脓毒症相关持续性炎症-免疫抑制-分解代谢综合征的研究进展

脓毒症的最新定义为宿主感染所导致的免疫反应失调引起的危及生命的器官功能障碍 [1].研究表明,我国重症医学科住院患者脓毒症的发病率为20.6％,病死率为35.5％,其中严重脓毒症病死率可高达50％以上 [2].脓毒症的治疗研究一直备受关注,但是在研究初期由于缺乏治疗经验,脓毒症患者的病死率极高,而随着"拯救脓毒症运动"的开展,在加强抗感染、液体复苏、器官支持等综合治疗后 [3],脓毒症患者的病情得到控制,早期病死率大大降低.但是,尽管人们对脓毒症的理解有了极大的提高,脓毒症相关疾病的病死率却未明显降低 [4].首次经历脓毒症打击的患者,一部分因病情较重而死亡,另一部分经过早期积极有效的综合治疗后存活并出院,但是在这部分患者中,尤其是老年患者,无法恢复正常的免疫状态,而转为慢性危重病(chronic critical illness, CCI).     

重视严重烧伤后期并发持续炎症-免疫抑制-分解代谢综合征

随着严重烧伤后脏器并发症的研究不断深入及器官功能监护和支持技术的不断提高, 严重烧伤患者在早期和中后期避免了因休克、感染等导致的死亡, 进入烧伤后期。其中部分患者因为烧伤创面未能及时和有效愈合, 大面积烧伤创面长时间暴露以及感染等, 处于发热、消瘦和创面迁延不愈等慢性危重症状态并伴有免疫功能下降、贫血、低蛋白血症等, 表现为持续炎症-免疫抑制-分解代谢综合征(PICS), 导致住院时间延长、远期病死率升高。该文结合笔者团队烧伤救治的临床实践, 对严重烧伤患者后期并发PICS的主要原因及PICS的临床特征、防治方法进行简要阐述, 期望引起同行对严重烧伤后期PICS的重视。     

大面积烧伤患者继发持续炎症-免疫抑制-分解代谢综合征的危险因素分析

目的探讨大面积烧伤患者继发持续炎症-免疫抑制-分解代谢综合征(PICS)的危险因素和治疗结局。方法采用回顾性病例系列研究方法。2017年1月—2021年12月, 暨南大学附属广州红十字会医院收治220例符合入选标准的大面积烧伤患者, 其中男168例、女52例, 年龄18～84(43±14)岁。按照PICS发生情况, 将患者分为PICS组(84例)和非PICS组(136例)。收集并分析2组患者性别、年龄、入院时合并基础疾病情况和急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)评分、入院时和入院14 d脓毒症相关性器官功能衰竭评价(SOFA)评分、治疗期间行机械通气超过48 h比例等一般资料, 烧伤总面积、Ⅲ度烧伤面积、伤后48 h内入院比例、伤后30 d深度创面暴露面积等专科情况, 住院天数、住院总费用、手术次数以及死亡情况等结局指标。对数据行独立样本t检验、Mann-WhitneyU检验、χ2检验。对除结局指标外2组比较差异有统计学意义的指标行多因素logistic回归分析, 筛选大面积烧伤患者继发PICS的独立危险因素。结果 PICS组患者入院时APACHEⅡ评分和SOFA评分、治疗...     

青藤碱对肾移植大鼠移植肾组织肿瘤坏死因子-α和CD80的影响

目的探讨青藤碱（SIN）对大鼠肾移植术后急性排斥反应免疫抑制作用的分子机制。方法实验动物模型随机分为：生理盐水（NS）组、SIN组、环孢素A（CsA）组、SIN＋CsA组、对照组（Ⅴ-Ⅶ），从每组中随机抽取半数，观察其存活时间，每日尿量及泌尿持续时间，另一半于术后第7天处死，检测血肌酐（Scr）尿素氮（BUN）水平，以及移植肾组织肿瘤坏死因子（TNF）-α、CD80分子表达水平变化。结果N．S组术后9d内死；SIN＋CsA组与NS、SIN、CsA组比较，差异存在统计学意义（P〈0．05）。Scr、BUN：N．S组明显高于其他组，差异有统计学意义（P〈0．05）；各实验组与对照组比较差异有统计学意义，SIN＋CsA组存在交互效应。外周血TNF-α表达水平、移植肾组织CD80表达：各实验组与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05），SIN＋CsA组存在交互效应。结论SIN可能通过下调移植肾组织TNF-α及细胞表面标记CD80分子的表达水平而产生免疫抑制作用。并与CsA存在协同作用。     

