IL-27通过促进活化性受体表达和STATs磷酸化增强NK92细胞的抗肿瘤作用

[摘要] 目的：探讨IL-27 影响NK92 细胞抗肿瘤作用的分子和信号通路的机制。方法：将NK92 细胞分别置于不同质量浓度的IL-27（10、20、30 及60 ng/ml）下培养24 h,LDH法检测NK92 细胞对多种血液肿瘤和实体瘤细胞的杀伤作用,流式细胞术检测NK92 细胞表面受体NKG2D、NKp30 和NKp46 的表达水平以及穿孔素和颗粒酶B的分泌水平,WB检测STATs 蛋白的表达和磷酸化水平。建立重度免疫缺陷型小鼠的前列腺癌（DU145 细胞）模型,使用IL-27 和NK92 细胞联合局部治疗,评估其抗肿瘤活性。结果：10、20 及30 ng/ml浓度的IL-27 均可显著促进NK92 细胞对靶细胞的杀伤能力,且30 ng/ml的IL-27 对其细胞毒的促进作用最强（P<0.05 或P<0.01）。30 ng/ml IL-27 能显著促进NK92 细胞表面受体NKG2D、NKp30 和NKp46 的表达（均P<0.05）、明显促进NK92 分泌穿孔素（P<0.05）,但不影响颗粒酶B的分泌（P>0.05）;上调STAT1、STAT3 及STAT5 蛋白的磷酸化水平（均P<0.01）。IL-27 和NK92 细胞局部联合治疗可明显延长前列腺癌荷瘤小鼠生存期（P<0.05）。结论：IL-27 可增强NK92 细胞对实体肿瘤细胞和血液肿瘤细胞的杀伤作用,两者联合治疗可明显延长荷瘤小鼠生长期,该作用与IL-27 上调NK92 细胞中JAK-STAT 通路STAT1、STAT3、STAT5 磷酸化水平和促进细胞中多种活化性受体相关。     

IL-2+IL-15组合培养方案对乳腺癌患者外周血中NK细胞体外扩增的效果

目的：观察IL-2+IL-15组合体外培养方案对于NK、NKT和T细胞亚群的比例、表型、杀伤肿瘤细胞活性与黏附活性的影响,并初步探讨其作用机制。方法：采集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012年5月至2012年7月期间收治的5例乳腺癌患者的外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,用IL-2+IL-15 联合培养方案进行培养,观察培养15 d后细胞的扩增倍数和淋巴细胞亚群比例变化,流式细胞术检测细胞免疫表型、细胞表面受体的表达,LDH释放法和CD107a释放法检测不同细胞亚群对于HLA匹配或不匹配的靶肿瘤细胞系的杀伤活性,活细胞工作站检测总扩增产物对于不同靶肿瘤细胞系的黏附作用。结果：与扩增前相比,IL-2+IL-15培养方案扩增15 d后,NK细胞\[（36.74±1710）% vs （16.34±3.12）%,P<0.05\]、NKT细胞\[（24.88±12.34）% vs （4.06± 2.05）%,P<0.05\]比例显著增加,CD4+ T细胞和Treg细胞比例显著降低（P<0.05）,CD8+ T细胞比例显著升高（P<0.05）;NK细胞表面活化受体NKp30\[（ 92.38±7.19）% vs（32.14±17.64）%,P<0.05\]、NKp44\[（74.26±16.28）% vs（1.94±1.60）%,P＜0.05\]、NKG2D \[（ 98.58±128）% vs（6650±24.84）%,P<0.05\] 的表达率均显著升高,CD16表达率显著降低\[（ 85.12±7.66）% vs（95.60±253）%,P<0.05\]; NKT细胞、T细胞表面活化受体DNAM-1和NKG2D明显升高（P<0.05）。总扩增产物、NK细胞和NKT细胞对HLA不匹配的靶肿瘤细胞的杀伤率均显著高于HLA匹配靶细胞系的杀伤（P<0.05）;在共孵育至84 min时,与HLA匹配的靶肿瘤细胞系相比,总扩增产物细胞与HLA不匹配的靶细胞系黏附结合数目显著增多\[（ 4.80±0.53） vs （2.25±035）个,P<0.05\]。结论：IL-2+IL-15组合方案在扩增NK细胞的同时,也能够有效扩增NKT细胞,即可以扩增CD56+细胞群。并且,扩增产物主要以不受HLA限制的NK细胞杀伤活性为主来杀伤肿瘤细胞。     

