张力负荷状态对膀胱逼尿肌细胞表型及生物力学特性的影响

目的 探讨周期性张力作用下的逼尿肌细胞表型转化与其生物力学特性改变的关系。方法 在特殊的培养皿上分离培养Wistar大鼠膀胱逼尿肌细胞,对其施加周期性牵拉后,分别采用免疫荧光、氚标胸腺嘧啶核苷掺入实验、流式细胞仪等测定逼尿肌细胞表型标志如SM-α-actin、细胞增殖状况等,评价逼尿肌细胞的表型转化状况;利用图像采集及分析系统、微管吸吮技术分别测定单个逼尿肌细胞收缩力及黏弹性,反映张力条件下其生物力学特性的改变。结果 未施加张力组与实验组之间差异显著;周期性牵拉导致逼尿肌细胞出现由“收缩型”向“合成型”的表型转化,总体上表现为actin表达降低且排列趋于紊乱、细胞增殖活跃;功能上出现单细胞收缩力减弱、黏弹性下降。结论 对培养逼尿肌细胞施加周期性张力负荷作用是在细胞水平模拟膀胱出口梗阻的有效方法;逼尿肌细胞表型转化正是其生物力学特性发生改变的结构基础。     

膀胱平滑肌细胞与膀胱脱细胞基质的生物相容性研究

目的研究膀胱平滑肌细胞与膀胱脱细胞基质(BAM)的生物相容性。方法分离培养兔膀胱平滑肌细胞,采用α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)抗体进行鉴定。将以1×10^5个/mL的单细胞悬液均匀接种于制备BAM支架上,通过与单独培养的膀胱平滑肌细胞作对照,绘制两组细胞生长曲线图,对比观察两条生长曲线的差异性。结果第4代兔膀胱平滑肌细胞形态为典型的“长梭样”,免疫荧光显示α-SAM表达阳性。膀胱平滑肌细胞能够在BAM上很好地黏附生长,两组细胞生长曲线基本相似。结论膀胱平滑肌细胞与BAM生物相容性好,可用膀胱平滑肌细胞作为种子细胞,以BAM作为支架材料构建组织工程化尿路移植物。     

tadenan对实验兔膀胱出口部分梗阻所致膀胱功能障碍的治疗作用

目的观察tadenan(太得恩,原名通尿灵)对膀胱出口部分梗阻所致膀胱功能障碍的治疗作用.方法20只新西兰雄性白兔分4组每组5只.A组为正常对照组,B、C、D组为实验组,A组行手术但不造成梗阻,B、C、D组手术造成膀胱出口部分梗阻.术后两周,B组予太得恩100mg*kg-1*d-1口服,C组予花生油(太得恩赋形剂),A、D组不给任何药物.饲养后解剖膀胱,取逼尿肌束标本于不同溶液中行电生理刺激观察其收缩功能,并以电子显微镜观察逼尿肌细胞超微结构.结果太得恩对膀胱出口部分梗阻所致的膀胱容量缩小有明显的保护作用;A组膀胱逼尿肌的收缩性明显优于D组及C组;D组和C组膀胱逼尿肌细胞中内质网明显扩张,线粒体水肿明显;而太得恩对逼尿肌细胞超微结构的病理改变具有保护作用.结论太得恩可保护膀胱逼尿肌收缩功能,对BPH有良好疗效.     

膀胱Cajal间质细胞的研究进展

在胃肠Cajal间质细胞(ICC)发现之后,膀胱上也发现了ICC细胞,膀胱ICC细胞的研究为了解膀胱功能提供了重要的理论基础,同时也成为治疗膀胱相关疾病的新靶点。膀胱ICC细胞具有独特的形态结构,并且存在多种离子通道及表达多种受体蛋白,它们共同构成其起搏功能与信号中转功能的结构基础,其结构异常与兴奋性改变将会引起膀胱兴...     

大隐静脉源性血管平滑肌细胞表型转化的研究进展

血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化是血管重塑的细胞学基础。收缩表型和合成表型VSMCs反映不同的功能,且两者之间可相互转化。笔者就大隐静脉源性VSMCs表型转化的概念及特点、表型标记物、细胞增殖和迁移,以及基质金属蛋白酶及其抑制物、细胞凋亡、表观遗传学与其表型转化的关系等研究进展进行归纳叙述,旨在为寻找防治静脉曲张相关的药物作用靶点提供理论基础。     

