NO与cGMP协同降低细胞内钙离子的释放从而使阴茎勃起

阴茎海绵体平滑肌细胞（SMCs）强直性收缩使阴茎处于疲软状态，NO可使SMCs舒张，从而使阴茎勃起。Williams等研究了SMCs内NO受肾上腺素能刺激后的作用。从小鼠和人类分离新鲜的SMCs，利用Fura-2荧光标记法，测量细胞内钙离子浓度（[Ca^2＋]（i））。结果显示，不论细胞外是否存在钙离子，苯肾上腺素（PE）均能短暂性提高细胞内钙离子浓度，表明细胞内钙离子库有释放活动。     

粉防己碱舒张离体新西兰白兔阴茎海绵体平滑肌的机制研究

目的观察粉防己碱(tetrandrine,Tet)对阴茎海绵体平滑肌胞内钙释放和胞外钙内流的影响,初步探讨其舒张作用的机制。方法采用离体阴茎海绵体平滑肌肌条张力记录法,观察Tet对去氧肾上腺素(phenylephrine,PE)和氯化钾(KCI)诱导收缩的肌条的影响；采用无Ca~(2 )-复Ca~(2 )实验法,观察Tet对PE诱导的依赖细胞内钙和细胞外钙的肌条收缩反应的影响。结果Tet对PE或kcl诱导的肌条收缩均具有浓度依赖性的抑制作用。100μmol/L Tet可抑制20μmol/L PE引起的依赖细胞内钙和细胞外钙的肌条收缩(P＜0．05)；结论Tet可通过阻滞电压依赖性钙通道、受体依赖性钙通道和抑制细胞内钙库释放,从而介导其对海绵体平滑肌的舒张作用。     

川芎嗪对离体兔阴茎海绵体平滑肌条收缩的影响

目的 初步探讨川芎嗪(Ligustrazine)对离体兔阴茎海绵体平滑肌条的舒张作用及其机制。方法 离体家兔阴茎海绵体平滑肌实验方法,观察川芎嗪对阴茎海绵体平滑肌的舒张效应,测定去氧肾上腺素(PE)和氯化钾(Ka)的浓度-效应曲线。结果 川芎嗪浓度依赖性地舒张PE诱发的阴茎海绵体平滑肌收缩作用,最大舒张效应为(74.1±6.2)％[对照组为(21.9±5.6)％,P<0.01]。不同浓度的川芎嗪可使PE和KCL的浓度-效应曲线右移,最大收缩反应降低,高浓度(0.8g/L)时抑制收缩作用更显著。结论 川芎嗪有明显的舒张阴茎海绵体平滑肌作用,并呈剂量依赖性。川芎嗪舒张阴茎海绵体平滑肌机制可能与抑制细胞外钙内流有关。     

RhoA/Rho激酶在阴茎勃起中的作用

阴茎海绵体血管的张力受血管收缩和舒张因子的调控。通常认为NO舒张阴茎小动脉和海绵体平滑肌在阴茎勃起中具有重要作用。最近研究发现,RhoA/Rho激酶参与收缩因子去甲肾上腺素(NE)和内皮素1(ET-1)介导的阴茎小动脉和海绵体平滑肌收缩过程,与NO介导的海绵体平滑肌舒张过程有相互作用,NO的勃起效应可能与阻断RhoA/Rho激酶介导的阴茎海绵体血管平滑肌收缩有关。RhoA/Rho激酶抑制剂在ED的治疗中有广阔的应用前景。     

粉防己碱(Tet)对兔子阴茎海绵体平滑肌细胞质中自由钙离子浓度的影响(英文)

