急性坏死性胰腺炎大鼠水通道蛋白4与脑损伤关系探讨

目的 :探讨水通道蛋白4(AQP4)在急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis,ANP)大鼠脑组织中的变化趋势,观察其与血脑屏障通透性和脑水肿的相关性。方法:84只成年雄性SD大鼠,随机分为ANP组(n=72)和假手术组(n=12)。制备ANP大鼠模型。假手术组于造模后24 h,ANP组于注射牛磺胆酸钠造模后3、6、9、12、18和24h 6个时间点为6个组,检测脑组织含水量、血脑屏障通透性变化,Western印迹法和半定量逆转录PCR检测脑组织AQP4蛋白及m RNA表达。结果 :脑组织AQP4蛋白及m RNA在损伤后6 h开始表达上调,9、12、18和24 h依次升高(P0.05)。AQP4蛋白及m RNA的表达与脑组织含水量均呈正相关(P0.05)。结论:ANP大鼠的血脑屏障功能降低及脑组织AQP4蛋白及m RNA表达水平增加,可能与脑水肿的形成和发展密切相关。     

烫伤早期脑水肿家兔脑组织水通道蛋白4表达与磁共振成像结果相关性研究

目的 观察水通道蛋白4(AQP4)在严重烫伤早期合并脑水肿家兔脑组织中的表达规律以及与磁共振成像(MRI)信号变化的联系,探讨严重烫伤早期脑水肿水的跨膜转运特征. 方法 将35只健康新西兰大白兔按照随机数字表法分为正常对照组(5只)及烫伤组(30只),其中烫伤组家兔均造成50％TBSAⅢ度烫伤(经病理切片证实存在脑水肿).伤后1、2 3、4、5、6h,烫伤组家兔(每时相点5只)行MRI颅脑检查并动态检测表观弥散系数(ADC)值；烫伤组家兔取额叶、顳叶及顶叶皮质,基底节区及小脑组织,采用免疫组织化学法及RT-PCR分别检测AQP4蛋白和AQP4 mRNA的表达.正常对照组家兔同上进行检测.对数据进行单因素方差分析,对AQP4蛋白与ADC值进行一元线性相关分析和Pearson线性相关分析. 结果 与正常对照组比较,伤后6h内烫伤组家兔MRI图像(T1加权像、T2加权像、扩散加权成像)未见明显改变,伤后4～6 h烫伤组家兔脑组织各部位中ADC值均明显降低(F值为0.492～2 271,P值均小于0.05).烫伤组家兔伤后2～6 h脑组织各部位中AQP4蛋白表达趋势大体一致,均明显高于正常对照组(0.164±0.022 -0.247±0.018),其中伤后3 h或4 h达高峰(0.237±0.042-0.306±0.026),F值为2.420～11.439,P值均小于0.05.AQP4蛋白在脑组织各部位的表达均与相应ADC值变化呈显著负相关,其r值为-0.489 - -0.337P ＜0.05或P ＜0.01.烫伤组家兔伤后各时相点脑组织各部位中AQP4 mRNA表达均明显高于正常对照组(F值为39.992～238.584,P值均小于0.05),伤后2h达高峰,且在脑组织各部位表达趋势大体一致. 结论 家兔严重烫伤后早期脑水肿(伤后6h以内)以细胞毒性脑水肿为主,AQP4可能在其形成过程中发挥重要作用.ADC值对于反映AQP4变化,进而无创、便捷评估脑水肿发展状况可能具有重要参考价值.     

大鼠液压冲击伤性脑水肿AQP4表达及其与脑水肿关系

目的 探讨大鼠液压冲击伤后水肿脑组织AQP4表达变化与脑水肿之间关系.方法 成年雄性SD大鼠48只制作颅脑损伤模型,术后6、12、24 h、3、7 d用于湿重法、免疫组织化学法分别测定水肿脑组织含水量及AQP4表达.结果 自伤后6 h,脑组织含水量开始增加(78.48±0.50)%,24 h达高峰(82.54±1.89)%,持续至3 d(80.61±0.49)%,然后开始下降,至7 d基本恢复到正常.组织学证实了脑水肿趋势.免疫组织化学显示水肿脑组织AQP4表达于伤后6 h开始增加(0.178±0.016),24 h达高峰(0.331±0.024),持续至3 d后下降(0.307±0.019),7 d仍高于假手术组;线性相关分析发现AQP4表达与脑含水量呈正相关(r=0.940,P<0.05).结论 AQP4表达上调可能在鼠液压冲击伤脑水肿的消散中起重要作用.     

