miR-338基因簇与食管癌发病风险的病例对照研究

目的: 探讨miR-338基因簇在食管癌组织中的表达模式及其与食管癌发病风险的关系。方法: 选取86例经病理确诊的食管癌患者,分别提取食管癌和癌旁组织总RNA,采用实时荧光定量PCR法检测hsa-miR-338-3p、hsa-miR-338-5p与hsa-miR-657的表达,应用配对样本t检验分析癌和癌旁组织中miRNA表达差异,Pearson相关分析检验基因簇各miRNA表达的相关性,logistic回归分析miRNA异常表达对食管癌发病风险的影响。结果: hsa-miR-338-3p与hsa-miR-338-5p在食管癌组织中的表达均较癌旁组织降低(P均<0.05),hsa-miR-657在食管癌和癌旁组织中表达的差异无统计学意义(P>0.05),hsa-miR-338-3p与hsa-miR-338-5p表达显著相关(r=0.754,P<0.05),hsa-miR-338-5p的低表达增加了食管癌的发病风险(OR=1.264,P<0.05),可能是食管癌的危险因素。结论: miR-338基因簇可能抑制了食管癌的发生,hsa-miR-338-5p可能成为食管癌诊断的潜在标志物。     

miR-140-5p靶向HDAC7抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制探讨

目的:探讨miR-140-5p靶向组蛋白去乙酰化酶7(histone deacetylase 7,HDAC7)调控非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法:采用qRT-PCR检测人NSCLC组织及癌旁组织中miR-140-5p的表达水平。用miR-140-5p mimic（模拟物）及miR-140-5p NC（阴性对照）转染A549细胞,CCK8法及克隆形成实验检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-5p与HDAC7的靶向关系,Western blot检测各组细胞HDAC7及PI3K、p-PI3K、AKT、和p-AKT表达水平。结果:与癌旁组织相比,miR-140-5p在NSCLC组织中的表达水平明显减低,差异有统计学意义（P＜0.01）。与miR-140-5p NC组相比,过表达miR-140-5p后A549细胞在48和72 h的增殖能力明显降低（P＜0.05）;且细胞克隆形成、细胞迁移和侵袭能力均降低（均P＜0.05）,PI3K/AKT信号通路中关键分子p-PI3K和p-AKT蛋白水平明显降低（均P＜0.05)。生物信息学预测HDAC7可能是miR-140-5p的一个靶基因,且双荧光素酶报告结果证实miR-140-5p直接靶向调节HDAC7表达。结论:miR-140-5p通过靶向HDAC7表达进而抑制NSCLC A549细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与通过抑制PI3K/AKT信号通路的激活有关。     

miR-379-5p靶向CTSL调控肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的分子机制

目的:探讨微小RNA-379-5p（miR-379-5p）通过靶向组织蛋白酶L(CTSL)调控肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的作用机制。方法:选择本院收治的肺癌患者57例,取患者肺癌组织与癌旁组织,应用qRT-PCR法检测miR-379-5p与CTSL mRNA的表达水平;免疫组化法检测CTSL蛋白的表达情况。miR-con（miR-con组）、miR-379-5p mimics（miR-379-5p组）分别转染肺癌NC-H446细胞,miR-379-5p mimics与pcDNA（miR-379-5p+pcDNA组）、miR-379-5p mimics与pcDNA-CTSL（miR-379-5p+pcDNA-CTSL组）分别共转染肺癌NC-H446细胞,MTT检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;Transwell迁移与侵袭实验检测细胞迁移与侵袭能力。双荧光素酶报告实验验证miR-379-5p与CTSL之间的靶向关系。Western blot检测CTSL、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9、Cleaved caspase-3蛋白的表达。结果:肺癌组织中miR-379-5p的表达水平显著低于癌旁组织（P＜0.05）,而CTSL mRNA及蛋白阳性率均显著高于癌旁组织（P＜0.05）;与miR-con组比较,miR-379-5p组细胞增殖、迁移、侵袭能力显著降低（P＜0.05）,细胞凋亡率显著增加（P＜0.05）,明显抑制Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达（P＜0.05）,而促进Cleaved caspase-3蛋白表达（P＜0.05）;双荧光素酶报告实验证明miR-379-5p可负向调控CTSL表达与活性;CTSL过表达可逆转miR-379-5p过表达对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的调控作用。结论:miR-379-5p过表达通过靶向CTSL而减弱肺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,诱导细胞凋亡。     

