骨形成蛋白7重组腺病毒的构建及诱导成骨的研究

目的探讨骨形成蛋白7（BMP7）重组腺病毒异位诱导成骨的作用。方法将BMP7基因克隆到转移载体pAdTrack-CMV中,在细菌BJ5183中与pAdEasy腺病毒基因组进行同源重组,得到BMP7重组腺病毒基因组,通过转染HEK293细胞包装出重组腺病毒,然后在裸鼠小腿肌肉中进行异位诱导成骨实验。结果经过PCR及酶切鉴定证明获得了BMP7转移质粒pAdTrack-BMP7和BMP7重组腺病毒基因组,并包装出重组腺病毒。组织学观察显示2周时实验局部大量纤维样细胞聚集,软骨细胞分化;5周时骨小梁形成,软骨细胞已退化。结论BMP7重组腺病毒的构建以及其异位诱导成骨的成功,为BMP7基因治疗的研究提供了确切的实验依据。     

骨形态发生蛋白7与肿瘤关系的研究进展

骨形态发生蛋白7（BMP7）属于转化生长因子－β（TGF-β）超家族的成员之一，最初在研究体内诱导骨与软骨形成的因子时发现，对骨骼的胚胎发育和再生修复起重要作用。研究发现它还参与调节多种细胞的增殖、分化及凋亡的生物学过程。现就BMP7的生物学结构、信号传导机制以及与肿瘤的发生和转移的关系等方面的研究进展介绍如下。     

骨形成蛋白与肿瘤相关性研究进展

骨形成蛋白(bone morphogenetic proteins，BMP)最初是作为一种可在异位诱导骨和软骨形成的蛋白质被发现，但后来的研究发现，广泛分布于人体多种组织和细胞，行使多方面功能。它参与胚胎的形成、发育及组织细胞的分化和增殖。BMP基因突变和异常表达将导致胚胎死亡、组织器官发育异常及其它疾病的发生。BMP与某些肿瘤的发生、发展及转移密切相关。本文就近年来BMP与某些肿瘤的相关性研究作一综述。     

β-catenin协同BMP9诱导骨肉瘤TE85细胞成骨分化

目的:检测β-连环蛋白(β-catenin)联合骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)对骨肉瘤TE85细胞成骨分化的影响。方法 :采用构建有β-catenin和BMP9基因的重组腺病毒Adβ-catenin和Ad BMP9,单独或联合感染人骨肉瘤TE85细胞,并用半定量RT-PCR法检测β-catenin和BMP9 m RNA在TE85细胞中表达水平的改变;荧光素酶报告基因系统检测β-catenin/TCF4相对活性的变化,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和读数法分析TE85细胞的早期成骨能力,茜素红染色法检测细胞的晚期成骨能力;半定量RT-PCR法检测骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)以及晚期成骨分化指标骨钙蛋白(osteocalcin,OC)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)m RNA的表达水平,蛋白质印迹法检测OC和OPN蛋白的表达水平。结果:重组腺病毒Adβ-catenin与AdBMP9感染TE85细胞后能显著提高外源性β-catenin与BMP9 mRNA的表达水平(P值均<0.05),Adβ-catenin能明显增强β-catenin/TCF4的相对活性(P<0.05)。Adβ-catenin与AdBMP9能分别诱导骨肉瘤细胞TE85早期成骨分化指标ALP活性增加(P<0.05),但增加的程度有限;对晚期成骨指标OC和OPN mRNA和蛋白表达以及钙盐沉积无明显上调的作用。Adβ-catenin与AdBMP9联合作用之后,上述各项早晚期成骨指标的表达均显著增强,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论:β-catenin和BMP9单独诱导骨肉瘤细胞TE85成骨分化的能力有限,而联合作用后诱导成骨分化的能力显著增强,β-catenin能协同BMP9诱导骨肉瘤细胞TE85成骨分化。     

KDM4A通过下调BMP9促进乳腺癌细胞MDA-MB-231的迁移和侵袭

背景与目的：外源性骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)能抑制人乳腺癌的恶性进展,但其在乳腺癌中常异常低表达。本研究拟探索表观遗传修饰的组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶4A(lysine specific demethylase4A,KDM4A)在乳腺癌中的表达及作用,探究KDM4A与BMP9之间的关系及其可能的调节机制。方法：通过生物信息学方法分析KDM4A在乳腺癌中的表达及其与BMP9之间的关系,采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitativepolymerasechainreaction,RTFQ-PCR）和蛋白质印迹法（Westernblot）进行验证;采用染色质免疫沉淀（chromatin immunoprecipitation,ChIP）验证KDM4A对BMP9的调控作用,采用RNA稳定性实验及CHX蛋白稳定性实验验证KDM4A对BMP9表达的影响。采用RNA干扰技术及敲低BMP9的腺病毒构建转染KDM4A小干扰RNA(siKDM4A)或感染siBMP9腺病毒（Ad-siBMP9...     