大鼠心脏移植排斥反应时细胞间粘附分子-1的表达及霉酚酸酯对其的抑制作用

目的　探讨大鼠同种异位心脏移植排斥反应期间移植心组织细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的表达及霉酚酸酯（MMF）对移植心ICAM-1表达和排斥反应的抑制作用。方法　建立大鼠心脏腹腔移植模型,设Wistar到Wistar大鼠的同系心脏移植对照组、SD大鼠到Wistar大鼠的同种移植组和同种移植MMF治疗组。采集移植心组织标本行免疫组织化学和组织病理学检查,应用多媒体彩色图文分析系统对移植心组织ICAM-1的表达进行定量检测。结果　对照组移植心组织ICAM-1表达较弱;同种移植组在排斥反应期间移植心组织毛细血管内皮细胞ICAM-1的表达强度和数量明显增加,且伴有大量淋巴细胞浸润;MMF治疗组移植心仅微弱表达ICAM-1,同时少有淋巴细胞浸润;检测移植心组织ICAM-1的表达改变比普通组织病理学检查可以提早2～3d发现排斥反应。结论　ICAM-1的表达水平与排斥反应的发生和发展有关;MMF能显著抑制移植心ICAM-1的表达和淋巴细胞的浸润,明显延长移植物的存活。     

FK506对干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α诱导间充质干细胞免疫抑制的影响

目的 观察用免疫抑制剂FK506对干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的间充质干细胞(MSCs)免疫抑制功能的影响及其作用机制.方法 将经过不同炎症因子预处理的小鼠MSCs与脾细胞共培养,并在FK506作用72 h后,以噻唑蓝(MTT)比色法检测脾细胞增殖;以流式细胞术检测脾细胞凋亡;以实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测MSCs发挥免疫抑制作用的主要分子,观察FK506对其影响.结果 IFN-γ和TNF-α联合预处理后的MSCs可以显著抑制脾细胞增殖,促进脾细胞凋亡,凋亡率可达(53.5±2.5)%,明显高于IFN-γ或TNF-α预处理的MSCs组以及对照组(P＜0.05),并且IFN-γ和TNF-α仅可以显著上调MSCs中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达,MSCs的免疫抑制作用可以被iNOS特异性抑制剂1400W所拮抗;但FK506则可以抑制MSCs中iNOS的表达,使MSCs对脾细胞增殖的抑制作用显著降低,脾细胞凋亡减少,凋亡率降至(44.3±3.2)%(P＜0.05).结论 FK506通过抑制IFN-γ和TNF-α联合预处理的MSCs中iNOS表达从而抑制其免疫抑制功能.

Abstract：

Objective To investigate the mechanism of immunosuppressant FK506 on the immunesuppression of mesenchymal stem cells ( MSCs) induced by interferon ( IFN) -γ and tumor necrosis factor (TNF)-α. Methods MSCs pretreated with inflammatory cytokines were co-cultured with mice spleen cells. After incubation with FK506 for 72 h, proliferation of spleen cells was measured by methyl thiazol tetrazolium (MTT) assay and the apoptosis was assessed by flow cytometry. Real-time polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the major molecule that mediated the immunosuppression of MSCs and the effect of FK506 on the molecule. Results MSCs pretreated with inflammatory cytokines could inhibit the proliferation of spleen cells and increase the apoptosis of spleen cells, and the apoptosis rate was (53. 5 ±2. 5) % , which was higher than that of MSCs pretreated with IFN-γ or TNF-α and control group ( P ＜0. 05), and IFN-γ and TNF-α upregulated inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression in MSCs significantly, and this immunosuppression could also be antagonized by a specific inhibitor 1400W. However,FK506 could inhibit iNOS expression in MSCs pretreated with IFN-γ and TNF-α, the inhibition of spleen cells proliferation by MSCs was reduced significantly, and the apoptosis rate of spleen cells was reduced to (44. 3 ±3. 2)% (P＜0. 05). Conclusion FK506 inhibits the immunosuppression of MSCs through downregulation of iNOS expression in MSCs pretreated with IFN-γ and TNF-α.     