肾上腺素能β受体在人膀胱逼尿肌中作用的年龄相关性研究

目的　研究肾上腺素能 β受体与人膀胱逼尿肌功能障碍的年龄相关性。　 方法　采用细胞功能试验、放射性配基结合及RT PCR法检测肾上腺素能 β受体在老年人逼尿肌细胞中的表达情况及对逼尿肌收缩的影响 ,并以青年人的膀胱逼尿肌标本作为对照。　结果　对照组和老年组之间KCl诱导的逼尿肌收缩程度无显著性差异 ;与对照组相比 ,老年组对异丙肾上腺素、BRL37344(选择性β3受体激动剂 )和forskolin(腺苷酸环化酶激活剂 )的反应性分别下降了 1 5 0 %、1 7 6 %和 1 2 6 % ,异丙肾上腺素和BRL37344的pD2 ( lgEC50 )值也显著降低 ;随年龄增加逼尿肌细胞的肾上腺素能 β受体的最大结合部位显著下降 ,但平衡解离常数却无明显差别。　结论　老年人膀胱平滑肌存在对肾上腺素能 β受体的反应性下降 ,这可能是造成老年人膀胱顺应性减退的原因。受体密度的降低和腺苷酸环化酶活性的下降导致的cAMP合成减少可能是造成肾上腺素能 β受体反应性下降的分子基础     

二氨基乙氧基双苯萘酯对豚鼠膀胱不同区域逼尿肌兴奋性的影响

目的初步探讨二氨基乙氧基双苯萘酯（2-aminoethoxydiphenyl borate,2-APB）对豚鼠膀胱不同区域逼尿肌兴奋性的影响。方法将豚鼠膀胱按解剖标志划分并切取不同部位组织块,制成逼尿肌肌条,置Kreb液孵育,通过离体逼尿肌肌条实验观察2-APB对豚鼠逼尿肌收缩活动频率、幅度变化的影响。结果应用2-APB后膀胱不同区域逼尿肌收缩频率和收缩幅度抑制程度不同,顶部抑制程度最高,体部次之,颈部最弱。结论膀胱逼尿肌不同区域兴奋性不同,可能与不同区域ICCs样细胞的分布差异有关。     

不稳定膀胱发病机制的研究进展

不稳定膀胱(unstahie bladder，USB)是膀胱功能亢进的一种，国际尿控协会(ICS)将其定义为膀胱在充盈期间，自主地或诱发地产生无法主动控制的收缩。在神经性膀胱，不稳定膀胱称为逼尿肌反射亢进，在非神经性膀胱则称为逼尿肌不稳定(DI)。研究USB发病机制是制定治疗措施的理论根据，现将近年来有关其受体机制的研究综述如下。     

阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化和勃起功能障碍的相关研究进展

勃起功能障碍(ED)与阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化密切相关。CCSMC表型转化表现为一种CCSMC由"收缩型"向"合成型"或"增殖型"改变的趋势,α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)、碱性调宁蛋白、肌滑蛋白、肌间线蛋白等可作为收缩型CCSMC分子标志物,波形蛋白、骨桥蛋白、I型胶原蛋白等可作为合成型或增殖型CCSMC分子标志物。目前,以CCSMC表型转化作为切入点进行研究相对较多的是双侧海绵体神经损伤所致的神经源性ED和糖尿病性ED,亦可见动脉性ED、高血压性ED的少许报道;另外,缺氧、血小板源性生长因子、烟草燃烧气体等外界因素直接作用于大鼠或CCSMC时亦会导致CCSMC表型转化。本文将根据目前的研究报道,对CCSMC表型转化与ED相关研究进行系统回顾。     

兔膀胱出口部分梗阻所致逼尿肌超微结构的改变

目的　观察兔膀胱出口部分梗阻后逼尿肌细胞超微结构的改变。　方法　建立雄性兔膀胱出口部分梗阻动物模型 ,利用透射电镜观察其逼尿肌细胞内超微结构 ,应用ImagineTool图像分析软件检测粗面内质网面积和线粒体密度。　结果　梗阻组逼尿肌细胞内单位面积平均 1 1 5 .2 8μm2 ,胞质中粗面内质网面积 (5 .377± 2 .31 8) μm2 ,较对照组的 (0 .476± 0 .31 9) μm2 明显扩大 ;线粒体相对密度为 1 .0 2 7± 0 .0 64 ,较对照组的 0 .830± 0 .0 58明显下降 ,P均 <0 .0 1。　结论　膀胱出口部分梗阻后逼尿肌细胞内质网扩张 ,提示其合成蛋白质功能增强 ,从而引起膀胱壁增厚 ;而线粒体水肿明显 ,密度下降 ,提示逼尿肌细胞能量代谢障碍 ,导致其收缩功能下降     

