氩氦刀冷冻消融治疗兔VX2肾癌外周血细胞因子的变化

目的研究冷冻消融治疗兔VX2肿瘤后外周血细胞因子的变化。方法建立兔VX2肾癌模型,将38只荷瘤兔随机分为：冷冻消融组（A组）,根治性肾切除组（B组）,肿瘤对照组（C组）,应用酶联免疫吸附试验法测定治疗前、治疗后21d外周血Th1型细胞因子（IFN-γ、TNF-α和Th2型细胞因子（IL-4、IL-6）浓度的变化。结果治疗后21d组间组内比较显示：冷冻消融组外周血IFN-γ、TNF-α浓度和IFN-γ／／IL-4比值明显升高,IL-6明显降低,与治疗前差异存在统计学意义（P〈0．05）,IL-4与治疗前相比差异无统计学意义（P〉0．05）;冷冻消融组外周血IFN-γ／、IL-4、IL-6浓度和IFN-γ／IL-4比值与肿瘤对照组相比,差异均有统计学意义（P〈0．05）;与根治肾切除组相比,冷冻消融组TNF—α浓度明显升高,IL-6明显降低,差异均有统计学意义（P〈0．05）,两组IFN-γ／、IL-4浓度差异无统计学意义（P〉0．05）。结论冷冻消融冶疗肾癌可使外周血IFN-γ／、TNF-α、IFN-γ／IL-4比值升高,IL-6浓度降低,增强机体的抗肿瘤免疫功能。     

Ⅲ型前列腺炎辅助性T细胞亚群的分化

目的 了解Ⅲ型前列腺炎前列腺液中CD4^＋T辅助性T细胞（Th细胞）亚群的分化情况。方法 按照美国国立卫生院（NIH）分类方法将病例分成ⅢA型／组（47例）、ⅢB型／组（29例），另设健康对照组（16例）。采用双抗体夹心酶联免疫法检测前列腺液（EPS）中Th；类细胞因子（IFN-γ）、Th2类细胞因子（IL-4）水平以及Th1／Th2比值（IFN-γ／IL-4）。结果 和对照组比较，ⅢA组、ⅢB组IFN-γ水平明显上调（P〈0．05），ⅢA组较ⅢB组升高更明显（P〈0．05）；和对照组比较，ⅢA组IL-4水平无明显变化（P〉0．05），ⅢB组IL-4水平上调（P〈0．05）：和对照组比较，ⅢA组IFN-γ／IL-4明显升高（P〈0．05），ⅢB组IFN-γ／IL-4无明显改变（P〉0．05）。结论 ⅢA型前列腺炎Th；细胞分化占优势，Th1／Th2平衡向Th1漂移，以细胞免疫反应为主；Th细胞分化也参与了ⅢB型前列腺炎的发病，但Th1／Th2处于相对平衡状态。     

全反式维甲酸作用的巨噬细胞对前列腺间质细胞功能的影响

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对前列腺切除术后创面修复过程中的前列腺间质细胞可能作用.方法:将单核巨噬细胞系(THP-1)细胞分成6组:M1型巨噬细胞实验组、对照组、未活化组,M2型巨噬细胞实验组、对照组、未活化组;其中M1型巨噬细胞先后通过PMA、IFNγ活化而成;而M2型巨噬细胞组先后通过PMA、IL-4激活....     

胎鼠真皮间充质干细胞对小鼠巨噬细胞极化的影响

目的：探究胎鼠真皮间充质干细胞（Fetal mice dermal mesenchymal stem cells, FDMSCs）对M1/2型巨噬细胞极化的影响。方法：本研究提取FDMSCs，利用脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）、γ干扰素（Interferon-γ,IFN-γ）刺激RAW264.7诱导为M1型巨噬细胞，利用白细胞介素4(Interleukin-4,IL-4)刺激RAW264.7诱导为M2型巨噬细胞，并建立了FDMSCs-RAW264.7共培养体系。共培养24 h后，收集巨噬细胞，用实时定量PCR和流式细胞学检测M1/2型巨噬细胞特征性因子白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、诱导性一氧化氮合酶（Induciblenitricoxidesynthase,iNOS）、CD86、白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)、精氨酸酶1(Arg-1)、CD206的表达变化。结果：FDMSCs使M1型巨噬细胞表达的IL-6、iNOS、CD86减少，IL-10、CD206增多；使M2型巨噬细胞表达的IL-10、Arg-1、CD20...     