1,25-(OH)2D3的免疫抑制作用及其在器官移植中的应用(文献综述)

近年的研究证实1,25-(OH)2D3具有重要的免疫调节作用,可以调节细胞因子的产生,抑制移植物急性排斥反应,延长移植物生存期.本文就1,25-(OH)2D3免疫调节作用的分子生物学机制、对免疫活性细胞的调节作用及其在器官移植后预防急性排斥反应中的作用等方面的研究进展作一综述.     

1,4-二氢-2,6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸甲异丁酯的合成

1,4-二氢-2,6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸甲异丁酯为一抗高血压新药,作者报道了其三步法的合成方法,并对Hanstzch合成法中制备邻硝基苯亚甲基乙酰乙酸异丁酯的方法进行了改进,反应时间缩短,得率提高至58%.对产物分子结构采用元素分析、红外光谱(IR)、核磁共振氢谱(1H-NMR)及碳谱(13C-NMR)进行了鉴定.     

1,25-(OH)2D3对小鼠皮肤移植后脾T细胞亚群、MLR及NK细胞活性的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]抑制机体免疫功能的机理,为用于临床抗排斥治疗提供实验依据.方法建立不同系小鼠间皮肤移植的动物模型.术日将实验小鼠随机分为四组,均用小鼠灌胃器给药.对照组:每日20ml/kg生理盐水; 维生素D3(VD3)组:单独应用1,25-(OH)2D3 2.5μg*kg-1*d-1; 环孢素A(CsA)组:单独应用CsA 25mg*kg-1*d-1; VD3+CsA组:联合应用VD3+CsA,按VD3组和CsA组用药剂量给药.术后10d,测定小鼠脾的T细胞亚群、单向混合淋巴细胞反应(MLR)、自然杀伤细胞(NK)活性.结果 VD3组的移植皮片存活时间(13.13±1.13)d,明显长于对照组的(9.75±0.89)d;CD3+、CD4+ T细胞百分率40.19%±4.25%、24.65%±3.47%均明显低于对照组48.70%±7.19%、 33.55%±4.34%,P<0.01;对BALB/C鼠的MLR(0.95±0.12)明显低于对照组(1.19±0.22),P<0.05; NK细胞的活性与对照组小鼠比较, 差异无显著性.结论 1,25-(OH)2D3能延长小鼠皮肤移植的存活时间,其抑制机体免疫功能的作用是通过减少CD3+、CD4+ T细胞的数量及抑制T细胞功能而发挥的,对NK细胞活性无明显影响.     

α-氨基-3羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体在瑞芬太尼痛觉过敏中作用的研究进展

背景 α-氨基-3羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionate,AMPA)受体是一种兴奋性递质谷氨酸离子通道型受体,谷氨酸可以与之结合并介导突触后膜电流,引起神经元兴奋性增强,从而导致痛觉信息上传增加,进而引起痛觉敏感化. 目的 探讨AMPA受体在瑞芬太尼痛觉过敏发生及维持中的作用. 内容 对AMPA受体的基本特征、运输、功能及其在瑞芬太尼痛觉过敏中的研究进行综述. 趋向 通过AMPA受体在瑞芬太尼痛觉过敏中的研究,为瑞芬太尼痛觉过敏的预防及治疗提供新靶点.     