突变型端粒酶逆转录酶基因转染对膀胱癌细胞T24增殖的影响

目的　探讨转染缺失突变的人端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因对膀胱癌细胞株T2 4端粒酶活性和体外增殖的影响 ,为膀胱肿瘤基因治疗提供新的基因靶点。　方法　采用DNA 磷酸钙共沉淀法 ,将绿色荧光蛋白基因标记的含突变型hTERT真核表达载体 pEGFP hTERT导入人膀胱癌细胞株T2 4中。应用荧光显微镜、端粒酶PCR ELISA法、与衰老相关的 β 半乳糖苷酶染色、软琼脂集落形成试验、裸鼠皮下成瘤试验等方法动态观察转染细胞中端粒酶活性及对细胞恶性表型的影响。　结果　在转染 pEGFP hTERT细胞中可见与突变型hTERT基因融合的绿色荧光蛋白稳定表达于细胞核内 ,转染细胞端粒酶活性降低 ,衰老相关 β 半乳糖苷酶表达增加 ,软琼脂中集落形成减少 ,裸鼠成瘤性降低。与转染空载体组及未转染组细胞相比 ,差别有显著性意义 (P <0 .0 5 )。　结论　转染突变型人端粒酶逆转录酶基因hTERT能抑制膀胱癌细胞T2 4的端粒酶活性 ,促进其衰老并逆转膀胱癌细胞的恶性表型 ,对膀胱肿瘤基因治疗具有潜在的临床应用价值     

冲洗液温度对前列腺术后膀胱无抑制性收缩的影响

目的探讨不同温度冲洗液对前列腺切除术后膀胱无抑制性收缩的影响。方法将 180例前列腺切除术后并发膀胱无抑制性收缩的患者随机分为A、B、C、D、E、F 6组 ,各 30例 ,术后均予持续膀胱冲洗 ,冲洗液温度分别为(2 3.5 0± 1.5 0 )℃、(2 6 .5 0± 1.5 0 )℃、(2 9.5 0± 1.5 0 )℃、(32 .5 0± 1.5 0 )℃、(35 .5 0± 1.5 0 )℃、(38.5 0± 1.5 0 )℃。观察前列腺术后膀胱无抑制性收缩症状并对其评分 ,同时观察记录持续膀胱冲洗的时间。结果E组及F组症状评分显著低于A、B、C、D组 (均P <0 .0 1) ;E组膀胱持续冲洗时间明显短于A、B、C、D、F组 (均P <0 .0 1)。结论前列腺术后持续膀胱冲洗液的温度在 (35 .5 0± 1.5 0 )℃为最佳 ,其可最大限度地减轻前列腺术后膀胱无抑制性收缩 ,减少持续膀胱冲洗的时间。     

糖尿病大鼠膀胱逼尿肌超微结构的改变

目的观察糖尿病大鼠逼尿肌细胞超微结构的改变。方法建立非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)大鼠模型,利用透射电镜观察其逼尿肌细胞内超微结构,应用Imaginetool图像分析软件检测粗面内质网面积和线粒体密度。结果NIDDM组逼尿肌细胞内单位面积平均(115.28μm2)胞质中粗面内质网面积在大鼠被喂养第4、12、24周分别为(4.376±2.321)μm2、(4.794±2.323)μm2、(5.377±2.318)μm2,较对照组的(0.462±0.316)μm2、(0.468±0.314)μm2、(0.476±0.319)μm2明显扩大(p<0.05),线粒体相对密度分别为(0.996±0.063)、(1.019±0.062)、(1.027±0.064),较对照组的(0.827±0.055)、(0.828±0.056)、(0.830±0.058)明显下降(p<0.05)。结论非胰岛素依赖型糖尿病逼尿肌细胞内质网扩张,提示其合成蛋白质功能增强,可能与糖尿病的逼尿肌收缩亢进、不稳定膀胱的情况有关;而线粒体水肿明显,密度下降,提示逼尿肌细胞能量代谢障碍,是引起逼尿肌收缩功能障碍的始动因素。     

TIL与膀胱肿瘤

1986年,Rosenberg等人从肿瘤组织中分离出浸润的淋 巴细胞,将其用IL 2扩增达一定数量后回输给荷瘤小鼠,可 使肿瘤消退,这种淋巴细胞被称为肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltratinglymphocyte,TIL)。10余年来,人们对膀胱肿瘤 中的TIL进行了一系列的研究,现综述如下。 1　膀胱肿瘤中TIL的细胞成分及其含量、分布和活性 Tsujihashi等[1-3]使用消化酶和菲科尔 泛影葡胺将膀胱 肿瘤组织处理后,用间断梯度离心法分离出TIL。然后再使 用流式细胞仪对TIL中细胞成分、含量进行研究,认为TIL 主要由Leu4(T细胞)、Leu10(B细胞)、Leu7(NK…     