钛颗粒在刺激人单核/巨噬细胞引起人工关节松动中的作用

目的分析不同直径、不同浓度的钛颗粒对人单核／巨噬细胞的作用。方法应用梯度离心法分离人单核／巨噬细胞，去除钛颗粒表面的内毒素，将直径（15．47±5．18）μm和（2．54±0．86）μm的钛颗粒，分别以颗粒体积（μm^3）：细胞数比为10：1及100：1的浓度刺激人单核／巨噬细胞。在钛颗粒刺激细胞24h后，运用ELISA检测培养上清液中的骨溶解介质白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和细胞坏死因子-α（TNF-α）的浓度。结果钛颗粒刺激单核／巨噬细胞可分泌IL-6、TNF-α和IL-1β；颗粒体积：细胞数比为100：1时，平均直径2．54μm的钛颗粒刺激单核／巨噬细胞产生IL-6、TNF-α和IL-1β的作用均大于直径15.47μm的钛颗粒，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论不含内毒素的钛颗粒本身具有刺激单核／巨噬细胞产生溶骨介质的作用；高浓度、直径小的钛颗粒可刺激人单核／巨噬细胞分泌更多的溶骨介质，具有较强的生物活性。     

血栓痔病人外周血Th1／Th2分析

为探讨血栓痔发病与T淋巴细胞活化及释放的Th1／Th2细胞因子失衡状态的关系,对32例血栓痔（实验组）和30例健康人（对照组）的外周血单个核细胞（PBMC）,经PMA诱导培养后,用流式细胞术测定CD3^＋标记T细胞内自细胞介素-4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）含量和CD8^-标记T细胞内IL-4和IFN-γ的含量,进行比较分析,从而估计Th1／Th2细胞的漂移状态。结果显示,实验组的IL-4和IFN-γ含量均显著高于对照组（P〈0．001）;且实验组IL-4^＋含量高于IFN-γ含量（P〈0．05）。结果表明,血栓痔病人发病时,体内的T淋巴细胞免疫系统被激活,且以Th2细胞为主,这种Th1／Th2细胞因子失衡可能在血栓痔发病过程中起到重要作用。     

慢性非细菌性前列腺炎辅助性T细胞亚群分化及其对炎症的影响

目的：了解慢性非细菌性前列腺炎（CP）前列腺液（EPS）中Th类细胞亚群分化及其和局部炎症的关系。方法：对47例CP患者（CP组），根据炎症程度分成Ⅰ组（轻度炎症）26例和Ⅱ组（重度炎症）21例；另以16例健康者为对照组。采用双抗体夹心酶联免疫法法检测各组EPS中Th1类细胞因子（IFN-γ）、Th2类细胞因子（IL-4）水平，以及Th1／Th2比值（IFN-γ／IL-4）。结果：与对照组比较，CP组IFN-γ、IFN-γ／IL-4明显升高（P〈0．05），IL-4水平无明显变化；其中，Ⅰ组IL-4水平无明显变化，而Ⅱ组IL-4水平显著性下调（P〈0．05）；Ⅱ组和Ⅰ组IFN-γ水平均明显上调（P〈0．05），但此两组间水平无显著性差别；Ⅱ组IFN-γ／IL-4明显高于Ⅰ组（P〈0．05）。结论：CP患者Th1细胞分化占优势，以细胞免疫反应为主；Th1的极化可能是导致前列腺局部炎症发展原因之一。     

