌血浆miR-143表达与肿瘤深肌层浸润及淋巴结转移的关系

摘 要：［目的］ 分析血浆miR-143表达与食管鳞癌浸润肌层深度及淋巴结转移的关系,为食管鳞癌转移的早期防治及作用机制提供理论学依据。［方法］ 收集食管鳞癌患者术前一周血标本40例,同期收集40例健康体检者血标本,运用实时定量荧光PCR检测两组人群血浆中miR-143表达水平,探讨食管鳞癌患者血浆中miR-143表达水平与食管鳞癌深肌层浸润及淋巴结转移的关系。［结果］ 与健康人群相比,食管鳞癌患者血浆中miR-143表达水平降低,差异有统计学意义（P<0.001）。食管鳞癌患者血浆miR-143表达水平与年龄（P=0.154）、性别(P=0.131)、肿瘤部位(P=0.092)均无关;T3+T4期患者血浆中miR-143表达水平低于T1+T2期患者（P=0.008）;与无深肌层浸润患者相比,有深肌层浸润患者血浆miR-143表达水平降低（P=0.012）;有淋巴结转移的患者血浆中miR-143表达水平较无淋巴结转移患者低（P=0.003）。［结论］ 食管鳞癌患者血浆miR-143表达水平较健康人群下调,且在有深肌层浸润和发生淋巴结转移的食管鳞癌患者血浆中表达水平明显下调,其有望作为评估食管鳞癌患者肿瘤进展的新生物学标志。     

食管鳞癌组织Vav1表达水平及其与预后的相关性

目的:探讨Vav1(Vav guanine nucleotide exchange factor)在可手术切除的食管鳞癌患者组织中的表达水平及其与患者预后的相关性。方法:回顾性分析中国医科大学附属盛京医院2009年12月至2015年12月期间行手术治疗的81例食管鳞癌患者的临床资料。采用定量RT-PCR检测上述病例食管鳞癌标本中Vav1的表达水平，应用Kaplan-Meier方法进行单因素生存曲线分析Vav1表达水平与食管鳞癌生存的相关性，Log-rank法进行检验，采用Cox风险比例模型分析预后的独立影响因素。结果:食管鳞癌患者Vav1表达水平较高，生存分析显示Vav1高表达组生存期明显低于低表达组（P＜0.05），Cox风险比例模型分析显示Vav1表达水平可作为食管鳞癌患者预后的独立影响因素。结论:食管鳞癌患者组织中Vav1表达水平高，Vav1表达水平高提示食管鳞癌患者预后不良。     

99例结外NK/T细胞淋巴瘤预后分析

背景与目的：结外NK/T细胞淋巴瘤的临床及预后存在明显的异质性,以早期病变为主,常见原发灶局部外侵,早期患者放疗为主要治疗手段。本研究旨在分析早期结外NK/T细胞淋巴瘤患者的临床特征、治疗方案、生存预后及可能影响预后的相关因素。方法：收集河北医科大学第四医院2010年1月—2015年12月病理证实的早期NK/T细胞淋巴瘤患者99例,发病平均年龄45.5岁（6~76岁）,男女发病比例2.1∶1;56.6%患者伴有B症状;单纯放疗7例,单纯化疗29例,放化综合治疗63例;中位放疗剂量52 Gy（34~60 Gy）,含左旋门冬酰胺酶或培门冬酶化疗患者73例,不含19例,中位化疗周期为6个（1~12个）。结果：全组患者中位生存时间59.9个月,中位局控时间73.5个月。全组患者1、2和5年总生存率分别为76.8%、68.8%和61.4%;1、2和5年局控率分别为84.5%、81.6%和78.3%;1、2和5年无远处失败生存率分别为83.4%、83.4%和76.8%。单纯放疗或放化疗与单纯化疗比较,5年总生存率为66.0%和47.3%（χ²=4.782,P=0.029）,5年局控率为85.8%和58.7%（χ²=5.949,P=0.015）。不伴原发肿瘤侵犯（primary tumor invasion,PTI）患者与伴有PTI患者比较,5年总生存率为71.5%和55.5%（χ²=4.950,P=0.026）;5年局控率为81.5%和72.0%（χ²=0.983,P=0.321）。全组近期疗效评价达CR者62例（62.6%）,治疗有效率83.8%,疾病控制率85.8%。评价CR患者与非CR患者5年生存率为84.1%和27.6%（χ²=31.566,P=0.000）;5年局控率为92.2%和52.4%（χ²=18.417,P=0.000）。结论：早期结外NK/T细胞淋巴瘤患者单放或放化综合治疗比单纯化疗疗效好,与生存有关的独立预后因素有Ann Arbor分期和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）,与局控有关的独立预后因素仅有LDH。     

