孕早期安氟醚麻醉对大鼠子代海马NR2B表达的影响

目的 评价孕早期安氟醚麻醉对大鼠子代海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)表达的影响.方法 孕8～10 d SD大鼠30只,体重200～250 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):对照组(C组)、吸入安氟醚4h组(E1组)和吸入安氟醚8h组(E2组).E1组和E2组分别吸入1.7％安氟醚4和8h,氧流量为2 L/min,C组吸入等流量氧气.分别于出生后20和30d,采用Morris水迷宫系统测定子鼠的认知功能.于水迷宫实验结束后第2天,取各组子鼠海马组织,分别采用PCR和免疫组化法测定NR2B mRNA及蛋白的表达.结果 与C组比较,E1组和E2组子鼠出生后20和30 d时逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,平台象限停留时间缩短(P＜0.05),海马NR2B mRNA及蛋白表达下调(P＜0.05);与E1组比较,E2组子鼠出生后20和30 d时海马NR2B mRNA及蛋白表达比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 孕早期安氟醚麻醉可降低大鼠子代的认知功能,其机制与抑制大鼠子代海马NR2B表达有关.     

孕早期七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能的影响

目的 评价孕早期七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能的影响.方法 孕5～7d的SD大鼠30只,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):正常对照组(C组)、吸入七氟醚4h组(S1组)和吸入七氟醚8h组(S2组).S1组和S2组分别吸入95％氧气-1.8％七氟醚4h和8h,氧流量2L/min,C组吸入95％氧气8h.分别于出生后20、30 d取5只母鼠的子鼠,采用Morris水迷宫实验测定认知功能,持续7d,然后处死子代大鼠,分离海马组织,测定N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)mRNA及其蛋白和hippyragranin mRNA的表达水平.结果 3组子代大鼠水迷宫实验结果、NR2B mRNA及其蛋白和hippyragranin mRNA表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 孕早期七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能无影响.     

孕早期异氟醚麻醉对子代大鼠认知功能的影响

目的 评价孕早期异氟醚麻醉对子代大鼠认知功能的影响.方法 孕5～7d的SD大鼠30只,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):正常对照组(C组)、吸入异氟醚4h组(Ⅰ1组)和吸入异氟醚8h组(Ⅰ2组).Ⅰ1组和Ⅰ2组分别吸入95％氧气-1.4％异氟醚4h和8h,氧流量2L/min,C组吸入95％氧气8h.分别于出生后20、30 d取5只母鼠的子鼠,采用Morris水迷宫实验测定认知功能,持续7d,然后处死子代大鼠,分离海马组织,测定N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基mRNA及其蛋白的表达水平.结果 3组子代大鼠水迷宫实验结果、N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基mRNA及其蛋白表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 孕早期异氟醚麻醉对子代大鼠认知功能无影响.     

氯胺酮对新生大鼠海马CREB磷酸化水平的影响

目的 探讨氯胺酮对新生大鼠海马环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平的影响.方法 SD大鼠75只,日龄7 d,雌雄不拘,随机分为对照组(C组)、氯胺酮10 mg/kg组(K1组)和氯胺酮20 mg/kg组(K2组),每组25只.K1组和K2组分别皮下注射氯胺酮10、20 mg/kg,C组注射等容量生理盐水,每间隔90 min注射1次,共注射7次.于首次注射后24 h时断头取脑,分离海马,采用TUNEL法检测凋亡神经元,计算凋亡指数;免疫荧光双标法检测p-CREB表达水平;RT-PCR法半定量检测CREB下游基因BDNF mRNA及Bcl-2 mRNA表达水平;于首次注射后6周时采用Morris水迷宫实验测定各组大鼠认知功能.结果 与C组相比,K1组和K2组大鼠海马神经元凋亡指数升高,p-CREB、BDNF mRNA及Bcl-2 mRNA表达下调(P<0.05);与K1组相比,K2组大鼠海马神经元凋亡指数升高,p-CREB、BDNF mRNA及Bcl-2 mRNA表达下调(P<0.05);与C组和K1组相比,K2组逃避潜伏期延长(P<0.05).结论 氯胺酮10、20 mg/kg均可诱导发育期大鼠海马神经元凋亡,而氯胺酮20 mg/kg可导致大鼠发育成熟后认知功能降低,可能与其抑制CREB磷酸化后BDNF及Bcl-2表达下调,导致神经元凋亡,影响大鼠神经系统发育有关.     

