PD-1/PD-L1抑制剂的困境与sPD-1/sPD-L1的标志物潜能

PD-1和PD-L1免疫检查点抑制剂是肿瘤治疗的又一个里程碑,但缺乏灵敏度和特异度高的标志物来筛选对免疫检查点抑制剂敏感的患者,导致在部分癌种和患者中有效率低;而且由于毒副作用和耐药性的存在,进一步限制了其临床应用。可溶性PD-1(sPD-1)和可溶性PD-L1(sPD-L1)是PD-1和PD-L1的溶解形式,已在多种肿瘤中被证实与肿瘤的临床病理特征、分期、疾病的严重程度、治疗敏感性及预后密切相关,可能成为免疫治疗的标志物。全文就PD-1/PD-L1抑制剂的作用机制和其在临床应用中的困境及sPD-1和sPD-L1的标志物潜能进行综述。     

人口腔细胞P450、GST基因多态性研究

目的　探讨人口腔细胞CYP 1A1与 2E1,GSTM1和GSTT1等等位基因的多态性 ,为分子流行病学研究提供一个收集基因样品的简易、可靠的方法。方法　收集人口腔洗液 4 0ml,加 10ml异丙醇固定 ,经蛋白酶K消化 ,酚、氯仿抽提 ,酒精沉淀提取口腔细胞DNA ,结合PCR -RFLP技术分析 32例正常人CYP 1A1与 2E1、GSTM 1和GSTT1基因多态性。结果　32例口腔上皮细胞DNA含量为 2 2 .36～ 330 .70 μg ,均数12 7.38μg ,中位数 113.84 μg。琼脂糖凝胶电泳显示 :所有 32例样品均具有高分子量DNA。其中 31例口腔细胞DNA能扩增 β- globin基因片段。CYP 1A1(Msp1) 3′端侧翼T→C突变型纯合子 (mm)占 2 2 .6 % ,突变型等位基因占 4 8.4 % ,CYP 2E1(Rsa1) 5′端调控区C→T突变型纯合子占 (mm) 6 .4 % ,突变型等位基因占 2 9.0 % ,GSTM1缺失占 4 5 .2 % ,GSTT1缺失 4 8.4 %。结论　从人口腔洗液上皮细胞中可提取到足够量的高分子DNA用以进行多种基因多态性分析 ,是一种可应用于大规模人群进行分子流行病学研究的可靠方法。     

人肝癌组织中S1P1和AT1R蛋白及mRNA表达的初步研究

目的:检测S1P1和AT1R蛋白及mRNA在人肝癌组织中的表达。方法:对18例人正常肝组织和23例人肝癌组织进行HE染色。采用免疫组化、Real-time PCR及Western blot方法检测人正常肝组织和人肝癌组织中S1P1及AT1R蛋白及mRNA表达。结果:S1P1及AT1R在人正常肝组织的细胞膜和细胞浆中可见弱的棕黄色颗粒沉着,肝癌组织的细胞膜和细胞浆中可见强的棕黄色颗粒沉着。与正常肝组织相比,肝癌组织中S1P1和AT1R蛋白及mRNA表达水平显著增高(P<0.05),两者呈现一致趋势。结论:S1P1及AT1R在人肝癌组织中的蛋白及mRNA表达水平呈一致升高的趋势,提示两种分子之间可能存在一定的相关性,为进一步研究其在肝癌发生发展中的关系提供了一丝新线索,也为临床上肝癌的诊断和防治提供一些新策略。     

Bmi-1基因及其编码蛋白在SKM-1细胞系中的表达

目的探讨人类Blymphoma Mo-MLVinsertion region(Bmi-1)基因及其编码蛋白在骨髓增生异常综合征(myelodysplasia syndrome,MDS)发病中的地位和作用。方法以正常骨髓和白血病细胞系K562为对照,利用半定量RT-PCR和Western Blot研究MDS细胞系SKM-1中Bmi-1基因在mRNA和蛋白水平的改变。结果SKM-1中Bmi-1在mRNA和蛋白水平均较正常组织有明显表达(P<0.05),二者表达水平与K562细胞系无显著差异(P>0.05)。结论Bmi-1基因在MDS亚型RAEB细胞系SKM-1中有明显表达,其在RAEB发病中可能具有重要意义。     

