牙周韧带细胞膜片技术用于牙周组织再生的研究进展

为了解决中重度牙周炎引发的牙周组织破坏后无法自主再生的问题,细胞膜片工程根据引导性组织再生术的基本原理,通过将使用温敏培养皿等方法获取的完整细胞片层直接移植贴附到缺损部位的方法,实现获取牙骨质、牙槽骨及嵌入二者的牙周韧带同时再生的目标.近年来,细胞膜片技术不断发展,逐步克服了单层细胞膜片厚度偏低、血管化不良及自体细胞来源不足等问题,其中运用牙周韧带细胞膜片进行牙周组织再生已经正式进入临床试验阶段.本文对近年来牙周韧带细胞膜片及其他常用细胞膜片在牙周组织再生方向应用的新进展作一综述.     

牙周膜来源细胞膜片在牙周再生中的应用研究进展

牙周炎作为危害口腔健康的严重疾病之一,其引起的牙周支持组织的损害和丧失却得不到良好的治愈,使得患者的生活质量严重下降。细胞膜片技术作为细胞移植的一种新方法,可以减少细胞的流失,提高细胞的利用率,且在移植的过程中无需外源性支架材料,其在牙周组织工程中表现出了巨大的潜力。本文就组织工程中细胞膜片技术及牙周膜来源的细胞膜片在牙周再生中的研究进展做一综述。     

细胞膜片技术在牙周、牙髓牙本质再生中的应用研究

细胞膜片技术作为一种细胞移植的新方法,能够最大程度保留细胞外基质和细胞间黏附蛋白,减少细胞流失、避免外源性生物材料的应用且提高细胞植活率,被广泛关注。本文就近年来细胞膜片技术在牙周、牙髓牙本质再生中的应用研究作一综述。     

组织工程技术与牙周组织再生

牙周修复治疗的最终目的是重建牙周结构、建立新附着关系，达到其功能和结构的理想恢复。本文从牙周再生的组织细胞学、细胞移植、牙周组织工程等方面综述了牙周组织修复再生技术的新进展和未来的发展方向，同时探索未来研究的重点和途径。     

应用牙周膜干细胞—牙囊干细胞复合细胞膜片同种异体移植修复比格犬牙周组织缺损的研究

目的 拟构建比格犬牙周缺损模型,观察牙周膜干细胞—牙囊干细胞复合细胞膜片修复牙周组织缺损的效果.方法 分离培养比格犬牙囊干细胞、牙周膜干细胞,制备牙囊干细胞细胞膜片、牙周膜干细胞细胞膜片以及以上2种细胞的复合细胞膜片,将膜片混合支架材料同种异体植入成年雄性健康比格犬牙周缺损模型,对照组只植入支架材料.分别于移植后1周、2周、4周、6周、8周、12周检测探诊深度、牙龈退缩、附着丧失情况.12周后观察分析牙周再生的组织形态学变化.结果 牙周临床检查及组织学形态学分析显示,3个膜片移植组牙周再生效果较对照组效果明显,其中复合细胞膜片移植组明显高于其余两个单一膜片移植组(P<0.05).结论 牙周膜干细胞—牙囊干细胞复合膜片同种异体移植更有利于修复比格犬牙周缺损.     

组织工程细胞片在牙周组织再生中的作用

牙周组织工程系指将在体外以理想的种子细胞和细胞外基质构建的具有生命活性的复合体植入牙周缺损部位,对牙周缺损部位进行结构功能性重建。组织工程细胞膜片构建主要有温敏培养皿、刮取法、胶原凝胶法、磁力组织工程法、表面粗糙颗粒单分子层法和聚合电解质等。牙周组织工程细胞片主要有牙周膜干细胞和骨髓间充质干细胞片,分别将其与不同的载体叠加并植入动物体内,可发现细胞外基质和纤维黏附,牙骨质样组织和牙周组织再生。将人牙周膜成纤维细胞和人脐静脉内皮细胞、人真皮成纤维细胞和人脐静脉内皮细胞共培养,所形成的细胞片可生成类似原生血管的管状结构。目前的组织工程细胞片的生物力学性能较差,与传统支架结合仍然存在着材料降解引起的组织纤维化和免疫排斥等问题,组织工程细胞片在牙周组织工程应用中具有较大应用前景;但是,要实现牙周组织的完全再生,其技术有待进一步的研究。本文就细胞片的构建、不同的牙周组织工程细胞片、细胞片工程面临的问题等研究进展作一综述。     

