体外反搏对高胆固醇血症猪颈动脉内膜形态和功能的影响

目的 探讨长期体外反搏对高胆固醇血症猪颈动脉内膜形态和内皮依赖血管舒张功能的影响.方法 18头雄性乳猪被随机分为3组,每组6只.用喂养高脂饲料乳猪复制高胆固醇血症模型(高脂饲养组);采用增强型体外反搏(EECP)治疗模型动物36 h(EECP组);以正常饲养组作为对照.取各组动物颈总动脉血管.用扫描电镜和透射电镜观察颈动脉内膜的形态,并测定离体颈动脉血管环对不同浓度梯度乙酰胆碱(Ach)的舒张反应.结果 扫描电镜下观察高脂饲养组血管内皮细胞排列紊乱,内皮细胞有明显脱落,部分细胞胞膜皱缩.体积明显减小,符合凋亡细胞的外形特征;EECP组血管内皮细胞排列紊乱的情形明显减轻,内皮细胞大小不一的程度减轻,皱缩脱落细胞较高脂饲养组明显减少.透射电镜下观察高脂饲养组血管内皮细胞凋亡、脱落,内膜破损明显,平滑肌细胞侵入和增生,泡沫细胞形成;EECP组内皮细胞呈梭形,内皮完整,内皮与内皮下结构连接紧密,平滑肌细胞轻度增生,少见泡沫细胞.在10-8～10-5mol/L Ach时,高脂饲养组和EECP组的血管舒张率较正常饲养组显著降低(P均＜0.05);在10-7～10-5mol/L Ach时,EECP组的血管舒张率较高脂饲养组明显提高(P均＜0.05).结论 高胆固醇血症动物颈动脉内皮超微结构改变提示有动脉粥样硬化形成,内皮依赖血管舒张功能明显受损;长期EECP干预可以显著改善内皮结构损伤和内皮依赖血管舒张功能,这可能是其发挥抗动脉粥样硬化作用的机制之一.     

长期体外反搏对高胆固醇血症猪血管内皮细胞的保护作用及机制

目的:探讨体外反搏对高胆固醇血症猪血管内皮细胞的保护作用及机制。方法:选雄性乳猪12头用高脂喂养建立动脉粥样硬化模型,对模型猪进行32h体外反搏治疗。用cDNA基因芯片对猪的动脉血管内皮细胞基因表达谱进行量化分析。结果:腹主动脉苏丹Ⅲ染色图像定量分析,高脂组:7.84%±2.37%;高脂加反搏组:1.26%±0.36%。两组差异有显著性意义(P<0.05)。冠状动脉左旋支内膜1:500扫描电镜显示:高脂+反搏组内膜的血管内皮细胞排列有序,细胞呈梭型排列与血流方向一致,表面光滑;高脂组血管内膜细胞排列紊乱,表面不光滑,有大量脱落细胞。显著改变的基因:芯片1(反搏组Cy3/高脂组Cy5):锌指蛋白0.33、MAP4K30.13、长链脂肪酸合成酶0.35、神经介素B受体0.19、GPX-13.26、整合素β10.06、CTGF0.28、eNOS3.1、VCAM-10.50;芯片2(高脂组Cy3/正常组Cy5):锌指蛋白23.06、MAP4K36.75、长链脂肪酸合成酶2.71、神经介素B受体6.68、GPX-10.63、整合素β16.29、CTGF2.45。结论:长期体外反搏可以改善内皮形态与功能,增加内皮细胞抗氧化作用,下调内皮细胞机械性刺激感应蛋白基因的表达,降低血管內皮细胞对LDL的摄取,及下调炎症因子相关基因的表达,起到抗动脉粥样硬化的作用。     