B细胞易位基因2在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨B细胞易位基因2（BTG2）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及临床意义。方法:分析癌症基因组图谱（TCGA）数据库中BTG2 mRNA在ESCC组织及癌旁组织中的表达,受试者工作特征（ROC）曲线分析BTG2 mRNA表达量在预测ESCC患者疾病状态和放疗敏感性中的诊断价值;免疫组织化学检测我院184例ESCC患者癌组织标本BTG2蛋白表达,其中包括55例行根治性放疗术的ESCC患者,50例正常黏膜组织作为对照。分析BTG2蛋白表达情况与ESCC临床特征的关系。结果:与对照组比较,BTG2 mRNA在ESCC组织中表达下降（5.08±1.06 vs 5.91±1.29,t=2.387,P=0.019）,与放疗敏感组患者比较,BTG2 mRNA在放疗抵抗的ESCC患者癌组织中表达下降（3.82±0.97 vs 5.44±0.73,t=4.935,P＜0.001）,ROC结果显示BTG2 mRNA在鉴别放疗敏感与放疗抵抗患者时特异性为95.65%,敏感性为75%（AUC=0.902,P＜0.001）;免疫组织化学结果显示ESCC组织中BTG2阳性表达（103/184）低于正常黏膜组织（42/50）,差异有统计学意义（χ2=13.10,P＜0.001）;BTG2表达在放疗敏感和放疗抵抗组织中的阳性表达率分别为57.9%（22/38）和23.5%（4/17）,差异有统计学意义（χ2=5.565,P=0.018）;ESCC患者BTG2蛋白表达差异在不同性别、年龄、T分期及M分期中无统计学差异（P＞0.05）,与N分期（χ2=4.134,P=0.042）及临床分期（χ2=5.303,P=0.021）相关;单因素分析结果显示,肿瘤分级（HR=0.500,95%CI:0.317～0.790,P=0.003）、N分期（HR=0.275,95%CI:0.157～0.479,P=0.000）、M分期（HR=0.317,95%CI:0.151～0.665,P=0.002）、临床分期（HR=0.269,95%CI:0.167～0.434,P=0.000）及BTG2表达（HR=1.956,95%CI:1.242～3.079,P=0.003）与ESCC患者总生存（OS）有关;多因素分析结果显示,肿瘤分级（HR=0.613,95%CI:0.381～0.987,P=0.044）、N分期（HR=0.507,95%CI:0.259～0.991,P=0.047）、临床分期（HR=0.504,95%CI:0.278～0.916,P=0.025）及BTG2表达（HR=1.608,95%CI:1.011～2.558,P=0.045）影响ESCC患者的OS。结论:BTG2具有作为预测ESCC进展及放疗敏感性生物标记物的潜在价值,并且是影响ESCC患者总生存率的独立预后因素。     

