急性肾损伤微环境上调骨髓间充质干细胞分泌肾脏保护性生长因子

目的：急性肾损伤的模型中不可忽视炎症等原因,机体在不同应激反应条件下分泌的保护性生长因子各不相同。在这种情况下,骨髓间充质干细胞分泌的肾脏保护性细胞因子不同于急性肾脏损伤的炎症因子。因此,探讨在体外模拟的急性肾衰竭微环境中上调骨髓间充质干细胞（BMSC）肾脏保护性生长因子的可能性。方法：取SD大鼠的骨髓细胞,经密度梯度离心分离,联合贴壁筛选法获取的细胞经流式细胞仪鉴定为BMSC,分别用含有胎牛血清（对照组）;胎牛血清＋缺血再灌注肾脏匀浆上清的培养基进行培养实验。培养7d后,RT—PCR检测两组BMP-7、IL-10、HGF的mRNA表达情况并进行比较。结果：培养7d后,体外模拟的急性肾衰竭微环境组BMP-7、IL-10、HGF的mRNA表达高于对照组。结论：在体外模拟的急性肾衰竭微环境中上调BMSC肾脏保护性生长因子的表达,从而对急性肾损伤发挥主要修复作用。     

hVEGF165基因转染后兔骨髓间充质干细胞蛋白分泌功能及成骨活性的检测

目的:血管内皮细胞生长因子在血管再生和骨组织再生过程中起着重要的调节作用.观察hVEGF-165基因转染的兔骨髓间充质干细胞分泌VEGF的功能及转染后细胞的成骨活性.方法:(1)体外分离、培养兔骨髓间充质干细胞,纯化并鉴定兔骨髓间充质干细胞;免疫荧光法检测细胞表面标志;传代培养后以1μgPcDNA3.1-hVEGF165∶3μL阳离子脂质体Lipofectamine的比例转染,通过ELISA和Western-blot检测转染后细胞中外源性VEGF的表达.(2)测定在正常条件培养和成骨条件培养下,转染后细胞上清中碱性磷酸酶、骨钙素的水平.结果:(1)hVEGF165基因转染的骨髓间充质干细胞能成功分泌VEGF蛋白.(2)成骨条件培养下,基因转染组细胞碱性磷酸酶和骨钙素的分泌量明显高于未转染组(P<0 05);而在正常条件培养下,基因转染组细胞碱性磷酸酶和骨钙素的表达分泌量较低.结论:(1)采用基因转染技术可将hVEGF165基因转染到骨髓间充质干细胞中并可有效表达具有生物活性的VEGF.(2)在成骨条件培养下,转染hVEGF165基因后骨髓间充质干细胞的成骨能力增强.     

骨髓间充质干细胞对重症急性胰腺炎大鼠肾损害干预的研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾损害的干预效果及机制.方法 将鉴定过的骨髓间充质干细胞注射到SAP大鼠体内,观察血清淀粉酶、肌酐、尿素氮及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1变化;透射电镜下观察肾脏间质毛细血管超微结构变化;免疫组织化学对肾脏AQP1定位;荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测肾脏水通道蛋白1(AQP1) mRNA变化,Western blot检测肾脏AQP1蛋白变化.结果 (1)培养的细胞经流式细胞术检测,CD29阳性细胞率为99.30％,CD90阳性细胞率为93.50％,CD34阳性细胞率为0.82％,CD45阳性细胞率为2.22％;(2)间充质干细胞干预后,SAP大鼠6、12、24h血清淀粉酶、肌酐、尿素氮及TNF-α、IL-1低于对应时间点未干预的SAP大鼠,两者差异有统计学意义(P＜0.05);(3)间充质干细胞干预后,SAP大鼠6、12、24 h肾脏间质毛细血管变化均轻于对应时间点未注射SAP大鼠;(4)间充质干细胞干预后,SAP大鼠12、24 h AQPl mRNA均高于对应时间点未干预的SAP大鼠,两者差异有统计学意义(P＜0.05);6、12、24 h AQP1蛋白均高于对应时间点未干预的SAP大鼠,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 骨髓间充质干细胞能减轻SAP大鼠肾损害,其机制可能同抑制炎性因子表达,减轻间质毛细血管损害,阻滞肾脏AQP1表达下调有关.     