目的:探讨粉防己碱(tetrandrine,Tet)松弛阴茎海绵体平滑肌的作用机制。方法:体外培养新西兰白兔阴茎海绵体平滑肌细胞,经钙荧光指示剂 Fluo-2/AM 负载后,用荧光离子数字成像系统观察 Tet 对平滑肌细胞内[Ca~(2 )]_i 的影响。结果:Tet(1,10,100μmol/L)对平滑肌细胞内静息[Ca~(2 )]_i无明显影响(P>0.05)。当细胞外钙离子浓度为2.5 mmol/L 时,Tet(1μmol/L,10 μmol/L,100 μmol/L)抑制了高钾和去氧肾上腺素(PE)导致的细胞内[Ca~(2 )]_i 升高(P<0.05),这种抑制作用具有浓度依赖性。在无细胞外钙时,1 μmol/L和10μmol/L Tet 对 PE 引起的细胞内[Ca~(2 )]_i 升高无明显影响(P>0.05);而100 μmol/L Tet 能明显抑制 PE 引起的细胞内[Ca~(2 )]_i 升高(P<0.05)。结论:Tet 通过阻滞电压依赖性钙通道、α_1受体依赖性钙通道和抑制细胞内钙库释放,降低阴茎海绵体平滑肌细胞内[Ca~(2 )]_i 水平,这是 Tet 松弛阴茎海绵体平滑肌的作用机制之一。     

粉防己碱对新西兰白兔阴茎海绵体平滑肌细胞内游离钙离子浓度的影响

目的探讨粉防己碱(Tet)松弛阴茎海绵体平滑肌的作用机制。方法体外培养的第3～4代新西兰白兔阴茎海绵体平滑肌细胞,经钙荧光指示剂Fluo-2/AM负载后,用荧光离子数字成像系统观察Tet对平滑肌细胞内[Ca~(2 )]i的影响。结果Tet对平滑肌细胞内静息[Ca~(2 )]i无明显影响(P>0.05)。在细胞外钙浓度为2.5 mmol/L时,1、10和100μmol/LTet对高钾和去氧肾上腺素(PE)引起的细胞内[ca~(2 )]i升高有浓度依赖性地抑制作用。对40 mmol/L KCl引起的细胞内[Ca~(2 )]i升高的抑制率分别为22.0%、41.0%和73.0%(P<0.05)。对10μmol/L PE引起的细胞内[ca~(2 )]i升高的抑制率分别为15.0%、26.4%和46.6%(P<0.05)。在无细胞外钙时,1μmol/L和10μmol/L Tet对PE引起的细胞内[Ca~(2 )]i升高,无明显影响(P>0.05);而100μmol/L Tet能明显抑制PE引起的细胞内[ca~(2 )]i升高,抑制率为28.2%(P<0.05)。结论Tet可能通过阻滞电压依赖性钙通道、α1受体依赖性钙通道和抑制细胞内钙库释放,降低阴茎海绵体平滑肌细胞内[Ca~(2 )]i水平,这是Tet松弛阴茎海绵体平滑肌的作用机制之一。     

硝苯吡啶体外对家兔阴茎海绵体平滑肌的舒张作用

阴茎海绵体平滑肌可表达L型电压依赖性钙通道，钙拮抗剂通过选择性作用于钙通道，阻滞细胞的外钙内流而舒张阴茎海绵体平滑肌，在犬阴茎海绵体内注射维拉帕米能诱发阴茎勃起。本实验旨在观察硝苯吡啶（NIF）对高K^＋诱发的离体家兔阴茎海绵体平滑肌条收缩的影响，并探讨其舒张效应和机制。     

缺血性阴茎异常勃起诊断与治疗进展

阴茎疲软是神经内分泌调节下阴茎海绵体平滑肌通过一系列分子生物学变化引起的阴茎海绵体血液动力学变化。阴茎疲软主要通过交感-肾上腺素能神经兴奋性增加,引起阴茎海绵体动脉以及海绵体窦平滑肌收缩,降低阴茎海绵体动脉血液灌注量,静脉     