食管鳞状细胞癌HPV 16/18型感染与p53表达的相关性研究

目的 探讨人乳头状瘤病毒（HPV）16/18型在食管鳞状细胞癌中的感染情况及其与p53的关系。方法 采用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测56例食管鳞状细胞癌手术切除组织（鳞癌组）和24名健康者正常食管组织（对照组）中HPV l6/18 E6、E7基因的表达,并根据其判断HPV感染情况;采用免疫组化SP法检测p53蛋白的表达水平。 结果 鳞癌组HPV感染率和p53蛋白阳性表达率均高于对照组（44.6% vs 12.5%,χ²=7.630,P=0.006;41.1% vs 4.2%,χ²=10.896,P<0.001）。在食管鳞癌组织中,HPV 16/18感染与病理分级、TNM分期和淋巴结转移有关（P<0.05）;且HPV16/18感染与p53蛋白表达呈正相关（r=0.565,P<0.001）。Kaplan-Meier生存分析结果显示,HPV感染阳性、p53表达阳性患者中位OS均小于HPV感染阴性、p53表达阴性者（21个月 vs 39个月,χ²=4.306,P=0.038;17个月 vs 41个月,^χ2=5.868, P=0.015）。控制相关的潜在混杂因素后,Cox回归模型显示HPV感染（HR=1.834,95%CI：1.010~3.330,P=0.046）和p53阳性表达（HR=2.189,95%CI：1.182~4.054, P=0.013）均可增加食管鳞状细胞癌患者的死亡风险。结论 食管鳞状细胞癌中HPV感染和p53阳性表达均较高,可能共同促进食管鳞状细胞癌的发生、发展并影响其预后。     

Immunogenic tumor cell death induced by chemoradiotherapy in patients with esophageal squamous cell carcinoma

Although it has been shown that chemoradiotherapy may induce immunogenic cell death, which could trigger T-cell immunity mediated by high-mobility group box 1 protein (HMGB1) and calreticulin, there is still limited information to support this theory directly in a clinical setting. In the present study, we evaluated antigen-specific T-cell responses against six cancer-testis antigens in peripheral blood lymphocytes from patients with esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) receiving chemoradiation. Expression of HMGB1 and calreticulin within tumor microenvironment was also analyzed in resected samples with and without chemoradiotherapy in relation to patients survival. Tumor antigen-specific T-cell responses were confirmed in six (38%) of 16 patients with ESCC after chemoradiotherapy coexisting with elevated serum HMGB1. In addition, HMGB1 within tumor microenvironment was significantly upregulated in patients with ESCC with preoperative chemoradiotherapy, but not in those without chemoradiotherapy, and the degree of HMGB1 positively correlated with patient survival (n = 88). Both irradiation and chemotherapeutic drugs induced upregulation of HMGB1 and calreticulin in nine ESCC cell lines. Furthermore, HMGB1 was able to induce maturation of dendritic cells. Together, our findings indicate that chemoradiation induces tumor antigen-specific T-cell responses, and HMGB1 production is related to clinical outcome after chemoradiation. Cancer Res; 72(16); 3967-76. ?2012 AACR.     

长链非编码RNA PANDAR在非小细胞肺癌中的表达和临床意义

背景与目的：长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在肿瘤的发生、发展过程中有重要作用。LncRNA CDKN1A反义链启动子DNA损伤激动RNA(promoter of CDKN1A antisense DNA damage activated RNA,PANDAR)与多种肿瘤的进展及预后相关。探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中lncRNA PANDAR的表达及临床意义。方法：采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)方法检测94例新鲜NSCLC组织标本及相对应的癌旁组织标本中PANDAR的表达,分析其与NSCLC的临床病理特征、诊断价值和预后的关系。结果：PANDAR在NSCLC组织中的表达显著低于癌旁组织(P<0.001);PANDAR低表达和高表达组在肿瘤体积、淋巴结转移、疾病分期和分化程度方面差异均有统计学意义(χ²=9.197,P=0.002;χ²=7.126,P=0.008;χ²=6.271,P=0.012;χ²=8.147,P=0.004);受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.797(95%CI：0.614~0.849;P<0.001),灵敏度和特异度分别是49.8%和84.3%,Youden指数为0.402;PANDAR低表达和高表达组在总生存期(overall survival,OS)及无进展生存期(progression free survival,PFS)上的差异有统计学意义(χ²=7.282,P=0.007;χ²=6.777,P=0.009)。结论：PANDAR在NSCLC中低表达,可以作为NSCLC的新型生物标志物和诊断靶标。     