IL-22/IL-22RA1通路在口腔鳞状细胞癌恶性进展中的作用及其机制

目的：探讨IL-22/IL-22受体A1（IL-22RA1）通路在口腔鳞状细胞癌（OSCC）恶性进展中的作用及其机制。方法：利用GEO数据库和免疫组化法分析IL-22RA1在OSCC组织及配对癌旁组织中的表达水平，采用组织芯片免疫组化法检测并分析IL-22RA1表达水平与OSCC患者临床病理特征的关系，通过EBI ArrayExpress数据库分析IL-22RA1表达水平与患者预后的关系。采用免疫荧光法检测IL-22和IL-22RA1在OSCC组织中表达水平并分析两者间的相关性。用RNA干扰技术敲减OSCC细胞WSU-HN4和CAL27的IL-22RA1表达，用qPCR法验证敲减效率。采用克隆形成实验、Transwell小室法分别检测IL-22对阴性对照（siNC）组和IL-22RA1敲减（siIL-22RA1）组OSCC 细胞克隆形成及迁移能力的影响，WB法检测IL-22 对OSCC细胞IL-22RA1表达水平及STAT1、STAT3和ERK1/2磷酸化水平的影响。结果：OSCC组织中IL-22RA1 mRNA的表达水平显著高于癌旁组织（P<0.05）。IL-22RA1表达水平与OSCC患者的肿瘤大小（P<0.05）、淋巴结转移（P<0.01）及预后不良（P<0.05）有关联。OSCC组织中的IL-22和IL-22RA1表达水平无明显关联，IL-22对OSCC细胞IL-22RA1表达无影响（均P>0.05）。IL-22可显著增强OSCC细胞的克隆形成和迁移能力（均P<0.01），并可激活OSCC细胞的STAT1、STAT3及ERK1/2 信号分子；敲减OSCC 细胞的IL-22RA1后，IL-22则无法发挥上述作用。结论：IL-22/IL-22RA1可通过调控细胞增殖和迁移促进OSCC的生长和转移，其下游机制可能是激活ERK1/2-STAT1/3信号通路。     

IL-12 逆转顺铂对人NK细胞免疫功能的抑制及其机制

目的: 探讨IL-12 逆转化疗药物对NK细胞免疫功能的抑制及其机制。方法: 纯化的NK细胞在PMA和Ionomycin刺激条件下、加或不加化疗药物顺铂（cisplatin,DDP）和IL-12,用ELISA法检测培养上清中IFN-γ 和TNF-α 的分泌水平,流式细胞术检测IFN-γ 和TNF-α、肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis inducing ligand, TRAIL）和转录因子（T-bet 和p-STAT-4）的表达百分率;纯化NK细胞加或不加化疗药物和IL-12 预处理48 h,流式细胞术检测其对白血病Jurkat 细胞株的杀伤效应。结果: 化疗药物明显抑制NK细胞分泌IFN-γ、TNF-α 以及TRAIL 的表达,IL-12 可以明显逆转DDP对NK细胞分泌IFN-γ、TNF-α 和TRAIL 的抑制（P<0.05 或P<0.01）。DDP抑制IFN-γ 和TNF-α 的转录因子p-STAT-4 的表达,而IL-12 通过上调磷酸化STAT-4 恢复了NK细胞的IFN-γ 和TNF-α 的分泌功能（P<0.01）。杀伤实验显示,DDP抑制NK细胞对白血病细胞Jurkat 的杀伤,而IL-12 通过上调TRAIL恢复NK细胞的杀伤功能（P<0.05 或P<0.01）。结论: 化疗药物DDP抑制NK细胞的杀伤功能以及细胞因子（IFN-γ 和TNF-α）的分泌,IL-12 通过上调TRAIL和转录因子STAT-4 的磷酸化恢复NK细胞的免疫功能,为临床应用IL-12 重建肿瘤化疗患者的免疫功能提供实验依据。     