乳腺癌骨转移机制与靶向治疗进展

乳腺癌骨转移是晚期乳腺癌常见的症状,乳腺癌细胞通过局部浸润、渗入血管和或淋巴管、随循环系统转移到骨、移出血管和或淋巴管、在骨定居并增殖引起溶骨性骨损伤。乳腺癌骨转移的发生发展取决于乳腺癌细胞与骨局部微环境之间相互作用,最后形成骨的结构破坏及功能受损。本文主要从分子水平阐述乳腺癌骨转移机制,并且综述针对乳腺癌骨转移关键靶点的抗骨转移药物的临床应用。     

乳腺癌组织中血管生成素样蛋白4与骨形成蛋白7的表达及临床意义

目的:研究乳腺癌组织中血管生成素样蛋白4（angiopoietin-like protein 4,ANGPTL4）与骨形成蛋白7（bone morphogenetic protein 7,BMP7）的表达,探讨其临床意义。方法:选取2014年01月至2015年07月我院120例乳腺癌及癌旁正常组织石蜡标本,采用免疫组化检测ANGPTL4和BMP7蛋白表达水平,分析与临床病理参数间的关系。收集32例新鲜乳腺癌及癌旁正常组织,采用Western blot检测ANGPTL4和BMP7蛋白表达水平。结果:石蜡组织中,乳腺癌ANGPTL4蛋白和BMP7蛋白阳性率均高于癌旁正常组织。ANGPTL4蛋白表达水平与肿瘤大小、TNM分期有关（P＜0.05）。BMP7蛋白表达水平与淋巴结转移、TNM分期有关（P＜0.05）。ANGPTL4和BMP7蛋白阳性表达患者5年生存率均低于阴性表达患者（P＜0.05）。ANGPTL4和BMP7蛋白是影响乳腺癌预后的独立危险因素。新鲜组织中,乳腺癌组织ANGPTL4和BMP7蛋白表达量分别为2.55±0.17和3.03±0.16,高于癌旁正常组织的2.42±0.28和2.89±0.12（P＜0.05）。乳腺癌组织中,ANGPTL4和BMP7蛋白表达量呈正相关（P＜0.05）。结论:ANGPTL4与BMP7蛋白可能协同促进乳腺癌的发生发展,是判断乳腺癌预后的重要指标,可能为乳腺癌的治疗提供新的分子靶点。     

乳腺癌微环境中趋化因子CCL20作用的研究进展

趋化因子是一类低分子量细胞因子,在调节肿瘤微环境中发挥重要作用。肿瘤微环境中的趋化因子不仅能够趋化白细胞,也能诱导附近的反应细胞影响肿瘤生长、侵袭、转移和血管生成。趋化因子与炎症和肿瘤疾病的发生发展密切相关,其中CC家族中的趋化因子CCL20在多种恶性肿瘤的侵袭和转移中发挥重要作用。近年发现,趋化因子CCL20在乳腺癌免疫抑制、血管生成及诱导上皮间质转化和肿瘤侵袭转移中起重要的调控作用。然而,CCL20在乳腺癌中的作用机制尚未明确。本文重点阐述趋化因子CC亚家族成员CCL20在乳腺癌微环境中的功能,探讨CCL20与乳腺癌微环境之间的关系,以期为乳腺癌靶向治疗提供新的思路。     