1,25-(OH)_2D_3对小鼠皮肤移植后脾T细胞亚群、MLR及NK细胞活性的影响

目的　探讨 1,2 5 二羟维生素D3 [1,2 5 (OH) 2 D3 ]抑制机体免疫功能的机理 ,为用于临床抗排斥治疗提供实验依据。方法　建立不同系小鼠间皮肤移植的动物模型。术日将实验小鼠随机分为四组 ,均用小鼠灌胃器给药。对照组 :每日 2 0ml/kg生理盐水 ;维生素D3 (VD3 )组 :单独应用 1,2 5 (OH) 2 D3 2 .5 μg·kg-1·d-1;环孢素A(CsA)组 :单独应用CsA 2 5mg·kg-1·d-1;VD3 +CsA组 :联合应用VD3 +CsA ,按VD3 组和CsA组用药剂量给药。术后 10d ,测定小鼠脾的T细胞亚群、单向混合淋巴细胞反应 (MLR)、自然杀伤细胞 (NK)活性。结果　VD3 组的移植皮片存活时间 (13.13±1.13)d ,明显长于对照组的 (9.75± 0 .89)d ;CD3+ 、CD4 + T细胞百分率 4 0 .19%± 4 .2 5 %、2 4 .6 5 %±3.4 7%均明显低于对照组 4 8.70 %± 7.19%、 33.5 5 %± 4 .34% ,P <0 .0 1;对BALB/C鼠的MLR(0 .95± 0 .12 )明显低于对照组 (1.19± 0 .2 2 ) ,P <0 .0 5 ;NK细胞的活性与对照组小鼠比较 ,差异无显著性。结论　 1,2 5 (OH) 2 D3 能延长小鼠皮肤移植的存活时间 ,其抑制机体免疫功能的作用是通过减少CD3+ 、CD4 + T细胞的数量及抑制T细胞功能而发挥的 ,对NK细胞活性无明显影响。     

过度免疫抑制的生物标记物(下)

肾脏移植已经逐渐成为许多晚期肾脏疾病患者的治疗选择,而移植希望达到的主要目标之一是移植后的免疫抑制治疗能够适应每例患者的个体需求,以避免移植排斥或过度免疫抑制.这样的个体治疗需要具备可重复使用的含量测定,以便在同种异体移植的早期就发现那些对患者有害的进程.我们将重点讨论移植后进行免疫抑制治疗时出现过度免疫抑制的生物标记物.     

利用胆固醇氧化酶转化胆固醇制备胆甾-4-烯-3-酮

用酶法催化氧化胆固醇制备胆甾-4-烯-3-酮相对于化学法合成具有反应简单、成本较低等优点.作者探讨了在正辛烷作为有机相的两相反应体系中,以胆固醇氧化酶催化氧化胆固醇制备胆甾-4-烯-3-酮的方法.在胆固醇质量浓度为40g/L,反应时间40min、反应温度40℃、磷酸缓冲液-正辛烷体积比32、通氧40L/h及搅拌转速300r/min下,胆固醇转化率达到92%,经薄板层析及紫外扫描,发现转化产物为单一的胆甾-4-烯-3-酮.     

胱硫醚-γ-裂解酶和胱硫醚-β-合成酶在高血压大鼠阴茎海绵体中的表达

目的:探讨高血压对大鼠阴茎海绵体组织胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和胱硫醚-β-合成酶(CBS)表达的影响及与大鼠勃起功能的关系。方法:健康雄性SPF级自发性高血压大鼠(SHR)与对照组WKY(Wistar-Kyoto)大鼠各10只,于12周龄时测定大鼠血清睾酮、阴茎海绵体内压/平均动脉压(ICP/MAP)、血浆和阴茎海绵体内源性H2S的含量,采用免疫组化和Western印迹分析CSE和CBS在阴茎海绵体内的表达。结果:SHR与WKY大鼠的血清睾酮值没有显著差别,SHR的ICP/MAP在0、3和5 V电刺激盆腔神经节(MPG)时均显著低于WKY组(n=10,P0.05)。SHR血浆H2S含量显著低于WKY大鼠[(10.49±1.35)μmol/Lvs(21.92±2.75)μmol/L,P0.05],SHR阴茎海绵体组织内源性H2S含量显著低于WKY大鼠[(52.60±3.44)nmol/mg prot vs(87.67±2.12)nmol/mg prot,P0.05],SHR阴茎海绵体组织内源性H2S生成率也较WKY大鼠显著降低[(1.14±0.07)nmol/(mg·min)vs(4.35±0.32)nmol/(mg·min),P0.05]。CSE及CBS主要表达在SHR和WKY大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞和血管内皮细胞的胞质,SHR的CSE及CBS蛋白表达量均显著低于WKY大鼠(P0.05)。ICP/MAP与CSE和CBS表达呈高度正相关(r=0.955、0.977,P均0.05)。结论:高血压大鼠阴茎海绵体组织中CBS和CSE的表达下降,导致阴茎海绵体内H2S合成减少,可能是高血压引起勃起功能下降的机制之一。     