维拉帕米对离体家兔阴茎海绵体平滑肌舒张作用的实验研究

目的　初步探讨维拉帕米 (VP)对离体兔阴茎海绵体平滑肌的舒张作用及其机制。方法　离体家兔阴茎海绵体平滑肌条实验方法 ,观察VP对阴茎海绵体平滑肌的舒张效应。结果　VP可舒张去氧肾上腺素 (PE)诱导的阴茎海绵体平滑肌收缩作用 ,最大舒张效应为 (4 6 .3± 2 .1) % (P <0 .0 1) ,且呈浓度依赖性。 10 -6mol·L-1,10 -5mol·L-1和 10 -4mol·L-1VP均可使PE引起的浓度 -效应曲线右移 ,最大收缩反应降低 ,10 -4mol·L-1VP拮抗作用更显著。结论　VP有明显的舒张阴茎海绵体平滑肌作用 ,并呈浓度依赖性。     

反义寡脱氧核苷酸对人阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5的抑制作用

目的　观察反义寡脱氧核苷酸对人阴茎海绵体平滑肌细胞 5型磷酸二酯酶 (PDE5 )的抑制作用 ,为阴茎勃起功能障碍的基因治疗提供理论和实验依据。　方法　将PDE5基因反义寡脱氧核苷酸与DOTAP转染人阴茎海绵体平滑肌原代细胞 ,Western印迹法检测转染后不同时间 (1～ 4 8h)海绵体平滑肌细胞内PDE5的浓度变化 ,观察反义寡脱氧核苷酸对平滑肌细胞内PDE5的作用。　结果　转染后 1～ 6h ,反义组人阴茎海绵体平滑肌原代细胞内PDE5表达量较对照组显著降低 (P=0 .0 0 0～ 0 .0 14 ) ;转染后 12～ 4 8h ,三组细胞内PDE5的表达比较 ,差别无显著性意义 (P =0 .189～0 .96 2 )。　结论　PDE5基因反义寡脱氧核苷酸对人阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5有抑制作用。     

腺病毒介导的激活大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞中NO／cGMP通路的实验研究

目的：探讨靶向大鼠iNOS基因的shRNA重组腺病毒载体对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞iN0s基因的激活作用,为阴茎勃起功能障碍（ED）的基因治疗提供实验依据。方法：将前期构建的重组腺病毒AdS—iN—OSrshRNA-EGFP（AdU6／shiNOS）和对照病毒AdU6／shControl,分别转染大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞,分别在不同病毒MOI（25,50,75）值下72小时后采样检测。采用realtimeRT-PCR半定量检测AdU6／shiNOS对细胞iNOS基因mRNA表达影响;Western—blot法检测海绵体平滑肌细胞iNOS蛋白表达变化。然后培养基中加L—Arg（10mmol／L）,用酶联免疫法检测病毒转染72小时后海绵体平滑肌细胞内cGMP的浓度变化,记录AdU6／shiNOS对平滑肌细胞内cGMP的影响。结果：AdU6／shiNOS转染大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞72小时后,和空白对照组、阴性对照组相比iN0s基因在mRNA和蛋白表达水平均显著上调（P〈O．05）,呈剂量依赖性,MOI一75时RNAa效果最好。而且转染72小时后,实验组原代平滑肌细胞内cGMP水平显著高于对照组及空白组（Pd0．05）。结论：利用腺病毒介导的RNAa技术,提高海绵体平滑肌细胞iN0s基因表达获得成功,可以增加阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP水平,激活了NO／cGMP通路,这为勃起功能障碍的基因治疗研究开辟了新的方向。     

离子通道在阴茎海绵体平滑肌紧张性调节中的作用

阴茎海绵体平滑肌舒张或收缩的调节 ,即海绵体平滑肌紧张性的生理学分别决定阴茎的勃起或疲软状态。众多的证据提示与其他血管组织一样 ,钾通道、钙通道是阴茎海绵体平滑肌紧张性的主要调节物质。在培养的海绵体平滑肌细胞和游离海绵体组织平滑肌条研究显示 :参与阴茎勃起的神经递质大多通过对平滑肌细胞离子通道及离子跨膜流动的作用而调节海绵体平滑肌紧张性。     