氯胺酮对新生大鼠海马CREB磷酸化水平的影响

目的 探讨氯胺酮对新生大鼠海马环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平的影响.方法 SD大鼠75只,日龄7 d,雌雄不拘,随机分为对照组(C组)、氯胺酮10 mg/kg组(K1组)和氯胺酮20 mg/kg组(K2组),每组25只.K1组和K2组分别皮下注射氯胺酮10、20 mg/kg,C组注射等容量生理盐水,每间隔90 min注射1次,共注射7次.于首次注射后24 h时断头取脑,分离海马,采用TUNEL法检测凋亡神经元,计算凋亡指数;免疫荧光双标法检测p-CREB表达水平;RT-PCR法半定量检测CREB下游基因BDNF mRNA及Bcl-2 mRNA表达水平;于首次注射后6周时采用Morris水迷宫实验测定各组大鼠认知功能.结果 与C组相比,K1组和K2组大鼠海马神经元凋亡指数升高,p-CREB、BDNF mRNA及Bcl-2 mRNA表达下调(P<0.05);与K1组相比,K2组大鼠海马神经元凋亡指数升高,p-CREB、BDNF mRNA及Bcl-2 mRNA表达下调(P<0.05);与C组和K1组相比,K2组逃避潜伏期延长(P<0.05).结论 氯胺酮10、20 mg/kg均可诱导发育期大鼠海马神经元凋亡,而氯胺酮20 mg/kg可导致大鼠发育成熟后认知功能降低,可能与其抑制CREB磷酸化后BDNF及Bcl-2表达下调,导致神经元凋亡,影响大鼠神经系统发育有关.     

氯胺酮对新生大鼠海马CREB磷酸化水平的影响

目的 探讨氯胺酮对新生大鼠海马环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平的影响.方法 SD大鼠75只,日龄7 d,雌雄不拘,随机分为对照组(C组)、氯胺酮10 mg/kg组(K1组)和氯胺酮20 mg/kg组(K2组),每组25只.K1组和K2组分别皮下注射氯胺酮10、20 mg/kg,C组注射等容量生理盐水,每间隔90 min注射1次,共注射7次.于首次注射后24 h时断头取脑,分离海马,采用TUNEL法检测凋亡神经元,计算凋亡指数;免疫荧光双标法检测p-CREB表达水平;RT-PCR法半定量检测CREB下游基因BDNF mRNA及Bcl-2 mRNA表达水平;于首次注射后6周时采用Morris水迷宫实验测定各组大鼠认知功能.结果 与C组相比,K1组和K2组大鼠海马神经元凋亡指数升高,p-CREB、BDNF mRNA及Bcl-2 mRNA表达下调(P<0.05);与K1组相比,K2组大鼠海马神经元凋亡指数升高,p-CREB、BDNF mRNA及Bcl-2 mRNA表达下调(P<0.05);与C组和K1组相比,K2组逃避潜伏期延长(P<0.05).结论 氯胺酮10、20 mg/kg均可诱导发育期大鼠海马神经元凋亡,而氯胺酮20 mg/kg可导致大鼠发育成熟后认知功能降低,可能与其抑制CREB磷酸化后BDNF及Bcl-2表达下调,导致神经元凋亡,影响大鼠神经系统发育有关.     

异丙酚对氯胺酮致老龄大鼠认知功能障碍的影响

目的 探讨异丙酚对氯胺酮致老龄大鼠认知功能障碍的影响.方法 健康雄性SD老龄大鼠32只,月龄18～24月龄,体重380～470 g,随机分为4组(n=8):对照组(C组)、异丙酚组(P组)、氯胺酮组(K组)和异丙酚+氯胺酮组(PK组).P组静脉输注异丙酚30 mg·kg-1·h-1,K组静脉输注氯胺酮40 mg·kg-1·b-1,PK组静脉输注异丙酚30 mg·kg-1·h-1+氯胺酮40 mg·kg-1·h-1,C组给予等容量生理盐水,每天2 h,连续7 d.给药结束后测定大鼠认知功能,记录逃避潜伏期和穿越平台次数.认知功能测试完毕后,处死大鼠,取海马组织,检测CA1区神经元凋亡情况,计算神经元凋亡率;测定CA1区caspase-3的表达水平.结果 与C组比较,P组逃避潜伏期、穿越平台次数、海马CA1区神经元凋亡率和caspase-3表达差异无统计学意义(P＞0.05),K组和PK组逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马CA1区神经元凋亡率升高,caspase-3表达上调(P＜0.05);与K组比较,PK组逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加,海马CA1区神经元凋亡率降低,caspase-3表达下调(P＜0.05).结论 异丙酚可减轻氯胺酮致老龄大鼠认知功能障碍,其机制可能与异丙酚可在一定程度上抑制氯胺酮所致caspase-3表达上调,从而抑制氯胺酮诱发的神经元凋亡有关.     

