鼻咽癌中EMP1蛋白的表达及其临床意义

目的： 探讨上皮膜蛋白1(EMP1)在鼻咽癌中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组织化学方法和Western blot检测75例鼻咽癌组织及距癌组织边缘2 cm以上的镜下未见癌浸润的正常鼻咽组织中EMP1蛋白的表达情况,并分析其与临床病理指标的关系。结果：免疫组织化学结果表明,EMP1蛋白在鼻咽癌组织及正常鼻咽组织中的表达阳性率分别为33.3%和74.2%,前者显著低于后者(P＜0.05)。Western blot结果表明,EMP1蛋白在鼻咽癌组织的相对表达量较正常鼻咽组织明显降低(P＜0.05)。EMP1蛋白表达与鼻咽癌T分期、有无淋巴结转移、临床分期以及细胞分化程度有关(P＜0.05)。结论：EMP1低表达可能促进了鼻咽癌的发病过程,在鼻咽癌的发生发展过程中具有重要作用。     

MTA1在鼻咽癌中的表达及意义

目的探讨MTA1在鼻咽癌中的表达及临床意义.方法应用逆转录-PCR（RT-PCR）技术,检测43例鼻咽癌组织和14例正常鼻咽部组织中MTA1 mRNA的表达. 结果 MTA1 mRNA 在鼻咽癌组织的平均表达水平明显高于鼻咽部正常组织（P〈0.05）.鼻咽癌组织中MTA1 mRNA高表达率与临床分期、T分期和N分期呈正相关关系.结论 MTA1基因过度表达与鼻咽癌浸润和转移密切相关.MTA1 mRNA的过度表达可能是评价鼻咽癌的恶性程度、转移的重要指标.     

Gli1蛋白及E-cadherin蛋白在宫颈癌中的表达及临床意义

目的:探讨Gli1蛋白及E-cadherin蛋白在宫颈癌中的表达及临床意义.方法:应用免疫组化SP法检测50例宫颈癌组织、30例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织、40例正常组织中Gli1蛋白及E-cadherin蛋白的表达.结果:Gli1蛋白在宫颈癌组织中明显高于正常宫颈组织(P＜0.05),E-cadherin蛋白在宫颈癌组织中明显低于正常宫颈组织(P＜0.05).结论:Gli1蛋白的高表达及E-cadherin蛋白的低表达与宫颈癌的病理分级、临床分期、淋巴转移等密切相关,且两者在宫颈癌的表达呈负相关.     

鼻咽癌组织中APE和HIF-1 α表达的临床意义

目的:研究无嘌呤/无嘧啶内切核酸酶(APE)和乏氧诱导因子1α(HIF-1α)表达与鼻咽癌生物学行为的关系,探讨其在鼻咽癌诊断和治疗中的价值.方法:应用免疫组化技术,检测47例鼻咽癌和20例鼻咽慢性炎性组织中APE和HIF-1α的表达,并对10例鼻咽癌患者放疗前和放疗期间组织中APE和HIF-1α表达水平进行动态检测.结果:鼻咽癌组织中APE的表达高于鼻咽慢性炎性组织,但其差异无统计学意义;APE表达与性别、年龄、T分期、有无颈淋巴结转移和临床分期均无关.鼻咽癌组织中HIF-1α的表达显著高于鼻咽慢性炎性组织;HIF-1α表达与T分期、有无颈淋巴结转移和临床分期相关,但与性别、年龄无关;放疗后获得肿瘤局部控制的患者,其放疗期间HIF-1α表达水平显著低于放疗前.鼻咽癌中APE和HIF-1α的表达未见相关性.结论:APE和HIF-1α在鼻咽癌中均呈过表达,提示两者均可能涉及鼻咽癌的发生、发展过程.HIF-1α表达水平的检测对鼻咽癌的诊断、分期及疗效判断有重要价值.     