IL-12增强CIK细胞对食管癌EC9706细胞的杀伤活性

目的：探讨IL-12对细胞因子诱导的杀伤 (cytokine-induced killer,CIK) 细胞的表型和CIK细胞在体外对食管癌EC9706细胞杀伤活性的影响。 方法: 体外分离人外周血单个核细胞,分为两组：对照组以IFN-γ、IL-2和CD3单抗诱导培养CIK细胞;IL-12组在对照组基础上加用IL-12培养。培养至第14天,流式细胞仪检测两组CIK细胞的免疫表型;LDH释放法测定效靶比20 ∶1、30 ∶1时两组CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性;观察效靶比30 ∶1时,NKG2D单抗对两组CIK细胞杀伤活性的影响。 结果: IL-12组与对照组相比较,CIK细胞免疫表型的CD3+CD56+细胞比例\[(28.23±1.71)% vs (16.34±059) %, P<0.05\]、CD3+细胞及CD3+CD56+细胞中NKG2D的表达\[(77.45 ±2.15)% vs (66.87±0.73)%, (92.94±077)% vs (82.18±066)%;均P<0.05\]、CD3+细胞中穿孔素的表达\[(51.78±0.63)% vs (43.54±0.95)%,P<0.05\]都明显增强;CD3+细胞颗粒酶B表达无明显变化\[(26.90±0.67)% vs (26.76±0.33)%,P>0.05)\]。效靶比20 ∶1和30 ∶1时,IL-12组CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性均较对照组明显增强\[(43.92±1.67)% vs (35.34±1.22)%,(55.95±0.88)% vs (43.91±110)%;均P<005\];以NKG2D单抗阻断后,IL-12组、对照组CIK细胞杀伤活性均明显下降\[(19.72±0.56)% vs (55.95±0.88)%, (19.83 ±1.20)% vs (43.91±1.10)%;均P<0.05\]。 结论: IL-12能够上调CIK细胞NKG2D和穿孔素的表达,从而增强CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性。     

IL-15上调NKG2D表达对CIK细胞杀伤活性的增强效应

目的观察IL-15对细胞因子诱导的杀伤细胞( Cytokine-induced killer cells,CIK)NKG2D受体表达及其对食管癌EC9706细胞杀伤活性的影响。方法体外分离外周血单个核细胞,分为两组。对照组：干扰素-γ、白细胞介素-2、CD3单抗诱导培养CIK细胞。IL-15组：加用IL-15培养。流式细胞仪检测细胞免疫表型及CD3+细胞、CD56+细胞表面NKG2D的表达,LDH法测定第14天细胞在效靶比20∶1、30∶1时对EC9706细胞的杀伤活性;效靶比30∶1时,观察NKG2D单抗封闭细胞表面NKG2D分子后对两组细胞杀伤活性的影响。结果随着培养时间的延长,CIK群体细胞及CD56+细胞表面NKG2D表达逐渐增强,IL-15组与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05);效靶比20∶1、30∶1时,IL-15组细胞对EC9706细胞的杀伤活性均较对照组明显增强,差异均有统计学意义(P＜0.05);效靶比30∶1时NKG2D单抗封闭CIK细胞表面NKG2D分子后,对照组细胞、IL-15组细胞对EC9706细胞的杀伤活性均较阻断前明显下降,差异均有统计学意义 (P＜0.05)。结论IL-15上调CIK细胞表面NKG2D分子表达,增强CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性,CIK细胞通过NKG2D发挥作用。     

