增强型绿色荧光蛋白基因对树突状细胞功能的研究

目的研究瘤内注射的树突状细胞（DC）的迁移及在肿瘤局部的作用。方法建立大鼠C6脑胶质瘤颅内肿瘤模型，脂质体介导的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因转染DC细胞，瘤内注射DC后取大鼠同侧的淋巴结在荧光显微镜下检测，并用流式细胞仪检测肿瘤周围组织CD4^＋T和CD8^＋T细胞的浸润。结果同侧的颈深部淋巴结可见EGFP表达的DC，对侧淋巴结未见到。DC治疗组证实有CD4^＋T和CD8^＋T明显浸润（CD4^＋T8．19％，CD8^＋T11．05％），RPMI1640治疗组CD4^＋T0．95％和CD8^＋T1．17％，生理盐水对照组CD4^＋T0．62％和CD8^＋T0．77％。结论瘤内注射的DC不仅能够迁移，而且有效地引起肿瘤局部的T细胞显著浸润，为瘤内注射DC细胞提供了依据。     

肝癌mRNA致敏的DC对SCID荷瘤鼠的抑瘤作用

目的通过重建人肝癌PBL-SCID嵌合模型来观察mRNA致敏的树突状细胞疫苗（mRNA DC）在体内的抑瘤效应并探讨机制。方法采用人外周血淋巴细胞腹腔注射法建立Hu-PBL-SCID鼠模型,尾静脉分别注射mRNA DC疫苗、抗CD4^＋、CD8^＋＋mRNA DC、未致敏的树突状细胞（DC）。每周1次,共两次,然后接种2×10^6HepG-2cells,观察鼠成瘤率、成瘤潜伏期、肿瘤体积以及测定特异性CTL活性。结果ELISA法可检测到鼠血清中人IgG水平,Hu-PBL-SCID嵌合模型重建成功,各组小鼠间成瘤率无明显差异,但mRNA DC组成瘤潜伏期延长,肿瘤生长缓慢,2周后肿瘤体积明显小于抗CD4^＋、CD8^＋＋mRNA DC组、DC组和PBS组,差异有统计学意义（P〈0.05）,实验组脾淋巴细胞对HepG-2细胞有特异性杀伤效应,而对胃癌SGC-7901细胞则无杀伤活性。结论mRNA致敏的树突状细胞疫苗体内能诱导产生明显的抑瘤作用。     

结肠癌患者外周血 CD4+ CD25+调节性 T细胞检测的临床意义

目的 探讨结肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞检测的临床意义。方法采用流式细胞技术对51例结肠癌患者和30例健康体检者外周血淋巴细胞CD4及CD25进行了检测。结果（1）结肠癌组CD4^＋CD25^＋细胞明显高于正常对照组（P〈0．05），CD4^＋CD25^＋细胞则显著低于正常对照组（P〈0．05）；（2）结肠癌组手术后患者CD4^＋CD25^＋、CD4^-CD25^＋细胞与手术前相比显著下降（P〈0．05）；（3）结肠癌组淋巴结转移患者CD4^＋CD25^＋细胞明显高于未转移组（P〈0．001）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数可以反映肿瘤患者免疫系统存在抑制状态，且可能与肿瘤的免疫耐受有关，并可反映肿瘤淋巴结转移状况。     

