新城疫病毒在消化道肿瘤中的研究进展

目前消化道肿瘤在我国有着越来越高的发病率,对于肿瘤的防治已成为现今医学研究的重要方向。传统消化道肿瘤治疗中存在化疗敏感性差、靶向治疗费用较高等问题,而新城疫病毒 (NDV) 因其特异地抗肿瘤作用,成为目前肿瘤治疗研究的热点之一。NDV具有选择性溶瘤作用可直接杀死肿瘤细胞;可作为肿瘤疫苗的佐剂,刺激机体产生细胞因子并激活机体发生迟发型超敏反应;NDV也可作为免疫疫苗的载体或提供治疗基因的病毒载体。本文就近年来NDV在消化道肿瘤中的研究进展做一综述。     

莪术醇生物修饰构建的瘤苗治疗胃癌的实验研究

目的探讨中药莪术的提取物——莪术醇修饰构建的肿瘤细胞疫苗对SGC-7901胃癌的抗瘤效应及联合新城鸡疫病毒(NDV)疫苗的综合效应。方法对SGC-7901胃肿瘤细胞进行系列处理,用莪术醇及NDV对其进行系列生物构建,修饰构建的瘤苗经免疫小鼠(1次/周×3)21天后,接种SGC-7901胃肿瘤细胞,根据设计观察各组抑制肿瘤肺转移、皮下结节形成、生存时间状况及LAK细胞的杀伤效应。结果经莪术醇修饰构建的SGC-7901肿瘤疫苗与对照组相比能明显阻止胃癌细胞的肺转移,显著抑制皮下肿瘤结节形成,明显延长荷瘤鼠的生存时间(P<0.05);用各组免疫接种后长期存活的脾细胞制备的LAK细胞,较同龄未免疫小鼠的脾细胞制备的LAK细胞具有更强的抗瘤效应(P<0.05);由NDV构建的疫苗的抗瘤作用低于莪术醇瘤苗组,莪术醇与NDV联合构建的瘤苗其抗瘤作用未呈现生物放大及相加效应。结论莪术醇修饰构建的SGC-7901新型肿瘤疫苗可以增强胃肿瘤细胞的免疫原性,对胃癌有较好的实验治疗作用。     

新城疫病毒D817株体外高效杀伤肝癌细胞及其作用机制

 目的 与NDV疫苗株LaSota对比研究一株NDV D817株对肝癌细胞高效特异性的杀伤效应和作用机制, 进一步筛选NDV溶瘤毒株。 方法 用MTT法对比病毒对三株传代肝癌细胞株SMMC-7721、Bel-7404和HepG-2及一株正常肝细胞株 HL-7702的杀伤效应,并用TUNEL法及透射电 子显微镜观察病毒诱导肿瘤细胞发生凋亡作用。 结果 NDV D817株对肝癌细胞株SMMC-7721、Bel-7404和HepG-2杀伤效应高达80％,显著高于疫苗 LaSota株（P<0.01）,而对人正常肝细胞HL-7702无明显影响;病毒在肝癌细胞中明显复制增 殖,对细胞的杀伤活性与病毒作用剂量和病毒作用时间成正比;NDV D817株有效诱导肝癌细胞 发生凋亡。 结论 NDV D817株有效诱导肝癌细胞发生凋亡, 对SMMC-7721、Bel-7404和HepG-2细胞具有高效杀伤 性,而对正常肝细胞HL-7702未见明显影响,推测为溶瘤株。     