去甲斑蝥素增强IL-15活化的PBMC对白血病KG1a细胞的杀伤作用

目的：探讨去甲斑蝥素（norcantharidin,NCTD）是否能增强IL-15活化的人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell, PBMC）对人急性髓系白血病KG1a细胞的杀伤作用及其可能机制。方法：锥虫蓝拒染法、CCK-8法检测NCTD对KG1a细胞增殖的影响,流式细胞术检测NCTD对KG1a细胞周期的影响,LDH释放法检测IL-15活化的PBMC（IL-15-PBMC）对NCTD处理后KG1a细胞的细胞毒活性,流式细胞术检测KG1a细胞表面NKG2D（natural killer group 2 member D）配体的表达。结果：NCTD有效抑制白血病KG1a细胞的增殖,呈时间（r=0.398,P=0.000）和剂量依赖性（r=0.861,P=0000）,并阻滞KG1a细胞周期于G2/M期;4 μg/ml 以下的NCTD对IL-15-PBMC没有明显的增殖抑制作用（P>0.05）。当效靶比为10 ∶1和20 ∶1时,IL-15-PBMC对0.125 μg/ml NCTD处理后KG1a细胞的杀伤率较对照组明显增加\[志愿者A：（37.44±5.78）% vs （9.33±1.69） %, （38.33±3.07）% vs （16.75±1.20）%;P<0.05\]。NCTD不影响KG1a细胞表面NKG2D配体蛋白的表达（P>0.05）。结论：NCTD能增强IL-15-PBMC对白血病KG1a细胞的杀伤作用,可能与抑制细胞增殖、阻滞细胞周期于G2/M期有关。     

IL-12诱导肝癌微环境中NK细胞活化发挥抗肿瘤作用

目的:探讨IL-12通过诱导肝癌微环境中NK细胞活化诱导抗肿瘤的效果。方法:NOD/SCID小鼠皮下注射肝癌HepG2细胞,成瘤后腹腔注射人外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL),建立HCC-huPBL荷瘤小鼠模型。将荷瘤小鼠随机分为IL-12组和PBS对照组,瘤内注射IL-12后,观测荷瘤小鼠瘤体积、体重、一般状况的变化,IL-12瘤内注射后第30天ELISA法检测荷瘤小鼠肝癌组织微环境中IL-12、INF-γ含量以及小鼠外周血中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate amin-otransferase,AST)及谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)的含量,免疫组化法检测IL-12治疗后肝癌微环境中NK细胞活化性受体NKG2D、NKp44、NKp30、NKp46,以及抑制性受体KIR2DL3/CD158b、NKG2A/CD159a的表达。结果:第12、18、24、30天IL-12组荷瘤小鼠瘤体积均小于PBS组[(594.47±205.51)vs(832.10±187.49)mm3,(963.61±427.95)vs(1 350.87±468.23)mm3,(1 285.02±368.56)vs(1 975.49±655.54)mm3,(1 903.64±471.34)vs(2 568.77±784.68)mm3,均P<0.05]。IL-12组小鼠肝癌组织中IL-12与INF-γ的表达水平均明显高于PBS组[(2.96±1.02)vs(1.35±0.75)pg/ml,(12.26±4.11)vs(7.81±3.46)pg/ml,均P<0.05]。IL-12组与PBS组相比,血清ALT水平第7天显著升高[(73.85±10.71)vs(41.73±13.13)U/L;P<0.05],第14天达到高峰。IL-12组治疗后肝癌组织中NK细胞活化性受体NKG2D、NKp44、NKp30的表达较PBS组高(P<0.05),NKp46的表达未见明显升高;而NK细胞抑制性受体CD158b和CD159a表达较PBS组低(P<0.05)。结论:肝癌模型小鼠瘤体内IL-12注射可上调瘤组织内NK细胞活化性受体、IL-12、IFN-γ的表达,下调抑制性受体的表达,从而抑制小鼠模型中肿瘤的生长。     