构建一种新型牙周膜牙囊复合细胞膜片的研究

目的：拟构建一种牙周膜牙囊复合细胞膜片,并比较其与单一膜片的性能差异,以期寻找一种更加优越的牙周缺损修复材料。方法：将第三代牙周膜干细胞及牙囊干细胞直接混合共同培养,将牙周膜牙囊混合细胞、牙周膜干细胞及牙囊干细胞分别制备成细胞膜片,应用HE染色,扫描电镜比较三种膜片形态学差异,应用茜素红染色,RT—PCR比较三种膜片成骨能力差异。结果：扫描电镜结果显示,牙囊牙周膜混合细胞膜片分泌更多的细胞外基质。HE染色结果也显示牙囊牙周膜混合细胞膜片细胞层数更多,基质分泌量更大。同时,牙囊牙周膜混合细胞膜片AIJP、Runx2、OCN表达显著高于单一细胞膜片。成骨诱导21天后,茜素红染色结果显示,与单一细胞膜片相比,牙囊牙周膜混合细胞膜片染色更深。结论：牙周膜牙囊复合细胞膜片较单一细胞膜片,细胞层数更多,基质分泌量更大,骨向分化能力更强,为牙周再生提供了新的思路。     

牙周引导组织再生技术在牙周病治疗中的应用

牙周引导组织再生技术是近年来兴起的诱导牙周组织再生疗法,给牙周病治疗开辟了广泛的前景。该文旨在对牙周引导组织再生术在牙周病治疗中的应用及应用前景作一综述。     

组织工程应用于牙周组织缺损修复

牙周组织工程用于修复牙周组织缺损给牙周病的治疗开辟了一条新路。本文概述了牙周组织再生技术的发展,阐明了牙周组织工程促进牙周再生相对于传统牙周再生方法的优势,并将组织工程用于修复牙周缺损的特点作一综述。     

组织工程应用于牙周组织缺损修复

牙周组织工程用于修复牙周组织缺损给牙周病的治疗开辟了一条新路，本文概述了牙周组织再生技术的发展，阐明了牙周组织工程促进牙周再生相对于传统牙周再生方法的优势。并将组织工程用于修复牙周缺损的特点作一综述。     

牙周组织再生治疗中牙源性干细胞的研究进展

牙周炎是一种慢性炎症性疾病,它可以破坏牙周组织,甚至导致牙齿丧失。随着对其发病机理的深入研究．牙周治疗的重点已从阻止疾病发展转变为促进牙周组织的再生和重建。牙周组织工程技术已成为牙周组织再生治疗的发展方向。干细胞群体的选择是组织工程最关键的部分之一。牙源性干细胞因其优良的再生和分化潜能,成为牙周组织再生治疗的重要来源。本文就牙周组织再生治疗中牙源性干细胞的研究进展作一综述。     