鼻咽癌组织中Gli1的表达及其对5-8F细胞增殖和迁移的影响

目的:研究神经胶质瘤相关癌基因1(Gli1)在鼻咽癌组织中的表达及其对鼻咽癌细胞5-8F增殖和迁移的影响。方法:采用荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测40例鼻咽癌组织和12例正常鼻咽组织中Gli1的表达;设计并合成针对Gli1基因的RNAi片段,将其感染5-8F细胞,蛋白质印迹法检测Gli1蛋白表达;MTT实验、平板克隆形成实验、细胞划痕实验和Boyden实验分别研究Gli1基因沉默后对5-8F细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:Gli1在鼻咽癌组织中的表达明显高于正常鼻咽组织,将siRNA-Gli1-01和siRNA-Gli1-02转染入5-8F细胞后,5-8F细胞中Gli1蛋白表达水平明显降低,细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显减弱。结论:Gli1基因的表达异常与鼻咽癌的发生发展相关,有望成为鼻咽癌早期诊断和预测预后的生物分子标志物。     

DNA依赖蛋白激酶在鼻咽癌病变中的表达及意义

[目的]研究DNA依赖蛋白激酶(DNA-PKcs)在鼻咽部正常黏膜、鼻咽炎、鼻咽非典型增生及鼻咽癌中的表达,并探讨DNA-PKcs表达与鼻咽癌临床病理参数间的关系.[方法]应用免疫组化EnVision法检测10例鼻咽部正常黏膜、10例鼻咽炎、21例鼻咽非典型增生和53例鼻咽癌组织中DNA-PKcs蛋白的表达水平,并结合临床病理特征进行分析.[结果]DNA-PKcs蛋白在正常鼻咽黏膜及鼻咽炎组织中呈低表达,在鼻咽非典型增生及鼻咽癌组织中呈高表达,阳性表达率分别为0、20.00％、71.42％和64.15％;其表达与鼻咽癌组织分化类型相关(P=0.023),与性别、年龄、临床分期及淋巴结转移无明显相关性(P均＞0.05).[结论]DNA-PKcs在鼻咽癌病变过程中可能发挥一定的作用.     

Gli1和Notch1在涎腺腺样囊性癌中的表达及其意义

[目的]探讨Gli1及Notch1在涎腺腺样囊性癌(SACC)中的表达及其相关性.[方法]采用免疫组织化学方法分别检测57例SACC及30例口腔正常小涎腺中Gli1和Notch1的表达情况并分析它们与临床病理指标之间的关系.[结果]Gli1在正常组织中不表达,在SACC中的阳性表达率为57.9％,两者之间差异具有统计学意义(P＜0.05).Notch1在正常组织和SACC中的阳性表达率分别为30％和77.2％,两者之间差异具有统计学意义(P＜0.05).Gli1表达与病理分型、肿瘤分期相关;Notch1表达与病理分型、肿瘤分期、是否侵犯相邻组织相关;Gli1与Notch1无相关性(r=0.152,P＞0.05).[结论]Gli1与Notch1在SACC的发生、发展中具有一定的作用.     

Gli1在食管鳞状细胞癌中的表达及与预后的关系

目的:探讨Hh信号通路关键因子Gli1在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及临床意义,并分析其与预后的关系.方法:食管鳞状细胞癌组织及癌旁正常食管组织各88例,采用免疫组织化学法检测Gli1的表达,另用Western-blot方法检测其中30例ESCC的Gli1的表达,Pearson卡方检验分析Gli1表达与临床病理特征之间的关系.单因素Kaplan-Meier法分析Gli1表达与预后的关系.Cox比例风险回归评估Gli1表达与预后的关系.结果:食管鳞状细胞癌组织中Gli1的表达在蛋白水平明显高于食管正常鳞状上皮,Gli1在ESCC中免疫组化阳性表达率为71.59％ (63/88),Gli1在癌旁正常食管鳞状上皮中免疫组化阳性表达率为6.82％ (6/88),差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot法证实Gli1蛋白在ESCC组织中表达上调,与癌旁正常食管组织中的表达比较,差异有统计学意义(P ＜0.001).Gli1高表达与肿瘤病理分期及淋巴结转移密切相关(P＜0.05).单因素分析Kaplan-Meier法提示Gli1阳性表达组与阴性表达组生存率之间的差别有统计学意义(Log-rank test,P=0.005).结论:食管鳞状细胞癌中Gli1的表达比较普遍,与ESCC的预后密切相关,可作为预测转移潜能和预后判断的有价值的指标.     