sCD40基因修饰树突状细胞抑制T细胞表型及细胞因子分泌

目的探讨sCD40基因修饰树突状细胞（DC）对T细胞表型及Th1和Th2类细胞因子分泌的影响及其体外诱导T细胞免疫耐受的机制。方法分别以sCD40基因及空载体修饰的13（2（实验组和对照组）作为刺激细胞，尼龙毛柱法收集Balb／c小鼠淋巴细胞作为反应细胞，初次进行混合淋巴细胞培养（MLC）7d。在培养的第1、3、4、5、7天时采用新型四唑氮盐（MTS）比色法检测淋巴细胞增殖率；酶联免疫吸附（EuSA）法测定培养液上清中的白细胞介素2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素10（IL-10）水平；第5天采用流式细胞仪检测CD4^＋、CD8^＋T细胞上CD25及CD69的表达。再次进行MLC5d，在培养的第1、3、5天时检测与初次MLC相同的项目，并比较初次及再次MLC后的各项检测指标。结果初次及再次MLC后，实验组（经sCD40基因修饰的DC）刺激细胞增殖反应明显低于对照组（空载体修饰的DC）。初次MLC中，实验组CD4^＋、CD8^＋T细胞比例及CD4^＋CD25^＋、CD8^＋CD25^＋、CD4^＋CD69^＋、CD8^＋CD69^＋T细胞比例明显低于对照组（P〈0．05）；实验组和对照组培养液上清中IL4和IL-10不能测出，而实验组培养液上清中IFN-γ和IL-2的水平均明显低于对照组（P〈0．01）。再次MLC后，培养液上清中IFN-γ、IL-2和IL-4、IL-10的分泌水平均明显低于对照组（P〈0．01）。结论体外MLC体系中，经sCD40基因修饰的DC可同时作用于CD4^＋和CD8^＋T细胞，使CD69和CD25表达降低，引起T细胞早期活化和成熟障碍，抑制T细胞增殖及Th1和Th2类细胞因子的分泌，诱导出T细胞免疫耐受状态。     

CD4+ CD25+ Treg细胞延长大鼠肾移植术后存活时间的量效关系分析

目的观察肾移植受者（Wistar大鼠）应用供者（SD大鼠）抗原特异性CD4^＋CD25^＋免疫调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg细胞）对移植肾存活时间的影响，为CD4^＋CD25^＋Treg细胞在体内应用提供定量分析依据。方法SD大鼠为供者，Wistar大鼠为受者，建立同种肾移植动物模型；免疫磁珠（MACS）法分选Wistar大鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞，检测CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞的纯度，并诱导其对SD大鼠供者抗原的特异性表型；根据在肾移植术中经受者尾静脉注射不同数量（2×10^5、5×10^5、1×10^6、2×10^6）的供者抗原特异性CD4^＋CD25^＋T细胞分为：实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组，并以未注射组作为对照。术后观察移植肾的存活时间；监测血肌酐（cr）的水平；按照BanffSchema标准进行移植肾病理诊断，并根据Watanabe的方法进行半定量评分。结果肾移植术后实验Ⅲ组平均存活时间最长，为（31．4±4．6）d，对照组平均存活时间最短，为（11．7±6．2）d；各实验组与对照组间血Cr检测结果比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；实验Ⅲ组和Ⅳ组不同时段的移植肾病理检查半定量评分结果与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论初步证实在受者体内应用适当数量的供者抗原特异性CD4^＋CD25^＋Treg细胞，能够改善移植肾的功能，有效延长大鼠肾移植术后的存活时间。     

树突状细胞疫苗对人化荷人膀胱癌SCID鼠循环微转移转归的影响

目的将人外周血淋巴细胞（PBL）以腹腔转输方法构建具备人免疫环境SCID鼠模型，探讨树突状细胞（Dc）疫苗对荷瘤SCID鼠血循环膀胱癌细胞微转移转归的影响。方珐体外侵袭法从膀胱癌细胞株T24中筛选具有高转移能力亚群（T24。）；从人外周血中分离PBL，经腹腔注射小鼠（4× 10^7／鼠），1d后，于鼠右后肢内侧皮下接种3× 10^6个T24-3细胞，2、4、5、6周分别检测鼠体内人免疫状态（包括血清IgG水平和CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞数量）及外周血细胞角蛋白20（CK20）mRNA表达；用含10％人AB型血清的RPMI-1640培养基，在rhGM—CSF和rhIL-4存在下，37℃、5％CO2环境下体外诱导培养人外周血单个核细胞（PBMC）来源DC。用冻融法获得的T24-3细胞裂解上清液致敏DC；并干预荷人瘤细胞的SCID鼠自发血循环肿瘤细胞微转移，观察大体情况、外周血CK20mRNA表达及瘤体MMP-7mRNA表达。结果SCID鼠于接种T24-3肿瘤细胞后5周进行DC疫苗干预。DC疫苗治疗组小鼠外周血中CK20mRNA表达均阴性，无远处转移发生；PBS处理组小鼠外周血中有2例CK20mRNA表达阳性，3例发生远处转移；DC治疗组小鼠外周血中有1例CK20mRNA表达阳性，1例发生远处转移。DC疫苗治疗组小鼠瘤组织中MMP-7mRNA表达最低，较PBS处理和DC治疗组差异有显著性意义（P〈O．01）。结论DC疫苗可以有效控制荷人膀胱癌SCID鼠血循环肿瘤细胞微转移发生，进而延缓或阻止肿瘤转移。     