盐酸埃他卡林对自发性高血压大鼠尾动脉血管条的舒张作用

目的:分析新型抗高血压药物盐酸埃他卡林对自发性高血压大鼠和正常血压Wistar-Kyoto大鼠阻力小动脉的舒张作用特点。方法:实验于2004-03/2005-01在解放军军事医学科学院毒物药物研究所完成。①选取12周龄雄性自发性高血压大鼠30只作为自发性高血压组,以12周龄雄性Wistar-Kyoto大鼠35只作为正常对照组。盐酸埃他卡林纯度大于99.5%(由解放军军事医学科学院毒物药物研究所合成);乙酰胆碱,L-NAME,吲哚美辛,格列苯脲,4-氨基吡啶,四乙铵均购自美国Sigma化学公司。②尾动脉血管条的制备:两组大鼠处死后迅速分离尾动脉,每只鼠制备2～4个螺旋状血管条,其中1～2个血管条去除内皮,其余血管条保持内皮完整。将血管条的两端扎紧,悬挂于含5mL Krebs-Ringer营养液的37℃恒温浴槽内,下端固定,上端通过张力换能器连于自动平衡记录仪,记录血管条的张力变化,并持续通入体积分数为0.95的O2和0.05的CO2混和气。制备完毕的血管条用于以下各独立实验。③乙酰胆碱诱发大鼠尾动脉内皮依赖性舒张反应实验:自发性高血压组取14个去内皮血管条,14个内皮完整血管条;正常对照组取12个去内皮血管条,12个内皮完整血管条。用40 mmol/L的KCl对两组大鼠尾动脉去内皮及内皮完整血管条进行预收缩,当血管条收缩达到稳定后,累积性加入10-8～10-4 mol/L乙酰胆碱。以KCl诱发最大稳定收缩幅度为100%,检测血管舒张率。④盐酸埃他卡林诱发大鼠尾动脉舒张反应实验:自发性高血压组取12个去内皮血管条,14个内皮完整血管条;正常对照组取10个去内皮血管条,取12个内皮完整血管条。预收缩过程同上,当血管条收缩达到稳定后,累积性加入10-7～10-3 mol/L盐酸埃他卡林,检测血管舒张率。⑤钾通道阻断剂影响盐酸埃他卡林舒血管作用的实验:自发性高血压组、正常对照组各取12个内皮完整血管条。首先将血管条分别与四乙铵、4-氨基吡啶、氯化钡、格列苯脲预孵育30 min,再用KCl预收缩血管,当血管条收缩达到稳定后,在浴槽内加入终浓度为10-3 mol/L的盐酸埃他卡林,观察各种钾通道阻断剂对盐酸埃他卡林舒血管作用的抑制情况。以用Krebs-Ringer营养液预孵育30 min、且不加入任何药物的血管作为空白对照。⑥一氧化氮合酶抑制剂和环氧化酶抑制剂影响盐酸埃他卡林舒血管作用的实验:自发性高血压组、正常对照组各取12个内皮完整血管条。首先将血管条分别与L-NAME、吲哚美辛预孵育 30 min,再用KCl预收缩血管,当血管条收缩达到稳定后,在浴槽内加入终浓度10-3 mol/L的盐酸埃他卡林,观察两种酶抑制剂对盐酸埃他卡林舒血管作用的抑制情况。结果:①正常对照组与自发性高血压组去内皮的尾动脉血管条均未产生舒张反应,而内皮完整的血管条均产生舒张反应,且呈剂量依赖性,最低有效浓度均为10-7 mol/L,乙酰胆碱浓度为10-6～10-4 mol/L时自发性高血压组尾动脉内皮依赖性舒张反应明显低于正常对照组(F=4.12～12.26,P<0.05或0.01)。②两组内皮完整与去内皮的血管条均产生舒张反应,但盐酸埃他卡林诱发自发性高血压大鼠尾动脉舒张效应显著强于正常血压Wistar-Kyoto大鼠(F=4.08～6.15,P<0.05)。③与空白对照血管比较,四乙铵、4-氨基吡啶、氯化钡均不能对抗盐酸埃他卡林的舒血管作用(P>0.05),而格列苯脲可显著对抗盐酸埃他卡林的舒血管作用(F=42.38,P<0.01)。与正常对照组比较,自发性高血压组格列苯脲对尾动脉舒张反应的阻断效应更敏感(F=8.76,P<0.01)。④L-NAME、吲哚美辛均不能抑制盐酸埃他卡林的舒血管作用(P>0.05)。结论:10-7～10-3 mol/L盐酸埃他卡林对大鼠尾动脉血管条均能诱发剂量依赖性舒张反应,该作用在高血压状态时显著增强,可能与ATP敏感性钾通道的功能改变相关。     