脂肪来源间充质干细胞治疗克罗恩病的实验研究

目的：探讨脂肪来源间充质干细胞（ADMSC）在克罗恩病（CD）治疗中的作用及可能的作用机制。方法采用三硝基苯磺酸（TNBS）法建立CD小鼠动物模型。将75只6～8周龄SPF级雌性BALB／c小鼠,随机分成3组,包括对照组（乙醇溶液灌肠加PBS腹腔注射）、TNBS组（TNBS灌肠加PBS腹腔注射）和ADMSC组（TNBS灌肠加ADMSC腹腔注射）,每组25只。通过免疫组织化学染色和实时定量 PCR等方法检测组织炎性细胞因子的水平,并记录各组小鼠生存曲线。结果 ADMSC组较TNBS组病变程度明显减轻,生存率明显增加（60％比30％,P＜0．05）。ADMSC组促炎因子坏死因子α（TNF-α）、白介素12（IL-12）及血管内皮生长因子（VEGF）的表达显著低于TNBS组,而抑炎因子IL-10的表达显著增加（均P＜0．05）。结论 ADMSC可能通过下调促炎因子TNF-α、IL-12和VEGF的表达和上调抑炎因子IL-10的表达,有效修复结肠炎性损伤,有望用于CD的临床治疗。     

骨髓间充质干细胞干预对急性肾损伤鼠肾脏中细胞因子的影响

目的：建立缺血再灌注（I/R）诱导的急性肾损伤小鼠模型,探讨外源性地给予骨髓间充质干细胞（MSCs）干预对模型小鼠肾损伤微环境中细胞因子水平的影响,并探讨其在肾损害修复中的作用。方法：采用Percoll密度梯度离心法分离出C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞（mMSCs）。雄性C57BL/6小鼠45只,分为正常对照组（15只）、I/R组（15只、夹闭双侧肾蒂30min开放）、I/R＋mMSCs组（15只、夹闭双侧肾蒂30min开放的同时尾静脉注射mMSCs）。于建模后1d、2d、3d、7d、14d分别处死部分小鼠（每次每组均处死3只）,留取动脉血及肾组织,检测血尿素氮（BUN）及肌酐（Scr）水平,制作肾组织切片行HE染色,观察肾组织病理变化,行肾小管坏死程度评分（ATN评分）。ELISA法检测肾组织匀浆肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白细胞介素-10（IL-10）、肝细胞生长因子（HGF）、骨形态发生蛋白-7（BMP-7）的水平。结果：I/R组小鼠的BUN及Scr均显著高于正常对照组,肾小管损伤严重;而I/R＋mMSCs组小鼠的BUN及Scr水平较I/R组为低,以术后第7天差异最为显著（P〈0.01）,肾小管损伤病理明显减轻,ATN评分也有着显著降低。ELISA结果显示单纯I/R组各时间点肾组织匀浆中TNF-α、IL-1β、MCP-1的水平显著升高（P〈0.01或P〈0.05）,而IL-10、HGF、BMP-7的水平却有着显著降低（P〈0.01或P〈0.05）。但同时给予MSCs干预的I/R小鼠肾组织匀浆中前述细胞因子的水平却向着相反方向改变。结论：MSCs对I/R肾组织中细胞因子的分泌具有调控作用,而这些调控了的细胞因子进而可通过旁分泌作用发挥促进肾损害的修复作用。     

IL-4, IL-6和TNF-α对脐带血来源的间充质干细胞成骨分化的作用

目的探讨细胞因子IL-4,IL-6和TNF-α对脐带血来源的间充质干细胞成骨分化的作用。方法取脐带血,以Percoll分离液离心分离细胞后进行培养,通过流式细胞仪检测间充质干细胞标志物CD29和CD44及造血干细胞标志物CD34;干细胞进行基础成骨分化培养后,以10 ng/m L细胞因子IL-4、IL-6和TNF-α进一步诱导,检测ALP活力,以茜素红对细胞进行钙结节染色比较。结果分离的细胞高表达CD29和CD44,基本不表达造血干细胞标志物CD34,为较纯的间充质干细胞;IL-4,IL-6诱导成骨9 d后,ALP活力相比阴性对照组显著增加(P0.01);IL-4、IL-6和TNF-α作用细胞18 d时,钙结节的形成个数为(6.4±1.78)、(11.2±1.75)、(4.5±1.90),较阴性对照组(0.6±0.84)显著增加(P0.01),其中IL-6作用后ALP活力增幅最大,钙结节形成的数目最多。结论 IL-4、IL-6作用9 d,可刺激间充质干细胞成骨分化,其中IL-6作用最为明显。     