联合应用胸腺肽α1治疗肾病综合征临床观察

目的：研究胸腺肽α1在预防肾病综合征并发感染及协助治疗的作用。方法：60例肾病综合征患者分为治疗组和对照组，治疗组予胸腺肽α1定期注射，两组治疗前后分别用流式细胞仪测定外周血T细胞亚群（CD3^＋，CD4^＋，CD8^＋，CD4^＋/CD8^＋）和NK细胞活性：同时观察两组病程和治疗效果。结果：治疗组患者的肾病综合征治疗有效率高于对照组（P〈0．05），尿蛋白转阴时间低于对照组（P〈0．05），治疗组感染率低于对照组，发生感染者抗菌素使用天数少于对照组（P〈0．05），组间感染类别差异无统计学意义（P〉0．05），治疗前两组CD3^＋，CD4^＋，CD8^＋，CD4^＋／CD8^＋和NK细胞活性差异无统计学意义，治疗后治疗组T细胞亚群活性和NK细胞活性明显高于治疗前（P〈0．05）。结论：胸腺肽α1改善肾病综合征患者免疫的失平衡，起到双向调节免疫的作用，减少治疗过程中并发症的发生，提高肾病综合征的治疗有效率。     

原发性肝癌射频治疗后局部免疫功能的变化及其临床意义

目的对原发性肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）射频消融治疗（radiofrequency ablation，RFA）前后肿瘤内部及边缘热休克蛋白70（heat shock protein，HSP70）的表达、CD8^＋T细胞数量的变化以及RFA治疗后，肿瘤边缘HSP70表达与肿瘤边缘CD8^＋T细胞数量之间的关系进行观察，探讨RFA治疗对原发性肝癌局部免疫功能状态的影响及其可能的临床意义。方法对17例HCC分别在RFA治疗前、后1个月，于肿瘤内部和肿瘤边缘超声引导下穿刺活检取样；采用PowerVision^TM二步染色法进行免疫组化分析，测定HSP70的表达、CD8^＋T细胞的数量；随访HCC复发／新生情况。结果RFA治疗后肿瘤边缘组织HSP70表达增强（Z=3．337，P=0．001）、CD8^＋T细胞数量增多（Z=1．996，P=0．049）；RFA治疗后，≤4cm肿瘤组的占位边缘CD8^＋T细胞数量高于〉4cm肿瘤组（Z=1．966，P=0．048）。RFA治疗后，边缘组织HSP70表达与CD8^＋T细胞数量之间呈正相关关系（r=0．489，P=0．046）；RFA治疗后，无复发或新生组的占位边缘组织HSP70表达和CD8^＋T细胞数量分别高于复发或新生组（Z=2．009，P=0．045；Z=2．007，P=0．045）。结论RFA治疗后边缘HSP70表达增强、CD8^＋T细胞数量增多，显示RFA治疗后局部免疫原性提高，抗肿瘤效应细胞浸润增加。     