血红素加氧酶-1对心肺复苏诱发大鼠脑水肿发生的影响

目的 探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对心肺复苏诱发大鼠脑水肿发生的影响.方法 雄性SD大鼠40只,随机分为4组(n=10):假手术组(S组)、心肺复苏组(CAR组)、氯化高铁血红素组(H组)和锡原卟啉组(SnPP组).CAR组、H组和SnPP组进行窒息性心跳骤停后行心肺复苏,H组预先12 h经腹腔注射氯化高铁血红素15 mg/kg,SnPP组预先1 h经腹腔注射锡原卟啉Ⅸ30 μmol/kg.各组于恢复自主循环(ROSC)后1 h和6 h时断头取脑组织,测定脑皮质、海马和脑干含水量,测定HO-1和水通道蛋白4(AQP4)mRNA表达.结果 与S组比较,CAR组和SnPP组皮质和海马含水量增加,海马AQP4 mRNA表达上调,H组HO-1 mRNA表达上调,SnPP组HO-4 mRNA表达下调(P<0.05);与CAR组比较,H组皮质和海马含水量降低,皮质及海马AQP4 mRNA表达下调,HO-1 mRNA表达上调(P<0.05),SnPP组T_2时皮质及海马AQP4 mRNA表达上调,HO-1 mRNA表达下调(P<0.05),各组脑干含水量比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 HO-1活性增高可减轻大鼠心肺复苏早期脑水肿,其机制可能与下调AQP4的表达有关.     

人脑膜瘤水通道蛋白4表达及其生物学意义

目的 研究水通道蛋白4(aquaporin 4 AQP4)在人脑膜瘤中的表达与脑膜瘤的病理学分型的相关性,并探讨其与瘤周脑组织水肿的关系及其可能机制.方法 取伴水肿(MRI证实)的良性脑膜瘤组织15例,无水肿良性脑膜瘤组织21例,恶性脑膜瘤15例和正常脑组织6例,应用免疫组织化学方法检测AQP4在脑组织的表达,并结合临床病理参数进行综合分析.结果 在不伴脑水肿的良性脑膜瘤组、伴水肿的良性脑膜瘤组以及恶性脑膜瘤组中阳性表达率均升高,正常脑组织中几乎未见阳性表达.伴水肿的良性脑膜瘤组织中AQP4阳性表达率高于无水肿良性脑膜瘤组(P＜0.05),恶性脑膜瘤组织中AQP4阳性表达率明显高于不伴脑水肿良性组(P＜0.01),AQP4的表达和脑膜瘤病理分级无相关性(P＞0.05).AQP4的表达与瘤周水肿显著相关(P＜0.05).结论 AQP4在脑膜瘤中的高表达与脑组织水肿的发生密切相关.检测脑膜瘤AQP4的表达对了解脑膜瘤生物学行为和判断预后有重要价值.     

水通道蛋白1在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的 探讨水通道蛋白1(AQP1)在乳腺癌组织中的表达和意义.方法 取乳腺癌组织40例及癌旁组织10例,应用RT-PCR法检测AQP1 mRNA在乳腺癌和癌旁组织中的表达及分布.结果 乳腺癌中AQP1 mRNA表达量(0.8957±0.0428),明显高于癌旁组织AQP1 mRNA表达量(0.3401±0.0549),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 AQP1在乳腺癌组织中表达增高,提示AQP1可能与乳腺癌生长、转移有关.     

供体鼠肺移植热缺血损伤对肺组织水通道蛋白表达的影响

目的 观察水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白3(AQP3)在供体鼠肺移植热缺血损伤过程中的表达,探讨其表达与肺水肿的关系.方法 30只SD大鼠按肺热缺血时间随机分为3组:A组:0 h(n=10);B组:1 h(n=10);C组:2 h(n=10).免疫组织化学、Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织AQP1、AQP3蛋白和mRNA的表达.结果 免疫组织化学显示,A、B、C 3组均有AQP1,AQP3蛋白表达.3组中AQP1 mRNA表达A值分别为0.63±0.10、0.49±0.07、0.36±0.06,AQP3分别为0.85±0.06、0.76±0.08、0.52±0.07.3组中AQP1蛋白相对灰度值分别为1.13±0.18、0.88±0.13、0.76±0.09,AQP3分别为1.92±0.26、0.95±0.15、0.61±0.07,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 肺移植过程中热缺血损伤造成AQP1、AQP3蛋白表达下调和肺水肿的发生;手术应尽量缩短热缺血时间.     