miR-515-5p通过靶向HDAC2影响食管癌发生发展的分子机制

目的：探讨miR-515-5p对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法：选取2020年6月至2020年12月在河北医科大学第四医院手术切除的60例食管癌患者的癌组织标本和20例健康成人的食管上皮组织标本,以及食管癌细胞TE1、Eca109、KYSE30和KYSE170,用 qPCR 法检测食管癌组织和细胞中 miR-515-5p 的表达水平。在Eca109细胞中转染miR-515-5p模拟物以及其阴性对照物、在TE1细胞中转染miR-515-5p抑制剂以及其阴性对照物,qPCR法检测转染效率,用CCK-8法、Transwell实验分别检测转染细胞的增殖、迁移及侵袭能力。采用生物信息学方法分析预测miR-515-5p的下游靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证组蛋白去乙酰化酶2（histone deacetylase 2,HDAC2）为miR-515-5p的靶基因。应用GEPIA和TCGA数据集分析HDAC2在食管癌组织中的表达及其与患者临床特征的关系。结果：miR-515-5p在食管癌组织及细胞中表达降低（均P<0.01）。过表达miR-515-5p抑制食管癌Eca109细胞的增殖、迁移和侵袭能力（P<0.05或P<0.01）,而敲低miR-515-5p 表达则可增强食管癌 TE1 细胞的增殖、侵袭和迁移能力（均P<0.05）。双荧光素酶报告基因分析证明,HDAC2是miR-515-5p的靶基因。qPCR和WB实验结果显示,miR-515-5p对HDAC2 mRNA和蛋白表达具有负调控作用。挽救实验证实miR-515-5P通过靶向HDAC2抑制食管癌Eca109细胞的增殖、迁移和侵袭能力（P<0.05或P<0.01）。结论：miR-515-5p通过靶向HDAC2影响食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。     

miR-627-3p在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其对癌细胞恶性生物学 行为的影响

目的：探讨 miR-627-3p 在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）组织中的表达及其对 ESCC细胞生物学行为的影响。方法：收集2015年1月至2015年10月河北医科大学第四医院胸外科手术切除的ESCC组织86例及对应的癌旁组织标本20例。通过qPCR法检测miR-627-3p在86例ESCC组织及癌旁组织中的表达,分析其表达与ESCC患者临床病理学指标及预后的关系;利用Kaplan-Meier Plotter在线数据库进一步分析数据库中hsa-miR-627的表达与ESCC患者预后的关系;通过qPCR法检测miR-627-3p在4株ESCC细胞系中的表达,选取表达水平最低的食管癌细胞转染miR-627-3p mimic,选取表达水平最高的ESCC细胞转染miR-627-3p inhibitor,采用CCK-8法检测细胞的增殖,采用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;采用 KEGG分析探讨 miR-627-3p可能介导的信号转导通路,并采用 qPCR法验证 miR-627-3p对信号通路中关键基因表达的影响。结果：miR-627-3p在 ESCC组织中的表达明显低于在癌旁组织中的表达,miR-627-3p的表达与 ESCC患者淋巴结转移和临床分期相关（均 P<0.05）;miR-627-3p高表达的 ESCC 患者的 5年生存率明显高于 miR-627-3p低表达的食管癌患者（P<0.05）。ESCC细胞系 KYSE170中 miR-627-3p表达最低,KYSE30中 miR-627-3p表达最高;在 KYSE170细胞中转染 miR-627-3p mimic后,细胞的增殖能力无明显变化（P>0.05）,但细胞的迁移（P<0.05）和侵袭能力（P<0.05）显著降低;在 KYSE30 细胞中转染 miR-627-3p inhibitor 后,细胞的增殖能力无明显变化（P>0.05）,但细胞的迁移（P<0.05）和侵袭能力（P<0.05）显著增高。KEGG 分析结果显示,miR-627-3p介导了多条与肿瘤相关的信号转导通路。结论：miR-627-3p在ESCC组织中的表达明显低于在癌旁组织中的表达,其低表达与ESCC患者的不良预后相关,miR-627-3p抑制ESCC细胞的迁移和侵袭,可能是通过干扰多条与肿瘤相关的信号通路发挥生物学功能。     