辅助性T细胞和细胞毒性T淋巴细胞双表位修饰的树突状细胞肿瘤疫苗治疗胃癌的实验研究

目的研究辅助性T细胞（Th）表位和细胞毒性T淋巴细胞（CTL）双表位修饰的树突状细胞（DCs）肿瘤疫苗用于胃癌免疫治疗的效果。方法用CTL表位MAGE-341-49和Th表位MAGE-322-36混合多肽冲击DCs，每周刺激脾脏T细胞1次，4周后收集多肽特异性T细胞。流式仪分析T细胞亚群分布，测定CD4^＋T细胞识别抗原细胞因子分泌及CD8^＋T细胞杀伤肿瘤细胞效能，观察双表位修饰的DCs肿瘤疫苗治疗胃癌的保护性免疫效应。结果双表位致敏的DCs体外可同时活化CD4^＋和CD8^＋T细胞，其中CD4^＋T细胞识别肿瘤细胞小鼠前胃癌细胞株MFC后分泌大量Th1型细胞因子[干扰素（IFN）-γ，白介素（IL）-2]，CD8^＋T细胞强效杀伤MFC。双表位修饰的DCs肿瘤疫苗小鼠体内免疫治疗获得抵抗后继胃癌细胞MFC的免疫保护能力，并显著高于单一表位（CTL或Th）修饰的DC8疫苗。结论Th和CTL双表位修饰的DCs肿瘤疫苗可同时激活CD4^＋Th1细胞和CD8^＋CTL抗肿瘤免疫，有效清除胃癌细胞。     

趋化因子巨噬细胞炎性蛋白-1α基因和B7-1基因共转染诱导大鼠的抗乳腺癌免疫效应

目的观察共转染巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-α）和B7-1诱导免疫应答的能力和抗乳腺癌免疫治疗的作用。方法7d龄SD大鼠接种乳腺癌细胞后，每天观察有无肿瘤形成；转基因细胞接种荷瘤SD大鼠，观察肿瘤体积的变化及生存期；流式细胞仪检测外周血T细胞亚型，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测白细胞介素（IL）-2及1-干扰素（IFN-1）的含量。结果SHZ-88、B7-1、MIP-α和MIP-α＋B7-1细胞接种10d后致瘤性分别为100％、30％、20％和0；荷瘤大鼠的生存天数分别为53．404±1．14、63．804±1．64、64．204±1．92及（89．004±2.55）d及外周血的CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋比值、IL-2及IFN-1的含量，MIP-1d＋B7-1组均高于其它组（P〈0．05）；接种14、28及40d后，MIP-1α＋B7-1组大鼠的肿瘤体积均小于其它组（P〈0．05）。肿瘤中心或对侧腋窝接种肿瘤细胞，诱导的抗肿瘤效应差异无统计学意义（P〉0．05）。结论共转染MIP-1α和B7-1，可产生协同抗乳腺癌效应。     

微波消融灭瘤联合瘤内接种树突状细胞诱导特异性抗肝癌免疫

目的 探讨微波消融(MWA)灭瘤联合瘤内接种树突状细胞(DCs)诱导特异性抗肝癌免疫的效能.方法 采用GM-CSF联合IL-4体外培养C57BL/6小鼠骨髓来源的DCs,于第6天收集使用.建立C57BL/6小鼠皮下Hepa1-6肝癌模型,随机分为对照组、瘤内接种DCs组(DC组)、肿瘤微波消融组(MWA组)及肿瘤微波消融+瘤内接种DCs组(MWA+DC组).免疫组织化学法检测肿瘤组织内CD4+和CD8+T细胞的浸润,MTT法检测小鼠脾脏细胞对Hepa1-6的特异性杀伤活性,观测各组小鼠肿瘤生长情况.结果 免疫组织化学法检测显示MWA+DC组肿瘤组织内有大量的CD4+和CD8+T淋巴细胞浸润,显著高于其它组(P<0.05).MwA+DC组脾细胞对Hepa1-6细胞有特异性杀伤效能,在E/T=40和100时,MWA+DC组脾细胞对Hepa1-6细胞的特异性杀伤力显著高于对照组、DC组及MWA组(P<0.05).MWA+DC组小鼠肿瘤完全消退率显著高于其它各组(P<0.05).结论 MWA联合瘤内接种DCs可有效诱导机体产生特异性抗肝癌免疫,是预防MwA治疗后肝瘤复发的一种有效方法 .     