孕晚期七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能和海马神经元树突棘发育的影响

目的 探讨孕晚期不同浓度七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能及树突棘发育的影响.方法 取SD孕鼠16只,用随机数字表法将其分为4组(每组4只):对照组(C组)、1.5％七氟醚麻醉组(S1组)、2.8％七氟醚麻醉组(S2组)和3.3％七氟醚麻醉组(S3组).七氟醚麻醉组母鼠于孕18～20 d进行每天1次的七氟醚麻醉,S1组、S2组和S3组孕鼠分别使用1.5％、2.8％和3.3％的七氟醚吸入4h并保持0.5、1.0、1.5 MAC;C组仅置于麻醉箱内,通入相同流量氧气暴露4h.于出生后21 d对各组子代大鼠水迷宫测定其认知功能,出生后28 d完成水迷宫测试后处死子代大鼠,采用高尔基染色法进行海马树突棘密度测定,采用RT-PCR法测定caspase-3 mRNA表达.结果 各组子代大鼠游泳路程、逃避潜伏期、穿越平台次数及平台所在象限停留时间比较差异无统计学意义(P＞0.05).与C组[(12±3)/10 μm]比较,S3组大鼠海马神经细胞树突棘密度降低[(9±3)/10μm](P＜0.05).各组子代大鼠海马内caspase-3 mRNA表达变化差异无统计意义(P＞0.05).结论 1.5 MAC七氟醚麻醉4h可降低子代大鼠海马内神经细胞树突棘密度,但未对子代大鼠认知功能及caspase-3 mRNA表达产生影响.     

孕早期吸入安氟醚对子代大鼠认知功能的影响

目的 探讨孕早期吸入安氟醚对子代大鼠认知功能的影响.方法 孕8～10 d SD大鼠30只,随机分为对照组(C组)、吸入安氟醚4 h组(E1组)和吸入安氟醚8 h组(E2组),每组10只.E1组和E2组分别吸入1.7%安氟醚4和8 h,氧流量2 L/min,C组吸入等流量氧气.于出生后20和30 d,采用Morris水迷宫实验测试子代大鼠的认知功能.结果 与C组比较,E1组和E2组出生后20和30 d时子代大鼠认知功能测试第3至5天逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,平台象限停留时间缩短(P＜0.05);E1组和E2组子代大鼠上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 孕早期吸入安氟醚可降低子代大鼠的认知功能.     

氯胺酮对幼年大鼠海马神经元tau蛋白磷酸化水平的影响

目的 探讨氯胺酮对幼年大鼠海马神经元tau蛋白磷酸化水平的影响.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为2组(n=30):对照组(C组)和氯胺酮组(K组).K组腹腔注射氯胺酮40 mg/kg,待翻正反射恢复时追加1/2首剂量,共追加3次,C组给予等容量生理盐水.各组于给药后1、7、21 d取10只大鼠行Morris水迷宫实验,测定其学习、记忆功能,并于末次Morris水迷宫实验结束后1 h断头取脑,采用免疫组化法测定海马苏氨酸231位点磷酸化tau蛋白(Tau-pThr231)和丝氨酸404位点磷酸化tau蛋白(Tau-pSer404)表达.结果 与C组比较,K组给药后1、7 d学习、记忆功能降低,海马神经元Tau-pThr231表达升高(P＜0.05);与给药后1 d比较,K组给药后7 d记忆功能增强,21 d学习、记忆功能均增强(P＜0.05或0.01);与给药后1 d和7 d比较,K组给药后21 d海马神经元Tau-pThr231表达降低(P＜0.05).光镜下各组大鼠海马神经元结构均未见异常.结论 氯胺酮可导致幼年大鼠短暂认知功能减退,可能与海马神经元Thr231位点tau蛋白磷酸化有关.     