植物雌激素α-玉米赤霉醇对大鼠胸主动脉血管的舒张效应

目的:观察植物雌激素α-玉米赤霉醇对大鼠胸主动脉的舒张作用及其途径。方法:实验于2005-09/12在首都医科大学病理生理学教研室完成。选取健康成年雌性Wistar大鼠17只,采用体外血管灌流的方法,用10-6mol/L苯肾上腺素预收缩血管,将10-6mol/L乙酰胆碱对血管环是否有舒张反应作为判断血管内皮是否完整的标准。观察α-玉米赤霉醇对血管内皮完整和去内皮胸主动脉的舒张作用,以及内皮型一氧化氮合酶抑制剂左旋硝精氨酸甲酯、鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝、钙激活钾通道阻断剂四乙胺、ATP敏感钾通道的阻断剂格列本脲、L-型钙通道激动剂(-)BayK8644(10-6mol/L)及雌激素受体阻断剂ICI182,780对这一过程的影响。各种药物对血管环的作用强度用最大舒张率表示,即加药后收缩幅度与加药前收缩幅度的百分比。结果:纳入大鼠17只,共取得胸主动脉环68个,共8个不合格予以剔除,其余60个胸主动脉环均用于实验。①α-玉米赤霉醇(10-10～10-5mol/L)可引起内皮完整的胸主动脉剂量依赖性的舒张效应;去内皮血管的最大舒张率显著低于同浓度内皮完整血管(P<0.05～0.01)。②左旋硝精氨酸甲酯和亚甲蓝均可抑制α-玉米赤霉醇对胸主动脉的舒张作用,使两组胸主动脉环的最大舒张率显著降低(P<0.05～0.01)。③四乙胺、格列本脲、BayK8644可以减弱α-玉米赤霉醇的舒张血管作用(P<0.05～0.01),雌激素受体特异性阻断剂ICI182,780对10-6mol/Lα-玉米赤霉醇的舒张作用无显著影响(P>0.05)。结论:α-玉米赤霉醇可引起内皮依赖性的胸主动脉舒张,其作用与一氧化氮合酶/一氧化氮系统激活、钙激活钾通道和ATP敏感钾通道开放、钙通道抑制有关,但与雌激素受体无关。α-玉米赤霉醇的舒张血管效应可能是其心血管保护途径之一。     

增强型体外反搏治疗非高危稳定型心绞痛患者

目的:探讨应用增强型体外反搏治疗非高危稳定型心绞痛患者的效果。方法:选取2016年1月～2018年12月收治的非高危稳定型心绞痛患者68例,采用随机数字表法分为观察组与对照组,各34例。观察组在常规药物治疗基础上结合增强型体外反搏治疗,对照组采用常规药物治疗。比较两组临床疗效,治疗前后非内皮依赖性舒张功能、内皮依赖性舒张功能、峰值流速变化率及心血管不良事件发生情况。结果:观察组临床疗效优于对照组,治疗后内皮依赖性舒张功能与峰值流速变化率均高于对照组,心血管不良事件发生率低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:采用增强型体外反搏治疗非高危稳定型心绞痛患者效果确切,可明显改善患者血管内皮功能,减少心血管不良事件的发生。     