lncRNA BLACAT1靶向结合miR-29a-3p调控甲状腺癌细胞TPC-1的生物学行为

目的:探讨长链非编码RNA BLACAT1(lncRNA BLACAT1)调控microRNA-29a-3p（miR-29a-3p）对甲状腺癌细胞恶性生物学行为的作用及其可能机制。方法:收集2018年06月至2019年03月在我院行甲状腺癌切除术的31例患者的肿瘤组织和相应的癌旁组织。采用qRT-PCR检测lncRNA BLACAT1、miR-29a-3p在甲状腺癌组织、癌旁组织、5种甲状腺癌细胞系（SW579、 PDTC-1、 HMGA1、 TPC-1、 KAT-5）及正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1中的表达水平;调控TPC-1甲状腺癌细胞系中lncRNA BLACAT1、miR-29a-3p的表达,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力。用生物信息分析和双荧光素酶报告基因法预测和验证lncRNA BLACAT1与miR-29a-3p的靶向关系。结果:与癌旁组织和正常甲状腺细胞相比,甲状腺癌组织和细胞系中lncRNA BLACAT1的表达水平显著上调,miR-29a-3p的表达水平显著下调（P＜0.05）;过表达lncRNA BLACAT1促进TPC-1细胞的增殖、迁移和侵袭;在甲状腺癌组织中lncRNA BLACAT1的表达水平与miR-29a-3p的表达水平呈负相关（r2 =0.492,P＜0.001）;双荧光素酶分析证实lncRNA BLACAT1能特异性结合miR-29a-3p,并能降低其表达;过表达miR-29a-3p抑制TPC-1细胞的增殖、迁移和侵袭,且miR-29a-3p可以抑制由lncRNA BLACAT1过表达引起的TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭能力的增强。结论:lncRNA BLACAT1通过靶向调控miR-29a-3p表达影响甲状腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,从而促进甲状腺癌的发展。     

lncRNA XIST调控miR-486-5p影响食管癌细胞增殖的实验研究

目的:探讨lncRNA XIST在食管癌组织中的表达情况以及其对食管癌细胞增殖的影响。方法:实时定量PCR检测23对食管癌及癌旁组织中lncRNA XIST的表达水平。采用lncRNA XIST siRNA转染lncRNA XIST表达最高的两株食管癌细胞，实时定量PCR检测转染效率；CCK-8检测细胞增殖情况；双荧光素酶报告基因检测lncRNA XIST与miR-486-5p的结合情况；实时定量PCR进一步检测miR-486-5p的表达。结果:实时定量PCR结果显示与癌旁组织相比食管癌组织中lncRNA XIST的表达水平显著升高（P＜0.01）。此外，在三株食管癌细胞中lncRNA XIST在Eca-109和TE-1细胞中表达最高。在Eca-109和TE-1细胞中转染lncRNA XIST siRNA后lncRNA XIST的表达水平分别降低了（75.50±0.89）%和（64.74±13.42）%。下调lncRNA XIST显著抑制食管癌细胞的增殖。双荧光素酶报告基因检测结果显示wt-XIST和miR-486-5p mimic共转染的细胞荧光素酶活性显著降低（P＜0.01）。此外，下调lncRNA XIST后两株细胞中miR-486-5p的表达水平均显著升高（P＜0.01）。结论:lncRNA XIST与食管癌的恶性进展密切相关，lncRNA XIST有望成为食管癌治疗的新靶点。     