过表达核转录因子Kr(u)ppel样因子4下调胃癌AGS细胞血管内皮生长因子的表达

目的 观察过表达核转录因子Kr(u)ppel样因子4(KLF4)是否下调胃癌AGS细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达.方法 体外培养人胃癌AGS细胞,分为4组:转染空质粒24 h对照组、转染空质粒48 h对照组、转染KLF4表达质粒24 h组、转染KLF4表达质粒48 h组.构建KLF4表达质粒,脂质体LipofectamineTM2000分别转染空质粒、KLF4表达质粒到AGS细胞,24、48 h后提取总RNA和蛋白,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、Western blot法分别检测KLF4和VEGF mRNA和蛋白水平的表达.结果 AGS细胞在24 h转染率为65%-75%,48 h转染率为40%～45%.实验组与对照组转染24、48 h后,KLF4 mRNA的表达量分别为:563.584±250.744比4.997±5.729(P＜0.05);351.852±212.439比2.4420±1.3770(P＜0.05).VEGF mRNA表达量分别为:0.008 929±0.003 810比0.002 294±0.000720(P＜0.05);0.018 375±0.008 263比0.002 193±0.001 698(P＜0.05);胃癌AGS细胞KLF4蛋白表达量显著性增加,相对应地VEGF蛋白表达水平显著性降低(P＜0.05).结论 体外胃癌AGS细胞过表达KLF4导致VEGF mRNA和蛋白表达下调,KLF4可能参与抑制调节胃癌AGS细胞VEGF的表达.     

脓毒症大鼠肾脏AQPs动态变化与水代谢的关系

目的：探讨肾脏AQPs的表达与肾损伤水代谢紊乱的关系。方法：Wistar大鼠采用盲肠结扎穿孔法（CLP）建立脓毒症大鼠模型。观测尿量、尿渗透压和肾功能。免疫组化方法检测AQP1、AQP2蛋白水平,实时荧光定量PCR方法检测AQP1mRNA、AQP2mRNA水平。结果：手术组大鼠肾脏AQP1蛋白及AQP1mRNA表达随着CPL术后时间的延长呈下降趋势,6h开始下降,24h达最低;AQP2蛋白及AQP2-mRNA表达均在术后3h增高、12h、24h明显降低,较假手术组差异有统计学意义（P〈0.05）。大鼠肾脏AQP1、AQP2分别与尿量呈负相关（P〈0.05）,与尿渗透压呈正相关（P〈0.05）。结论：AQP1和AQP2基因通过调节AQP1、AQP2蛋白的表达,参与肾脏水代谢的调节;AQP1、AQP2蛋白及基因的表达异常是导致脓毒症肾损伤水代谢紊乱的重要原因。     

先天性积水肾脏组织中水通道蛋白mRNA表达与肾实质厚度变化的相关性研究

目的 观察先天性肾积水肾组织水通道蛋白1～4(AQP1～4)mRNA表达及与肾实质厚度变化之间的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应法检测37例先天性肾盂输尿管连接处狭窄患儿[年龄(60.3±48.8)个月]和6例正常对照组[年龄(62.7±17.1)个月]肾组织标本中AQP1～4 mRNA的相对表达量.术前B超检测积水肾实质厚度,并与术中测定结果比较.AQP1～4 mRNA相对表达量与肾实质厚度之间进行相关性分析.结果 积水肾组织中AQP1～4 mRNA表达量分别为0.39±0.22、0.42±0.20、0.52±0.22、0.30±0.18,正常对照组分别为0.90±0.10、0.92±0.09、0.98±0.12、0.74±0.21,2组比较差异均有统计学意义(P<0.01).B超测定积水肾实质厚度平均(5.01±2.38)mm,肾盂放水后肾实质厚度平均(5.12±1.81)mm,差异无统计学意义(P0.05).梗阻肾脏实质厚度与AQP1～4 mRNA相对表达量呈正相关(r分别为0.773、0.772、0.557、0.625,P<0.01).结论 积水肾实质厚度变化与AQP1～4 mRNA表达量下降有一定相关性.     

Asymptomatic brain tumor detected at brain check-up

Brain check-up was performed in 4000 healthy subjects who underwent medical and radiological examinations for possible brain diseases in our hospital from April 1996 to March 2000. Magnetic resonance imaging revealed 11 brain tumors which consisted of six meningiomas, three pituitary adenomas, one astrocytoma, and one epidermoid cyst. The detection rate of incidental brain tumor in our hospital was 0.3%. Nine patients underwent surgery, with one case of morbidity due to postoperative transient oculomotor nerve paresis. The widespread use of brain check-up may increasingly detect asymptomatic brain tumors. Surgical indications for such lesions remain unclear, and the strategy for treatment should be determined with consideration of the patient's wishes.