Survivin基因在人大肠癌中的表达及临床意义

目的:研究Survivin基因在大肠癌中的表达及临床意义.方法:应用反转录RT-PCR方法,检测了29例大肠癌组织中Survivin基因mRNA的表达.结果:发现正常大肠黏膜组织中Survivin基因不表达,肿瘤组织中Survivin 基因表达阳性率为72.4%(21/29).半定量分析结果显示,29例大肠癌组织中Survivin其表达的平均值为 0.61 ±0.39.Survivin基因表达与淋巴结转移,肿瘤分期及远处转移有关.但与年龄,肿瘤大小,分化程度无关.结论:提示Survivin基因在大肠癌病程中起重要的作用,对筛选大肠癌术后高危转移患者,加强随访诊治有一定参考意义.     

大肠癌端粒酶各组分表达及其与端粒酶活性的关系

目的：研究端粒酶的3种组分与其活性的关系,探讨端粒酶激活的关键因素。方法：采用TRAP法检测大肠癌组织及相邻正常黏膜组织中端粒酶活性,用RT－PCR检测端粒酶3种组分的表达。结果：在64例（85．33％）癌组织中检测到端粒酶活性,正常黏膜中没有端粒酶活性,两者差异有显著性（P＜0．01）;hTR和TP1基因的表达在癌组织和正常黏膜没有差别,hTERT在癌组织中的表达要明显高于正常黏膜,差别具有显著性（P＜0．01）,hTERT基因表达强度与端粒酶活性密切相关。结论：大肠癌端粒酶活性表达具有肿瘤特异性,hTERT在癌组织中的表达明显高于正常粘膜,大肠癌中端粒酶活性和hTERT基因表达强度密切相关,hTERT基因表达可能是端粒酶激活的关键因素。     

核不均一性核糖核蛋白A1在大肠癌中的表达

目的检测大肠癌组织中核不均一性核糖核蛋白（hnRNPA1）及其基因的表达情况，探讨hnRNPA1与大肠癌临床各项指标的相关性。方法收集60例大肠癌患者手术切除标本，制备快速冰冻病理切片，免疫组织化学链霉菌抗生素蛋白-过氧化酶连接（SP）法检测hnRNPA1蛋白的表达；同时应用半定量聚合酶链反应（PCR）法检测组织hnRNPA1基因表达情况，分析基因表达量与临床指标的关系。结果免疫组织化学检测可见hnRNPA1蛋白着色主要位于细胞浆和细胞核；60例大肠癌标本中有35例阳性表达，表达率明显高于正常大肠黏膜组织（P〈0．05），与肿瘤的分化程度、临床Dukes分期和淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。逆转录（RT）-PCR可见hnRNPA1阳性标本占96．7％，平均比值显著高于正常大肠黏膜的平均比值，不同分化程度及不同临床分期的大肠癌中hnRNPA1基因的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。结论hnRNPA1在大肠癌中高表达。在晚期伴淋巴结转移的大肠癌中其蛋白和基因的表达明显高于早期大肠癌。表达强度随分化程度的降低而递增。     

VHL基因和HIF-1α在大肠癌组织中的表达及临床意义

为探讨VHL基因和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理因素的关系,我们用免疫组织化学SP法检测165例大肠癌和20例癌旁组织中VHL、HIF-1α表达情况,并分析其表达与大肠癌中医证型、分化程度、临床分期、转移及预后的相关性。结果显示,VHL基因在165例大肠癌组织中的阳性表达率为21．8％,在20例癌旁组织中的阳性表达率为75．1％（P〈0．001）;HIF-1α蛋白在165例大肠癌组织中的阳性表达率为75．2％,在20例癌旁组织中的阳性表达率为5．0％（P〈0．001）;VHL基因的阴性表达与HIF-1α蛋白的阳性表达与大肠癌患者的中医证型、肿瘤分期、淋巴结转移、器官转移及预后有关（P〈0．05）。结果表明,VHL基因表达下调和HIF-1α蛋白表达上调在大肠癌的侵袭、转移中发挥重要作用。     

结直肠癌中抑癌基因ING1的表达研究

目的 探讨抑癌基因ING1及其蛋白p33／ING1在结直肠癌中的表达。方法 用RT-PCR检测35例散发性结直肠癌中ING1 mRNA的表达水平，并应用S-P法检测60例散发性结直肠癌及正常黏膜组织中p33／ING1蛋白的表达。结果 结直肠癌组织、正常黏膜组织中p33／ING1蛋白阳性表达率分别为43．3％（26／60）、100％（60／60），两者比较差异有统计学意义（P＜0．01）。p33／ING1在无淋巴结转移组及淋巴结转移组中的阳性表达率分别为57．6％（19／33）、25．9％（7／27），两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。在Dukes A、B期和Dukes C、D期患者癌组织中p33／ING1的阳性表达率分别为56．7％（17／30）、30．0％（9／30），两者比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 ING1及p33／ING1蛋白的低表达与散发性结直肠癌发生、发展密切相关，临床分期越差者表达水平越低。     