HOXC6在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨鼻咽癌患者组织中同源盒基因C6(HOXC6)的表达水平与临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测127例鼻咽癌患者的石蜡组织标本中HOXC6蛋白的表达，分析其表达与患者临床特征及预后的关系。在GEO公共数据库中下载鼻咽癌基因芯片数据集GSE12452和GSE13597，分析HOXC6基因在鼻咽癌和正常鼻咽组织间在转录水平上的表达差异；进一步采用GSEA分析方法探讨HOXC6基因在鼻咽癌中可能的作用机制。结果:HOXC6在鼻咽癌组织中表达上调，其水平表达与鼻咽癌的T分期、N分期和临床分期有显著的相关性(P<0.05)，且高表达与鼻咽癌的不良预后显著相关(P<0.05)。COX多因素分析显示:N分期（P=0.022）和HOXC6表达水平（P=0.038）是影响鼻咽癌患者预后的独立危险因素。在基因芯片数据集中，HOXC6 mRNA在鼻咽癌组织中的表达水平明显高于正常鼻咽组织(P<0.05)；GSEA分析提示，HOXC6基因高表达样本主要富集了细胞凋亡、TNF-α信号通路、IL6/JAK/STAT3信号通路等基因集，影响鼻咽癌的生物学过程。结论:HOXC6基因的表达与鼻咽癌患者的预后存在密切相关性，可作为其独立预后危险因素。     

微小RNA-218在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的:检测微小RNA-218(microRNA-218,miR-218)在鼻咽癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义.方法:收集鼻咽癌活检组织标本54例,同时以35例正常及慢性炎性反应鼻咽黏膜活检组织作为对照,采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RFQ-PCR)法检测鼻咽癌组织及对照组织中miR-218的表达情况,分析miR-218表达水平与鼻咽癌临床病理参数之间的关系,以及与患者预后的关系.结果:与对照鼻咽黏膜组织相比,miR-218在鼻咽癌组织中的表达水平普遍下调.鼻咽癌组织中miR-218平均表达量明显低于对照鼻咽上皮组织,差异有统计学意义(P=0.000).miR-218表达水平在低分化鼻咽癌组织明显低于高/中分化鼻咽癌(P=0.032),临床Ⅲ/Ⅳ期鼻咽癌组织明显低于临床Ⅰ/Ⅱ期鼻咽癌(P=0.007),有转移的鼻咽癌组织明显低于无淋巴结转移的鼻咽癌(P=0.019).Kaplan-Meier生存分析发现,miR-218表达水平越高,患者生存时间越长(P＜0.05).结论:miR-218与鼻咽癌的发生、临床进展及预后密切相关,它可能成为鼻咽癌新的潜在的治疗靶点及诊断预后分子标志物.     