6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶4对癌细胞的增殖及迁移的影响及机制研究

目的:探讨6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶4(PFKFB4)对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法:利用慢病毒构建PFKFB4沉默和过表达的卵巢癌A2780稳定细胞系,并用qPCR和Western blotting检测PFKFB4沉默和过表达效果,通过CCK-8实验、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell实验、流式细胞术和试剂盒分别检测A2780细胞的增殖和迁移能力以及糖酵解水平。结果:成功构建了PFKFB4沉默和过表达的A2780稳定细胞系。与对照组相比,沉默PFKFB4后,A2780细胞的PFKFB4 mRNA和蛋白水平、增殖和迁移能力以及葡萄糖消耗和乳酸分泌水平显著降低,ROS水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05);过表达PFKFB4后,A2780细胞的PFKFB4 mRNA和蛋白水平、增殖和迁移能力以及葡萄糖消耗和乳酸分泌水平显著升高,ROS水平显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:PFKFB4可通过增强糖酵解活性,发挥促进卵巢癌细胞的增殖和迁移的作用。     

面包酵母催化溶剂相不对称还原合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯

研究有机溶剂中面包酵母催化2-氧代-4-苯基丁酸乙酯（OPBE）不对称还原合成（R）-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯（（R）-HPBE），分别考察有机溶剂种类、初始水含量、初始底物浓度、缓冲液pH值和添加剂等因素对OPBE转化率（COPBE）、HPBE产率（YHPBE）及（R）-HPBE的光学纯度（ee％）的影响。实验结果表明，乙醚为适宜反应介质，适宜pH为中性；反应初始水含量和初始底物浓度分别以ω（H2O）=30g／L、c（OPBE）=5mmol／L为佳。添加α-氯代苯乙酮（α—PC）对酵母预处理2h后，（R）-HPBE的PP从35．52％提高为82．25％，COPBE和YHPBE分别从75．29％和46．02％提高到98．51％和75．82％。     

腰-骶-骨盆固定技术及研究进展

近年来脊柱外科内固定器械研发及手术技术取得了许多新的进展,但是腰骶关节固定失败、假关节形成等难题仍是脊柱外科医师面临的挑战之一.骶骨骨质薄弱、复杂的区域解剖结构、腰骶关节承载的巨大生物应力等均是导致局部容易发生固定融合失败的原因.     

肝移植免疫抑制治疗的现状及趋势

绝大多数接受肝移植的患者需要接受免疫抑制治疗,虽然免疫抑制剂极大地改善了患者的预后,但由于对药物的耐受力不同,传统标准的免疫抑制方案不能适用于所有患者,需要寻找更加合理的方案。本文将就肝移植免疫抑制治疗的现状及发展趋势作一简单介绍。     

不同免疫抑制剂对大鼠血管平滑肌细胞转化生长因子-β1和Smads信号通路的影响及意义

目的研究不同免疫抑制剂对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）转化生长因子（TGF）-β1和Smacks信号通路的影响，探讨其在慢性移植肾肾病发生、发展中的作用。方法应用大鼠胸主动脉平滑肌细胞体外原代培养技术，分别用CsA（3mg／L）、FK506（1mg／L）、MMF（0．3mg／L）与RPM（10mg／L）处理6、12h。用免疫组织化学和实时荧光定量聚合酶链反应检测TGF—β1、Smacks蛋白和mRNA在平滑肌细胞中的表达及定位。结果CsA组和FK506组TGF—β1、Smad2的蛋白和mRNA表达水平高于对照组、MMF组和RPM组（P〈0．01），Smad7蛋白和mRNA表达低于对照组、MMF组和RPM组（P〈0．01）；MMF组和RAPA组TGF-β1、Smad2蛋白和mRNA表达低于对照组（P〈0．01），而Smad7的表达高于对照组（P〈0．01）。CsA组和FK506组，以及MMF组和RPM组的组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论不同免疫抑制剂可能通过影响血管平滑肌细胞TGF—β1和Smacks信号通路，导致移植物动脉硬化，从而影响慢性移植肾功能丧失的进程。