FOLFOX方案化疗对晚期结直肠癌患者免疫功能的影响

目的 研究FOLFOX方案化疗对晚期结直肠癌患者免疫功能的影响.方法 43例晚期结直肠癌患者中22例接受了FOLFOX方案化疗（化疗组）,21例未接受化疗（对照组）.分别于化疗前、化疗结束时和化疗结束3个月后,取患者外周静脉血,采用抗体标记流式细胞仪检测外周血CD4＋T细胞中CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞所占比例;并通过ELISA法检测外周血中Th1/Th2细胞因子（IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10）水平.结果 化疗结束时,相对于化疗前和对照组,化疗组CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞比例显著降低 [（4.15±0.56）%比（5.60±0.88）%和（5.38±0.92）%,均P＜0.01];外周血IL-4和IL-10水平亦显著降低,IFN-γ和IL-2水平则明显升高（均P＜0.01）.化疗结束后3个月,CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞比例略微升高 [（4.53±0.58）%],但仍低于化疗前和对照组（P＜0.01）;而IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10则恢复到化疗前和对照组同期水平（均P＜0.01）.结论 FOLFOX化疗可降低晚期结直肠癌患者的调节性T细胞的比例,引起Th1/Th2细胞因子平衡向Th1漂移,从而有利于患者肿瘤免疫抑制的解除.     

慢性乙型肝炎肝纤维化患者Th1／Th2细胞及其细胞因子的变化

目的探讨Th1／Th2细胞及其分泌的细胞因子在慢性乙型肝炎（CHB）肝纤维化患者发生发展中的作用。方法选取2011年3—10月在河北医科大学第三医院感染科接受肝组织病理活检的CHB肝纤维化患者46例,根据纤维化分期分为S0～1期15例,S2～3期20例,S4期11例三组,另取同期健康志愿者10名作为健康对照组。用流式细胞术和实时荧光定量PCR检测外周血Th1、Th2细胞频率和单个核细胞（PBMCs）中干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）基因表达;用ELISA法检测血清IFN-γ和IL-4水平;用免疫组织化学染色检测肝组织IFN-γ和IL4表达。应用Spearman相关分析、Kruskal—WallisH检验、Logistic逐步回归方法分析Th1／Th2细胞及其细胞因子在CHB肝纤维化患者外周血和肝组织中的变化。结果不同肝纤维化分期的CHB患者外周血Th1／Th2细胞频率的比值、PBMCs中IFN-γ／IL-4mRNA、血清中IFN-γ／IL-4及肝内IFN-γ／IL-4差异均有统计学意义,并随肝纤维化程度加重逐渐下降（χ2=36．259、40．822、26．321和31．852,P〈0．05）。血清及肝组织中IFN-γ,／IL-4比值与肝纤维分期均呈负相关（r=-0．616和-0．531,P〈0．01）。Logistic回归分析显示：AST、凝血酶原时间（PT）和血清IFN-γ／IL4比值是发生显著肝纤维化（S2-4）的三个独立危险因素（OR=5．933,95％CI：1．324～26．586,P=0．02;OR=12．866,95％CI：1．746～94．788,P=0．01;OR=4．755,95％CI：1．034～21．862,P：0．04）。结论CHB患者体内存在Th1／Th2失衡,随着肝纤维化进展,外周血及肝脏内均呈现Th2应答的极化现象,这可能是CHB肝纤维化发生发展的一种机制。     

胸腺肽对扁平疣患者血清白介素-10和γ干扰素水平的影响及疗效分析

目的研究胸腺肽对扁平疣患者血清白介素-10（IL-10）、γ干扰素（IFN-γ）水平的影响及疗效.方法采用酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）双抗体夹心技术检测扁平疣患者治疗组、对照组治疗前后及正常人血清IL-10、IFN-γ水平.结果治疗前两组扁平疣患者IL-10水平都明显高于正常人,IFN-γ水平明显低于正常人（P＜0.01）,两组患者间IL-10、IFN-γ水平相近（P＞0.05）.治疗后胸腺肽组IL-10水平显著降低,并明显低于对照组,IFN-γ水平显著升高,也明显高于对照组（P＜0.01）,而对照组治疗前后水平差异无统计学意义（P＞0.05）,且治疗组的疗效（总有效率80.76%）明显高于对照组的46.15%（P＜0.05）.结论扁平疣患者存在TH1/TH 2型细胞因子失衡,胸腺肽可通过纠正此种细胞因子失衡而改善患者免疫功能,提高治疗效果.     