miR-144-3p 通过靶向FZD4 阻断Wnt/β-catenin 通路抑制肝癌Huh-7 细胞的恶性生物学行为

[摘要] 目的: 探讨miR-144-3p 通过阻断卷曲受体4（FZD4）/Wnt/β-catenin 信号通路对肝癌Huh-7 细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制。方法：收集2012 年3 月至2017 年7 月在柳州市工人医院手术切除的18 例肝癌患者的癌组织及相应的癌旁组织标本,以及肝癌细胞系Huh-7、SMMC7721 和MHCC97 和人正常肝上皮细胞株THLE-3,用qPCR 检测肝癌组织及细胞系中miR-144-3p 的表达水平。将miR-144-3p mimics/inhibitor 和FZD4 敲降载体转染至Huh-7 细胞中,用CCK-8、Transwell、划痕愈合实验和Annexin V-FITC/PI 染色流式细胞术检测Huh-7 细胞的增殖、迁移和凋亡水平。用双荧光素酶报告基因验证miR-144-3p 和FZD4 的靶向关系。结果：在肝癌组织和细胞系中miR-144-3p 均呈低表达（P<0.05 或P<0.01）。过表达miR-144-3p 可显著抑制Huh-7 细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡（均P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验证明miR-144-3p 靶向作用FZD4 并下调其表达水平。体外实验进一步证实,过表达miR-144-3p 靶向FZD4 并阻断Wnt/β-catenin 通路,进而抑制Huh-7 细胞增殖、迁移和促进细胞凋亡（均P<0.01）。结论：miR-144-3p 通过阻断FZD4/Wnt/β-catenin 通路抑制肝癌Huh-7 细胞的恶性生物学行为,为肝癌诊断或治疗提供了潜在分子靶点。     

微小RNA-380-5p 在宫颈癌组织及细胞中的表达及其通过下调RHOA抑制C33A细胞的增殖和迁移

[摘要] 目的：检测微小RNA-380-5p（miR-380-5p）在人宫颈癌组织和细胞系中的表达,探讨其抑制宫颈癌C33A细胞增殖和迁移的作用机制。方法：收集2016 年12 月至2017 年7 月同济医学院附属武汉中心医院妇产科手术切除的16 例宫颈癌患者癌组织和对应的癌旁组织标本,以及宫颈癌细胞系HCC94、C33A、Hela、SiHa 和人子宫颈上皮永生化细胞H8,用qPCR 法检测miR-380-5p 在癌及癌旁组织、4 种宫颈癌细胞及H8 细胞中的表达。用脂质体转染技术将miR-380-5p mimic（实验组）和miR-NC（阴性对照组）瞬时转染C33A细胞,用qPCR法检测转染后细胞中miR-380-5p 表达,CCK-8 法和Transwell 小室法分别检测转染细胞的增殖和迁移能力。用生物信息学软件TargetScan 预测miR-380-5p 的下游基因,用双荧光素酶报告基因实验验证miR-380-5p 对下游基因Ras 同源基因家族成员A（Ras homolog gene family member A,RHOA）的结合作用,qPCR 法和Western blotting 检测miR-380-5p 下游基因RHOA的表达。结果：宫颈癌组织中miR-380-5p 表达水平明显低于癌旁组织（P<0.01）,宫颈癌细胞系中miR-380-5p 表达水平均明显低于H8 细胞（P<0.05）,以C33A细胞中的表达水平最低（P<0.01）。与阴性对照组比较,转染miR-380-5pmimic 能显著抑制C33A细胞的增殖（P<0.05）和迁移能力（P<0.01）,且下调RHOA、ROCK1、ROCK2、CDK2和N-cadherin蛋白的表达（均P<0.01）。生物信息学软件预测RHOA可能为miR-380-5p 的调控基因,双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-380-5p 可与RHOA 3’-非编码区（UTR）特异性结合,miR-380-5p 可明显下调RHOA基因的表达（P<0.01）。结论：miR-380-5p 在宫颈癌组织及细胞系中低表达,过表达miR-380-5p 可能通过下调RHOA及其下游蛋白的表达抑制宫颈癌C33A细胞的增殖和迁移。     