复合干细胞膜片移植修复后的牙周组织与正常牙周组织对正畸力反应的差异性研究

目的：比较在正畸力作用下经牙囊细胞（dental follicle cells,DFCs）与牙周膜干细胞（periodontal liga?ment stem cell,PDLSCs）复合细胞膜片诱导再生的牙周组织与正常牙周组织中牙齿移动速率的差异,探讨对再生组织实施正畸牙移动的可行性。方法选择6只成年雄性比格犬,拔除上下颌双侧第一前磨牙。左上及右下象限为实验组,于拔牙窝远中制造4 mm ×4 mm ×4 mm骨缺损,移植DFCs/PDLSCs复合细胞膜片修复牙周组织缺损,诱导其重建;左下及右上象限为对照组。移植术后12周,安装正畸加力装置,以尖牙为支抗近中牵引第二前磨牙,力值150 g ,牵引4周后测量实验组、对照组第二前磨牙近中移动速率,进行统计学分析。结果 DFCs/PDLSCs复合细胞膜片修复牙周组织缺损形成典型的“牙槽骨—牙周膜—牙骨质”样结构,具有良好的组织学特点,实验组与对照组第二前磨牙近中移动速率差异无统计学意义（P>0.05）。结论经复合干细胞膜片修复后的牙周组织对于正畸力刺激有良好反应,正畸牙齿移动速率与正常组织无明显差异。     

Periodontal tissue regeneration by transplantation of adipose tissue-derived stem cells

Periodontitis is the most common cause of tooth loss, and therefore great effort is directed towards developing therapies to counteract its progression. Recent advances have been made to regenerate periodontal tissue damaged by periodontitis. The topical application of recombinant cytokines such as platelet-derived growth factor and fibroblast growth factor-2 can activate endogenous stem cells existing within the periodontal ligament, resulting in enhancement of periodontal regeneration. These cytokine therapies have studied in both preclinical and clinical studies, and concentrated efforts are now being made to translate these techniques to cell-based therapies for enhancing periodontal regeneration. Although recent studies reported that transplantation of stem cells from various tissues, including bone marrow and periodontal ligaments, had positive effects on periodontal regeneration, these techniques are limited by problems with stem cell isolation and availability. Thus, we focused on adipose tissue-derived stem cells (ADSCs) because adipose tissue is abundant and is easily and safely accessible. Recently, we demonstrated that transplantation of ADSCs enhances periodontal tissue regeneration in beagle dogs. We have already completed preparations to begin clinical studies to evaluate the safety and efficacy of ADSCs in periodontal tissue regeneration. This review summarizes our knowledge of adipose stem cell therapies and explores its potential in periodontal therapy.     

Tissue engineered periodontal products

Attainment of periodontal regeneration is a significant clinical goal in the management of advanced periodontal defects arising from periodontitis. Over the past 30 years numerous techniques and materials have been introduced and evaluated clinically and have included guided tissue regeneration, bone grafting materials, growth and other biological factors and gene therapy. With the exception of gene therapy, all have undergone evaluation in humans. All of the products have shown efficacy in promoting periodontal regeneration in animal models but the results in humans remain variable and equivocal concerning attaining complete biological regeneration of damaged periodontal structures. In the early 2000s, the concept of tissue engineering was proposed as a new paradigm for periodontal regeneration based on molecular and cell biology. At this time, tissue engineering was a new and emerging field. Now, 14 years later we revisit the concept of tissue engineering for the periodontium and assess how far we have come, where we are currently situated and what needs to be done in the future to make this concept a reality. In this review, we cover some of the precursor products, which led to our current position in periodontal tissue engineering. The basic concepts of tissue engineering with special emphasis on periodontal tissue engineering products is discussed including the use of mesenchymal stem cells in bioscaffolds and the emerging field of cell sheet technology. Finally, we look into the future to consider what CAD/CAM technology and nanotechnology will have to offer.     

羊富血小板胶细胞基质在2种牙周缺损模型中的修复效果

目的 探讨羊富血小板胶-牙周膜成纤维细胞基质(PRgel-PDLFs)促进不同原因造成的牙周缺损再生的效果.方法 用新鲜全血制取富血小板血浆(PRP),并加入催化剂与成纤维细胞一起培养合成PRgel-PDLFs基质;然后将24只山羊随机分为急性牙周缺损组和慢性牙周炎缺损组,模型建成后所有动物一侧植入PRgel-PDLFs基质于牙周缺损区,另一侧为手术空白组,术后10周,进行CT影像学检查和组织学测量分析.结果 10周后CT影像学和组织学检查显示:两组均在牙根面见新生牙骨质样组织、牙周膜样组织和牙槽骨样组织,且PRgel-PDLFs组再生的牙周组织明显多于空白组(P＜0.01);急性缺损组和慢性牙周炎缺损组的组织再生量相近,差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 PRgel-PDLFs基质能够促牙周组织再生,且对急性牙周缺损和慢性牙周炎造成的牙周缺损修复效果相近.     