尿素交连明胶对正常人体免疫系统细胞因子的影响

目的探讨不同浓度的3.5%尿素交连明胶（UG）对正常人体免疫系统细胞因子的影响.方法选择健康志愿者12名,严格无菌条件下抽取静脉血15 ml,肝素抗凝.计数后将细胞平均分成五组：1640培养液阴性对照组（C1）、10%血浆对照组（C2）、10%UG观察组（H1）、20%UG观察组（H2）、40%UG观察组（H3）.各组分别在未加药（T1）、加脂多糖（LPS,T2）、加植物血凝素（PHA,T3）三种条件下,使单个核细胞在不同的培养液中培养48 h后,以酶联免疫吸附法（ELISA法）检测白细胞介素-2、10（IL-2、IL-10）和干扰素-γ（IFN-γ）的浓度.结果各组IL-2、IL-10、IFN-γ在T1、T2、T3组间比较无显著性差异（P＞0.05）;IL-2和IFN-γ在T1与T2两种条件下比较无显著性差异（P＞0.05）,但两者与T3条件下比较有显著性差异（P＜0.05）;IL-10在三种条件下比较均有显著性差异（P＜0.05）.结论UG在体外试验中不抑制正常人体免疫系统机能.     

来氟米特抑制狼疮肾炎患者树突状细胞成熟的实验研究

目的：观察来氟米特活性代谢产物A771726处理前后狼疮。肾炎（1upus nephritis，LN）患者树突状细胞（DC）表面标志及功能的改变，探索来氟米特治疗LN的新途径。方法：分离LN患者外周血单个核细胞，用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte macrophage colony stimulating factor，GM-CSF）、白细胞介素-4（interleukin-4，IL-4）等细胞因子诱导DC成熟，来氟米特组再加入A771726培养。培养第9天收集DC细胞，流式细胞仪检测CD80、CD86和HLA-DR的表达。肌法检测DC刺激淋巴细胞增殖的能力，ELISA法检测混和淋巴细胞反应培养上清IL-10和IFN-γ水平。结果：A771726处理后的DC表达0380、cm86和HLA-DR百分数较对照组均明显降低[（62．80±1．67）vS（78．35±4．50），（64．50±13．06）vs（84．91±9．80），（71．44±11．56）vs（91．51±7．63）]，P均〈0．01；A771726处理后的DC与T细胞混合培养，其刺激T细胞增殖相应的OD值较对照组明显降低[DC：TC=1：10时，（0．295±0．069）vs（0．468±0．100）；DC：TC=1：50时，（0．196±0．044）vs（0．391±0．023）]，P均〈0．01。其混合培养的上清液中IL-10水平较无A771726处理的DC与T细胞的混合培养上清液明显降低[（205．0±35．8）pg／ml vs （443．6±93．2）pg／ml，P〈0．01]，而IFN-γ两者间无统计学差异[（89．3±11．9）pg／ml vs （99．9±15．7）pg／ml，P〉0．05]。结论：A771726在体外可抑制LN患者外周血DC的成熟，未成熟DC能抑制T细胞增殖及T细胞向Th2细胞转化。     

