肿瘤坏死因子、白细胞介素-2、α-干扰素及合用异博定对人乳腺癌细胞多药耐药性的逆转作用研究

目的检测肿瘤坏死因子、白细胞介素-2、α-干扰素及合用异博定对人乳腺癌耐药细胞系的耐药性的调节作用。方法MTT法检测药物对MCF-7/Adr细胞的抑制率变化,流式细胞术检测肿瘤坏死因子、白细胞介素-2、α-干扰素及合用异博定后,细胞内罗丹明-123的药物浓度变化。结果α-干扰素可增加耐药细胞内的药物浓度,α-干扰素与异博定合用比单用异博定也可增加细胞内的药物浓度。各用药组均可不同程度提高阿霉素对耐药细胞的抑制率。结论乳腺癌化疗中,合用α-干扰素及异博定,可在减少副作用的基础上逆转肿瘤的耐药性。     

乳腺癌患者外周血Th1／Th2细胞因子的漂移及其与病理和临床病程的关系

 目的 检测乳腺癌患者外周血CD+3 T细胞分泌细胞因子的水平，分析Th1和Th2细胞的细胞因子免疫变化，为肿瘤的免疫治疗提供实验依据。方法 用刺激物刺激细胞，增加细胞内细胞因子的表达，加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体，特异性抗原抗体结合，应用流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平。同时用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中相应的细胞因子。结果 CD+3 T细胞分泌的细胞因子水平及血清中的细胞因子皆表现Th1型细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-12（IL-12）表达水平较正常对照组显著降低，Th2型细胞因子白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-10（IL-10）表达水平较正常对照组升高，差异有统计学意义。肿瘤坏死因子-α （TNF-α）表达水平较正常对照组升高，差异有统计学意义。结论 乳腺癌患者体内Th2型细胞因子模式占优势状态，这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸，从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一。     

小胶质细胞及其细胞因子对乳腺癌细胞的影响

目的:体外培养小胶质N9细胞并观察其条件培养液(conditioned medium,CM)对乳腺癌MCF-7细胞生存率的影响,以探讨小胶质细胞在脑转移癌中的作用机制.方法:混合培养N9细胞和MCF-7细胞,在倒置光学显微镜下观察细胞形态学的变化.采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、MCF-7细胞及其条件培养液MCF-7-CM刺激N9细胞获得N9-CM; ELISA法检测N9-CM中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-17 (interleukin-17,IL-17)的表达,Griess体系检测一氧化氮(nitric oxide,NO)的生成量.将N9-CM按不同浓度(10％、25％、50％、75％和100％)作用于MCF-7细胞,MTT法检测Ng-CM对MCF-7细胞生存率的影响.结果:MCF-7细胞与N9细胞共培养,N9细胞由静止态变为激活态;LPS、MCF-7细胞及其上清液均可以诱导N9细胞产生TNF-α、IL-17和NO;N9-CM浓度达50％～100％时对MCF-7细胞生长有抑制作用,且作用强度呈时间-浓度相关性.结论:小胶质细胞可以被转移到CNS的乳腺癌细胞激活并发挥肿瘤抑制作用.其作用强度与小胶质细胞分泌NO及细胞因子TNF-α和IL-17的浓度和作用时间呈正相关性.     

大肠癌患者细胞因子变化的临床意义

目的 检测大肠癌患者外周血CD+4T细胞分泌细胞因子水平的变化,分析Th1/Th2类细胞因子的平衡调节及其临床意义.方法 刺激细胞,增加细胞内因子表达,荧光标记特异性抗细胞因子单克隆抗体,特异性抗原抗体结合,用流式细胞术分析,检测特异性细胞因子表达水平.结果 大肠癌患者Th1型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)表达水平较健康组显著降低;Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平较健康组升高,且IFN-γ/IL-4的比值最具临床意义,差异有统计学意义.结论 大肠癌患者体内Th1/Th2出现漂移,IFN-γ/IL-4比值可作为大肠癌临床进展及免疫功能评价的指标.     