HMGB1与乳腺癌患者临床病理学特征及免疫指标的相关性研究

背景与目的：高迁移率族蛋白1（high mobility group box 1,HMGB1）参与DNA复制、转录及翻译过程,与恶性肿瘤的发生、发展、浸润及转移密切相关,并参与炎症、免疫、增殖、转移和自噬等多种信号转导通路的调节。探究HMGB1与乳腺癌患者临床病理学特征、免疫功能及新辅助化疗效果的相关性。方法：选取2019年5月—2020年10月南昌市第三医院收治并接受新辅助化疗的乳腺癌患者120例,采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定患者空芯针穿刺活检物中的HMGB1水平,以及调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）相关指标IL-10、TGF-β的含量。采用流式细胞术检测CD3 ⁺ 、CD4 ⁺ 、CD8 ⁺ T淋巴细胞和自然杀伤（natural killer,NK）细胞百分比。采用速率散射比浊法检测免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和补体C3、C4的含量。按照95% CI下限水平将研究对象分为高水平组（HMGB1＞ 22.98 ng/mL）和低水平组（HMGB1≤22.98 ng/mL）。新辅助化疗方案的疗程结束后,根据Miller-Payne病理学反应性分级标准评价术后疗效,分析HMGB1水平与疗效的关系。结果：HMGB1与乳腺癌临床分期、淋巴结是否发生转移相关（P ＜ 0.05）;HMGB1与Treg相关指标IL-10、TGF-β显著相关（r=0.734,P ＜ 0.001;r=0.686,P ＜ 0.001）;HMGB1高水平组CD4 ⁺ T细胞/CD3 ⁺ T细胞低于低水平组,CD8 ⁺ T细胞/CD3 ⁺ T细胞高于低水平组（P ＜ 0.05）;高水平HMGB1患者术后疗效差。结论：HMGB1水平与乳腺癌临床分期、淋巴结转移及细胞免疫功能相关,并有助于预测新辅助化疗的效果。     

治疗前刺激性甲状腺球蛋白阴性合并淋巴结转移的分化型甲状腺癌131I治疗后的临床转归

背景与目的：治疗前刺激性甲状腺球蛋白（preablative stimulated thyroglobulin，ps-Tg）阴性和¹³¹I显像阴性往往提示分化型甲状腺癌（differentiated thyroid cancer，DTC）患者无病生存状态，然而临床上常遇到ps-Tg阴性伴¹³¹I显像示淋巴结转移的情况。探讨甲状腺全切术后ps-Tg阴性伴¹³¹I显像示淋巴结转移患者的临床转归及其影响因素。方法：2015年5月—2018年1月在青岛大学附属医院首次行¹³¹I治疗的ps-Tg<2 ng/mL伴淋巴结转移的DTC患者130例，随访6~36个月，根据临床转归情况分为满意（excellent response，ER）、不确切（indeterminate response，IDR）、影像学反应欠佳（structural incomplete response，SIR）3组，比较3组患者的性别、年龄、原发肿瘤大小、腺外浸润、T分期、术后N分期、淋巴结转移率、复发风险分层、¹³¹I治疗剂量、ps-Tg及甲状腺球蛋白抗体（thyroglobulin antibody，TgAb）等特征的差异，对有意义的因素进一步行亚组分析。结果：3组患者在N分期（χ²=11.274，P=0.024）、ps-Tg（H=9.579，P=0.008）和TgAb（H=11.632，P=0.003）方面差异有统计学意义，在性别（χ²=0.559，P=0.756）、年龄（F=0.408，P=0.666）、原发肿瘤大小（H=1.834，P=0.400）、腺外浸润（χ²=1.345，P=0.510）、T分期（χ²=4.494，P=0.610）、淋巴结转移率（H=3.358，P=0.187）、复发风险分层（χ²=3.008，P=0.556）和首次131I治疗剂量（H=1.335，P=0.513）方面差异均无统计学意义。术后分期N₀组14例，100.00%（14/14）达到ER，N_1a组18例，其中77.78%（14/18）达ER，22.22%（4/18）达IDR，N_1b组98例，63.26%（62/98）达ER，18.37%（18/98）达IDR，18.37%（18/98）达SIR。IDR组的中位ps-Tg水平为1.85 ng/mL显著高于ER组的1.09 ng/mL（t=2.976，P=0.003）和SIR组的0.39 ng/mL（t=2.468，P=0.014），而SIR组的中位TgAb水平为713.10 U/mL，显著高于ER组的40.42 U/mL（t=3.409，P=0.001）和IDR组的39.02 U/mL（t=2.381，P=0.017）。结论：对于ps-Tg阴性、首次¹³¹I治疗后扫描发现淋巴结转移的患者，术后N分期、ps-Tg及TgAb水平可作为预测其临床转归的敏感指标。术后分期为N_1b、ps-Tg水平很低但TgAb水平明显升高者更易出现治疗反应欠佳。     