骨髓间充质干细胞对大鼠慢性胰腺炎炎性因子的影响

目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠慢性胰腺炎(CP)炎性因子的影响。方法 将80只SD大鼠随机分为空白组(20只,注射无菌生理盐水),模型组[20只,尾静脉注射二丁基二氯化物(DBTC)制作大鼠CP模型],假治疗组(20只,尾静脉注射DBTC制作大鼠CP模型后,输入和BMSCs等量的无菌生理盐水)和治疗组(20只,于CP模型制作成功后尾静脉注射体外培养的同种异体BMSCs)。80 d后采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠胰腺中白细胞介素(IL)-1、IL-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-d、转化生长因子(TGF)-β水平。结果 治疗组中IL-1 (652.326±36.424) ng/L,IL-6(8.347±1.094) ng/L,IL-8( 352.487±69.340) ng/L,rGF-β(0.020±0.006) μg/L,均低于假治疗组与模型组(P＜0.05),IL-10(603.799±89.374) ng/L,TNF-α( 507.450±90.130)μg/L则高于假治疗组和模型组(P＜0.05)。模型组和假治疗组之间IL-1、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、TGF-β的表达水平差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 同种异体BMSCs的输入可以降低CP中促炎因子的水平,提高抗炎因子的浓度,有助于减轻CP的炎症反应,减缓甚至阻止CP的发展。     

hIL-10基因修饰骨髓间充质干细胞对异种T淋巴细胞增殖的影响及机制研究

目的 研究hIL-10基因修饰的MSCs(骨髓间充质干细胞)对异种混合T淋巴细胞增殖的影响及机制.方法 RT-PCR克隆hIL-10基因并将构建慢病毒hIL-10/pLOX-cwGFPs,然后将慢病毒转导hIL-10入豚鼠MSCs;ELISA测定hIL-10-MSCs培养上清hIL-10含量;CCK-8法检测hIL-10基因修饰的骨髓间充质干细胞对体外混合淋巴细胞培养的影响;ELISA测定其培养上清对外周血单个核细胞分泌IFN-γ的影响.结果 成功构建慢病毒hIL-10/pLOX-cwGFP,hIL-10-MSCs培养上清的IL-10水平明显高于未转染(P<0.05);hIL-10-MSCs能抑制异种T淋巴细胞混合培养的增殖反应(P<0.05);加入IL-2能逆转MSCs的抑制作用(P<0.05);hIL-10-MSCs培养上清组能抑制PHA刺激的PBMC分泌IFN-γ(P<0.05).结论 hIL-10-MSCs对混合异种淋巴细胞培养有显著的抑制作用,能抑制PHA刺激的PBMC分泌IFN-γ.     

人牙龈间充质干细胞对B细胞的作用及机制研究

目的探讨人牙龈间充质干细胞(GMSC)对B细胞增殖与分化的调节功能及其相关分子机制。方法分离提取GMSC,从外周血分选出B细胞。将GMSC或纤维母细胞分别与B细胞进行体外共培养,设为GMSC组和纤维母细胞组,检测两组B细胞的扩增情况;检测两组细胞上清中IgG1与IgM的表达情况;检测两组细胞白细胞介素(IL)-6、Perforin、干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α的分泌情况;检测两组B细胞表达IL-10与转化生长因子(TGF)-β的水平;检测两组B细胞中PC-1的表达情况;检测GMSC调控B细胞功能的信号通路;检测GMSC对B细胞活化T细胞功能的调控。结果与纤维母细胞组比较,GMSC组B细胞的扩增明显减弱(P0.05),GMSC与B细胞共培养后,能明显抑制B细胞分泌IgG1和IgM,明显抑制IL-6、Perforin、IFN-γ和TNF-α的分泌(均为P0.05)。与纤维母细胞组比较,GMSC组中的IL-10与TGF-β分泌量更高(均为P0.05)。GMSC组中PC-1的表达水平明显降低(P0.05)。加入TGF-β受体抑制剂ALK5后,GMSC对B细胞的抑制作用明显减弱(P0.05)。与纤维母细胞组比较,GMSC组的B细胞活化和扩增T细胞的能力明显减弱(P0.05)。结论 GMSC对B细胞及其介导的免疫反应具有抑制功能,可通过TGF-β信号通路抑制B细胞的活化以及其他相关功能。     