纤维支气管镜检标本微小RNA-21在非小细胞肺癌诊断中的临床应用价值

目的 探讨纤维支气管镜检标本微小RNA-21(miRNA-21)在非小细胞肺癌(NSCLC)诊断中的临床应用价值.方法 选取80例NSCLC患者作为NSCLC组,选取同期接受镜检筛查的80例肺炎或肺结核患者作为对照组.检测两组患者的镜检物miRNA-21表达水平,比较两组患者的细胞因子和肿瘤标志物水平,分析NSCLC患者镜检物miRNA-21水平与细胞因子和肿瘤标志物水平的相关性.结果 NSCLC组患者的镜检物miRNA-21水平为(8.29±1.15),明显高于对照组的(1.35±0.41),差异有统计学意义(P﹤0.001).NSCLC组患者的γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.001).NSCLC组患者的癌胚抗原(CEA)、神经元特异烯醇化酶(NSE)和角蛋白CYFRA21-1水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.001).NSCLC患者的镜检物miRNA-21表达水平与细胞因子IFN-γ、IL-1β、IL-4、IL-6、TNF-α和肿瘤标志物CEA、NSE、CYFRA21-1水平均呈正相关(P﹤0.05).结论 NSCLC患者纤维支气管镜检标本中miRNA-21的表达水平较高,且与细胞因子和肿瘤标志物水平密切相关.     

干扰素-β对不同胶质瘤细胞系的生长抑制及对其他细胞因子表达调节作用的研究

目的:研究干扰素β(IFNβ)对胶质瘤细胞系的生长抑制和诱导凋亡作用,及其对细胞因子表达的调节作用。方法:分别用IFNβ基因和蛋白刺激胶质瘤细胞系SKMG1和T98,通过MTT方法检测细胞增殖情况,运用流式细胞技术检测细胞凋亡情况,用实时定量PCR法检测细胞因子的表达变化。结果:IFNβ基因和蛋白可明显抑制SKMG1细胞增殖,诱发细胞凋亡,但对T98细胞系的作用很弱。SKMG1细胞的对照组不能检测出白细胞介素1β(IL1β)的表达,在48h达到42.8±8.3;肿瘤坏死因子α(TNFα)在IFNβ基因刺激后24h其表达达到10±2.1,P=0.001;IFNβ基因刺激后白细胞介素IL6的表达在12h一过性降低(0.2±0.1),P=0.001,在48h其表达升高(9.7±1.3),P=0.000。T98细胞的对照组不能检测出肿瘤坏死因子α(TNFα)的表达,在刺激48h达到5.7±2.7;白细胞介素1β(IL1β)在IFNβ基因刺激后12h表达达到6.8±1.1,P=0.002;白细胞介素6(IL6)表达在IFNβ基因刺激后,24h升高(2.8±0.4),P=0.030。结论:IFNβ基因和蛋白可以抑制胶质瘤细胞的增殖,诱发细胞的凋亡,可以调节其他细胞因子的表达。但是在不同的细胞系中有不同作用。     

食管鳞癌患者Th1和Th2细胞因子的免疫状态

表达白细胞介素(IL)-2、γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)为主的Th1型细胞介导细胞免疫应答,以表达IL4、IL-5、IL-10为主的Th2型细胞介导体液免疫应答。如果Th1和Th2失衡,发生Th2漂移,则显示机体抗肿瘤反     

IL-23在肿瘤免疫中的作用

作为具有重要免疫调节活性的细胞因子,白细胞介素(IL)-23在多种疾病中发挥着重要作用.在其对肿瘤的免疫调节中,存在着抗肿瘤与促进肿瘤生长两种观点.IL-23可以促进干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α和IL-12等细胞因子的分泌,IL-23/Th17轴是发挥免疫调节作用的关键.     