西地那非和咯利普兰对离体人和猴海绵体肾上腺素反应的影响

为评估和比较磷酸二酯酶抑制剂西地那非和咯利普兰对人与猴海绵体平滑肌肾上腺素收缩反应的影响。Lau LC等人进行了一项研究。其中人的阴茎从变性手术的患者中取得。人和猴离体海绵体条浸泡于等张溶液中。测定药物对预收缩的人与猴海绵体和神经原性收缩的影响。结果显示，西地那非和咯利普兰都能产生人和猴子海绵体浓度依赖性的舒张。猴海绵体中，硝酸甘油，异丙肾上腺素和西地那非IC（50）（半数最大剂量）值，     

番泻甙对小肠平滑肌细胞收缩功能的影响

目的:探讨大黄的主要有效成分番泻甙对小肠平滑肌细胞收缩的影响。方法:酶解法获取大鼠小肠环行平滑肌细胞,图像分析仪检测不同浓度的番泻甙对小肠环行平滑肌细胞的收缩作用,激光扫描共聚焦显微镜测定番泻甙对细胞内游离钙离子浓度[Ca2 ]i的影响,然后测定番泻甙对Ach刺激的小肠环行平滑肌细胞收缩反应和细胞内[Ca2 ]i变化的影响作用,通过免疫荧光实验检测番泻甙对RhoA的活化和空间转位的影响。结果:不同浓度的番泻甙对小肠环行平滑肌细胞没有直接收缩作用,对环行平滑肌细胞的[Ca2 ]i也没有升高作用,但经番泻甙作用后,Ach引起的小肠环行平滑肌细胞的收缩剂量-反应曲线明显左移(P<0.05)。番泻甙可以促使RhoA的活化,从胞浆转位至胞膜,提高平滑肌细胞收缩的钙敏感性。结论:番泻甙没有直接收缩小肠平滑肌的作用,但可通过活化RhoA,提高小肠环行平滑肌的钙敏感性,与其他激动剂协同增强小肠的运动功能。     

组织激肽释放酶对大鼠阴茎海绵体平滑肌cAMP 和cGMP影响的研究

目的探讨组织激肽释放酶对大鼠阴茎海绵体平滑肌cAMP和cGMP的影响，以初步阐明其舒张阴茎海绵体平滑肌的机制。方法采用放射免疫法，测定组织激肽释放酶对培养的大鼠阴茎海绵体平滑肌(去内皮组)和阴茎海绵体平滑肌组织(未去内皮组)cAMP和cGMP的影响，并以硝普钠为阳性对照，以赋形剂为阴性对照。结果100mu组织激肽释放酶使阴茎海绵体平滑肌组织内cAMP和cGMP浓度分别增高2．13倍和2．54倍，而对培养的阴茎海绵体平滑肌cAMP和cGMP没有明显作用。结论组织激肽释放酶能内皮依赖性地提高阴茎海绵体平滑肌细胞内cAMP和cGMP的水平，发挥舒张阴茎海绵体平滑肌的效应。     

PDE5基因反义寡脱氧核苷酸对人阴茎海绵体平滑肌细胞cNMP的影响

目的 :观察PDE5基因反义寡脱氧核苷酸对人阴茎海绵体平滑肌细胞内cAMP和cGMP的影响 ,为阴茎勃起功能障碍的基因治疗提供理论和实验依据。　方法 :将PDE5基因反义寡脱氧核苷酸 (含第 1外显子部分序列 )与脂质转染试剂DOTAP共同转染人阴茎海绵体平滑肌原代细胞 ,以酶联免疫法分别检测转染后不同时间 (1～ 4 8h)海绵体平滑肌细胞内cAMP和cGMP的浓度变化 ,观察反义寡脱氧核苷酸对平滑肌细胞内cNMP的影响。　结果 :转染后 ,反义实验组平滑肌原代细胞内cGMP水平 (1～ 6h)显著高于对照组 (P <0 .0 1)。　结论 :PDE5基因反义寡脱氧核苷酸可以增加人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP水平 ,本研究有助于了解PDE5基因与cNMP在阴茎勃起中的作用 ,并为阴茎勃起功能障碍的基因治疗提供理论和实验基础。     