去甲斑蝥素联合IL-12、IL-15处理增强PBMC对Raja细胞的杀伤效应【创新点评：中药抗癌药物去甲斑蝥素增强PBMC对淋巴瘤的杀伤－郑胡镛】

目的:探讨细胞因子IL-2、IL-15激活的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)对去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)处理后的人Burkitt淋巴瘤Raji细胞的杀伤效应及其可能机制.方法:锥虫蓝拒染法检测NCTD对Raji细胞和PBMC细胞增殖的影响;LDH释放法检测IL-2、IL-15激活后的PBMC对K562细胞和Raji细胞的杀伤;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测IL-2、IL-15诱导后PBMC表面NKG2D的表达,以及NCTD作用前后Raji细胞表面NKG2D配体(MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3)的表达.结果:NCTD抑制Raji细胞的增殖,具有剂量、时间依赖性(P＜0.05),但对PBMC增殖无影响(P＞0.05).在效靶比为10∶1、20∶1时,IL-2、IL-15激活的PBMC对K562细胞的杀伤率较未激活的PBMC明显增高[(52.42±3.89)％vs (15.82±5.12)％,(79.55±9.22)％vs(27.67±3.66)％,P＜0.05];PBMC对NCTD处理后Raji细胞杀伤率较未经NCTD处理的Raji细胞明显增高[(23.63±6.20)％vs (5.04±1.25)％,(41.80±4.09)％ vs (8.59±2.19)％;P＜0.05],且IL-2、IL-15激活的PBMC对NCTD处理后Raji细胞的杀伤率较NCTD处理前明显提高[(38.97±2.76)％ vs(13.19±3.67)％,(63.09 ±7.30)％ vs(19.89 ±4.15)％;P＜0.05].激活后PBMC表面NKG2D表达率升高[(44.91±5.85)％vs (25.28±7.69)％,P＜0.05].NCTD作用后Raji细胞表面NKG2D的配体ULBP2表达显著升高[(12.69±3.99)％vs(1.03 ±0.42)％,P＜0.05],而其他配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP3的表达无明显变化(P＞0.05).结论:NCTD联合细胞因子IL-2、IL-15处理能增强PBMC对Raji细胞的杀伤效应,其机制与NCTD上调Raji细胞表面ULBP2表达和细胞因子上调PBMC表面NKG2D表达有关.     

体外扩增对食管癌患者NK细胞表面受体表达及其抑瘤活性的影响

目的： 探讨食管癌患者NK细胞扩增前后的受体表达及其对肿瘤细胞的杀伤。 方法： 收集福建省肿瘤医院食管癌患者外周血20例,健康供者（对照组）外周血10例。NK细胞培养采用细胞因子（IL-2+IL-12+IL-15+IL-18）组合,流式细胞术检测NK细胞免疫表型及其受体（CD56+、CD69+、NKG2D、NKp30、NKp44、NKp46、CD158b、CD159a）的表达,LDH法检测不同效靶比时NK细胞对多种肿瘤细胞株（K562、Raji、Eca-109、TE-1）的杀伤作用。 结果： 与对照组相比,食管癌患者外周血CD3+、CD4+细胞比例以及CD4+/CD8+T细胞比值明显降低（P<0.05）,NK细胞（CD3-CD56+）及调节性T细胞（Treg）比例明显升高（P<0.05）。经细胞因子IL-2+IL-12+IL-15+IL-18组合定向扩增20 d后,食管癌患者NK细胞比例高达90%以上,NK细胞数扩增达1 000倍以上（P<0.01）;而CD3+T细胞、CD4+、CD8+T细胞、CD19+B细胞、Treg细胞及单核巨噬细胞（CD14+）比例均显著降低（P<0.01）,且食管癌患者与对照组之间无统计学差异（P>0.05）。经细胞因子体外培养20 d后,NK细胞表面CD69及活化性受体（NKG2D、NKp30、NKp44、NKp46）均明显上调,而抑制性受体（CD158b、CD159a）均明显下调（P<0.05）。培养20 d后,食管癌患者NK细胞对肿瘤细胞K562、Raji、Eca-109、TE-1的杀伤能力均显著高于培养前\[（69.2±5.1）% vs （42.3±3.0）%,（44.6±3.2）% vs （21.1±2.0）%,（69.7±3.9）% vs （50.3±35）%,（67.1±4.5）% vs （41.2±3.3）%;均P<0.01\]。 结论: 细胞因子IL-2+IL-12+IL-15+IL-18组合能有效扩增外周血NK细胞并上调其活并性受体的表达、下调抑制性受体的表达,其数量及功能均能满足临床治疗需要。     

IL-4, IL-17 and CD163 Immunoexpression and IL-6 Gene Polymorphism in Chronic Hepatitis C Patients and Associated Hepatocellular Carcinoma