Fhit基因和Survivin基因在膀胱移行细胞癌中的表达和意义

目的探讨Fhit基因和Survivin基因在膀胱移行细胞癌（TCC）中的表达和意义。方法用免疫组织化学sP法检测49例膀胱TCC组织和10例正常膀胱组织中Fhit蛋白和Survivin蛋白的表达。结果10例正常膀胱组织中Fhit蛋白表达均为阳性，Survivin蛋白表达均为阴性；Fhit蛋白在膀胱TCC中阳性表达率为46．9％（23／49），随恶性程度和临床分期增高而阳性表达减少，差异有统计学意义（P〈0．05）；Survivin蛋白在膀胱TCC中阳性表达率为57．1％（28／49），随恶性程度和临床分期增高而阳性表达增高，差异有统计学意义（P〈0．05）；膀胱TCC中Fhit蛋白和Survivin蛋白表达呈负相关（P〈0．05）。结论Fhit基因和Survivin基因可能是膀胱TCC发生的晚期分子事件，Fhit蛋白和Survivin蛋白异常表达可作为膀胱TCC的肿瘤标志物。Fhit蛋白可能通过肿瘤凋亡抑制途径发挥作用。     

PTEN和p27及cyclin D1蛋白在大肠癌组织中的表达及相关性研究

目的：研究大肠癌组织中PTEN、p27和cyclinD1蛋白的表达及三者间的关系。方法：应用免疫组铡匕学方法检测58例大肠癌组织、58例癌旁组织和14例正常大肠黏膜中PTEN、p27和cyclinD1蛋白的表达情况。结果：大肠癌组织中PTEN和p27蛋白的阳性表达率分别为65．52％（38／58）和53．45％（31／58），较癌旁组织和正常组织明显刚氏（P〈0．05）；cyclinD1蛋白的阳性表达率为60．34％（35／58）,较癌旁组织及正常组织显著升高（P〈0．05）。三者在大肠癌组织中的表达存在相关性，且均与肿瘤的分化程度、有无淋巴结转移和Dukes分期有关（P〈0．05）。结论：PTEN、p27和cyclinD1基因的异常改变参与大，且三者之间存在相关性。联合检测三者表达水平可作为评价大肠癌病理生物学行为的客观指标之一。     

MMP2和CA50在大肠癌、癌旁黏膜和正常黏膜中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶2（MMP2）和CA50在大肠癌、癌旁黏膜和正常大肠黏膜中的表达及临床意义。方法用免疫组织化学法检测40例大肠癌组织、癌近旁黏膜组织、癌远旁黏膜组织及10例正常大肠黏膜组织中MMP2和CA50的表达。结果①MMP2和CA50的阳性表达强度及表达阳性率按正常大肠黏膜组织、远癌旁黏膜组织、近癌旁黏膜组织及大肠癌组织的顺序依次增高，且表达强度和阳性率在4种不同组织间的差异均有统计学意义（P〈0．01）；②大肠癌组织中MMP2表达和CA50表达有一定关系；③CA50表达与大肠癌的分化程度有关（P=0．02）；MMP2表达与大肠癌的分化程度及Dukes分期有关（P=0．04，P=0．02）。结论MMP2的过度表达可促进大肠癌的恶性发展，CA50是评估大肠癌细胞恶性程度的可靠指标，MMP2和CA50在大肠癌的发生、发展过程中可能有协同作用。     

Survivin和p-STATS在大肠癌组织中表达与相互关系的研究

目的：探讨大肠癌组织中Survivin和p-STATS表达与相互关系及其在大肠癌发生发展过程中可能的作用，寻找大肠癌可能的新诊断、治疗方法。方法：应用免疫组织化学和用型二步法检测62例大肠癌、15例良性肿瘤和10例正常大肠组织中Survivin和p-STATS的表达情兄。结果：62例大肠癌组织中Survivin表达阳性35例（56.45％）；p-STAT3表达阳性38例（6129％）；在35例Survivin阳性表达病例中，p-STAT3表达阳性22例。结论：Survivin基因可能是通过p-STAT3蛋白的激活在大肠癌组织中发挥抗凋亡作用，促进大肠癌发生。     