磨损颗粒刺激巨噬细胞引起人工关节松动的作用机制

目的探讨来源于人外周血的单核／巨噬细胞对直径1μm以下超高分子聚乙烯（UHMWPE）磨损颗粒的反应及其机制。方法从因无菌性人工髋关节松动而需要行翻修手术的患者假体周围组织中提取UHMWPE磨损颗粒。从10名健康志愿者分别抽取50ml外周血，梯度离心获得外周血中的单核／巨噬细胞。将细胞分为6组：A：单核／巨噬细胞＋UHMWPE磨损颗粒；B：单核／巨噬细胞＋UHMWPE磨损颗粒＋100μM Rotenone；C：单核／巨噬细胞＋UHMWPE磨损颗粒＋10μM U0126；D：单核／巨噬细胞＋UHMWPE磨损颗粒＋10ng／ml Cerivastatin；E：单核／巨噬细胞；F：单核／巨噬细胞＋脂多糖（LPS）。检测各组细胞的TNFα表达。结果UHMWPE磨损颗粒明显刺激单核／巨噬细胞分泌TNFα。Rotenone、U0126和Cerivastatin均可抑制UHMWPE磨损颗粒刺激单核／巨噬细胞分泌TNFα，且以U0126明显（P〈0．01）。结论UHMWPE磨损颗粒刺激单核／巨噬细胞产生TNFα可通过NF—κB和MAPK通路，但以MAPK通路为主。     

不同程度烫伤应激对大鼠皮下移植瘤生长的影响

目的：探讨应激反应对大鼠皮下移植瘤生长的影响。方法：将大鼠乳腺癌细胞Walker-256癌细胞株注入Wistar幼鼠腹腔,5d后抽取腹水,浓缩,经Wistar大鼠腹股沟皮下接种,建立Wistar大鼠皮下移植瘤模型。选取24只荷瘤大鼠,随机分为实验对照组（未烫伤）、轻度烫伤组（10％TBSA,100℃水中烫伤5s）、重度烫伤组（15％TBSA,100℃水中烫伤10s）,每组8只。烫伤后12h尾静脉取血,ELISA法检测血自细胞介素-18（IL-113）水平,放射免疫法测定血清皮质醇水平;烫伤后1、7、13d测定皮下肿瘤体积,伤后13d进行肿瘤的病理学观察。结果：烫伤后大鼠血浆IL-1G水平较实验对照组[（5．01±2．51）pg／m1]明显升高（P〈O．01）,重度烫伤组[（155．78±18．30）pg／ml]较轻度烫伤组[（94．12±15．31）pg／m1]升高更加明显（P〈O．01）;烫伤后大鼠血清皮质醇水平也较实验对照组[（60．51±16．70）μg／L]明显升高（P〈O．01）,重度烫伤组[（115．78±17．42）μg／L]较轻度烫伤组[（87．19±13．28）μg／L]升高更加明显（P〈O．05）。烫伤后1d,各组间肿瘤体积差异无统计学意义（P〉0．05）;烫伤后7d和13d,对照组与轻度烫伤组肿瘤体积差异无显著性（P〉0．05）,重度烫伤组肿瘤体积明显大于实验对照组和轻度烫伤组（P〈0．05）。病理学观察显示,烫伤组肿瘤细胞密度均较实验对照组大;各组均有纤维组织增生和炎细胞浸润,尤以重度烫伤组为甚。结论：重度烫伤后应激反应促进肿瘤的生长。     

CD40配体刺激的树突细胞增强CEA转基因小鼠细胞免疫的实验研究

目的探讨CD40配体（CD40L）对CEA转基因小鼠中的树突细胞（Dc）的激活作用,并进一步评价其对DC诱导的细胞免疫的效能。方法使用CEA转基因小鼠的骨髓细胞,通过粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）和IL-4在体外的刺激,贴壁法定向诱导分化出未成熟DC,利用CD40L刺激DC成熟后．体外荷载CEA526-533抗原肽．使DC具备诱导特异性细胞免疫的能力。通过定量测定DC表面分子、DC分泌的细胞因子、淋巴细胞增殖试验等来研究DC诱导细胞免疫的有效性。结果实验组DC的IL-12分泌量为（937．81±51．99）pg／10^6 DC,明显高于对照组[（83．06±8．58）pg／10^6DC,P〈0．01]。实验组DC的促CD8＋T细胞及脾细胞增殖活性明显强于对照组（P〈0．05）。刺激CD8T细胞增殖时,实验组和对照组淋巴细胞的IFN-γ分泌量分别为（33．900±4．550）和（5．226±0．460）ng／L．差异具有统计学意义（P〈0．01）;刺激脾细胞增殖时。实验组和对照组淋巴细胞的IFN-1分泌量为（69．802±11．407）和（2．912±0．562）ng／L,差异同样具有统计学意义（P〈0．01）。结论在CEA转基因小鼠的动物模型中．体外使用CD40L刺激骨髓来源DC可以促进其分化成熟,该成熟DC能有效增强CEA转基因小鼠的细胞免疫。     