定向诱导间充质干细胞成软骨分化相关活性因子研究进展

关节软骨受损或缺失,是导致关节炎等渐进性疾病的主要原因,严重影响患者生活质量。成熟的透明软骨由于缺乏神经支配和血管供应,且软骨细胞增殖能力差,所以很难自我修复。自体软骨细胞移植尚存在局限性,且操作复杂,阻碍了临床应用。间充质干细胞增殖能力较强,并保留有分化潜力,但向成软骨分化需要一定的条件,如细胞因子、支架材料、培养基等。寻找促进诱导间充质干细胞成软骨分化的活性因子,是目前关节软骨再生的重要研究方向。本文就诱导间充质干细胞向软骨分化的相关活性因子的研究进展进行综述。     

BMSCs向心肌分化的基因表达谱分析

目的分析hBMSCs经5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-aza)诱导向心肌样细胞分化过程中基因表达谱的改变。方法取胸外科非血液病患者手术中废弃的肋骨骨髓分离培养hBMSCs,5-aza诱导第2代hBMSCs。取诱导前及诱导后的细胞,免疫细胞化学法检测α-actin、肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)和连接蛋白43(connexin 43)表达,流式细胞仪检测cTnT阳性细胞百分率;利用人表达谱基因芯片技术筛选分化过程中的差异表达基因,对部分基因进行功能分类和分层聚类分析。结果 hBMSCs经5-aza诱导后,部分呈肌细胞样形态。免疫细胞化学染色检测示诱导前细胞α-actin、cTnT染色呈弱阳性,connexin 43染色呈阴性;诱导后3周细胞α-actin、cTnT、connexin 43染色均呈阳性。流式细胞仪检测示诱导前cTnT阳性细胞百分率为7.43%±0.02%,诱导后3周为49.64%±0.05%。分化过程中共检测到1 814个显著差异表达基因,对其中647个基因分层聚类,聚为5类,生物功能包括信号传导、细胞代谢、增殖分化、发育以及形态发生等。结论 hBMSCs经5-aza诱导向心肌样细胞分化过程受信号传导通路、转录基因、生长因子等多种因素在不同时间点上的共同调控。     

人脐带间充质干细胞移植治疗晚期外伤性癫痫

目的探讨人脐带间充质干细胞移植治疗晚期外伤性癫痫的临床价值。方法对31例晚期外伤性癫痫患者进行人脐带间充质干细胞移植,观察临床效果。结果癫痫发作完全消失或仅有先兆者21例,极少发作(≤3次/年)者5例,发作明显改善(减少≥75%)者4例,无明显改善(减少<75%)者1例,满意率83.87%。结论人脐带间充质干细胞移植对治疗外伤性癫痫具有较好的效果。     

人羊膜间充质干细胞外泌体通过微小RNA-135a促进成纤维细胞迁移实验研究

目的研究人羊膜间充质干细胞外泌体(human amniotic mesenchymal stem cell exosome,hAMSCExo)中的微小RNA-135a(microRNA-135a,miR-135a)对成纤维细胞迁移的作用。方法用外泌体分离试剂盒提取hAMSC-Exo并进行鉴定,划痕实验检测hAMSC-Exo对成纤维细胞迁移的作用。实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)检测过表达miR-135a后hAMSC-Exo中miR-135a基因相对表达量,划痕实验检测过表达和敲减miR-135a后hAMSC-Exo对成纤维细胞迁移的作用,Western blot检测过表达和敲减miR-135a后hAMSC-Exo成纤维细胞迁移相关蛋白[大分子肿瘤抑制因子2(large tumor suppressor 2,LATS2)、E-钙黏着蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、α平滑肌肌动蛋白(αsmooth muscle actin,α-SMA)]的相对表达量;均以293T细胞外泌体及hAMSC-Exo作为对照。结果成功获得hAMSC-Exo;划痕实验检测示,hAMSC组促进成纤维细胞迁移能力最强,GW4869(外泌体抑制剂)处理hAMSC组促进成纤维细胞迁移能力减弱。qRT-PCR检测示过表达miR-135a后,hAMSC-Exo中miR-135a基因相对表达量明显增加。划痕实验检测示,过表达miR-135a后,hAMSC-Exo促进成纤维细胞迁移能力增强;而敲减miR-135a后,hAMSC-Exo促进成纤维细胞迁移能力减弱。Western blot检测成纤维细胞迁移相关蛋白显示,与293T细胞外泌体组比较,各hAMSC-Exo处理组均下调Ecadherin、N-cadherin和LATS2表达,上调α-SMA表达;其中过表达miR-135a后,hAMSC-Exo能力增强,敲减miR-135a后,hAMSC-Exo能力较过表达miR-135a组下降。结论hAMSC-Exo中的miR-135a可促进成纤维细胞迁移,抑制E-cadherin、N-cadherin和LATS2表达,促进α-SMA表达。     