PTEN基因和FHIT基因在膀胱尿路上皮癌中的表达和意义

目的 探讨磷酸酶和张力蛋白同源(phosphatase and tensin homolog,PTEN)基因及脆性组氨酸三联体(fragile histindine triad,FHIT)基因在膀胱尿路上皮癌组织中的表达水平及临床意义. 方法 采用免疫组织化学S-P法检测14例正常膀胱黏膜及37例膀胱尿路上皮癌组织中的PTEN及FHIT基因的表达水平. 结果 在14例正常膀胱组织中PTEN与FHIT基因均表达阳性或强阳性.在37例膀胱尿路上皮癌组织中PTEN 基因阳性表达率为56.8%(21/37),其中阳性9例,强阳性12例,FHIT基因阳性表达率为48.6%(18/37),其中阳性8例,强阳性10例.随着肿瘤分期、分级的增加PTEN和FHIT基因表达均显著减少;PTEN基因的表达与FHIT基因的表达呈正相关(P＜0.01). 结论 PTEN与FHIT基因可能成为估计膀胱尿路上皮癌恶性程度及肿瘤侵袭性的一项有用的指标,联合检测PTEN和FHIT基因在膀胱尿路上皮癌中的表达,有助于对膀胱肿瘤的细胞分化程度及诊断做出正确评价.     

FHIT mRNA在结直肠癌中的表达及其与细胞凋亡的相关性

目的研究脆性组氨酸三联体基因(FHIT mRNA)在结直肠癌组织中的表达以及与结直肠癌细胞凋亡的相关性。方法应用组织芯片技术制作正常直肠痔组织、腺瘤组织标本各16例及结直肠癌80例石蜡标本,采用原位分子杂交检测FHIT mRNA,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)检测结直肠癌细胞的凋亡指数。结果(1)正常直肠组织平均FHIT mRNA阳性细胞率为45.67%±9.39%,腺瘤组织平均阳性细胞率为23.45%±5.06%,结直肠癌组织平均阳性细胞率为15.1%±4.11%,三者比较,差异有统计学意义(P<0.01),结直肠癌患者不同年龄、性别、肿瘤部位、大小、血清CEA水平、组织学类型的FHIT mRNA阳性细胞率无统计学差异(P>0.05);不同分化程度、病理分期、淋巴转移的FHIT mRNA阳性细胞率有统计学差异(P<0.05);(2)FHIT mRNA表达程度不同的结直肠癌细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)间存在显著性差异(P<0.01);(3)FHIT mRNA阳性细胞率高患者平均生存期为42.7个月,阳性细胞率低患者为29.8个月,前者的年累计生存率(88.10%,37/42)显著低于阳性细胞率低者(74.19%,23/31)(P<0.01)。结论FHIT基因可能参与结直肠癌细胞凋亡的调节,FHIT基因表达下降可能与结直肠癌的发生密切相关。     

Survivin和Vimentin在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨凋亡蛋白抑制因子生存素（Survivin）和波形蛋白（Vimentin）在肾透明细胞癌（clearcellrenalcellcarcinoma,ccRCC）中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测56例ccRCC、25例癌旁组织及13例正常肾组织中Survivin和Vimentin的表达及定位情况。结果Survivin在肾透明细胞癌中高表达,而在癌旁及正常组织中未见表达;其表达与ccRCC临床分期及病理分级呈正相关,差异有统计学意义（P〈0．01）。Vimentin在正常肾组织及癌旁组织中亦未见表达,而在肾透明细胞癌中高表达,且与临床分期及病理分级呈正相关,差异有统计学意义（P〈0．01）。并且两个因子的表达呈显著正相关（r=0．566,P〈0．01）。结论Survivin和Vimentin在ccRCC组织中高表达,共同促进了ccRCC的发生、发展、侵袭与转移,联合两因子检测可为ccRCC的预后评估提供重要的信息。     