膀胱肿瘤无创伤筛选及诊断方法的研究进展

本文将近年来逐渐开展的尿脱落细胞检查、流式细胞计数、BTA检查 (BTAstat,BTAtrak)、NMP2 2、LewisX抗原检查、端粒酶测定 (Telomerase)、DNA微卫星分析等与传统膀胱镜检查相比较 ,对无创伤性检查与膀胱镜检查在膀胱肿瘤的筛选、诊断中的作用加以综述     

膀胱Cajal间质细胞研究近况

近年来,随着有关膀胱Cajal间质细胞(Interstitial cells of Cajal,ICCs)的不断深入研究,有关膀胱ICCs的分布、表面受体、信号传导、多种因素对其影响的多项研究证实:膀胱ICCs为膀胱的起搏细胞,且多种相关疾病:如糖尿病性膀胱病(DCP)、逼尿肌不稳定(DI)、膀胱出口梗阻(BOO)等均与膀胱ICCs异常有关,相关膀胱ICCs的研究为上述疾病的治疗提出新方向,现就膀胱Cajal间质细胞研究近况予以综述.     

膀胱的传入神经通路在膀胱内灌注神经生长因子诱导的膀胱过度活动中的重要性

间质性膀胱炎患者尿液中神经生长因子 (ＮＧＦ)常会升高。作者通过膀胱内灌注ＮＧＦ诱导制成膀胱过度活动症模型 ,评价Ａδ传入神经和Ｃ传入神经的重要性。实验共使用了 2 2只Ｗｉｓｔａｒ和8只Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ成年雌鼠 ,均采用乌拉坦 1.2ｍｇ/ｋｇ皮下注射麻醉。部分雌鼠在ＮＧＦ膀胱灌注前 4ｄ内皮下给予 12 5ｍｇ/ｋｇ的辣椒辣素。对所有雌鼠进行尿动力学检查 ,膀胱测压灌注速度为 0 .0 4ｍｌ/ｍｉｎ ,最大灌注容量为 0 .6 0ｍｌ。测压参数包括诱导出现排尿反射的容量阈值或压力阈值 ,膀胱顺应性 ,膀胱收缩幅度 ,收缩次数及…     

不同大小仿膀胱生理牵张力对膀胱平滑肌细胞生物学特性的影响

目的 探索不同牵张力对膀胱平滑肌细胞形态和增殖活性的影响. 方法 膀胱平滑肌细胞复合硅胶材料后对材料施加5％、10％、15％、20％及25％等不同大小的牵张力,共聚焦显微镜下观察细胞形态变化.CCK-8酶标法检测细胞增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期并计算细胞增殖指数. 结果 在牵张力作用下膀胱平滑肌细胞呈现“收缩型”形态学改变,由无序的星形舒展状态向相对规则的纺锤状细胞形态迁移变化.CCK-8所测对照组吸光值度A为0.471 ±0.027,各牵张组分别增至1.320±0.094(5％组,P＜0.0001)、1.001±0.029(10％组,P＜0.0001)、0.821 ±0.032(15％组,P＜0.0001)、0.621 ±0.032(20％组,P=0.0004)及0.591±0.056(25％组,P=0.0268).与对照组(29.35±0.55)％相比,细胞增殖指数增加到(55.55±1.05)％(5％组,P＜0.0001),(47.70±0.20)％(10％组,P＜0.0001),(35.40 ±2.10)％(15％组,P＜0.0001),与20％组的(34.85±0.55)％(P =0.1372)和25％组的(30.35 ±0.45)％(P =0.5234)比较差异均无统计学意义. 结论 适当强度牵张力可以调节膀胱平滑肌细胞形态并促进细胞增殖活性,5％形变率的牵张力下细胞增殖最活跃.     

膀胱部分切除术的价值

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,在我国其发病率居泌尿系统恶性肿瘤的首位.其中膀胱移行细胞癌(TCC)最为常见,占膀胱癌的90％以上.膀胱鳞状细胞癌比较少见,占膀胱癌的3％ ～7％.膀胱腺癌更为少见,占膀胱癌的比例＜2％.膀胱移行细胞癌的治疗方法取决于肿瘤的分期和细胞分级.表浅性肿瘤(SBC)占全部膀胱肿瘤的75％～85％,包括Tis、T0、T,期膀胱肿瘤,常采用保留膀胱手术方式;浸润性膀胱肿瘤是指肿瘤浸润肌层T2、T3、T4期肿瘤,其基本治疗是根治性膀胱切除术[1].     

膀胱肿瘤无创伤筛选及诊断方法的研究进展

本文将近年来逐渐开展的尿脱落细胞检查、流式细胞计数、BTA检查(BTA stat，BTA trak)、NMP22、LewisX抗原检查、端粒酶测定(Telonerase)、DNA微卫星分析等与传统膀胱镜检查相比较，对无刨伤性检查与膀胱镜检查在膀胱肿瘤的筛选、诊断中的作用加以综述。