PD-1 PD-L1单抗在复发转移性鼻咽癌中的研究进展

鼻咽癌患者经放疗及同步辅助化疗后，临床转归有所改善，但肿瘤复发及远处转移仍为一项难题。近些年，免疫检查点抑制剂的发现为肿瘤的免疫治疗提供了新的选择。其中，程序性细胞死亡受体1（programmed cell death protein-1，PD-1）/程序性死亡受体配体1（programmed cell death 1-ligand，PD-L1）单抗受到广泛关注且已应用于临床治疗。本文就帕博利珠单抗、纳武利尤单抗、卡瑞利珠单抗和特瑞普利单抗等PD-1/PD-L1单抗在复发/转移性鼻咽癌中的研究进展进行综述。      

CYP1A1、GSTM1基因多态性与肺癌易感性的研究

目的:探讨CYP1A1、GSTM1基因多态性与肺癌易感性之间的相关性。方法:利用RFLP-PCR(限制性片段长度多态性-聚合酶链反应)方法检测65例原发性肺癌和60例非肿瘤患者CYP1A1、GSTM1基因,再用NcoI及HinfI两种内切酶识别CYP1A1等位基因亚型。结果:1)肺癌组与对照组CYP1A1等位基因型Ile/Ile、Ile/Val、Val/Val的频率总体分布无显著性差异;但肺癌组CYP1A1(Val/Val)基因型频率(18.5%)明显高于对照组(8.3%),两组差异有显著性(P<0.05)。2)肺癌组GSTM1(-)基因型的频率(63.1%)明显高于对照组(45.0%),P<0.05。3)两种等位基因联合分析发现,与携带CYP1A1(Ile/Ile)/GSTM1(+)基因型的个体相比:CYP1A1(Ile/Ile)/GSTM1(-)以及CYP1A1(Ile/Val+Val/Val)/GSTM1(+)基因型个体患肺癌的风险度较高,OR分别为3.82(95.0%CI,1.27～11.45)和3.5(95.0%CI,1.18～10.41);而CYP1A1(Val/Val)/GSTM1(-)基因型个体患肺癌的风险度最高,OR为10.5(95.0%CI,1.70～64.73)。4)进一步分层分析发现,CYP1A1(Ile/Val+Val/Val)等位基因型主要增加鳞癌的危险性;而GSTM1基因型组织类型无明显的相关性。5)在分析吸烟对肺癌易感性的影响时发现,CYP1A1(Ile/Val+Val/Val)及GSTM1(-)等位基因型与吸烟有协同作用,并与至发病时的累积吸烟量有关。结论:CYP1A1(Val/Val     

乳腺癌组织中乳腺癌缺失基因1的表达研究进展

DBC1基因与乳腺癌密切相关。了解DBC1的分子机制及其与疾病的关系,深入探讨DBC1与乳腺癌的关系,揭示其在乳腺癌发生发展中的作用,对于相关乳腺癌的病因预防和治疗新靶点的探索有很重要的意义。本文针对国内外关于该基因的研究进行综述,了解其分子机制及在乳腺癌中的表达。     

IGF-1对胃癌血红素氧合酶-1表达的影响

目的:研究胃癌患者血清中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和血红素氧合酶-1(HO-1)的表达相关性,并探讨IGF-1对胃癌细胞中HO-1表达的调控作用.方法:收集胃癌患者血清标本,ELISA检测血清中IGF-1和HO-1的含量;胃癌细胞株SGC7901作为体外实验载体,不同浓度IGF-1干预胃癌细胞,Real time PCR和Western blot检测胃癌细胞中HO-1 mRNA和蛋白的表达量;随后在胃癌细胞培养基中加入IGF-1阻断剂,观察应用阻断剂前后胃癌细胞HO-1表达的变化.结果:胃癌患者血清中IGF-1和HO-1的表达较正常人群明显升高,且两者的表达呈正相关性.体外培养胃癌细胞SGC7901,IGF-1可显著促进胃癌细胞HO-1的表达,且该效应呈浓度依赖性.培养基中应用IGF-1阻断剂后,胃癌细胞HO-1的表达量明显受到抑制.结论:本实验探讨胃癌中IGF-1和HO-1表达的相关性,初步阐述IGF-1对胃癌HO-1表达的正向调控作用,为HO-1参与IGF-1促进胃癌发生及发展提供了理论依据.     