细胞-支架构建方式的牙周组织工程实验研究

目的　观察评价细胞 支架构建方式的组织工程方法对牙周组织再生修复的影响和意义。方法　体外培养动物自体牙周膜细胞 (PDLCs) ,传代扩增后接种到纳米羟基磷灰石材料 (nHAC)三维支架上 ,扫描电镜观察PDLCs在nHAC支架上的附着及生长情况 ;同时 ,将PDLCs nHAC复合物植入动物牙周组织缺损中 ,术后 8周观察 ,评价其牙周组织的再生情况。结果　扫描电镜显示 ,nHAC具有良好的多孔网状结构 ,PDLCs在nHAC上贴附牢固 ,生长旺盛。动物实验可见 ,PDLCs nHAC植入组较对照组有更多的新生牙槽骨、新生牙周膜和新生牙骨质生成 ,缺损处牙周组织几乎完全再生 ,且未见上皮长入。结论　应用细胞 支架构建方式的牙周组织工程方法能获得理想的牙周组织再生和重建。     

Implications of cultured periodontal ligament cells for the clinical and experimental setting: a review

The periodontal ligament (PDL) is a key contributor to the process of regeneration of the periodontium. The heterogeneous nature of the PDL tissue, its development during early adulthood, and the different conditions to which the PDL tissue is exposed to in vivo impart on the PDL unique characteristics that may be of consequence during its cultivation in vitro. Several factors affecting the in vivo setting influence the behaviour of PDL fibroblasts in culture. The purpose of this review is to address distinct factors that influence the behaviour of PDL fibroblasts in culture – in vivo–in vitro transitions, cell identification/isolation markers, primary PDL cultures and cell lines, tooth-specific factors, and donor-specific factors. Based on the reviewed studies, the authors recommendations include the use of several identification markers to confirm cell identity, use of primary cultures at early passage to maintain unique PDL heterogeneic characteristics, and noting donor conditions such as age, systemic health status, and tooth health status. Continued efforts will expand our understanding of the in vitro and in vivo behaviour of cells, with the goal of orchestrating optimal periodontal regeneration. This understanding will lead to improved evidence-based rationales for more individualized and predictable periodontal regenerative therapies.     

富血小板胶细胞基质在羊实验性牙周炎牙周缺损中的应用

目的：探讨羊富血小板胶-牙周膜成纤维细胞基质（PRgel-PDLFs）的合成,观察其促进羊中度牙周炎牙周再生的可能作用。方法：建立羊中度牙周炎模型;采用密度梯度离心法从羊新鲜全血中获取富血小板血浆（platelet-rich plasma,PRP）,并按一定比例加入牛凝血酶和氯化钙合成富血小板胶（platelet-rich gel,PRgel）,然后将其与成纤维细胞PDLFs培养合成PRgel-PDLFs基质,并将其植入动物模型牙周吸收缺损区,10周后处死动物,进行常规组织学检查及CT影像学分析。结果：组织学检查及CT影像学分析均显示,3组在牙根面均可见新生牙骨质样组织、牙周膜和牙槽骨样组织的形成,与空白组相比,PRgel-PDLFs组和PRgel组新生牙周组织明显增多,有统计学意义（P〈0.01）。PRgel-PDLFs组新生牙周组织量比PRgel组多,有统计学意义（P〈0.01）。结论：体外合成的PRgel-PDLFs基质可明显促进羊牙周炎吸收组织的再生。