SC及NDV修饰的瘤苗治疗胃癌的实验疗效研究

目的 :研究中药三棱、莪术的提取物SC修饰构建的肿瘤细胞疫苗对SGC 790 1胃癌细胞株的抗瘤效应及联合新城鸡疫病毒疫苗的实验杀瘤疗效。方法 :对SGC 790 1胃肿瘤细胞进行系列处理 ,用SC(sparganiumstoloniferumBuehhum、Curcumazedoariarosc SC ,Chinesetraditionalmedicine )及NDV (新城鸡瘟病毒 )对其进行生物构建 ,修饰构建的瘤苗经免疫小鼠 (1次 /周× 4 ) 2 8d后 ,接种SGC 790 1胃肿瘤细胞 ,观察抑制肿瘤肺转移、皮下结节形成及生存时间状况。结果 :经SC修饰构建的SC SGC 790 1瘤苗能明显阻止胃癌细胞的肺转移 ,显著抑制皮下肿瘤结节形成 ,能明显延长荷瘤鼠的生存时间 ,与对照组相比差异有显著性 (P <0 0 5 )。由NDV构建的疫苗的抗瘤作用低于SC瘤苗组 ,在延长荷瘤鼠生存期方面和单瘤苗组相近 ,SC与NDV联合构建的瘤苗其抗瘤未呈生物放大及相加效应。结论 :SC修饰构建的SGC 790 1新型疫苗可以增强胃肿瘤细胞的免疫原性 ,对胃癌有较好的实验治疗效果     

胃癌患者术后NDV-ATV治疗对机体免疫功能的影响

目的 探讨新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤疫苗(NDV—ATV)治疗胃病术后患者机体免疫功能的影响。方法 采用流式细胞术分析36例胃病术后(术后2、3、4、5周)NDV—ATV治疗患者外周静脉血T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化情况，并以15例术后未接受NDV—ATV治疗的胃癌患者作对照。结果 对照组术后CD3^ 、CD4^ 、NK细胞所占百分比和CD4^ /CD8^ 逐渐升高，以术后3周内升高最为明显。NDV—ATV治疗组，术后CD3^ 、CD4^ 、NK细胞所占百分比和CD4^ /CD8^ 上升速度更快，持续时间更长。治疗结束后与治疗前比较，有非常显著性差异(P＜0．01)；且明显高于未接受NDV—ATV治疗的对照组患者(P＜0．05)。第1次治疗后和治疗结束后相比较有显著性差异(P＜0．05)。结论 NDV—ATV可同时视为1种免疫调节剂，能明显改善胃癌患者术后机体的免疫功能，提高机体抗肿瘤能力。     

新城疫病毒对人胃癌细胞的抑制杀伤作用

目的 :研究新城疫病毒 (NDV)对人胃癌细胞株的作用。方法 :利用MTT方法检测NDV对人胃癌细胞株的杀伤性。结果 :NDV作用后的人胃癌细胞株的细胞活性比对照的细胞活性有显著下降 (P <0 0 1) ,且NDV血凝效价值显著升高 ,表明NDV能杀死肿瘤细胞。结论 :NDV能够直接杀死肿瘤细胞 ,可作为治疗肿瘤的一种新生物制剂     

新城疫病毒感染体外诱导胃癌细胞热休克蛋白70的表达及意义

目的：观察NDV在体外抗胃癌细胞活性，研究NDV感染诱导胃癌细胞热休克蛋白70(HSP70)的表达及其意义。方法：应用倒置显微镜观察细胞形态，MTT法测细胞生长抑制状况，血凝试验检测：NDV在细胞中的增殖状况，免疫组化染色观察细胞中HSP70表达情况，流式细胞术检测胃癌细胞HSP70的表达。结果：NDV在体外可使BGC-823胃癌细胞形成明显的细胞病变效应及生长抑制作用，且这种抑制作用与肿瘤细胞被NDV感染后HSP70表达增加呈正相关。结论：NDV的抗BGC-823胃癌细胞活性显著，其杀伤机制之一为通过感染而诱导BGC-823产生过多的HSP70。     