趋化因子CCL20与恶性肿瘤之间的关系

趋化因子是一类控制细胞向炎性部位迁移的细胞因子,在调控免疫细胞分化、发育及定向迁移过程中起重要作用。CCL20是趋化因子家族中的重要成员之一,属于CC亚族,其受体为CCR6。CCL20在被激活的单核细胞、T细胞、树突状细胞及内皮细胞中表达;CCR6主要在肝、肺及淋巴组织中表达。CCL20的表达可被肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNFα)、白细胞介素1β(interleukin1β,IL-1β)、IL-17、CD40配体和干扰素γ(interferonγ,IFN-γ)等细胞因子诱导,在恶性肿瘤的生长及促进肿瘤细胞的侵袭和转移(主要是肝内转移)中发挥重要作用。     

肺癌的生物治疗现状

本文着重介绍了近年来细胞因子如干扰素、白细胞介素2、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、IL-2/LAK细胞疗法、IL-2/TIL细胞疗法在肺癌治疗方面的应用现状。     

顺铂预处理化疗通过免疫调节增强CIK细胞对B16恶性黑色素瘤的抑制作用

目的 观察顺铂( Cisplatin,DDP)预处理化疗联合CIK细胞对B16恶性黑色素瘤的抑制作用,探讨DDP预处理化疗增强细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine - induced killer cells,CIK cells)抑瘤作用的潜在机制.方法 建立C57BL/6小鼠B16黑色素瘤模型,测量肿瘤体积,绘制...     

Cell of origin of lung cancer

Lung cancer is a devastating disease and a major therapeutic burden with poor survival rates. The discovery of rare cells with stem cell‐like properties in solid tumours is emerging as an important area of cancer research and may help explain the resistance of these tumours to current therapeutics. Despite rapid developments in cancer stem cell research in other solid tumours, progress in the lung has been hampered by an incomplete understanding of the epithelial stem cell hierarchy, the heterogeneity of disease and the lack of a suitable in vivo transplantation model to assess stem cell behaviour. In this review we critically discuss what is currently known about the role of normal stem cells and cancer‐initiating cells in lung tumour development, and briefly discuss strategies aimed at advancing the field of lung stem cell biology, with an emphasis on the design and manipulation of state‐of‐art mouse models.     

记忆性干细胞样T细胞在肿瘤治疗应用中的研究进展

记忆性干细胞样T细胞(stem memory T cells,TSCM)是最近几年发现的一个细胞亚群,约占外周血中总的CD4+T细胞和CD8+T细胞的2％～4％,是记忆性T细胞的早期分化阶段,具有记忆性细胞和干细胞的特点,基因谱介于初始T细胞和中央记忆T细胞之间.记忆性干细胞样T细胞具有自我更新和长期存活能力,这些特点使它们成为肿瘤领域关注的热点.本文将简述记忆性干细胞样T细胞的一些特点,以及它们在肿瘤治疗中的应用.     

CIK细胞在癌症患者外周血中水平及影响因素的研究

目的 :分析CIK细胞在癌症患者外周血与年龄、性别、疾病种类、分期的关系。方法 :采用流式细胞术 (FCM)对 145例实体瘤患者外周血中的CIK细胞 (CD+ 3 CD+ 56)及NK细胞 (CD-3 CD+ 56)进行标记分析。结果 :在中、晚期实体瘤患者中 ,CIK细胞表达呈高水平 ,CIK细胞占外周血淋巴细胞总数的百分比为 (9 4 5± 5 4 4%) ,在早期表达水平不高 ,为 (3 2 2±2 2 9%) ,两组差异有显著性 (P <0 0 1) ;而年龄、性别、疾病种类并不影响其在外周血中的水平。NK细胞水平不如CIK细胞明显 ,两者无相关性 (P >0 0 5 )。结论 :CIK细胞在中、晚期恶性肿瘤外周血中有较高的表达水平 ,发挥其重要的抗肿瘤细胞免疫作用 ,并不受患者的年龄、性别及疾病种类的影响。     

胎儿LAK细胞治疗中晚期肝癌的疗效观察

自1989年1月至1991年10月,我们应用6~7个月龄的胎儿脾脏细胞和白细胞介素-2(IL-2)共培养3天后制备成胎儿LAK细胞,静脉输注或肝动脉插管灌注治疗中晚期肝癌18例.结果疼痛减轻16例,占88.9%;食欲增加14例,占77%;临床完全缓解2例,占11%;部分缓解14例,占77%;总有效率占88.9%(16/18).而且LAK细胞治疗后患者周围血OKT_4比率升高,OKT_8比率下降,说明治疗后患者免疫功能有一定改善.结果提示:①胎儿脾脏含有丰富的LAK前身细胞;②胎儿LAK细胞治疗中晚期肝癌有明显疗效.     