乳腺癌间质成纤维细胞体内外研究现状及展望

目的:总结间质成纤维细胞与乳腺癌发生发展的研究现状,探讨间质成纤维细胞在乳腺癌发生、生长和转移中的作用及对治疗的影响。方法:应用Medline、PubMed及CNKI期刊全文数据库检索系统,以"乳腺癌、间质、肿瘤相关成纤维细胞、肿瘤微环境"为中文关键词,"breast cancer、stromal、carcinoma-associated fibroblasts、tumor microenviron-ment"等为英文关键词,检索1994-2011年的相关文献,共检索到英文文献258条,中文文献56条。纳入标准:1)乳腺癌间质成纤维细胞的形态和特性;2)分离和培养的方法;3)功能的研究;4)对乳腺癌的发生、生长、转移,以及治疗的影响。结果:乳腺癌间质成纤维细胞通过细胞与细胞间的相互接触,在各种趋化因子和(或)细胞因子的作用下,通过不同的信号通路促进上皮细胞恶性转化,在乳腺癌的发生、生长及转移中起着重要的作用,但具体的机制尚不明确。结论:乳腺癌间质成纤维细胞通过细胞间的相互作用,促进细胞的恶性转化,并通过分泌各种的细胞因子使得乳腺癌细胞的增殖、转移和侵袭能力大大加强,促进了乳腺癌的发展。它对于乳腺癌的内分泌治疗和化疗疗效有着重要的影响,可能是乳腺癌治疗的新靶点。     

BMP在骨肿瘤中的存在和意义

1965年,Urist发现脱钙骨基质的提取物在肌肉内使间充质细胞转化为骨系细胞发生异位成骨,随后分离出了一种小分子量的糖蛋白,即骨形态发生蛋白.Wezney在1988年对这种骨提取物的肽链进行分析,并测出其氨基酸的序列,首次克隆出BMP2,BMP3,BMP4,至今,已有15种BMP及40种BMP相关蛋白被成功的分离.目前利用基因重组技术可以大量获得BMP,为临床应用提供了可能.BMP在骨肿瘤的作用也正日益引起人们的关注。     

脂肪细胞在乳腺癌发生发展中作用的研究进展

脂肪细胞是乳腺的重要组成部分,其中癌症相关脂肪细胞可以促进乳腺癌细胞的增殖和转移。脂肪细胞分泌的脂肪因子通过特异性诱导与促进肿瘤发生相关的转录程序来促进肿瘤细胞的迁移和血管生成。脂肪细胞通过脂质代谢的途径向乳腺癌细胞提供脂质,促进乳腺癌细胞的代谢重塑。脂肪细胞来源的成纤维细胞具有促进乳腺肿瘤的进展和结缔组织增生的作用,同时脂肪来源的胶原Ⅵ也可以为乳腺癌细胞提供结构支持。本篇综述通过介绍乳腺癌中脂肪细胞的相关作用机制,以及其在乳腺肿瘤微环境及肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移的机制,为探究治疗乳腺癌的新靶点提供思路。     

乳腺癌肝转移的机制及治疗

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,也是女性肿瘤相关性死亡的主要原因。乳腺癌发生远处转移是其死亡的主要原因之一,骨、肺、肝和脑是转移主要的靶器官;肝脏是实体肿瘤常见的转移部位,是乳腺癌第三常见的转移部位。乳腺癌肝转移的过程是多步骤的,是乳腺癌细胞和肝组织微环境中的多种因素共同参与的,进一步了解乳腺癌肝转移的机制对指导临床治疗至关重要。作者论述了乳腺癌肝转移的机制及治疗进展。     

乳腺癌肝转移的机制及治疗进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，也是女性肿瘤相关性死亡的主要原因。乳腺癌发生远处转移是其死亡的主要原因之一，骨、肺、肝和脑是转移主要的靶器官；肝脏是实体肿瘤常见的转移部位，是乳腺癌第三常见的转移部位。乳腺癌肝转移的过程是多步骤的，是乳腺癌细胞和肝组织微环境中的多种因素共同参与的，进一步了解乳腺癌肝转移的机制对指导临床治疗至关重要。作者论述了乳腺癌肝转移的机制及治疗进展。     

骨形态发生蛋白与肿瘤

骨形态发生蛋白(BMP)是一种多功能的细胞因子,不仅可以促进新骨形成,而且参与调控细胞生长、分化、迁移、凋亡以及胚胎和器官发生等过程。研究显示BMP还与肿瘤的发生和转移密切相关,在肿瘤治疗中具有重要的应用价值。     

骨形态发生蛋白在骨肉瘤中的临床意义及评价

目的为了解骨形态发生蛋白在骨肉瘤的临床诊断、侵袭、转移中的意义。方法应用免疫组化方法检测3l例骨肉瘤标本的BMP表达，结合临床病理资料进行综合分析。结果AKP升高病例组中95％的病例BMP阳性表达，临床X线成骨性骨肉瘤病例组中88％的病例BMP阳性表达，肺转移病例组中90％的病例BMP阳性表达。P值分别为0．0016和0．0238，统计学上有显著性差异。结论BMP阳性表达合并AKP值升高，可作为成骨性骨肉瘤临床筛选检测；BMP较临床X线对骨肉瘤的预后判定更准确；BMP阳性表达与肺转移呈正相关。     

乳腺癌骨转移研究进展

骨是乳腺癌最常见的转移部位之一,乳腺癌骨转移以溶骨性病变为主,也有少部分为成骨性病变,目前的研究表明趋化因子、整合素、血管生成以及骨微环境与癌细胞的相互作用等在乳腺癌骨转移的过程中起了重要作用.     