Follistatin 表达抑制促进 BMP-2诱导人类骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究

目的探讨Follistatin表达抑制对人类骨髓间充质干细胞（BMSC）细胞活性及骨形态发生蛋白（BMP）‐2诱导人类BMSC成骨分化的影响。方法采用 Follistatin特异性 siRNA 转染人类BMSC ,检测线粒体脱氢酶活性、细胞DNA含量及蛋白含量。采用定量逆转录‐聚合酶链式反应（qRT‐PCR）检测成骨相关基因表达,采用碱性磷酸酶（ALP）染色和茜素红染色检测 Follistatin对BMP‐2诱导人类BMSC成骨分化的影响。结果转染后3、7 d ,人类BMSC代谢、DNA含量显著升高;转染后14 d ,总蛋白含量增加。Follistatin表达抑制后成骨相关基因如ALP、OCN、OSX、OC、OPN、RUNX2等表达升高,且ALP活性及钙沉积量显著增加。结论抑制Follistatin表达可促进人类BMSC细胞活性和BMP‐2诱导人类BMSC成骨分化能力,Follistatin可抑制人类BMSC成骨分化。     

Development and characterization of novel clinical grade neonatal porcine bone marrow‐derived mesenchymal stem cells

Due to recent advances in research on mesenchymal stem cells (MSCs), MSCs are expected to be used in various clinical applications. However, securing adequate cadaveric donors and safety of living donors are major issues. To solve such issues, we have examined to develop clinical grade neonatal porcine bone marrow‐derived MSCs (npBM‐MSCs). Clinical grade neonatal porcine bone marrow cells were collected, frozen, and sent to our laboratory by air. The npBM‐MSCs were isolated from thawed bone marrow cells, then frozen. The thawed npBM‐MSCs were examined for CD markers and differentiated into chondrocytes, osteocytes, and adipocytes. They were compared with human bone marrow‐derived MSCs (hBM‐MSCs) for growth rate and size. To assess the robustness of proliferation, we compared culture medium with or without gelatin. The npBM‐MSCs expressed positive MSC markers CD29, CD44, and CD90 and were differentiated into chondrocytes, osteocytes, and adipocytes. The doubling time of npBM‐MSCs was significantly shorter than that of hBM‐MSCs (17.3 ± 0.8 vs 62.0 ± 19.6 hours, P < 0.01). The size of npBM‐MSCs was also significantly smaller than that of hBM‐MSCs (13.1 ± 0.3 vs 17.5 ± 0.4 μm, P < 0.001). The npBM‐MSCs showed similar proliferation characters irrespective of with or without gelatin coating. The npBM‐MSCs secreted VEGF‐A, VEGF‐C, and TGF‐β1. We have established npBM‐MSCs which show super‐rapid growth, small size, and robust proliferation profile. The np‐MSCs might be able to solve the donor issues for MSC therapy.     

Does vehicle-based delivery of mesenchymal stromal cells give superior results in knee osteoarthritis? Meta-analysis of randomized controlled trials

Study designMeta-analysis.ObjectivesWe aim to analyze and compare the efficacy and safety of vehicle-based delivery of Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) in the management of osteoarthritis of the knee from Randomized Controlled Trials (RCTs) available in the literature.Materials and methodsWe conducted independent and duplicate electronic database searches including PubMed, Embase, Web of Science, and Cochrane Library till August 2021 for RCTs analyzing the efficacy and safety of vehicle-based delivery of MSCs in the management of knee osteoarthritis. Visual Analog Score (VAS) for Pain, Western Ontario McMaster Universities Osteoarthritis Index (WOMAC), Magnetic Resonance Observation of Cartilage Repair Tissue (MOCART) score, and adverse events were the outcomes analyzed. Analysis was performed in R-platform using OpenMeta [Analyst] software.Results21 studies involving 936 patients were included for analysis. None of the studies made a direct comparison of the direct and vehicle-based delivery of MSCs, hence we pooled the results of all the included studies of both groups and made a comparative analysis of their outcomes. Although at 6 months, both direct and vehicle-based delivery of MSCs showed significantly better VAS improvement (p = 0.002, p = 0.010), it was not consistent at 1 year for the vehicle delivery (p = 0.973). During 6 months and 12 months, direct delivery of MSCs (p < 0.001, p < 0.001) outperformed vehicle delivery (p = 0.969, p = 0.922) compared to their control based on WOMAC scores respectively. Both direct (p = 0.713) and vehicle-based delivery (p = 0.123) of MSCs did not produce significant adverse events compared to their controls.ConclusionOur analysis of literature showed that current clinically employed methods of vehicle-based delivery of MSCs such as platelet-rich plasma, hyaluronic acid did not demonstrate superior results compared to direct delivery, concerning the efficacy of treatment measured by improvement in pain, functional outcomes, and safety. Hence, we urge future clinical trials to be conducted to validate the effectiveness of advanced delivery vehicles such as composite bioscaffolds to establish their practical utility in cartilage regeneration with respect to its encouraging in-vitro evidence.     