新城疫病毒对人NK细胞表达TRAIL的促进作用

目的:研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)刺激自然杀伤(natural killer,NK)细胞产生肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的作用机制。方法:采用免疫磁珠分选(magnetic activated cell sorting,MACS)法,分离得到高纯度的NK细胞;乳酸脱氢酶释放法检测NDV激活的NK细胞对人肝癌HepG2细胞的杀伤作用;实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测NDV刺激NK细胞4h后对TRAILmRNA表达水平的影响;FCM检测NDV刺激NK细胞16h时TRAIL蛋白的表达情况;ELISA法检测NDV刺激NK细胞后对其分泌干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的影响;最后采用抗IFN-γ抗体中和IFN-γ后,再采用FCM检测NDV刺激的NK细胞中TRAIL蛋白的表达情况。结果:FCM检测结果显示,分离得到的NK细胞的纯度达(90.60±1.15)%;NDV刺激NK细胞16h后,明显增强NK细胞的杀伤肿瘤作用,NDV效价为204.8HU刺激组的杀伤率达到(22.28±0.84)%;RFQ-PCR及FCM检测结果显示,不同效价的NDV刺激NK细胞后,NK细胞中TRAILmRNA及蛋白表达水平均明显升高;ELISA检测结果显示,NDV刺激NK细胞后IFN-γ的分泌水平明显增加,在NDV效价为25.6HU刺激16h时达到峰值(796.47±37.87)pg/mL;采用抗IFN-γ抗体中和IFN-γ后,NK细胞中TRAIL蛋白表达水平明显下降。结论:NDV刺激NK细胞后可增强IFN-γ的分泌水平,进而通过IFN-γ上调TRAIL的表达,此途径为NDV刺激NK细胞表达TRAIL的机制之一。此外,NDV直接刺激NK细胞表达TRAIL是另一条重要的途径。     

鸡新城疫病毒对人类口腔鳞癌细胞的杀伤作用

目的　检测鸡新城疫病毒 (newcastlediseasevirus ,NDV)对人口腔鳞癌细胞的杀伤作用。方法　利用MTT方法检测NDV对人口腔鳞癌 (oralsquamouscellcarcinoma ,OSCC)颈淋巴结转移癌细胞系 (GNM)及人舌鳞癌细胞系 (TSCCa)细胞株的杀伤性。结果　NDV作用后的人口腔鳞癌细胞株的细胞活性比对照组的细胞活性有显著下降 (P <0 0 1) ,NDV血凝效价值显著升高。结论　NDV能够通过在人口腔鳞癌细胞内增殖杀死癌细胞株。     

NDV修饰对H22肝癌细胞脂质体瘤苗免疫作用影响的观察

目的:用脂质体包裹新城疫病毒(NDV)修饰后的H22肝癌细胞抗原,以增进疫苗的抗肝癌效应,探讨有效的抗肝癌手段.方法:NDV感染H22肝癌细胞,氯化钾法提取肿瘤抗原,改进的机械分散法制备脂质体.80只BalB/c鼠腹腔接种H22肝癌细胞后分为2部分,每部分再用随机数字表法分4组,24 h后,分别腹腔接种脂质体包裹的H22抗原(LAg 组)、脂质体包裹NDV修饰的 H22抗原(LVAg 组)、NDV修饰的肿瘤抗原(NDVAg 组)及D-Hanks(D-Hanks组);1周后,进行第2次免疫接种.记录小鼠的生存期.MTT法测定小鼠淋巴细胞毒活性.结果:LVAg组的抗肿瘤效应最强,其生存期为(35.2±5.5) d,脾淋巴细胞毒活性为(30.08±3.03)%,均高于其他各组,P均<0.001;LAg组的生存期为(21.6±4.2) d,优于NDVAg组(15.3±4.3) d和D-Hanks组(15.3±3.2) d,P均<0.05.LAg组脾淋巴细胞毒活性为(20.31±1.47)%,优于NDVAg组(9.38±1.53)%和D-Hanks组(9.33±1.59)%,P均<0.001.NDVAg组和D-Hanks组抗瘤效应差异无统计学意义,P>0.05.结论:NDV修饰可增强脂质体瘤苗对肝癌抗瘤作用.     

新城疫病毒抑制鼻咽癌细胞的体外实验研究

目的:研究新城疫病毒(NDV)对鼻咽癌细胞的抑制作用及其作用机制.方法:采用化学发光法、流式细胞术及电子显微镜研究NDV分别作用于两株鼻咽癌细胞后其对细胞生长的抑制情况,以及NDV诱导鼻咽癌细胞发生凋亡的情况.结果:化学发光法的结果显示,在一定的浓度范围和时间范围内,NDV对鼻咽癌细胞的抑制作用有剂量效应比和时间效应比关系.流式细胞术结果显示,NDV使鼻咽癌细胞生长阻滞在G1期,并促进细胞凋亡.电子显微镜观察细胞凋亡超微结构的结果显示,NDV可诱导鼻咽癌细胞产生凋亡小体,发生凋亡.结论:NDV可以抑制鼻咽癌细胞增殖,其作用机制主要是影响细胞生长周期和诱导细胞发生凋亡.     