18 F-FLT PET/CT对食管鳞癌放化疗效果预测研究

背景与目的： ¹⁸ F-FLT是一种细胞增殖的示踪剂。探索 ¹⁸ F-FLT PET/CT对食管鳞癌根治性放（化）疗效果的预测价值。方法：对根治性放（化）疗的初治食管鳞癌患者,放疗前及放疗第4周行 ¹⁸ F-FLT PET/CT扫描,记录原发灶的SUV _max-T 、转移淋巴结的SUV _max-N 等参数。随访患者总生存期（overall survival,OS）及无进展生存期（progression-free survival,PFS）,分析PET/CT参数与患者预后的关系。结果：共入组39例患者,25例完成2次PET/CT扫描。 ¹⁸ F-FLT的SUV _max-T 由基线6.63下降到1.22,淋巴结SUV _max-N 由3.69下降到1.84,但下比例与生存率无关。 ¹⁸ F-FLT PET/CT的基线SUV _max-N ＜5.00的患者,其OS明显高于SUV _max-N ≥5.00的患者（P=0.002）。结论：对根治性放（化）疗食管鳞癌,治疗前的基线 ¹⁸ F-FLT PET/CT的淋巴结SUV _max-N 是一个较好的预测预后参数。放疗4周时,病灶在 ¹⁸ F-FLT PET/CT扫描中的SUV值明显下降,但不能预测预后。     

探讨Tim-3在非小细胞肺癌浸润巨噬细胞上的表达及其对预后的影响

背景与目的：T细胞免疫球蛋白和黏蛋白域分子3(T cell immunoglobulin and mucin-domaincontaining molecules 3,Tim-3)在免疫调节中起重要作用,参与多种疾病的发生、发展,且与疾病免疫逃逸和疾病临床预后明显相关。该研究旨在探讨负性共刺激分子Tim-3在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)浸润巨噬细胞中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学法检测126例NSCLC患者中Tim-3的表达水平,分析肿瘤组织浸润巨噬细胞Tim-3的表达水平与临床病理特征间的关系,并进一步分析Tim-3的表达水平对NSCLC患者预后的影响。结果：Tim-3主要分布于巨噬细胞的细胞质和细胞膜中;Tim-3在肿瘤浸润巨噬细胞中的表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期均显著相关(P=0.002、0.045和0.022);Tim-3在肿瘤浸润巨噬细胞中的表达水平可显著影响NSCLC患者的生存及预后,在Ⅲ期NSCLC患者中,Tim-3的表达越高,患者总生存期(overall survival,OS)越短(Ⅲ期：χ²=12.910,P=0.000,中位OS分别为80和32个月)。而且,Tim-3的表达水平与Ⅲ期NSCLC患者的无疾病生存期(disease free survival,DFS)也显著相关(χ²=6.135,P=0.013,中位DFS分别为41和24个月),高表达Tim-3的NSCLC患者DFS短。另外,在Ⅲ期NSCLC患者中,Tim-3在淋巴细胞中的表达水平与OS和PFS呈负相关(χ²=4.737,P=0.030,中位OS分别为80和47个月;χ²=5.882,P=0.015,中位DFS分别为41和24个月)。结论：Tim-3在肿瘤免疫中起负性调节作用从而促进免疫逃逸,对患者的生存及预后有不良影响。