CSPG4基因在鼻咽癌中的表达分析

  目的  研究硫酸软骨素多糖蛋白4（CSPG4）基因在鼻咽癌及对照组织中的表达。  方法  采用实时荧光定量PCR测定CSPG4基因在4例正常鼻咽上皮和18例鼻咽癌组织（其中Ⅱ期6例,Ⅲ期5例,Ⅳ期7例）中的表达情况;通过构建包含92例对照和187例鼻咽癌的组织芯片,应用免疫组织化学检测CSPG4蛋白的表达和分布。  结果  正常鼻咽上皮中CSPG4基因mRNA表达水平较低,在鼻咽癌中CSPG4表达上调且与临床分期呈正相关,差异具有统计学意义（P=0.017）。免疫组织化学结果表明鼻咽癌中CSPG4蛋白表达水平高于对照组,91.98%的鼻咽癌组织中CSPG4为强阳性表达,而对照组的强阳性率为76.09%（P=0.001）。  结论  CSPG4在鼻咽癌中随着临床进展表达逐渐上调,可能参与了鼻咽癌的发生发展,具体机制及临床应用前景值得进一步深入研究。      

鼻咽癌变过程中DNA依赖蛋白激酶表达水平研究

Objective:To observe the expression of DNA-dependent protein kinase (DNA-PKcs) in the nasopharyngeal tissues during carcinogenesis.Methods:Patients including 30 cases of nasopharyngitis,42 cases of nasopharyngeal atypical hyperplasia and 34 cases of nasopharyngeal carcinoma (NPC) were chosen from Zhongshan area in which there is high incidence rate of NPC.The expression of DNA-PKcs in the nasopharyngeal tissue was examined by immunohistochemistry.Results:The expression rates of DNA-PKcs in the nasopharyngitis tissue,the nasopharyngeal precancerous lesion and the NPC were 6.7%,64.3% and 55.9%,respectively (P＜0.001).Conclusion:The expression of DNA-dependent protein kinase may play an important role in nasopharyngeal tissue carcinogenesis.     

lncRNA LAMA5-AS1通过上调TFPI2表达抑制鼻咽癌细胞的增殖和迁移

目的:检测鼻咽癌组织和细胞株中长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）LAMA5-AS1的表达，观察lncRNA LAMA5-AS1对鼻咽癌细胞增殖和迁移的影响并探讨其作用机制。方法:荧光实时定量聚合酶链式反应（qPCR）分别检测lncRNA LAMA5-AS1在68例鼻咽癌组织及62例慢性鼻咽炎组织、鼻咽癌细胞株及永生化鼻咽上皮细胞中的相对表达。选择lncRNA LAMA5-AS1表达最少的细胞株，分别转染阴性对照质粒（对照组）或载有lncRNA LAMA5-AS1序列质粒（实验组）。MTS法和细胞划痕实验分别检测高表达lncRNA LAMA5-AS1对细胞增殖和迁移能力的影响。qPCR检测高表达lncRNA LAMA5-AS1对组织因子途径抑制物2（tissue factor pathway inhibitor 2，TFPI2）基因mRNA表达的影响，Western blotting检测TFPI2蛋白和ERK信号通路蛋白表达。结果:与慢性鼻咽炎组织比较，lncRNA LAMA5-AS1在鼻咽癌组织中表达明显降低（P＜0.01）。与人永生化鼻咽上皮细胞比较，lncRNA LAMA5-AS1在鼻咽癌细胞株中表达明显降低（P＜0.01），在CNE-2Z细胞中的表达最少（P＜0.01）。与对照组比较，实验组CNE-2Z细胞的增殖能力从第3天开始明显降低（P＜0.05），实验组CNE-2Z细胞迁移能力明显下降（P＜0.01）。与对照组比较，实验组CNE-2Z细胞中TFPI2在mRNA和蛋白水平的表达明显增加（P＜0.01），ERK信号通路蛋白p-ERK、MSK1、MNK和STAT3表达明显降低。结论:lncRNA LAMA5-AS1在鼻咽癌组织和细胞株中表达明显降低，高表达lncRNA LAMA5-AS1可通过上调TFPI2基因表达、下调ERK信号通路活性，抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞的增殖和迁移能力。     