Objective: To assess the expression of IL-4, IL-17 and CD-163 as well as study of IL6-572 C/G gene polymorphism in chronic HCV and HCC on top of HCV. Methods: Sixty HCC specimens and 60 adjacent hepatic tissue with HCV of different grades of necro-inflammation and different stages of fibrosis. In addition to 55 HCV, 60 HCC and 50 healthy venous blood samples for evaluation of IL6-572 C/G gene polymorphism. Results: high expression of IL-4, IL-17 and CD163 in higher grades of activity, late stages of fibrosis and higher degrees of steatosis of HCV. IL-4 and CD163 showed higher expression in advanced grades of HCC, while IL-17 more expressed in lower grades. No significant difference in IL6-572 C/G gene polymorphism among studied groups regarding G/C, G/G, C/C frequencies or G and C allele’s frequencies. Conclusion: IL-4, IL-17 and CD163 were associated with HCV severity. Their expression in HCC suggests their important role in HCC development. Blocking of these proteins may be a good target to control inflammation in HCV and can hinder progression to cirrhosis then to HCC. On the other hand, IL6-572 promoter gene polymorphism is neither associated with HCV infection nor with HCC development and its progression.     

Serum IL-8 and IL-12 levels in breast cancer

Interleukins (ILs) are known to play a fundamental role in cancer. We investigated the serum levels of IL-8 and IL-12, in breast cancer patients, and their relationship with the prognostic parameters and therapy. Fortyeight patients with pathologically verified breast carcinoma and 21 healthy controls were enrolled into the study. Serum samples were obtained at baseline and after two cycles of chemotherapy. Serum IL-8 and IL-12 levels were determined using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). There was no significant difference in the baseline serum IL-8 and IL-12 levels between breast cancer patients and healthy controls (p = 0.365 andp = 0.871, respectively), no significant correlation between the prognostic parameters and the serum IL-8, IL-12 levels. However, in the subgroup consisting of metastatic breast cancer patients, baseline serum IL-8 levels were significantly higher compared with non-metastatic disease (p = 0.047). Anthracycline-based chemotherapy and the addition of taxane did not change the levels of both serum IL-8 and IL-12. Serum IL-8 level may be useful in determining metastatic breast cancer. Larger studies are needed to confirm this finding.     

IL-2、IL-15增强免疫编辑后NK细胞NKG2D的表达及其对鼻咽癌CNE2细胞的杀伤活性

目的:观察IL-2、IL-15对免疫编辑后NK细胞NKG2D的表达及其对鼻咽癌CNE2细胞杀伤活性的影响.方法:抗CD56磁珠纯化NK细胞后分为4组:(1)编辑前NK细胞组:加入1130 U/ml IL-2;(2)单纯编辑组:NK细胞与CNE2细胞10:1混合,加入100U/ml IL-2;(3)IL-2再培养组:纯化编辑后的NK细胞,加入1 000 U/ml IL-2;(4)IL-15再培养组:纯化编辑后的NK细胞,加入10 ng/ml IL-15.24 h后,流式细胞仪检测各组NK细胞表面NKG2D的表达;LDH释放测定法测定效靶比20:1时各组NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性.结果:编辑前NK细胞组、单纯编辑组、IL-2再培养组、IL-15再培养组NK细胞表面NKG2D的表达率分别为(97.63±0.83)%、(53.50±1.25)%、(94.47±1.00)%、(98.07±0.21)%.IL-2、IL-15再培养组NK细胞NKG2D的表达分别比单纯编辑组有显著的增加(P＜0.01),该4组NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性分别为(35.90±3.27)%、(4.70±2.30)%、(31.70±3.56)%、(40.18±2.94)%,IL-2再培养组、IL-15再培养组明显提高编辑后NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性(P＜0.01),IL-15的作用强于IL-2.结论:高剂量IL-2、IL-15可以上调免疫编辑后NK细胞表面NKG2D的表达,恢复编辑后NK细胞对鼻咽癌细胞CNE2的杀伤活性,IL-15的作用强于IL-2.     