骨形态发生蛋白与肿瘤

骨形态发生蛋白(BMP)是一种多功能的细胞因子,不仅可以促进新骨形成,而且参与调控细胞生长、分化、迁移、凋亡以及胚胎和器官发生等过程.研究显示BMP还与肿瘤的发生和转移密切相关,在肿瘤治疗中具有重要的应用价值.     

骨折修复过程中骨形态发生蛋白2对趋化因子12表达的调控及其意义

目的探讨骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein,BMP2)对趋化因子12(chemokine C-X-C motif-ligand-12,CXCL12)表达调节及其在骨折修复过程中的意义。方法构建BMP2敲除鼠BMP2~(cKO/+)和BMP2~(cKO/cKO)。免疫组化分析正常小鼠、BMP2~(cKO/+)小鼠及BMP2~(cKO/cKO)小鼠胫骨骨折模型中骨内膜细胞CXCL12的表达及其随时间的变化。实时定量PCR(RT-q PCR)比较对照组与BMP2~(cKO/+)小鼠骨内膜细胞及其分化细胞CXCL12、骨钙蛋白、α-SMA表达差异。结果BMP2~(cKO/+)和BMP2~(cKO/cKO)小鼠BMP2显著低于对照组。小鼠骨折修复过程中骨内膜细胞和成骨细胞CXCL12表达明显升高,且表达CXCL12细胞先增多再减少;BMP2~(cKO/+)小鼠骨折修复过程中表达CXCL12的骨内膜细胞和成骨细胞逐渐增加。BMP2~(cKO/+)小鼠分离的骨内膜细胞CXCL12表达显著高于正常小鼠。在诱导分化的小鼠骨内膜细胞中添加rh BMP2,CXCL12的表达减少,骨钙蛋白和α-SMA表达显著增加。诱导分化的BMP2~(cKO/cKO)骨内膜细胞CXCL12表达显著高于正常小鼠,而骨钙蛋白的表达则显著降低。CXCL12受体拮抗剂AMD3100处理诱导分化的BMP2~(cKO/cKO)骨内膜细胞,骨钙蛋白和α-SMA表达显著增加。结论骨折修复过程中,BMP2下调CXCL12的表达有助于成骨细胞的分化从而促进骨折的修复。     

骨形态发生蛋白2在腰椎融合术中应用的效果与并发症

正骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)是由骨基质分泌的一种疏水性非胶原蛋白,属于转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员~([1-3])。是美国Marshall R.Urist教授于1965年发现的,Urist将脱钙骨基质(decalcified bone matrix,DBM)置于动物肌肉袋中诱导异位骨形成。其属于BMP家族,其中BMP-2,4和7的生物活性最高,成骨活性最强~([4-6])。现已证实BMP是一种酸性多     

恶性肿瘤骨转移机制探讨

骨骼是肿瘤最常见的转移部位,大约占1/3。尸解显示大约60％癌肿骨转移,80％以上骨转移癌是由乳腺癌、前列腺癌、肺癌、甲状腺癌和肾癌转移的,其中乳腺癌和前列腺癌转移率高达84％。骨转移中脊椎最常累及,其次为肋骨、骨盆和长干骨近端、胸骨和颅骨。脊柱转移主要发生在椎体,腰椎最好发,其次为胸椎,颈椎和骶椎。乳腺癌和肺癌常转移到胸椎,前列腺癌常侵犯腰椎、骶椎和骨盆。 恶性肿瘤可通过局部扩散或血液播散转移到骨,其中局部扩散非常少见,仅发生在口腔或鼻咽部癌肿侵入局部骨骼,或乳腺癌、肺癌或食管癌转移到胸骨。血液播散是癌肿转移到骨的主要途径;机制可能包括血管解剖特征,骨组织和肿瘤细胞的特性。 Ewing最早提出解剖定位理论(anatomically Or-