KAI1／CD82 mRNA和蛋白在鼻咽癌组织中的表达及意义

目的 探讨KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组化SP法检测70例鼻咽癌和30例正常鼻咽部组织中KAI1／CD82蛋白的表达情况;逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测28例鼻咽癌和15例正常鼻咽部新鲜组织中KAI1／CD82 mRNA的表达情况。分析KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白的表达与临床病理特征之间的关系。结果 KAI1／CD82 mRNA在鼻咽癌组织中的阳性表达率为42.9％（12／28）,低于正常鼻咽部组织中的73.3％（11／15）,差异无统计学意义（P＞0.05）;KAI1／CD82蛋白在鼻咽癌组织中的阳性表达率为44.3％（31／70）,低于正常鼻咽部组织中的700％（21／30）,差异有统计学意义（P＜0.05）。KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在鼻咽癌组织中的表达与患者的性别、年龄、病理类型、T分期均无关（P＞0.05）,而与淋巴结转移有关。KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在无淋巴结转移组中的阳性表达率分别为85.7％和68.4％,明显高于淋巴结转移组的28.6％和35.3％,差异均有统计学意义（P＜0.05）。KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在N1、N2、N3亚组间表达率的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在鼻咽癌组织中表达下调,该基因可以抑制鼻咽癌发生、发展及淋巴结转移,有望作为鼻咽癌诊断和预后判定的一种有效分子标记物。     

染色体3p14.2区域一个与鼻咽癌呈负相关EST的鉴定

目的：寻找染色体３Ｐ１４．２区域与鼻咽癌相关的表达序列标记,为筛选鼻咽癌候选基因打下基础。方法：运用生物信息学同生比较筛选ＥＳＴ的策略,结合Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和逆转录ＰＣＲ方法,检测３ｐ１４．２区域的相关ＥＳＴＳ在鼻咽癌和正常鼻咽组织中的表达。结果：在３Ｐ１４．２区域筛选到一个在鼻咽癌中低表达的ＥＳＴＷ２３３１２,与正常鼻咽上上以组织相比较,在鼻咽癌细胞株及１３例鼻咽癌活检组织中的５便其表达下调     

鼻咽癌组织ERCC1的表达及其临床意义

目的:探讨核苷酸切除修复交叉互补基因(ERCC1)在鼻咽癌(NPC)组织中表达及其与顺铂(DDP)化疗疗效的关系。方法:82例经鼻咽部肿物活检确诊为鼻咽低分化鳞癌患者接受DDP为基础化疗,应用免疫组化法检测鼻咽部癌组织ERCC1基因蛋白表达,并设34例NPC癌旁上皮组织为对照组。结果:在NPC癌旁上皮组织中ERCC1的阳性率为88.2%,明显高于NPC组织中ER-CC1阳性率(63.4%),P<0.05;ERCC1基因蛋白表达阳性患者化疗有效率为36.5%,ERCC1阴性患者有效率为63.3%,其差异有统计学意义,P<0.05。ERCC1表达与NPC患者年龄有关(P<0.05),与性别、T分期、N分期及M分期无关,P>0.05。结论:ERCC1异常表达是NPC DDP化疗耐药的一个重要因素,检测ERCC1基因有助于预测NPC患者对顺铂化疗敏感性。     

人鼻咽与鼻咽癌cDNA阵谱中DNA修复相关基因表达差异的初步研究

目的 用cDNA阵卤咽癌组织及正常组织的基因表达谱,研究鼻咽癌组织内修复相关基因的表达差异。方法 Atlas human cancer cDNA expression array 7742-1杂交后,用Atlas Image 1.01a分析滤膜杂交结果,RT－PCR反应验证滤膜杂交结果。结果 在588个肿瘤相关基因中,共有134个基因表达上调,88个基因表达下调。在有DNA损伤应答、修复、重组相关基因的C区中,表达上调的基因有21个,与修复相关的有6个;表达下调的有44个,与修复相关的则有12个。结论 DNA修复相关基因的改变可能在鼻咽癌病理生理过程中起一定作用。