乙醛脱氢酶1A1过表达对胃癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨乙醛脱氢酶1A1（ALDH1A1）过表达对胃癌细胞增殖、克隆形成和侵袭能力的影响。方法 成功构建过表达ALDH1A1的pEGFP-N1-ALDH1A1真核载体并转染至人胃癌细胞株MKN-28（实验组）,同时设空载体组（转染空载体pEGFP-N1的MKN-28细胞）和空白对照组（未行任何干预措施的MKN-28细胞）,分别于转染96 h后采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法、克隆形成实验及Transwell小室侵袭实验检测ALDH1A1过表达对MKN-28细胞增殖、克隆形成和侵袭能力的影响。结果 实验组转染96 h后的增殖抑制率为（19.26±2.01）％,均低于空载体组和空白对照组,而克隆形成率和穿膜细胞数分别为（25.44±1.74）％和（219.78±12.93）个,均高于空载体组和对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。空白对照组和空载体组以上指标的差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 在MKN-28细胞中过表达ALDH1A1,可增强肿瘤细胞的增殖、克隆形成和侵袭能力,提示ALDH1A1可能参与了胃癌的发生、发展。     

信号通路蛋白Akt1、ERK1/2与HIF-1α在肺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨信号通路蛋白Akt1、ERK1/2与HIF-1α在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法(Envision二步法),检测100例肺癌Akt1、ERK1/2和HIF-1α蛋白表达情况。结果 Akt1、ERK1/2及HIF-1α蛋白在肺癌组织中均呈不同程度表达,其阳性表达率分别为63.00%、68.00%和52.00%;Akt1与HIF-1α表达具有明显相关性(γ=0.673,P=0.000),ERK1/2与HIF-1α表达亦具有明显相关性(γ=0.568,P=0.000);Akt1、ERK1/2和HIF-1α表达均与肺癌分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.01)。结论 Akt1、ERK1/2和HIF-1α在肺癌中均呈高水平表达,Akt1、ERK1/2与HIF-1α表达具有明显相关性,三者均与肺癌分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关,三者联合检测对肺癌诊断、治疗及预后具有重要意义。     

58. Susceptibility to lung cancer is associated with genetic polymorphisms of CYP1A1、GSTM1

Objective: To investigate the association of lung cancer susceptibility with genetic Polymorphism of CYP1A1 and GSTM1. Methods: The study was conducted on 65 lung cancer cases and 60 no-cancer controls. The genetic polymorphism both CYP1A1 and GSTM1 were performed in cancer tissues of all patients and peripheral blood leukocytes of no-cancer controls. First by RFLP-PCR, then after incubating with restriction enzyme Ncol and Hinfl. Results: ①There were no significant differences in the frequency distribution of CYP1A1 polymorphisms between lung cancer patients and controls, but the frequency of CYP1A1(Val/Val) was significant higher than that controls (P<0.05). ②If OR for CYP1A1 (Ile/Ile) genotype was 1.0, the OR of CYP1A1 (Ile/VaL)、CYP1A1 (Val/Val) was 1.68 (95%CI, 0.79～3.59) and 3.2 (95%CI, 1.06～10.26), respectively. ③The significant difference were observed that GSTM1(-) became markedly expressed (63.1%, 41/65) in elung cancer patients than in the corresponding controls (45%, 27/60) (P<0.05), OR was 2.09 (95%CI, 1.02～4.26); ④When analysis combined CYP1A1 and GSTM1 genotype, we found that individual who take along CYP1A1 (Ile/Ile)/GSTM1 (-) or CYP1A1 (Ile/Val+Val/Val)/GSTM1 (+) genotype had higher odds ratio than CYP1A1 (Ile/Ile)/GSTM1 (+) genotype, the OR was 3.82 (95%CI, 1.27～11.45) and 3.5 (95%CI 1.18～10.41), respectively, but the CYP1A1 (Val/Val) / GSTM1 (-) genotype was the hightest odds ratio, the OR was 10.5 (95%CI, 1.70～64.73). ⑤We observed that the individual who carry CYP1A1(Val/Val) genotype can increased risk of squamous cell carcinoma of lung (P<0.05), OR was 2.75 (95%CI, 1.24～6.17), there was no significant associated of pathologic with GSTM1 genotype. ⑥Stratified analysis suggested an interaction between cigarettes smoking and CYP1A1 (Ile/Val+Val/Val)、GSTM1 (-) genotype. Conclusion: ①The individuals who carried genotype of CYP1A1 (Val/Val) and GSTM1 (-) were susceptible to lung cancer. ②the individuals who carried CYP1A1 (Ile/Ile) /GSTM1 (-) or CYP1A1 (Ile/Val+Val/Val) /GSTM1 (+) genotype with higher risk of developing lung cancer than that CYP1A1 (Ile/Ile)/GSTM1 (+) genotype. ③There were interaction between smoking and CYP1A1 (Ile/Val+Val/Val)、GSTM1 (-)     