远端肢体缺血预处理对氯胺酮致发育期大鼠海马CA1区神经细胞Bcl-2和Bax表达失衡的影响

目的研究远端肢体缺血预处理对氯胺酮麻醉导致的发育期大鼠海马CA1区神经细胞抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和凋亡因子Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达失衡的影响。方法SD新生大鼠48只,5日龄,体重8~12 g,随机分为四组:对照组(C组)于出生第7天腹腔注射生理盐水8 ml/kg,间隔2 h注射一次,共注射6次;远端肢体缺血预处理组(RIPC组)于出生第5天行右后肢缺血5 min,再灌注5 min预处理,4个循环,48 h后腹腔注射生理盐水8 ml/kg,方法同C组;氯胺酮组(K组)于出生第7天腹腔注射氯胺酮20mg/kg,方法同C组;肢体缺血预处理+氯胺酮组(RK组)于出生第5天行远端肢体缺血预处理,48 h后腹腔注射氯胺酮20 mg/kg,方法同C组。四组于腹腔注射完成后12 h经心脏灌注取脑,分别采用免疫组化法和Western blot法观察大鼠海马CA1区凋亡因子Bax和抗凋亡因子Bcl-2阳性细胞数量和蛋白含量。结果与RIPC组比较,K组和RK组海马CA1区神经细胞Bax阳性细胞数量明显增多,蛋白含量明显升高(P<0.05),Bcl-2阳性细胞数量明显减少,蛋白含量明显降低(P<0.05)。C组和RIPC组海马CA1区神经细胞Bcl-2和Bax阳性细胞数量和蛋白含量差异无统计学意义。与K组比较,RK组海马CA1区神经细胞Bax阳性细胞数量明显减少,蛋白含量明显降低(P<0.05),Bcl-2阳性细胞数量明显增多,蛋白含量明显升高(P<0.05)。结论远端肢体缺血预处理可减轻氯胺酮大剂量、多次注射导致的发育期大鼠海马CA1区神经细胞Bcl-2、Bax表达失衡。     

全反式维甲酸对5/6肾大部切除大鼠肾素-血管紧张素系统的影响

目的 观察全反式维甲酸（atRA）对残余肾肾素-血管紧张素系统（RAS）的影响。 方法 采用5/6肾大部切除大鼠模型，分别给予5 mg·kg-1·d-1（n＝8）、10 mg·kg-1·d-1（n＝8）、20 mg·kg-1·d-1（n＝8）的atRA灌胃。单纯肾大部切除非干预组（NX组，n＝8）和假手术组（sham组，n＝8）为对照。放射免疫法检测大鼠肾皮质肾素、血管紧张素水平。Western印迹检测肾组织血管紧张素1型受体（AT1R）水平。实时定量PCR方法检测激活蛋白1（AP-1）亚单位c-jun和c-fos mRNA的表达水平。 结果 atRA 灌胃10周时， 3种剂量atRA组收缩压明显低于NX组（P < 0.05），但不同剂量atRA组间差异无统计学意义。NX组大鼠肾皮质肾素和血管紧张素Ⅱ水平均显著高于sham组（P < 0.05）。atRA治疗组肾皮质肾素和血管紧张素Ⅱ水平均显著低于NX组，其中20 mg·kg-1·d-1组二者水平显著低于其他两个剂量组。atRA抑制残肾皮质AT1R表达约30％，而20 mg·kg-1·d-1剂量组AT1R表达水平最低。atRA组AP-1亚基c-jun和c-fos mRNA表达显著低于NX组（P < 0.05）。 结论 atRA能明显抑制5/6肾大部切除大鼠肾皮质RAS主要成分的高表达。     

Alteration of growth-related proto-oncogene expression in diabetic glomeruli by a specific endothelin receptor A antagonist

BACKGROUND.: The early phase of glomerular growth in diabetic rats is accompaniedby increased c-fos and c-jun expression. The renal endothelin(ET)-1 mRNA levels increased with the progression of diabeticnephropathy. This study was designed to assess whether glomerularmRNA expression of growth-related proto-oncogenes in diabeticrat glomeruli is affected by a specific ET receptor A antagonist,FR139317. METHODS.: Diabetes was produced by streptozotocin (STZ) injection. Animalswere divided into four groups: (1) untreated diabetic rats (n=25);(2) FR139317-treated diabetic rats (n=20); (3) control non-diabeticrats (n=20); and (4) FR139317-treated controls (n=20). FR139317treatment was continued for 24 weeks. c-myc, c-fos, c-jun andproliferating cell nuclear antigen (PCNA) mRNA expression inrat glomeruli from each group (n=7) at 4, 12 and 24 weeks afterSTZ or saline injection was evaluated. RESULTS.: Glomerular mRNA levels for c-myc, c-fos, c-jun and PCNA in group1 increased with the progression of diabetic nephropathy (24weeks: c-myc, 4.6-fold; c-fos, 3.8-fold; c-jun, 4.2-fold; andPCNA, 4.4-fold). FR139317 treatment attenuated increases inglomerular mRNA levels of these genes (24 weeks, c-myc, 0.4-fold;c-fos, 0.4-fold; c-jun, 0.5-fold; and PCNA, 0.4-fold) in group2. However, FR139317 did not affect mRNA levels in control glomeruli CONCLUSIONS.: These data suggest that FR139317 may protect against glomerularinjury of diabetes in rats by reducing mRNA levels of growth-relatedgenes.     