血清IL-6及IL-10在非霍奇金淋巴瘤患者血清中的表达及临床意义

目的:探讨细胞白介素-6（IL-6）和白介素-10（IL-10）在非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin's lymphoma,NHL）患者中的表达水平及其与患者临床特征、预后的关系。方法:收集我院2013年06月至2016年06月初治的NHL患者278例,回顾性分析IL-6和IL-10的水平。结果:NHL患者外周血IL-6及IL-10浓度明显高于对照组。IL-6 与 IL-10 在不同临床特征的NHL中进行分析,可发现IL-6与IL-10浓度与性别及年龄无明显相关性,但当疾病分期、IPI评分、CRP、LDH、血清β2微球蛋白升高,出现B症状,骨髓侵犯时,IL-6 与 IL-10水平明显升高（P＜0.001）。根据疗效分组,疗效较好的患者起病初期IL-6 与 IL-10水平较低,而疗效差的患者起病时IL-6 与 IL-10水平较高。患者缓解后指标可下降或恢复至正常,如未缓解,IL-6 与 IL-10指标不变或者升高。结论:NHL患者IL-6 与IL-10 水平升高是患者临床症状较重及预后较差的预测指标。     

细胞因子IL-2和IL-6对胰腺癌细胞表达VEGF-D的调节

目的探讨细胞因子白细胞介素2（IL-2）和白细胞介素6（IL-6）对胰腺癌细胞表达VEGF-D的调节。方法以细胞因子IL-2或IL-6分别刺激胰腺癌细胞株SW1990和BXPC-3后用逆转录 聚合酶链式反应技术（RT-PCR）分析其VEGF-D基因的表达。结果IL-2使细胞株SW1990和BXPC-3产生VEGF-D mRNA减少;IL 6使细胞株SW1990产生VEGF-D mRNA增加,但对细胞株BXPC-3产生VEGF-D mRNA无明显影响。结论IL-2抑制胰腺癌细胞VEGF-D mRNA的表达,从而抑制胰腺癌淋巴结转移;IL-6促进某些胰腺癌细胞VEGF-D mRNA的表达,但对胰腺癌细胞生物学特性的影响有待于进一步深入研究。     

IL-2和IL-10在急性髓性白血病患儿血清中的水平及其临床意义

目的 观察急性髓性白血病患儿血清中白细胞介素(IL)-2和IL-10的水平及其临床意义.方法 纳入急性髓性白血病患儿80例,其中初发27例、缓解25例、复发28例.同期纳入体检健康者50例患儿为对照组.应用酶联免疫吸附法(Elisa)检测血清中IL-2和IL-10水平.结果 与对照组比较,急性髓性白血病患儿血清中IL-2水平显著降低,IL-10水平显著升高(P<0.01).血清中IL-2和IL-10水平与急性髓性白血病患儿的年龄、性别、骨髓中白血病细胞比例、FAB分型无显著相关性(P>0.05).急性髓性白血病初发和复发组患儿血清中IL-2和IL-10水平与缓解组比较,有统计学差异(P<0.01).急性髓性白血病初发与复发患儿血清中IL-2和IL-10水平比较,无统计学意义(P>0.05).结论 急性髓性白血病患儿血清中IL-2和IL-10水平变化明显,与该病的预后联系密切.     

Simultaneous Increase in Serum Levels of IL-37 and IL-18 Binding Protein In Low-Grade and High-Grade Brain Tumors

Background: IL-18binding protein (IL-18BP) might play a role in tumor escape from immune surveillance through interacting with IL-37. Such interactions modulate the antitumor activity of IL-18 and affect regulatory T cell (Treg) function. However, the biological roles of IL-37 and IL-18BP have not yet been explored in brain tumors. This study aimed to investigate serum levels of IL-37 and IL-18BP in high-grade and low-grade brain tumors and determine their associations with pathological characteristics of the patients. Subjects and methods: This case-control study consisted of 60 patients with brain tumors (40 low-grade and 20 high-grade) and 30 healthy controls. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits were used to measure the levels of IL-37 and IL-18BP in serum. Results: Our results indicated that serum levels of IL-37 and IL-18BP were significantly higher in patients with brain tumors (109.02, 426.37 pg/mL), high-grade (104.44, 428.87 pg/mL), and low-grade (113.88, 426.37 pg/mL) tumors in compared to healthy controls (35.03, 362.00 pg/mL), (P<0.05). Interestingly, our results revealed a significant positive correlation between IL-37 and IL-18BP serum levels in brain tumors (n=60, R=0.42, P=0.001). Our study also showed that serum levels of IL-37 and IL-18BP in glioblastoma grade IV were approximately similar to those in astrocytoma grade II, meningioma type I, and pituitary adenoma. Furthermore, no significant differences were found in serum levels of IL-37 and IL-18BP between patients with low-grade and high-grade tumors (P=0.24 and P=0.61, respectively). Conclusion: The simultaneous increase in IL-37 and IL-18BP serum levels and their positive correlation may facilitate disease progression in low-grade and high-grade brain tumors by inhibiting antitumor immune responses.     