靶向人PDESA3基因的shRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP的影响

目的：观察腺病毒载体介导特异性短发夹RNA（shRNA）对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷（cGMP）的影响,为应用RNA干扰（RNAi）技术治疗阴茎勃起功能障碍（ED）提供实验依据。方法：成功构建携带3条针对人PDESA3基因位点特异性shRNA的重组腺病毒（rAd5-shRNA-PDE5A3）,并设立阴性对照病毒组和空白对照组,分别转染人阴茎海绵体平滑肌细胞。以放射免疫法分别检测转染重组腺病毒24、48、72h后细胞内cGMP浓度变化,观察rAd5-shRNA-PDE5A3对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果：实验组rA（15-shRNA-PDE5A3转染人阴茎海绵体平滑肌细胞后胞内cGMP水平显著高于阴性对照组和空白对照组,在转染后72h最为显著。结论：3条特异性针对人PDE5A3mRNA靶位点的shRNA可有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,增强对PDE5基因的阻抑效果。     

川芎嗪舒张离体兔阴茎海绵体平滑肌的作用及其机制的初步研究

目的 :探讨川芎嗪 (Chuanxiongzine ,Ligustrazine)对离体兔阴茎海绵体平滑肌条的舒张效应及其作用机制。　方法 :采用离体家兔阴茎海绵体肌条张力记录法 ,观察川芎嗪对去氧肾上腺素 (phenylephrine,PE)诱导收缩的阴茎海绵体肌条的舒张作用 ;应用亚硝基左旋精氨酸甲酯 (L NAME)、ODQ预处理和去除内皮 ,分别记录川芎嗪对阴茎海绵体肌的舒张作用。采用放射免疫法测定川芎嗪对阴茎海绵体平滑肌肌条中cGMP和cAMP含量的影响。　结果 :川芎嗪对阴茎海绵体平滑肌具有浓度依赖性舒张作用 ,其EC50 为 1 .5 8× 1 0 -4mol/L ,ODQ可部分抑制川芎嗪对肌条的舒张效应 (P <0 .0 5 ) ,而L NAME预处理和去除内皮对川芎嗪舒张肌条的效应没有影响 (P >0 .0 5 )。川芎嗪处理组阴茎海绵体平滑肌肌条中的cGMP和cAMP含量分别是对照组的 1 .5和 2 .3倍 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。　结论 :川芎嗪对阴茎海绵体平滑肌具有浓度依赖性的舒张效应 ,其舒张作用机制与增加cGMP、cAMP浓度有关     

靶向人PDE5A3基因的shRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP的影响

目的:观察腺病毒载体介导特异性短发夹RNA(shRNA)对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,为应用RNA干扰(RNAi)技术治疗阴茎勃起功能障碍(ED)提供实验依据。方法:成功构建携带3条针对人PDE5A3基因位点特异性shRNA的重组腺病毒(rAd5-shRNA-PDE5A3),并设立阴性对照病毒组和空白对照组,分别转染人阴茎海绵体平滑肌细胞。以放射免疫法分别检测转染重组腺病毒24、48、72h后细胞内cGMP浓度变化,观察rAd5-shRNA-PDE5A3对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果:实验组rAd5-shRNA-PDE5A3转染人阴茎海绵体平滑肌细胞后胞内cGMP水平显著高于阴性对照组和空白对照组,在转染后72h最为显著。结论:3条特异性针对人PDE5A3mRNA靶位点的shRNA可有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,增强对PDE5基因的阻抑效果。     

阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接的研究进展

阴茎海绵体平滑肌的收缩能力在人类阴茎勃起中起重要作用。了解引发、维持和调节阴茎海绵体平滑肌张力的机制是进一步认识、诊断和治疗阴茎勃起功能障碍的前提。尽管如此 ,在生理学上 ,想认识内源性和外源性血管调节剂如何作用于个体阴茎海绵体平滑肌细胞的确切机制 ,以及在成对的阴茎海绵体中 ,这些信号如何在各个实质细胞中传递的过程仍较困难。本文目的 :①综述目前所了解的阴茎海绵体平滑肌张力在细胞和分子水平的调节机制 ;②综述各种方法在间隙通道研究中的应用