miR-17-5p在胃肠道间质瘤组织中的表达及其对GIST882细胞增殖与凋 亡的影响

目的：探讨miR-17-5p在胃肠道间质瘤（gastrointestinal stromal tumor,GIST）组织中的表达及其对GIST882细胞增殖 与凋亡的影响。方法：选取2019年5月至2020年5月广西医科大学第四附属医院胃肠外科手术切除的20例GIST患者的瘤组织 及相应的瘤旁组织标本,以及GIST882细胞和人正常肠道上皮细胞HIEC为研究对象。荧光PCR-毛细管电泳测序法检测GIST 标本中KIT基因突变情况。分别将 miR-17-5p mimic 和 pc-KIT 转染至 GIST882 细胞中。双荧光素酶报告基因实验验证 miR-17-5p与KIT的靶向关系。qPCR和WB法检测GIST组织和细胞中miR-17-5p、KIT mRNA及蛋白的表达,CCK-8法、流式细 胞术检测GIST882细胞的增殖、凋亡及细胞周期进程。结果：20例GIST组织中有15例患者发生KIT基因突变。与瘤旁组织比 较,GIST组织中miR-17-5p表达水平显著降低、KIT mRNA表达水平显著升高（均P<0.01);与HIEC细胞比较,GIST882细胞中 miR-17-5p表达显著降低、KIT mRNA和蛋白表达显著升高（均P<0.01)。过表达miR-17-5p可显著降低GIST882细胞的增殖能力(P<0.01) 、提高细胞凋亡率(P<0.05) 、sub-G1期和S期细胞比例显著增加（均P<0.05) 、而G0/G1期的细胞比例显著减少(P<0.05),同时KIT 蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实KIT是miR-17-5p的下游靶基因。同时过表达 miR-17-5p 和 KIT 对 GIST882 细胞的增殖、细胞周期进程和凋亡水平未产生明显影响。结论：过表达 miR-17-5p 可显著抑制 GIST882细胞的增殖并诱导细胞凋亡,同时下调KIT蛋白的表达,miR-17-5p可能是治疗GIST的潜在靶标。     

下调ERp57抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:分析内质网驻留蛋白57（ERp57）在食管鳞癌组织中的表达情况以及下调ERp57对食管癌细胞TE-1生物学功能的影响。方法:GEPIA数据库分析食管癌中ERp57的表达;通过荧光定量PCR和Western blot检测临床食管癌标本及细胞株中ERp57 的表达;利用shRNA沉默TE-1细胞内ERp57后,通过CCK8检测细胞增殖、TUNEL检测细胞凋亡、划痕检测细胞迁移、Transwell检测细胞侵袭。结果:食管癌组织中ERp57 的mRNA和蛋白的表达水平均高于癌旁组织（P＜0.05）,食管癌细胞中ERp57的mRNA及蛋白的表达高于食管上皮细胞（P＜0.05）。沉默ERp57使TE-1细胞的增殖能力减弱、凋亡比例增加,并减弱了TE-1细胞的迁移及侵袭能力。结论:沉默ERp57表达能够抑制食管癌细胞TE-1的增殖、迁移、侵袭,可为食管癌研究提供理论依据。     

miR-769对食管鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移能力及紫杉醇耐药性的影响

目的:探讨hsa-miR-769（miR-769）在食管鳞癌组织中的表达及其对癌细胞增殖、侵袭和迁移能力及紫杉醇耐药性的影响。方法:通过生物信息学技术挖掘,我们对肿瘤相关的hsa-miR-769（miR-769）的表达进行了深入研究,进而进行临床样本的验证,并通过细胞生物学和分子生物学研究对其作用机制进行了进一步探索。结果:公共数据库的挖掘结果显示miR-769在食管癌组织中表达异常升高,且在临床样本中我们观察到了相同的升高异常,通过细胞实验和分子生物学实验,我们发现miR-769调控肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力,同时引起肿瘤细胞的上皮间质转化过程发生改变,后续的研究中,我们成功构建了紫杉醇耐药的食管鳞癌细胞系,并发现miR-769在食管鳞癌对于紫杉醇的获得性耐药中起到了重要作用。结论:miR-769影响食管鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力及对紫杉醇的耐药性,本研究旨在探索食管鳞癌发生发展的机制,并为食管鳞癌靶向治疗提供了新的潜在靶点。     

lncRNA RHPN1-AS1靶向miR-485-5p调控骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及其分子机制