异丙酚对脂多糖诱导大鼠腹腔巨噬细胞Toll样受体-4 mRNA表达的影响

目的 观察异丙酚对脂多糖（LPS）诱导大鼠腹腔巨噬细胞Toll样受体-4（TLR-4）mRNA表达的影响，探讨异丙酚抑制LPS诱导白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF—α）产生的机制。方法 雄性Wistar大鼠32只，处死后分离腹腔巨噬细胞，随机分为4组（n=8）：A组（阴性对照组）；B组LPS（终浓度为1μg／ml）／加入巨噬细胞中；C组LPS（终浓度为1μg／ml）＋异丙酚（终浓度为1μg／ml）加入巨噬细胞中；D组LPS（终浓度为1μg／ml）＋异丙酚（终浓度为5μg／ml）加入巨噬细胞中。细胞培养12h后。用ELISA方法检测培养上清液中IL-6、TNF-α的浓度，用RT-PCR方法检测TLR-4mRNA的表达水平。结果 与A组相比，B组IL-6、TNF-α和TLR-4m RNA水平均增加，C组IL-6、TLR-4m RNA水平升高（P〈0．01）；与B组相比，C组、D组IL-6、TNF-α和TLR-4m RNA水平降低（P〈0．05或〈0．01）。结论 异丙酚通过下调TLR-4m RNA的表达水平，从而一定程度上抑制了LPS诱导大鼠腹腔巨噬细胞，TNF-α和IL-6的产生。     

M2型巨噬细胞和调节性T细胞在胃癌组织中的表达及其预后预测价值

目的探讨胃癌组织中M2型巨噬细胞和调节性T细胞（Tregs）的表达情况及其联合检测对预后的预测价值。方法收集1999年2月至2005年12月期间复旦大学附属中山医院行D2根治术并达到R0切除的135例胃癌患者临床及随访资料。将手术切除标本制作组织芯片,以CD163作为M2型巨噬细胞标记,以Foxp3作为Tregs细胞标记,免疫组织化学染色后,分别以阳性细胞密度和阳性细胞计数来表示M2型巨噬细胞和Tregs细胞的表达。结果肿瘤组织中M2巨噬细胞密度和Tregs阳性细胞计数中位数分别为7．48／HP和6．33／HP．高于癌旁组织的1．37／HP和2．92／HP（均P〈0．01）。胃癌组织内M2型巨噬细胞与调节性T细胞表达呈显著正相关（r=0．415．P〈0．01）。M2和Tregs均低表达的43例患者中位生存期为99．0个月,显著长于M2和Tregs均高表达的45例患者（72．3个月,P〈0．05）。结论联合检测M2型巨噬细胞和Tregs表达这两种不同来源的抑制性免疫细胞可有效预测胃癌预后。     

Th1/Th2平衡在高容量血液滤过防治多脏器功能衰竭中的变化及意义

目的探讨多脏器功能衰竭（MODS）发病机制及高容量血液滤过（HVHF）防治MODS的依据。方法采用2次打击法建立猪MODS模型，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清干扰素（IFN）-γ和白细胞介素（IL）-4含量变化；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法测定脾脏IFN-γ、IL-4mRNA水平及辅助T细胞特异性转录因子T-bet和GATA-3mRNA的含量变化。结果HVHF组MODS发生率为20％，显著低于MODS组88．9％（P〈0．01）；血清IFN-γ和IL-4浓度显著低于MODS组（P〈0．05），处死前IFN-γ／IL-4比值明显高于MODS组（P〈0．01）；脾脏IFN-γ和IL-4 mRNA表达量较MODS组明显下降（P〈0．05），IFN-γ/IL-4 mRNA比值明显高于MODS组（P〈0．05）；脾脏GATA3mRNA表达量低于MODS组（P〈0．01），T—bet mRNA表达量下降，差异无统计学意义（P〉0．05），T-bet／GATA3比值显著高于MODS组（P〈0．01）。结论Th1向Th2漂移可能是MODS发生的本质原因之一，HVHF能够在一定程度上遏止Th1向Th2漂移的发生。     