树突状细胞疫苗对胃癌患者术后免疫功能影响的初步观察

目的探讨树突状细胞(DCs)疫苗治疗胃癌术后患者的临床疗效。方法采用外周血单个核细胞及自体肿瘤抗原在体外制备DCs疫苗,将50例胃癌术后患者随机分为两组,对照组予以常规化疗;疫苗治疗组常规化疗2周后进行DCs疫苗皮下注射,每周1次、共4次。治疗前后检测患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞百分比的变化,观察DCs疫苗治疗的初步临床效果及不良反应。结果疫苗治疗组外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞百分比在DCs注射2周后开始上升,4周后上升至最高值犤CD3 (71.2±9.8)%,CD4 /CD8 (1.76±0.24)%,NK细胞(13.5±2.6)%犦,第8周下降;与同期对照组犤CD3 (58.8±9.2)%,CD4 /CD8 (1.26±0.29)%,NK细胞(10.8±2.3)%犦相比,差异有显著性意义(P<0.05)。疫苗治疗组患者血常规及肝肾功能检测均正常,未出现明显毒副反应。结论DCs疫苗可明显改善胃癌术后患者T细胞亚群及NK细胞百分比,临床应用无明显不良反应。     

免疫调理对脓毒症免疫功能和预后的作用

目的：探讨免疫调理对改善脓毒症大鼠和患者免疫功能及预后所起的作用。
方法：（1）实验部分：将大鼠分为3组：假手术组、对照组和实验组,每组20只。后2组采用大鼠盲肠结扎穿孔的方法制备大鼠脓毒症模型,对照组接受抗生素治疗,实验组接受抗生素加免疫调理。制作模后分别在3,12,24,48 h采血。各组大鼠按时点进行淋巴细胞计数和测定CD4+,CD8+ T淋巴细胞和CD4/CD8比值;观察胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡情况,计算脓毒症大鼠的存活率。（1）临床部分：前瞻性分析70例符合脓毒症患者,随机分成对照组和观察组。对照组接受经典治疗,观察组采用经典治疗联合蛋白酶抑制剂和胸腺肽α1治疗（经典治疗+免疫调理）,免疫调理疗程为7 d,分别观察治疗前和治疗后1,3,7 d临床和相关免疫学指标。
结果：（1）实验部分：CLP脓毒症造模成功后,实验组淋巴细胞,CD4+T淋巴细胞水平,CD4/CD8值均显著高于对照组明显（P＜0.05）。对照组胸腺和脾脏的淋巴细胞凋亡指数比实验组明显增高（P＜0.05）。实验组72 h存活时间比对照组明显延长（P＜0.05）。（2）临床部分：观察组CD4+T淋巴细胞,淋巴细胞计数及CD14+单核细胞HLA-DR水平较对照组显著升高（P＜0.05）。对照组死亡20例,观察组死亡13例（P＜0.05）。
结论：免疫调理可使脓毒症大鼠免疫功能提高,降低胸腺和脾脏淋巴细胞的凋亡率,提高脓毒症大鼠的存活率。免疫调理可提高脓毒症患者免疫调理的免疫功能,改善其免疫麻痹,延长近期生存率。     

射频消融治疗脾功能亢进症对机体细胞免疫功能的影响

目的 探索射频消融治疗肝硬化门静脉高压性脾功能亢进症的近远期疗效以及其对机体细胞免疫功能的影响.方法 使用随机分组的方法 将符合纳入标准的43例患者分为射频治疗组(22例)和手术对照组(21例).两组患者分别于术前和术后1周、1个月、6个月、1年、2年、3年时采静脉血进行血常规、淋巴细胞转化率、NK细胞活性和淋巴细胞亚群的测定,使用t检验对组间差异进行对比分析. 结果 两组患者脾亢症状均得到较好的缓解.射频治疗组各项细胞免疫指标手术前后无明显差别;手术对照组术后NK细胞活性和T淋巴细胞转化率均明显低于术前水平(P值均小于0.05),与射频治疗组差异亦非常显著.虽然随着术后时间的延长,其NK细胞活性和T淋巴细胞转化率呈现一定的上升趋势,但是仍与术前水平有显著下降.手术对照组CD4+T细胞及CD4+/CD8+比值较术前有显著降低(P值均小于0.05),但是随着术后时间延长其表现出逐渐恢复的趋势,其中CD4+T细胞和CD4+/CD8+比值分别在术后30个月(P=0.078)和术后36个月(P=0.103)时恢复至术前水平.结论 RFA治疗脾亢在较好的缓解患者脾亢症状的同时由于保留了部分脾脏组织从而较好的保留了机体的细胞免疫功能,且具有创伤小,易操作,并发症少的优点,值得在临床上推广应用.     