原发性肝细胞癌Survivin,CyclinD1的表达及其临床意义

目的：探讨Survivin和CyclinD1在原发性肝细胞癌（HCC）组织中的表达及两者在肝癌发病机制中的作用和临床意义.方法：利用免疫组织化学SP法检测50例原发性肝癌组织、20例正常肝组织中Survivin和CyclinD1蛋白表达情况.结果：Survivin蛋白在肝癌中的阳性表达率为66.0%（33/50）,显著高于正常肝组织组（均为阳性表达）（P＜0.001）,阳性表达与肝癌的肝内转移和肝癌的多发性有关（P=0.019,P=0.030）.CyclinD1蛋白在肝癌中的阳性率为44.0%（22/50）,显著高于正常肝组织组（均为阴性表达）（P＜0.001）,阳性表达与肝癌的肝内转移和肝癌的分化程度有关（P=0.035,P=0.036）.Survivin的阳性表达与CyclinD1的阳性表达呈正相关（r=0.466,P＜0.001）.Survivin和CyclinD1的过表达均与患者术后＜3年生存期相关（P=0.018,P=0.013）.结论：Survivin与CyclinD1在肝细胞癌的发生及发展过程中起着不同程度的作用,联合检测Survivin与CyclinD1对判定原发性肝细胞癌预后可提供一定的依据.     

Tspan-1在结直肠肿瘤组织中的表达及其意义

目的 研究Tspan-1基因在结直肠癌组织中的表达,分析其与临床病理因素及预后的关系.方法 采用免疫组化ELIVISION二步法,检测Tspan-1基因蛋白在80例结直肠癌组织,13例结肠腺瘤组织及27例正常结肠黏膜组织中的表达.结果 本组80例结肠癌组织中Tspan-1阳性表达率为90%,13例结肠腺瘤组织中表达率为23%,27例正常结肠黏膜中表达率为7%,3组之间相比差异均具有统计学意义(P＜0.01).Tspan-1阳性表达在低中分化癌中均显著高于高分化癌(P＜0.01),有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P＜0.01),TNM分期Ⅲ～Ⅳ期组中表达显著高于Ⅰ期组(P＜0.01).Tspan-1与肿瘤浸润深度、5年生存率有显著相关性(P＜0.01),与性别、年龄、部位、肿瘤大小、病理类型等无关(P＞0.05).结论 Tspan-1基因表达可以被用作判断结直肠癌预后的一个标志;Tspan-1蛋白的表达可能在大肠腺瘤的形成中起重要作用.     

Survivin、血管内皮生长因子在乳腺良性肿瘤和乳腺癌中的表达及意义

目的探讨Survivin基因在乳腺良性肿瘤、乳腺癌组织中表达的临床意义及其与血管内皮生长因子(VEGF)表达的关系。方法应用免疫组织化学法(SP法)检测14例乳腺纤维腺瘤、62例乳腺癌组织中Survivin基因和VEGF的表达。结果Survivin在乳腺癌和乳腺纤维腺瘤组织中表达的阳性率分别为67.7%和7.1%(P<0.01)。而VEGF在乳腺癌和纤维腺瘤组织中的阳性率分别为72.6%和42.9%(P<0.05)。乳腺癌组织中Survivin表达水平与VEGF表达相关(peearson系数0.569),与患者临床病理特征无关(P>0.05)。结论Survivin基因在乳腺癌组织的发生中可能起一定的作用,且Survivin基因可能参与了肿瘤的血管形成。     

脆性组氨酸三联体基因蛋白在直肠癌组织中的表达及其与细胞凋亡的相关性研究

目的探讨脆性组氨酸三联体基因蛋白(FHIT)在直肠癌组织中的表达情况及其与细胞凋亡间的关系。方法利用组织芯片和免疫组织化学技术,检测16例正常直肠和16例腺瘤组织标本及80例直肠癌组织中的FHIT、Bax、Bcl-2和survivin基因蛋白的表达,并运用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)检测直肠癌细胞凋亡。结果(1)直肠癌组织FHIT蛋白异常表达率为53.8%(43/80),其表达减弱与患者年龄、性别及肿瘤组织分型无关(P>0.05);而与肿瘤Dukes分期、淋巴结转移和患者的5年生存率关系密切(P<0.05,P<0.01)。(2)Bax、Bcl-2和survivin在直肠癌组织中的表达率分别为72.5%、51.3%和77.5%;survivin蛋白高表达与FHIT蛋白低表达密切相关(P<0.05);FHIT蛋白表达下降的同时,Bcl-2上调及Bax下调(P<0.01)。(3)FHIT蛋白表达减弱时细胞凋亡指数(AI)也下降;FHIT蛋白不同表达组间的AI比较,P<0.01。结论FHIT基因表达下降可能与直肠癌的发生密切相关,FHIT基因可能参与肿瘤细胞凋亡的调节。     