白血病抑制因子对人早孕绒毛滋养层细胞c-jun、c-fos基因表达的调节

目的探讨重组人白血病抑制因(LIF)对人早孕滋养层细胞着床相关分子原癌基因c-jun、c-fos表达的影响及其作用环节。方法将人早孕滋养层细胞培养于DMEM培养液中,加入不同浓度LIF(1、10和100 ng)作用1 h后,分别提取总RNA;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测原癌基因c-jun和c-fos的表达。结果正常培养的人早孕滋养层细胞有一定水平的c-jun、c-fos基因表达;LIF对人早孕滋养层细胞c-jun、c-fos的表达均有上调作用,c-jun、c-fos mRNA水平增加1．5～3倍,并且调节呈剂量依赖性。结论LIF可能通过调节滋养层细胞原癌基因c-jun和c-fos表达而影响胚胎的植入。     

咪唑安定对氯胺酮诱导的c-fos基因在大鼠后扣带回皮质区表达的影响

目的 观察咪唑安定对氯胺酮诱导的c-fos基因在大鼠后扣带回皮质区表达的影响，探讨咪唑安定预防或减轻氯胺酮所致精神症状及神经损害的机制。方法 雄性Wistar大鼠30只，随机分为生理盐水5ml组、咪唑安定15mg／kg组、氯胺酮100mg／kg组、咪唑安定15mg／kg加氯胺酮100mg／kg组、氯胺酮100mg／kg加咪唑安定15mg／kg组。咪唑安定与氯胺酮两药间隔15min给药，所用药物均由腹腔注射。各组动物于用药后2h开胸经心脏灌流脑固定，用免疫组织化学方法检测后扣带回皮质区c-fos蛋白的表达，用彩色病理图像分析系统测定c-fos阳性细胞的百分率和阳性细胞的密度。结果氯胺酮可明显诱导c-fos蛋白在大鼠后扣带回皮质区的表达；咪唑安定自身不能诱导c-fos的表达；咪唑安定预处理可显著抑制氯胺酮诱导的c-fos在这一区域的表达；先用氯胺酮后给予咪唑安定仅能部分抑制c-fos的表达。结论 咪唑安定预处理可抑制氯胺酮诱导的c-fos基因在大鼠后扣带回皮质区的表达，这可能是其预防或减轻氯胺酮所致精神症状和神经损害的机制之一。     

多次异丙酚给药对大鼠海马pCREB表达的影响

目的 探讨多次异丙酚给药对大鼠海马磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(pcREB)表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠48只,日龄18～21 d,体重40～60 g,随机分为4组,每组12只,各组分别腹腔注射0.9%生理盐水10 ml/ks(A组)、异丙酚50 mg/kg(B组)、异丙酚100 mg/kg(C组)或异丙酚200 mg/kg(D组),连续用药5 d.每天均采用Morris水迷宫实验测试大鼠空间学习记忆能力.第5天测试结束后处死大鼠取脑分离海马组织,每组随机取6只应用免疫组织化学法检测海马pCREB的表达,剩余6只透射电镜下观察海马神经元突触结构.结果 与第1天比较,各组第4、5天逃避潜伏期明显缩短(P<0.05);与A组比较,其余3组第4、5天逃避潜伏期延长(P<0.05);与B组比较,D组第5天逃避潜伏期延长(P<0.05);与A组和B组比较,c组和D组海马pCREB表达下调(P<0.05).随异丙酚剂量增加,大鼠海马神经元突触结构受损加重.结论 多次较大剂量异丙酚给药可引起幼年大鼠空间学习记忆能力降低,其机制可能与海马pCREB表达下调、海马神经元突触结构改变有关.