A novel dendritic cell-based cancer vaccine produces promising results in a syngenic CC-36 murine colon adenocarcinoma model

BACKGROUND: This study was conducted to test the efficacy of a new cancer vaccine, composed of dendritic cells (DCs) pulsed with an interleukin-2 gene-encoded vaccinia virus tumor oncolysate (DC-IL-2VCO) in a CC-36 murine colon adenocarcinoma model. MATERIALS AND METHODS: CC-36 tumor cells were injected subcutaneously into the left flank of four- to six-week old male BALB/c mice. The mice were divided into three groups, each of which received one of the following treatments: (1) DCs pulsed with the IL-2 gene-encoded vaccinia oncolysate (DC-IL-2VCO), (2) DCs pulsed with the tumor oncolysate alone (DC-CO), or (3) no treatment (control). Tumor incidence was measured, and survival rates were compared using a paired Student's t-test. Cytolytic T cell activity was measured in peripheral blood lymphocytes (PBL) and splenic lymphocytes using a (51)Cr-release assay. Lastly, mice were depleted of either CD4+ or CD8+ lymphocytes prior to receiving the vaccine to test the mechanism of tumor immunity in these mice. RESULTS: Mice treated with DC-IL-2VCO demonstrated decreased tumor burden, increased survival, and greater cytolytic activity compared with control mice and mice receiving DC-CO. In addition, mice depleted of CD8+ T cells prior to immunization with IL-2VV + DC-IL-2VCO had a significant increase in the incidence of tumor, similar to the untreated control mice. CONCLUSIONS: DCs pulsed with an IL-2 gene-encoded vaccinia virus tumor oncolysate (DC-IL-2VCO) produced safe and effective immune responses in a murine CC-36 colon adenocarcinoma model. This vaccine (DC-MelVac; Patent no. 11221/5) has the potential to treat humans with cancer, and has received FDA approval for use in Phase I clinical trials.     

氩氦刀冷冻联合CpG寡脱氧核苷酸治疗小鼠皮下移植性结肠癌

目的 探讨氩氦刀冷冻消融联合CpG寡脱氧核苷酸（ODN）对小鼠移植性结肠癌的治疗作用.方法 BALB/c小鼠皮下接种结肠癌CT26细胞建立荷瘤鼠模型,小鼠被分成PBS组（6只,瘤周注射PBS组）、氩氦刀组（6只,氩氦刀冷冻组）、CpG ODN组（6只,瘤周注射CpG ODN）和联合治疗组（6只,氩氦刀冷冻加瘤周注射CpG ODN）.观察各组小鼠存活及肿瘤生长情况;采用酶联免疫吸附试验检测小鼠外周血中IL-12和IFN-γ的含量;利用流式细胞仪检测小鼠外周血中CD3＋CD4＋T细胞与CD3＋CD8＋T细胞比例;对氩氦刀组和氩氦刀联合CpG ODN组治愈小鼠进行再攻击实验,观察小鼠再次成瘤率.结果 氩氦刀组和联合治疗组小鼠的平均生存时间为（80.3±5.4）d和（83.8±5.5）d,明显长于PBS组[（53.7±3.7）d]和CpG ODN组[（51.5±6.8）d],差异均有统计学意义（P＜0.05）.氩氦刀组和联合治疗组抑瘤率分别为83.8%和86.2%.治疗后20 d,氩氦刀组和联合治疗组的CD3＋CD4＋T细胞/CD3＋CD8＋T细胞比值、IL-12和IFN-γ水平均高于PBS组和CpGODN组,差异有统计学意义（P＜0.05）;与氩氦刀组比较,联合治疗组CD3＋CD4＋T细胞/CD3＋CD8＋T细胞比值差异无统计学意义,但IL-12和IFN-γ水平则显著升高（P＜0.05）.肿瘤再攻击后,氩氦刀组和联合治疗组分别有5只（5/6）和1只（1/6）再次成瘤,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 氩氦刀冷冻联合CpG ODN可以增强荷瘤鼠的抗肿瘤免疫应答,增强了氩氦刀治疗小鼠的免疫功能,减少了肿瘤再次攻击的成瘤率.     