抑癌基因FHIT在肝细胞癌中的研究

目的　探讨原发性肝细胞癌 (HCC)中FHIT基因的表达。方法　采用免疫组织化学技术 (SP法 )检测 4 0例HCC及其癌旁组织、32例肝外伤后正常肝组织中FHIT的表达情况。结果　 4 0例HCC中有 1 1例FHIT表达缺失 ,而相应的癌旁组织中只有 2例FHIT蛋白表达缺失 ;正常肝组织中全部呈阳性表达 ;HCC组织中FHIT蛋白缺失率显著高于相应癌旁及正常肝组织 (P <0 .0 1 ) ,并与肿瘤的病理学分级、TNM分期、门静脉癌栓及HBsAg阳性表达有密切关系 (P <0 .0 5 )。结论　FHIT蛋白的缺失与HCC的发生、发展有关     

非小细胞肺癌Survivin和Skp2的表达及其临床意义

目的检测Survivin和Skp2蛋白在非小细胞肺癌中的表达,探讨其相互关系及临床意义。方法用实时定量PCR的方法检测30例非小细胞肺癌组织及其对应的癌旁组织中survivin mRNA的表达,应用免疫组织化学法检测50例非小细胞肺癌组织中Survivin和Skp2的表达,统计Survivin与病理特征及Skp2的关系。结果 76.7%（23/30）肿瘤组织survivin mRNA表达量明显高于对应的癌旁组织。Survivin蛋白在癌组织的阳性表达率（74.0%）显著高于癌旁组织（16.7%）,χ2=25.9,P〈0.001。Skp2在非小细胞肺癌组织中的阳性表达率（70.0%）也显著高于癌旁组织（20.0%）,χ2=18.8,P〈0.001）。Survivin表达与非小细胞肺癌的病理类型、分化程度、肿瘤分期以及是否有淋巴结转移无统计学意义的相关性（P〉0.05）。Survivin表达与Skp2表达呈正相关（χ2=8.32,P〈0.05）。结论 Survivin在肺癌组织中高表达,其阳性表达率与肿瘤病理类型、肿瘤分期、细胞分化程度和淋巴结转移无明显相关性,与Skp2表达呈正相关。     

结直肠癌侵袭性与脾酪氨酸激酶基因Syk启动子甲基化的关系

目的　探讨脾酪氨酸激酶 (Syk)基因启动子甲基化与结直肠癌侵袭转移之间的关系。方法　采用巢式双重甲基化特异性聚合酶链反应 (MSP)和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)的方法检测Syk基因在 12 0例结直肠癌肿瘤组织、癌旁正常组织中的甲基化和表达情况。 结果　 12 0例结直肠癌患者中 ,48例未检测到SykmRNA的表达 ,而癌旁正常组织均有表达。癌旁正常组织未检测到Syk基因启动子甲基化 ,3 7例肿瘤组织发生Syk基因启动子甲基化(3 0 .8% ) ,癌组织Syk基因启动子甲基化率显著增高 (P <0 .0 0 0 5 )。在淋巴结转移的 5 6例中 ,2 4例发生Syk基因启动子甲基化 ,而无淋巴结转移的 64例中 ,13例发生甲基化 ,有淋巴结转移的Syk基因启动子甲基化发生率显著高于无淋巴结转移组 (P =0 .0 0 8)。发生甲基化的肿瘤组织中 ,均无SykmRNA的表达。结论　结直肠癌中 ,SYK基因启动子过甲基化导致其mRNA的失表达 ,从而引起结直肠癌的侵袭性增强 ,它可能是结直肠癌发生侵袭转移的又一种机制。     

膀胱移行细胞癌中FHIT基因启动子甲基化及其蛋白的表达

目的：探讨膀胱移行细胞癌（BTCC）FHIT基因启动子甲基化状态及其与FHIT蛋白表达的关系。方法：采用甲基化特异性PCR（MSPCR）方法及免疫组织化学S-P法检测62例BTCC组织和10例正常膀胱组织中FHIT基因启动子甲基化状态及FHIT蛋白表达。结果：BTCC组织、正常膀胱组织FHIT基因启动子甲基化频率分别为19．4％（12／62）,0（0／10）。FHIT蛋白在正常膀胱组织、BTCC中阳性表达率分别为100．0％（10／10）和46．77％（29／62）,肿瘤不同分级中随恶性程度的增高,表达减少,Ⅰ级与Ⅲ级比较,差异有统计学意义（P〈0．05）,不同临床分期中随分期的增高,表达减少,Tis～T1与T2～T1比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。FHIT基因的启动子甲基化和蛋白阳性表达有相关（P〈0．05）。结论：FHIT基因的启动子甲基化可能是基因失活重要机制之一,FHIT基因启动子甲基化及表达在BTCC的发生、发展中起重要作用。