IL-4与IL-10联合诱导异种骨移植免疫耐受的实验研究

[目的]探讨IL-4和IL-10在诱导异种骨移植免疫耐受中的作用。[方法]取雄性BALB／c小鼠60只（体重20～22g）为骨移植受体，取新西兰兔1只为异种骨供体。实验用小鼠股后肌袋骨移植模型。将动物随机等分为A、B、C 3组，在小鼠左肢股后肌袋植入新鲜异种骨粒（75mg／只）并做如下处理。A组为对照组，腹腔注射生理盐水200 μl；B组腹腔注射IL-4和IL-10各0．5 μg（100 μl）；C组植骨部注射IL-4和IL-10各0．5 μg（100 μl）。于术后1、2、4、6周分批取材。通过检测受者的淋巴细胞刺激指数、细胞因子及组织学变化，观察诱导异种骨移植免疫耐受的效果。另取BALB／c小鼠10只和本地菜兔1只做二次移植实验，确定免疫抑制作用是否有供体特异性。[结果]与A组相比，B和C组注射IL-4及IL-10后均明显抑制了骨抗原二次刺激引起的细胞增殖（P〈0．01），腹腔注射起效早，局部注射作用持久。细胞因子检测，早期B组IL-2和IFN-γ分泌增加（P〈0．05），C组仅IFN-γ分泌增加；2周时两组的IFN-γ和IL-4分泌均明显减少（P〈0．05），C组的IL-2分泌也明显减少（P〈0．001）。组织学检查，注射IL-4和IL-10后植骨部炎细胞浸润少，尤其C组诱导成骨较多。二次移植实验表明，IL4和IL-10的免疫抑制作用有供体抗原特异性。[结论]IL-4和IL-10能有效抑制新鲜异种骨移植免疫反应，促进耐受形成。抑制作用在早期主要通过细胞因子调节，使Th1／Th2达到动态平衡而实现。腹腔注射起效早，局部注射作用持久。     

白细胞介素-18基因修饰大肠癌细胞肿瘤疫苗的制备及抗肿瘤作用研究

目的：制备人白细胞介素-18（hIL-18）基因的修饰的大肠癌基因工程肿瘤疫苗，观察其抗肿瘤作用。方法：应用MTT法观察X线照射后对SW480细胞生长的影响，治疗15d后，采用ELISA法检测实验鼠血清IFN—γ、IL-2、IL-12、IL-4、IL-10；将SW480细胞和SW480-IL-18细胞应用放射线灭活后接种于裸鼠左侧背部皮下，再接种SW480细胞于裸鼠右侧背部皮下，观察灭活后SW480-IL-18细胞的抗瘤效应。结果：经过高能X线照射后，SW480-IL-18细胞生长停滞，96h细胞全部死亡。未照射的106个SW48-1L-18细胞在24h内分泌IL-18的含量是182．7PG；照射组可是60．39pg。空载体转染的SW480细胞和未转染的SW480细胞上清液中未检测到IL-18。SW480-IL-18组较SW480组和pcDNA3．1／SW480组，能明显刺激T细胞增殖（P=0．01）；而SW480组和pcDNA3．1／SW480组，对T细胞的刺激作用微（P=-0．27）。灭活SW480-IL-18细胞能有效地激活裸小鼠体内NK细胞活性。SW480-IL-18细胞治疗后，治疗组较其他对照组肿瘤生长明显受到抑制（P〈0．05）。治疗组小鼠存活期显著延长，有33．4％小鼠长期存活，高于对照组。结论：IL-18基因修饰的SW480细胞具有明显的抗肿瘤作用，为大肠癌基因工程肿瘤疫苗的研制提供了实验基础。