Trends of IL-6 and IL-8 levels in patients with recurrent breast cancer: preliminary report

BACKGROUND: We reported that IL-6 and IL-8 levels at the beginning of treatment are predictive indicators of response to therapy and prognosis of patients with recurrent breast cancer. The aim of this study was to investigate the trend of IL-6 and IL-8 levels in heavily pretreated patients with recurrent breast cancer. METHODS: Cytokine level trends in 12 patients heavily pretreated with anthracyclines were studied. Patients were divided into two groups according to the objective response. There were 5 partial response (PR)/no change (NC), and 7 progressive disease (PD) patients. Blood was taken every four weeks. IL-6 was measured by chemiluminescent enzyme immunoassay. IL-8 was measured by ELISA. RESULTS: The pretreatment level of IL-6 in the PR/NC group (11.0+/-2.1 pg/ml) was significantly lower than that (15.3+/-2.7 pg/ml) in the PD group. However, there was no difference in IL-8 level between the PR/NC group (12.5+/-5.5 pg/ml) and the PD group (11.5+/-1.1 pg/ml). IL-6 levels in the PR/NC group were maintained within normal levels or decreased to within normal levels after treatment, while levels of IL-6 in the PD group gradually increased until the time of patient death. A decrease in IL-8 level after treatment was observed in only one patient in the PR/NC group. Mild increase of IL-8 levels was observed in the PD group. CONCLUSION: Continuous elevation of IL-6 levels indicates poor prognosis in heavily pretreated patients with recurrent breast cancer. Combination therapy including agents that reduce IL-6 levels will be a new strategy for aggressively treating recurrent breast cancer.     

IL-27基因多态性和血清 IL-27 p28水平与骨肉瘤风险相关性分析

目的：评估IL-27基因多态性和血清IL-27p28水平与骨肉瘤风险的相关性。方法对比研究160例骨肉瘤患者（研究组）和250例健康患者（对照组）。 IL-27基因-964 A／G，2905 T／G，和4730 T／C多态性采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性测定。酶联免疫吸附试验检测血清中IL-27p28的水平。结果与对照组相比，骨肉瘤患者血清IL-27p28水平显著降低（P＜0．01）。Ⅲ～Ⅳ期骨肉瘤患者血清IL-27p28水平低于Ⅰ～Ⅱ期患者（P＜0．05）。同样，转移患者的血清IL-27p28水平低于非转移患者（ P＜0．05）。 IL-27-964 A／G，2905 T／G，4730 T／C的基因型和等位基因频率与骨肉瘤风险无相关性（ P＞0．05）。分层分析也未能显示-964 A／G，2905 T／G，和4730 T／C多态性与临床分期和骨肉瘤的转移存在相关性（P＞0．05）。结论血清IL-27p28低水平可能与骨肉瘤进展有关，但IL-27基因-964 A／G，2905 T／G，和4730 T／C多态性和它们的单倍型不与骨肉瘤的风险相关联。     

CD62p、IL-6、IL-8的表达与鼻咽癌分期及预后关系的探讨

目的: 探讨不同期别的鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者血清中CD62p、IL-6、IL-8的表达与肿瘤分期及预后的关系.方法: 采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测83例病理确诊为NPC的各期放疗前患者血清与17例正常人血清中CD62p、IL-6、IL-8的表达,分析各指标的表达与肿瘤分期及预后的关系.结果: CD62p、IL-6、IL-83个指标在NPC患者血清中的表达明显高于正常人群(P<0.01);与患者的年龄和性别无关(P>0.05);与肿瘤的TNM分期及肿瘤临床分期呈正相关(P<0.05);且CD62p、IL-6、IL-8 3个指标间存在正相关性(P<0.05).结论: CD62p、IL-6、IL-83个指标在各期鼻咽癌患者血清中高表达与鼻咽癌的TNM分期及肿瘤临床分期呈正相关,可以作为NPC肿瘤转移的前瞻性指标.