NDV7793体外激活的小鼠单核巨噬细胞(MΦ)对小鼠肝癌细胞的杀伤作用及其机制

 目的
初步研究NDV7793激活的小鼠单核巨噬细胞（MΦ）对小鼠肝癌Novikoff细胞的杀伤作用,并探讨其杀伤机制与TNF-
α和TRAIL的关系。 方法从腹腔分离6周龄BALB/C小鼠MΦ, 用NDV7793于体外刺激小鼠MΦ,以ELISA分别测定
NDV7793刺激小鼠MΦ后产生的TNF-α及TRAIL水平;NDV7793体外刺激MΦ后,与小鼠肝癌Novikoff细胞混合培养,
以LDH微量释放法测定小鼠MΦ对小鼠肝癌Novikoff细胞的杀伤效应。同时设立3组实验对照组：IFN-β阳性对照组
、紫外线灭活NDV（UV-NDV）对照组以及空白对照组。 结果与3个对照组相比,NDV7793在体外能提高MΦ分泌TNF-
α、TRAIL的水平;NDV体外刺激后的小鼠MΦ能杀伤小鼠肝癌Novikoff细胞。结论NDV7793在体外能激活小鼠MΦ,
小鼠MΦ被NDV7793刺激后,对小鼠肝癌Novikoff细胞的杀伤作用增强,NDV激活后的小鼠MΦ对小鼠肝癌Novikoff细
胞的杀伤机制可能与TNF-α和TRAIL有关。     

新城疫病毒感染体外诱导胃癌细胞热休克蛋白70的表达及意义

目的 :观察NDV在体外抗胃癌细胞活性 ,研究NDV感染诱导胃癌细胞热休克蛋白 70 (HSP70 )的表达及其意义。方法 :应用倒置显微镜观察细胞形态 ,MTT法测细胞生长抑制状况 ,血凝试验检测NDV在细胞中的增殖状况 ,免疫组化染色观察细胞中HSP70表达情况 ,流式细胞术检测胃癌细胞HSP70的表达。结果 :NDV在体外可使BGC 82 3胃癌细胞形成明显的细胞病变效应及生长抑制作用 ,且这种抑制作用与肿瘤细胞被NDV感染后HSP70表达增加呈正相关。结论 :NDV的抗BGC 82 3胃癌细胞活性显著 ,其杀伤机制之一为通过感染而诱导BGC 82 3产生过多的HSP70。     

ATV-NDV瘤苗治疗胃癌的临床观察(附50例临床报告)

ATV—NDV是用已经灭能但存活的新城疫病毒(NDV)感染患者自体肿瘤细胞制成瘤苗，对患者进行术后主动免疫的新疗法。我们从1997年起采用ATV—NDV配合化疗治疗50例胃癌，现报告如下：     

6株NDV鄱阳株对肝癌细胞杀伤作用的初步研究

目的:研究从江西鄱阳湖野鸭分离的6株NDV对肝癌细胞的杀伤效应,进一步筛选NDV溶瘤毒株。方法:用MTT法研究6株NDV鄱阳株对两株传代肝癌细胞株Novikoff和HepG-2及一株正常肝细胞株HL-7702的杀伤效应。结果:6株NDV鄱阳株对肝癌细胞株Novikoff和HepG-2有显著杀伤效应,而对人正常肝细胞HL-7702无明显影响;病毒对细胞的杀伤活性与病毒作用剂量和病毒作用时间成正比;病毒在肝癌细胞中有明显复制增殖现象;Novikoff肝癌细胞对NDV敏感性强于HepG-2肝癌细胞。结论:6株NDV鄱阳株对Novikoff及HepG-2肝癌细胞产生显著的杀伤作用,而对正常肝细胞HL-7702未见明显影响。     