猪冠状动脉内皮细胞舒张过程中高钾溶液的抑制作用

背景：目前高钾心脏停搏液已在心脏手术中广泛应用。但有关高钾溶液对冠状动脉内皮细胞舒张血管功能影响的研究尚少。目的：探讨高钾溶液对猪冠状动脉内皮细胞功能的影响及其机制。设计：随机对照的实验研究。地点、材料和干预：2000-06／09从北京大红门肉联厂共取17只刚宰杀的生猪猪心(雌雄不限)。均置人4℃的KH中，30min内送回北京阜外医院体外循环研究室，10min内选其心外膜下冠状动脉前降支中下三分之一，切成3段3mm的血管环。按单纯随机抽样法将49条猪冠状动脉血管环分为7组，每组7条；分别为对照组、20mmol／L高钾组、50mmol／L高钾组、四乙胺组、格列苯脲(商品名：优降糖)组、50mmol／L高钾十四乙胺组、50mmol／L高钾+格列苯脲组。采用器官槽法，分别用Krebs-Henseleit重碳酸盐缓冲液(Krebs solution，KH)、20，50mmol／L的高钾溶液浸泡血管环1h。主要观察指标：7μmol／L环加氧酶阻断剂吲哚美辛(商品名：消炎痛)和300μmol／L一氧化氮合成酶阻断剂N-硝基-L-精氨酸、1mmol／L钙激动性钾通道阻断剂四乙胺或3μmol／L ATP敏感性钾通道阻断剂优降糖的作用下，30nmol／L前列腺素F2α引发的预收缩强度和非受体介导钙离子载体(1&;#215;10^-10～1&;#215;10^-6mol／L)引发的内皮源性舒张反应。结果：格列苯脲组、50mmol／L高钾+四乙胺组、50mmol／L高钾+格列苯脲组的血管收缩强度[(1．0&;#177;0．3)．(1．2&;#177;0．5)，(1．9&;#177;0．8)g]与对照组[(2．4&;#177;0．5)g]比较，差异有显著性意义(F=11．425，P&;lt;0．05)与单纯浸泡于KH的冠状动脉相比，内皮源性超极化因子(endothelium-derived hyperpolarizing factots．EDHF)介导的内皮源性舒张反应，经20，50mmol／L高钾溶液及四乙胺作用后显著降低(F=44．036，P&;lt;0.01)，但加入优降糖后改变不明显(F=6．612，P&;gt;0.05)。结论：EDHF在冠状动脉内皮源性舒张中起重要的作用，高浓度钾离子抑制EDHF的作用，EDHF介导血管舒张的作用过程主要与钙激动性钾通道有关。     

猪冠状动脉内皮细胞舒张过程中高钾溶液的抑制作用

背景:目前高钾心脏停搏液已在心脏手术中广泛应用。但有关高钾溶液对冠状动脉内皮细胞舒张血管功能影响的研究尚少。 目的:探讨高钾溶液对猪冠状动脉内皮细胞功能的影响及其机制。 设计:随机对照的实验研究。 地点、材料和干预:2000-06/09从北京大红门肉联厂共取17只刚宰杀的生猪猪心(雌雄不限)。均置入4℃的KH中,30min内送回北京阜外医院体外循环研究室,10min内选其心外膜下冠状动脉前降支中下三分之一,切成3段3mm的血管环。按单纯随机抽样法将49条猪冠状动脉血管环分为7组,每组7条;分别为对照组、20mmol/L高钾组、50mmol/L高钾组、四乙胺组、格列苯脲(商品名:优降糖)组、50mmol/L高钾 四乙胺组、50mmol/L高钾 格列苯脲组。采用器官槽法,分别用Krebs-Henseleit重碳酸盐缓冲液(Krebs solution, KH)、20,50mmol/L的高钾溶液浸泡血管环1h。 主要观察指标:7μmol/L环加氧酶阻断剂吲哚美辛(商品名:消炎痛)和300μmol/L一氧化氮合成酶阻断剂N-硝基-L-精氨酸、1mmol/L钙激动性钾通道阻断剂四乙胺或3μmol/L ATP敏感性钾通道阻断剂优降糖的作用下,30nmol/L前列腺素F_(2α)。引发的预收缩强度和非受体介导钙离子载体(1×10~(-10)～1×10~(-6)mol/L)引发的内皮源性舒张反应。 结果:格列苯脲组、50mmol/L高钾 四乙     