晚期非小细胞肺癌PD-1/PD-L1单抗治疗临床转化现状

随着对肿瘤免疫逃逸机制研究的不断深入,通过阻断程序性死亡因子1（programmed cell death 1,PD-1）及其配体l （PD-1 ligand,PD-L1）构成的 PD-1/PD-L1 通路,证实了 PD-1/PD-L1 抑制剂在晚期非小细胞肺癌（non small cell lung cancer, NSCLC）患者生存的相关性,以及PD-L1作为疗效预测标志物的价值。在NSCLC的局部晚期维持治疗、二线治疗及部分一线治 疗的临床试验中,PD-1/PD-L1抑制剂治疗均获得了较好的治疗效果;PD-1/PD-L1抑制剂联合放化疗、联合细胞因子与其他免疫 抑制剂及联合细胞外调节蛋白激酶(extracel lular regulated protein kinase,ERK)通路靶向治疗也有一定获益。本文就PD-1/PD-L1 抑制剂用于NSCLC治疗现状及其影响因素作一综述。     

UGT1A1、SLCO1B1基因多态性与伊立替康化疗不良反应的研究进展

摘 要：伊立替康(Irinotecan，CPT-11)是抗瘤谱广、临床应用广泛的化疗药物之一，但可能发生的不良反应，尤其是严重的剂量限制性毒性(迟发性腹泻和骨髓抑制)常常影响其临床应用。近年来，由基因多态性指导的临床个体化用药成为热点，有研究指出UGT1A1和SLCO1B1基因多态性参与了CPT-11代谢及转运。全文就UGT1A1和SLCO1B1基因多态性与CPT-11化疗不良反应的研究进展作一综述。     

PD-1/PD-L1通路抑制剂在难治性骨肉瘤治疗中作用的研究进展

骨肉瘤是一种好发于青少年、高度恶性、侵袭性强、易转移的成骨恶性肿瘤。新辅助化疗结合外科治疗使骨肉瘤患者 5年生存期超过50%,但针对合并复发和转移的骨肉瘤患者治疗效果仍不理想。免疫治疗被证明是一种行之有效的治疗人类恶 性肿瘤的策略。逃避免疫监测被认为是肿瘤恶性进展的主要因素,免疫检查点在调控抗肿瘤免疫效果中发挥重要作用,因此针 对这些免疫检查点的阻断剂或抑制剂已成为肿瘤患者有效的治疗手段。本文就近年来PD-1/PD-L1通路抑制剂在难治性骨肉瘤 治疗中的作用及机制、临床应用、疗效与安全性等的研究进展进行综述。     

LASS2/TMSG-1、TAK1和TAB1在结肠癌中的表达及临床意义

摘 要：［目的］ 探讨肿瘤转移抑制基因-1（LASS2/TMSG-1）、转化生长因子激活激酶1（TAK1）和转化生长因子β活化激酶结合蛋白1（TAB1）在结肠癌组织中的表达及其临床意义。［方法］ 选取2017年1月至2018年2月在我院治疗的原发性结肠癌患者68例，分别取其结肠癌组织及癌旁正常组织，采用实时聚合酶联法（real-time polymerase chain reaction，RT-PCR）测定组织中的LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1表达水平，分析结肠癌组织中LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1的表达水平以及与患者临床病理特征的相关性，采用COX回归分析分析LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1表达水平与患者预后的相关性。［结果］ 结肠癌患者结肠癌组织TAK1（0.76±0.15ng/ml）、TAB1（1.46±0.20ng/ml）的表达水平与癌旁正常组织（0.57±0.15ng/ml，1.21±0.19ng/ml）相比显著升高；LASS2/TMSG-1的表达水平（1.52±0.36ng/ml）与癌旁正常组织（2.36±0.43ng/ml）相比显著下降（P<0.05）。LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期显著相关（P<0.05）。术后12个月随访时共有8例（11.76%）患者出现肿瘤复发/转移。出现肿瘤复发/转移的患者其TAK1、TAB1水平（0.96±0.15ng/ml，1.68±0.19ng/ml）与未复发/转移（0.52±0.13ng/ml，1.26±0.20ng/ml）患者相比显著升高；LASS2/TMSG-1显著下降（1.74±0.38ng/ml vs 3.02±0.49ng/ml）（P<0.05）。COX回归分析结果显示，肿瘤分化程度、肿瘤TNM分期、LASS2/TMSG-1、TAK1及TAB1表达水平是影响结肠癌患者临床预后的独立因素。LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1表达水平之间无显著相关性（P>0.05）；患者预后与LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1表达水平具有显著相关性（P<0.05）。［结论］ LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1的表达水平可能与结肠癌的发生及发展具有相关性，且与患者临床预后相关。     