新城疫病毒Lasota 弱毒株对人肿瘤细胞的体外修饰作用

 目的 研究新城疫病毒（NDV）弱毒株Lasota对体外培养的人肿瘤细胞株免疫功能的影响。方法 以不同病毒滴度作用于肿瘤细胞，采用MTT染色法检测NDV对肿瘤细胞的杀伤作用，同时用NDV处理过的小鼠黑色素B16细胞免疫小鼠，检测其对小鼠NK细胞活性影响。结果 NDV Lasota株对4种癌细胞株均具有较强的杀伤作用，用其处理小鼠黑色素瘤细胞株后，再次接种可提高小鼠体内的NK细胞活性。结论 NDV能够抑制肿瘤细胞生长，诱导其凋亡，免疫接种小鼠后，可提高小鼠的细胞免疫功能。     

6株NDV鄱阳株对肝癌细胞杀伤作用的初步研究

目的：研究从江西鄱阳湖野鸭分离的6株NDV对肝癌细胞的杀伤效应，进-步筛选NDV溶瘤毒株。方法：用MTT法研究6株NDV鄱阳株对两株传代肝癌细胞株Novikoff和HepG-2及一株正常肝细胞株HL-7702的杀伤效应。结果：6株NDV鄱阳株对肝癌细胞株Novikoff和HepG-2有湿著杀伤效应，而对人正常肝细胞HL-7702无明显影响；病毒对细胞的杀伤活性与病毒作用剂量和病毒作用时间成正比；病毒在肝癌细胞中有明显复制增殖现象；Novikoff肝癌细胞对NDV敏感性强于HepG-2肝癌细胞。结论：6株NDV鄱阳株对Novikoff及HepG-2肝癌细胞产生显著的杀伤作用，而对正常肝细胞HL-7702未见明显影响。     

鸡新城疫病毒诱导口腔鳞癌细胞凋亡的实验研究

目的检测鸡新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)对人口腔鳞癌细胞诱导凋亡作用。方法采用MTT染色法和流式细胞仪分析法检测NDV对人口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)颈淋巴结转移癌细胞系(GNM)及人舌鳞癌细胞系(TSCCa)体外细胞培养株诱导凋亡的作用。结果NDV作用后的GNM、TSCCa均出现明显的细胞凋亡特征,与对照组差异有统计学意义。结论NDV能够诱导OSCC凋亡。     

新城疫病毒体外抗白血病作用的实验研究

 目的　通过体外实验研究探讨新城疫病毒（NDV）对人类急性单核细胞白血病的作用。方法　应用倒置显微镜观察NDV感染后白血病细胞形态和密度的变化,AO／PI染色后观察病毒对白血病细胞的生长抑制情况;甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定不同浓度NDV作用于白血病细胞不同时间后对细胞增殖的影响。结果　倒置显微镜下,对照组细胞形态规则、分布密集;NDV感染组细胞形态不规则,聚集、融合现象明显,分布稀疏;AO／PI染色后对照组呈均匀明亮的绿色荧光,NDV原液组呈红、绿两色荧光,以红色为主,MTT检测结果显示不同浓度NDV对SHI-1细胞的增殖均有明显抑制作用（P＜0.01）,不同时间的抑制作用也有明显差异（P＜0.01）;增殖抑制作用呈现时间-浓度依赖关系。结论　NDV是一种有效的抗人类急性单核细胞白血病的病毒。     

Observation on vaccinating newcastle disease virus vaccine with inhalation and preventing recurrence of nasopharyngeal cancer after radiotherapy

Newcastle disease virus (NDV) is a kind of bird virus. It mainly infects and spreads in chickens. Some time it may infect persons accidentally and produce some symptom like cold, but the patients can cure without special treatment. So far, there is not any report about everlasting carrier with NDV. NDV vaccine has been used to immunotherapy of cancer since 1960s. There have been being successful reports about NDV against cancer.[1(5] Then, so far there is not international report about N…