苯乙酸钠处理的胃癌细胞对LAK细胞杀伤的敏感性

为了探讨分化诱导剂苯乙酸钠是否能够增强ＬＡＫ细胞的治疗效果，作者采用ＭＴＴ法分析了苯乙酸钠处理的胃癌细胞对ＬＡＫ细胞杀伤敏感性的变化。结果表明：苯乙酸钠处理的胃癌细胞ＭＫＮ－２８和ＭＫＮ－４５对ＬＡＫ细胞的杀伤敏感性均增强。另外，苯乙酸钠处理的胃癌细胞粘附ＬＡＫ细胞的活性亦增强。因此，苯乙酸钠处理的胃癌细胞对ＬＡＫ细胞杀伤敏感性的增强可能在于其增强了效靶细胞之间的识别和结合；苯乙酸钠与ＬＡＫ细胞相结合有可能增强ＬＡＫ细胞治疗肿瘤的效果。     

细胞因子诱导的杀伤细胞在肿瘤治疗中的作用

细胞因子诱导的杀伤（CIK）细胞是用于肿瘤免疫治疗的主要免疫活性细胞。相关基础研究显示其对多种血液及实体肿瘤有显著杀伤活性,大量临床试验证实其对肿瘤患者有明确疗效且不良反应轻微。CIK细胞治疗肿瘤是一种前景广阔且安全的方法,因此建立规范的培养和应用标准十分重要。     

Formation of solid tumors by a single multinucleated cancer cell

BACKGROUND:

Large multinucleated cells (MNCs) commonly exist in tumorigenic cancer cell lines that are used widely in research. However, the contributions of MNCs to tumorigenesis are unknown.

METHODS:

In this study, MNCs were characterized in the murine fibrosarcoma cell line UV‐2237 in vitro and in vivo at the single‐cell level.

RESULTS:

The authors observed that MNCs originated from a rare subpopulation of mononuclear cells and were positive for a senescent marker, β‐galactosidase. In addition, MNCs were responsible for the majority of clonogenic activity when cultured in hard agar; they were more resistant to chemotherapeutic agents than mononuclear cells; they could undergo asymmetric division (producing mononuclear cells) and self‐renewal in vitro and in vivo; and, most important; a single MNC produced orthotopic, subcutaneous tumors (composed mainly of mononuclear cells) that gave rise to spontaneous lung metastases in nude mice.

CONCLUSIONS:

The current results indicated that the growth of MNCs may be arrested under stress and that MNCs are highly resistant to chemotherapy and can generate clonal, orthotopic, metastatic tumors. Cancer 2011. © 2011 American Cancer Society.     

干细胞niche与肿瘤干细胞产生和发展的关系

肿瘤干细胞学说认为大部分肿瘤来源于肿瘤干细胞。肿瘤干细胞与正常干细胞一样具有自我更新能力,能够产生肿瘤组织团块中的各种增殖和分化的细胞。肿瘤干细胞可能来源于正常干细胞或分化细胞。干细胞niche是干细胞生存的微环境,通过提供抑制细胞增殖和生长的信号来维持干细胞于静止状态。干细胞niche功能异常会导致niche的数量增加,以及干细胞功能异常和数量增加。肿瘤干细胞可能在异常的niche中存活,打破这种异常的niche就会削弱肿瘤干细胞的自我更新,从而抑制肿瘤的生长。靶向肿瘤干细胞异常微环境的治疗策略可能是癌症治疗的一个方向。     

实体瘤肿瘤干细胞的研究进展

干细胞与肿瘤细胞存在许多相似之处,可能是肿瘤细胞的起源细胞。在血液系统恶性肿瘤和实体瘤中均分离和鉴定出具有干细胞特征的细胞群,称之为肿瘤干细胞。它们在恶性肿瘤的发生和发展中发挥重要的作用。肿瘤可能是一种干细胞疾病,这对认识肿瘤的发病机理和有效的临床治疗具有重要的指导作用。