PD-1/PD-L1抑制剂在恶性黑色素瘤（新）辅助治疗中的研究进展

恶性黑色素瘤是一种具有较高复发率及死亡率的实体肿瘤。目前针对Ⅱ~Ⅲ期黑色素瘤的治疗仍是以外科手术为主，由于缺乏有效的（新）辅助治疗手段，高危黑色素瘤患者的5年生存率仅有30%~70%。程序性死亡因子1（PD-1）和程序性死亡因子配体1（PD-L1）是重要的免疫检验点共抑制分子，通过抑制T细胞的激活和增殖通路参与了肿瘤的免疫逃逸。近些年来包括Nivolumab和Pembrolizumab在内的多种PD-1/PD-L1抑制剂研发获批上市，并在晚期黑色素瘤的治疗中表现出显著的疗效。因此多项针对PD-1/PD-L1抑制剂在高危黑色素瘤患者（新）辅助治疗的临床试验正积极开展。本文主要对近年来相关研究进行了回顾与总结，探讨PD-1/PD-L1抑制剂在黑色素瘤（新）辅助治疗应用的前景和可能发展的方向。     

lnc-KCNQ1OT1在胃癌组织和细胞中的表达及其临床意义

目的:探讨长链非编码RNA-KCNQ1OT1(lnc-KCNQ1OT1)在胃癌组织和细胞中的表达及临床意义。方法:收集 2010年1月1日至2011年12月31日期间在哈尔滨医科大学附属肿瘤医院行手术治疗的163 例胃癌患者的临床资料,选取组织和细胞通过RT-PCR法检测lnc-KCNQ1OT1的表达情况,根据其表达情况及临床病例数据分析lnc-KCNQ1OT1在胃癌组织和细胞中的临床意义。结果:与癌旁组织比较,lnc-KCNQ1OT1在胃癌组织中的表达水平明显增高（P<0.05）。在胃癌细胞株HGC-27、MGC-803中,lnc-KCNQ1OT1表达水平较胃永生化上皮细胞株GES-1明显升高（P<0.05）。单因素分析显示lnc-KCNQ1OT1的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小无关（P>0.05）,与淋巴结转移（P<0.001）明显相关。K-M生存分析显示胃癌患者中lnc-KCNQ1OT1高表达者预后不良（P<0.05）。结论:在胃癌组织和细胞中lnc-KCNQ1OT1的表达量高,其高表达与胃癌患者淋巴结转移相关,并可导致胃癌患者预后不良。lnc-KCNQ1OT1可作为潜在的胃癌预后预测的分子标志物。     

肝细胞肝癌内NAP1L1的表达及其临床意义

目的 探讨肝癌组织中核小体组装蛋白1-like-1(NAP1 L1)的表达情况.方法 应用免疫组化法检测173例肝癌及癌旁肝组织中NAP1 L1的表达情况.结果 NAP1L1蛋白在癌旁肝组织中不表达,而在肝癌组织中高表达且表达阳性率为28.32％(49/173),且NAP1 L1表达上调与肝硬化、AFP水平显著相关.结论 NAP1 L1在肝癌组织中高表达提示着患者的不良预后,表明NAP1L1在肝癌的发生、发展中可能起着一定的作用.     

黏蛋白1多肽通过small-MUC1蛋白抑制肿瘤细胞生长

目的：探讨黏蛋白1（mucin 1,MUC1）串联重复序列多肽(简称黏蛋白1多肽,MUC1多肽)对肿瘤细胞生长抑制的作用机制。方法：MUC1多肽与多种肿瘤细胞Jurkat、Raji、U937、MCF7、SMMC7721及活化的T细胞、小鼠巨噬细胞RAW264.7共同培养,观察MUC1多肽对上述细胞生长的影响;建立BABL/c小鼠Jurkat细胞皮下移植瘤动物模型,应用MUC1多肽进行治疗;采用GST免疫沉降实验鉴定与MUC1多肽结合的肿瘤细胞表面蛋白。结果：MUC1多肽对Jurkat、Raji、U937、MCF7和SMMC7721细胞的生长均有抑制作用,对活化的T细胞和小鼠RAW264.7细胞生长无明显抑制作用。MUC1多肽对BABL/c小鼠皮下Jurkat细胞移植瘤的生长均有明显抑制作用（P<0.05）。GST免疫沉降实验显示,Jurkat 和MCF7细胞裂解上清中与MUC1多肽结合的蛋白可与两种抗MUC1串联重复序列抗体（GP1.4和HMPV）及抗胞内段抗体（Ab5）发生反应,相对分子质量大约115 000,提示可能是MUC1新的同种型,命名为small MUC1（sMUC1）。结论：MUC1多肽可通过与肿瘤细胞表面small MUC1蛋白的相互作用向细胞传导生长抑制信号