目的:探讨lncRNA RHPN1反义RNA1（RHPN1-AS1）靶向miR-485-5p对骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响和机制。方法:实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测20例骨肉瘤组织与其对应的癌旁组织、人正常成骨细胞hFOB1.19以及3种骨肉瘤细胞（U-2OS、SAOS-2、HOS）中RHPN1-AS1和miR-485-5p的表达水平。利用脂质体转染法将RHPN1-AS1小干扰RNA（si-RHPN1-AS1）、小干扰RNA阴性对照（si-NC）、miR-485-5p模拟物（miR-485-5p mimics）、miRNA阴性对照（miR-NC）分别转染U-2OS细胞,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印记（Western blot）检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、p21、p27、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和基质金属蛋白酶14（MMP-14）蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证RHPN1-AS1和miR-485-5p的靶向调控关系。结果:与癌旁组织比较,骨肉瘤组织中RHPN1-AS1的表达水平显著升高,miR-485-5p的表达水平显著降低（P＜0.05）;与hFOB1.19细胞比较,3种骨肉瘤细胞中RHPN1-AS1的表达水平显著升高,miR-485-5p的表达水平显著降低（P＜0.05）。与si-NC组比较,si-RHPN1-AS1组U-2OS细胞的活力显著降低,迁移和侵袭能力显著降低,细胞凋亡率显著升高,Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9和MMP-14蛋白的表达水平显著降低,p21、p27和Bax蛋白的表达水平显著升高（P＜0.05）;与miR-NC组比较,miR-485-5p组U-2OS细胞的活力显著降低,迁移和侵袭能力显著降低,细胞凋亡率显著升高,Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平显著降低,p21和Bax蛋白的表达水平显著升高（P＜0.05）。RHPN1-AS1靶向负性调控miR-485-5p表达。干扰miR-485-5p表达逆转了抑制lncRNA RHPN1-AS1表达对骨肉瘤U-2OS细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。结论:抑制RHPN1-AS1通过上调miR-485-5p抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡。     

Expression of microRNA-1299 in esophageal carcinoma and its effects on migration and invasion of esophageal cancer cells北大核心CSCD

Objective: To investigate the expression of microRNA-12 99 (miR-1299) in esophageal carcinoma and its effects on the migration and invasion of esophageal cancer TE1 cells. Methods: The pathological tissue specimens and their matched paracancerous tissues of 58 patients with esophageal cancer were selected in the Fourth Hospital of Hebei Medical University from June 2017 to June 2018. The expression level of miR-1299 in cancer and corresponding adjacent tissues was detected by real-time fluorescent quantitative PCR. The relationship between miR-1299 expression and clinicopathological features was analyzed. After miR-1299-mimics were transfected into esophageal cancer TE1 cells for the overexpression of miR-1299, the proliferation of TE1 cells was detected by CCK-8 assay, and the migration and invasion abilities were detected by Transwell migration and invasion assays, respectively. Then the expressions of matrix metalloproteinase 11 (MMP11) and MMP16 mRNAs and proteins in miR-1299 over-expressed TE1 cells were detected by realtime fluorescent quantitative PCR and Western blotting, respectively. Results: The expression of miR-1299 in esophageal cancer tissues was significantly lower than that in the adjacent tissues (P< 0.001). The expression level of miR-1299 was associated with the clinical stage of esophageal cancer patients (P < 0.05). After the transfection of miR-1299-mimics into TE1 cells, the expression level of miR-1299 was significantly increased (P< 0.01). After the over-expression of miR-1299 in TE1 cells, the proliferation of TE1 cells did not change significantly (P > 0.05), while the migration (P < 0.001) and invasion (P < 0.01) abilities decreased significantly, and the expressions of MMP11 and MMP16 mRNAs and proteins were obviously decreased (all P< 0.01). Conclusion: The expression of miR-1299 is down-regulated in esophageal cancer tissues and may inhibit the migration and invasion of esophageal cancer cells. © 2019 by TUMOR. All rights reserved.     