β干扰素基因修饰的人骨髓间充质干细胞治疗前列腺癌小鼠移植瘤的实验研究

目的 探讨人β干扰素(interferon-beta,IFN-β)基因修饰的人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cell,hMSC)对人前列腺癌小鼠移植瘤的治疗作用.方法 构建人IFN-β基因腺病毒表达载体Ad-IFN-β,体外转染hMSC,使用4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记表达IFN-β的hMSC( IFN-β-hMSC).应用人前列腺癌PC-3细胞株皮下种植建立小鼠前列腺癌动物模型,将IFN-β-hMSC经尾静脉注射入小鼠模型体内,收集肿瘤和肝、肺、脾、肾等脏器作冰冻切片和石蜡切片,荧光显微镜下观察肿瘤及各脏器中IFN-β-hMSC的分布情况.42只小鼠随机分为治疗组:IFN-β-hMSC(2×106,2×105)组;对照组:Ad-hMSC组、hMSC组、Ad-IFN-β组、重组IFN-β组、生理盐水组,每组6只.记录各组尾静脉注射后荷瘤小鼠肿瘤大小及生存期.结果 IFN-β-hMSC注射后14 d,荷瘤小鼠前列腺癌组织冰冻切片和石蜡切片中均可见DAPI标记的IFN-β-hMSC,而肝、肺、脾、肾等脏器的切片中均未见IFN-β-hMSC的存在.肿瘤质量:IFN-β-hMSC(2 × 106)治疗组(1.35±0.28)g、IFN-β-hMSC(2×105)组(1.43±0.41)g,与对照Ad-hMSC组(3.49±0.25)g、hMSC组(3.58±0.30)g、AdIFN-β组(3.30±0.24)g、重组IFN-β组(3.32±0.25)g、生理盐水组(3.32±0.47)g比较差异均有统计学意义(P ＜0.05);IFN-β-hMSC(2 × 106)治疗组中位生存时间91 d、IFN-β-hMSC(2×105)组87 d,与对照Ad-hMSC组57 d、hMSC组59 d、Ad-IFN-β组62 d、重组IFN-β组61 d、生理盐水组61 d比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IFN-β-hMSC在体内具有向前列腺癌微环境聚集转移的特性,且能够抑制前列腺癌移植瘤的生长,延长荷瘤鼠的生存期.     

不同诱导剂对骨髓间充质干细胞向神经元分化的影响

目的 寻找一种较为理想的诱导人骨髓间充质干细胞分化为神经元的诱导剂及方法.方法 采用人淋巴细胞分离液从骨髓中分离出骨髓间充质干细胞,体外培养、扩增后,以不同组合的复合神经诱导剂加以诱导,诱导期间观察细胞形态的变化,通过免疫细胞化学鉴定诱导细胞的分化情况,并用SPSS 12.0进行数据分析.结果 人骨髓间充质干细胞在加入不同组合的复合神经诱导剂后,均出现了胞体收缩、突起伸出的神经元样改变.免疫组化结果显示,兔抗人巢蛋白(nestin)、鼠抗人神经丝单克隆抗体(neurofilament,NF)出现了不同的阳性率,其中以E组阳性率最高,nestin(5.653±1.228)%,NF(74.724±3.651)%,兔抗人胶质纤维酸性蛋白(gliafiber acid protein,GFAP)免疫组化染色均呈阴性,SPSS 12.0分析显示各诱导组之间差异具有显著性意义(P＜0.05).结论 本实验探索出一种较为理想的诱导入骨髓间充质干细胞分化为神经元的复合神经诱导剂及方法.