stTRAIL—MSC靶向促进肝癌大鼠RFA过渡区残癌细胞凋亡的体内研究

目的：探讨stTRAIL-MSC靶向促进肝癌大鼠RFA过渡区残癌细胞凋亡的作用。方法：对150只雄性SD大鼠,采用N1S1肿瘤细胞建立肝荷瘤大鼠模型,并随机将其分为stSTRAL-MSC组、MSC组、Vector-MSC组、培养液组以及空白对照组,每组30只,在接受治疗前1周给以注射相应的制剂,在接受RFA治疗后12h、24h、48h以及1周时每组取6只处死并进行相关检查（空白组除外）,同时比较空白组与RFA组其生存时间。结果：stTRAIL-MSC在接受RFA治疗后其肿瘤体积变化、过渡区肿瘤细胞凋亡指数、大鼠肿瘤毁损体积、过渡区肿瘤细胞（ki-67染色）增殖指数等比较明显优于其他几组,而且在对caspase-3、caspase-8、Bcl-2水平检测时发现,stTRAIL-MSC其caspase-、3caspase-8水平明显高于其他四组,而Bcl-2水平低于其他四组,对接受RFA以及空白对照组大鼠的生存情况分析发现,采用RFA治疗的大鼠其生存时间明显高于空白对照组。结论：stTRAIL-MSC靶向通过提高cas-pase蛋白酶级联反应继而达到促进肝癌大鼠RFA过渡区残癌细胞凋亡。     

直肠癌病人外周血NK细胞和T淋巴细胞亚群数目的变化及其临床意义

目的 探讨直肠癌病人外周血NK细胞和T淋巴细胞亚群的变化及临床意义。方法 分别应用同位素及流式细胞仪法检测26例正常人（无肿瘤）和35例直肠癌患者（包括术前术后）外周血NK细胞和T淋巴细胞亚群数目。结果 NK细胞,CD3,CD4,CD4／CD8比值在直肠癌组与对照组差异显著性（P＜0．05）。直肠癌患者随Dudes分期增高而NK细胞,CD3,CD4,CD4／CD8比值逐渐下降,差异均有极显著性（P＜0．01）。根治术和姑息性切除术后NK细胞CD3,CD4,CD4／CD8升高,CD8回落接近对照组。肿瘤未切除组术后NK细胞,CD3,CD4／CD8则进一步下降,差异有显著性（P＜0．05）。结论 直肠癌患者NK细胞等各项免疫指标大大降低,这种疫紊乱状态在不同病情又有显著差别,根治术和姑息性切除术可明显改善病人的免疫状态。     

免疫调理对脓毒症大鼠中性粒细胞和淋巴细胞亚群的影响

目的研究免疫调理对脓毒症大鼠中性粒细胞和淋巴细胞及其亚群的影响,阐明免疫调理在脓毒症治疗中的作用。方法成功制作SD大鼠盲肠结扎穿孔（CLP）脓毒症模型,被分为假手术组、对照组和实验组,各20只。制作脓毒症模型后分别在3、12、24、48h采血待测。检查外周血涂片、白细胞总数、中性粒细胞、淋巴细胞计数和CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞亚群。结果实验组白细胞计数和中性粒细胞计数比对照组明显降低,而淋巴细胞计数和CD8^＋T淋巴细胞水平比对照组明显升高,P〈0．05。实验组CD8们林巴细胞水平与对照组差异无统计学意义。结论免疫调理可以明显降低脓毒症大鼠白细胞和中性粒细胞,从而减轻炎症反应。免疫调理可以提高脓毒症大鼠淋巴细胞计数和CD4^＋T淋巴细胞,从而改善免疫功能。