LncRNA PVT1抑制miR-497-5p表达调控子宫内膜癌细胞增殖和迁移侵袭的分子机制研究

目的:研究长链非编码RNA PVT1和miR-497-5p在子宫内膜癌组织中的表达以及其对癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，并探讨其机制。方法:运用实时荧光定量法测定子宫内膜癌组织、癌旁正常组织及子宫内膜癌细胞HEC-1-B中PVT1和miR-497-5p的表达。用脂质体法将siRNA-PVT1和miR-497-5p mimic转染至子宫内膜癌细胞HEC-1-B；MTT法、Transwell法检测HEC-1-B细胞的增殖、迁移和侵袭。Targetscan在线分析网站预测和双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA PVT1和miR-497-5p的靶向关系。将siRNA-PVT1和miR-497-5p inhibitor共转染至HEC-1-B细胞，MTT法、Transwell法检测HEC-1-B细胞的增殖、迁移和侵袭。结果:与癌旁正常组织相比，子宫内膜癌组织中PVT1表达显著上调，miR-497-5p表达显著下调（P<0.05）。沉默PVT1、过表达miR-497-5p均可抑制HEC-1-B细胞的增殖、迁移和侵袭（P<0.05）。PVT1靶向miR-497-5p。抑制miR-497-5p的表达可逆转沉默PVT1对HEC-1-B细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:沉默PVT1可抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭，其机制可能与PVT1靶向miR-497-5p有关，将可为子宫内膜癌的靶向治疗提供新靶点。     

lncRNA SNHG14通过靶向miR-433-3p调控甲状腺癌SW579细胞的恶 性生物学行为

目的：探讨 lncRNA SNHG14 对甲状腺癌 SW579细胞恶性生物学行为的影响及其分子机制。方法：收集2017年10月至2018年12月青海省人民医院收治的20例甲状腺癌患者的癌组织及癌旁组织标本,用qPCR检测甲状腺癌组织和对应癌旁组织中SNHG14与miR-433-3p 的表达;根据转染物的不同,将 SW579 细胞分为 si-NC 组（转染si-NC）、si-SNHG14组（转染si-SNHG14）、miR-NC组（转染 miR-NC）、miR-433-3p mimic 组（转染 miR-433-3p mimic）、si-SNHG14+anti-miR-NC 组（共转染si-SNHG14与anti-miR-NC）和si-SNHG14+anti-miR-433-3p组（共转染si-SNHG14与anti-miR-433-3p）。MTT法、FCM、Transwell 实验分别检测转染后SW579细胞的增殖能力、细胞周期、细胞凋亡率、迁移及侵袭能力的改变;利用双荧光素酶报告基因实验检测SNHG14是否可结合miR-433-3p,qPCR法检测SNHG14与miR-433-3p之间的相互调控关系。结果：SNHG14在甲状腺癌组织中的表达高于癌旁组织（P<0.05）,而miR-433-3p的表达水平低于癌旁组织（P<0.05）。抑制SNHG14的表达或过表达miR-433-3p 可使SW579细胞增殖能力降低（P<0.05）、迁移与侵袭细胞数减少（均 P<0.05）、细胞凋亡率升高（P<0.05）、G1期细胞比例升高（P<0.05）且S期细胞比例降低（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验证明SNHG14可结合miR-433-3p,抑制SNHG14的表达可提高SW579细胞中miR-433-3p水平（均P<0.05）。同时抑制miR-433-3p 和SNHG14的表达可部分逆转后者对SW579细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用（均P<0.05）。结论：甲状腺癌组织中lncRNA SNHG14呈高表达、miR-433-3p呈低表达,lncRNA SNHG14可通过靶向结合miR-433-3p促进甲状腺癌SW579细胞的增殖、迁移、侵袭而抑制细胞凋亡。     

长链非编码RNA FAM201A靶向miR-488-3p对胃癌细胞生物学行为及放射敏感性的影响

  目的  探讨长链非编码RNA（lncRNA）序列相似性家族201-成员A（family with sequence similarity 201-member A，FAM201A）靶向miR-488-3p对胃癌细胞生物学行为及放射敏感性的影响。  方法  选取2014年1月至2017年1月间于莱阳中心医院确诊并进行胃癌根治性切除手术（术前均未经过放疗和化疗治疗）的胃癌患者的肿瘤组织标本和配对的非癌性黏膜标本63例，采用qRT-PCR检测63例胃癌组织和与其对应的癌旁组织中FAM201A及miR-488-3p的表达水平。构建抑制FAM201A表达的MGC803胃癌细胞株。四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）法检测细胞增殖活力，流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力。用不同辐射强度（0、2、4、6和8 Gy）射线照射抑制FAM201A表达的MGC803细胞，克隆形成实验检测细胞存活分数，绘制单击多靶模型拟合曲线。双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证FAM201A和miR-488-3p的靶向关系。  结果  与癌旁组织相比，胃癌组织中FAM201A的表达水平显著升高，miR-488-3p的表达水平显著降低。抑制FAM201A可显著抑制MGC803细胞增殖、迁移和侵袭，促进其凋亡，增加MGC803细胞的放射敏感性。FAM201A可靶向负性调控miR-488-3p表达。抑制miR-488-3p能够逆转抑制FAM201A对细胞MGC803增殖、凋亡、迁移侵袭和放射敏感性的影响。  结论  抑制lncRNA FAM201A通过靶向miR-488-3p可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭，促进胃癌细胞凋亡，并增加其放射敏感性。FAM201A有望成为胃癌的新型分子靶点。      

长链非编码RNA FGD5-AS1在肺癌组织中的表达及其对细胞增殖的影响

目的:研究长链非编码RNA（LncRNA）FGD5-AS1在肺癌组织中的表达及其对肺癌细胞增殖的影响。方法:RNA-seq分析肺癌组织中LncRNA及微小RNA(miRNA)的表达改变,根据表达量的改变确定候选LncRNA FGD5-AS1;RT-qPCR检测分析肺癌组织及肺癌细胞中FGD5-AS1的表达;免疫荧光检测分析肺癌组织中细胞增殖和抗原Ki-67的表达;通过线性回归分析肺癌组织中FGD5-AS1与Ki-67的表达相关性。生物在线软件联合miRNA测序结果,并通过荧光素酶检测分析FGD5-AS1与miR-129-5p结合可能性。将A549细胞分成空白对照组（Control）、si-FGD5-AS1组、miR-mimics组（miR-129-5p mimics）、si-FGD5-AS1与miR-mimics联合组,利用脂质体法将si-FGD5-AS1、miR-129-5p mimics分别或联合转染入A549细胞,24 h后,利用CCK-8检测细胞活力、Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡、蛋白印迹（Western blot）检测细胞凋亡相关蛋白（Bad、Bcl-2、Cleaved Caspase-3）的表达。结果:FGD5-AS1在肺癌组织及肺癌细胞中的表达均显著升高（P＜0.01）,其表达量与Ki-67的表达呈正相关（r=0.641 8,P=0.000）。miR-129-5p在肺癌组织及细胞中的表达均显著降低（P＜0.01）,生物在线软件及荧光素酶检测验证,FGD5-AS1与miR-129-5p存在结合位点;在肺癌组织中,miR-129-5p的表达与Ki-67的表达呈负相关（r=-0.752 8,P=0.000）。与Control组比较,si-FGD5-AS1可显著抑制A549细胞的增殖（P＜0.01）、促进其凋亡（P＜0.01）,Bad及Cleaved caspase-3的表达均显著升高（均P＜0.01）,Bcl-2的表达显著降低（P＜0.05）;与si-FGD5-AS1组比较,si-FGD5-AS1与miR-mimics联合组可进一步抑制细胞增殖（P＜0.01）,促进细胞凋亡（P＜0.01）,Bad及Cleaved caspase-3的表达均显著提高（均P＜0.01）,Bcl-2的表达显著降低（P＜0.01）。结论:肺癌组织中FGD5-AS1的表达显著上调,可能通过抑制hsa-miR-129-5p的表达而促进肺癌细胞增殖,参与肺癌的发生及进展。