非诺贝特对冠心病患者血管内皮依赖性舒张功能及血清NO浓度的影响

【目的】探讨冠心病患者血管内皮功能及血清NO浓度的变化及非诺贝特干预的影响。【方法】用高分辨超声技术检测各组对象的肱动脉内皮依赖性舒张功能,并测定血清NO浓度,药物非诺贝特干预8周后复测上述指标。【结果】与正常对照组比较,冠心病患者肱动脉内皮依赖性血管舒张功能明显减退(P<0.01),血清NO浓度降低(P<0.01)。非诺贝特可改善内皮血管依赖性舒张功能[(8.09±4.30)%vs(2.51±1.30)%,P<0.01],升高血清NO浓度[(66.43±17.87)μmol/Lvs(49.12±17.81)μmol/L,P<0.01],并且血管内皮依赖性舒张功能与血清NO浓度正相关(r=0.741,P<0.001)。【结论】冠心病患者肱动脉内皮依赖性血管舒张功能明显减退,血清NO浓度降低。非诺贝特通过增加血清NO浓度改善冠心病患者的血管内皮功能,该作用可能是贝特类调脂药防治冠心病的机制之一。     

阿托伐他汀对长期吸烟者内皮功能的改善作用

目的 探讨阿托伐他汀对长期吸烟者血管内皮功能改善及炎症因子的影响.方法 长期吸烟者264例,随机分为两组;治疗组接受12周阿托伐他汀(20mg/d),对照组服用安慰剂,应用高分辨超声测定肱动脉血管内皮依赖性舒张功能及非内皮依赖性血管舒张功能,以及检测受试者外周血清中一氧化氮( nitric oxide,NO)、内皮素1(endothelin,ET)、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)水平,观察受试者内皮功能改善情况.结果 治疗组服用12周阿托伐他汀治疗后血管内皮依赖性舒张功能及非内皮依赖性血管舒张功能均有明显改善,与治疗前比较,NO水平明显升高,(78.7±14.32)μmol/L vs (67.2±13.02) μmol/L; ET、CRP水平明显下降,ET (44.6±8.54) ng/L vs(86.1±6.81) ng/L、CRP(2.84±3.12)mg/L vs (5.80±5.29) mg/L,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组血流介导的血管舒张反应(FMD) (11.48±5.35)％ vs (7.76±3.87)％及硝酸甘油介导的血管舒张反应(NMD) (10.80±3.12)％ vs (7.80±2.29)％较治疗前有明显改善.结论 阿托伐他汀通过抗氧化应激对长期吸烟者血管内皮功能有明显的改善作用,从而保护其血管内皮功能.     

不同浓度外源性内皮素1刺激大鼠脑皮质神经元增加释放一氧化氮首次国内实验直接证实

目的观察不同浓度内皮素1刺激大脑皮质神经元增加释放一氧化氮的作用.方法实验于2002-03/2003-02在暨南大学医学院病理教研室、生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心实验室进行.①取新生SD大鼠大脑皮质细胞,神经元体外原代培养至第7天,以10,100 nmol的内皮素1刺激神经元,对照组加入等体积磷酸盐缓冲液,以硝酸还原酶法测定间接反映一氧化氮的含量,检验内皮素1对神经元释放一氧化氮的累积效应.分别检测加药前、加药后30 min,6 h培养基中的一氧化氮浓度.②将培养的神经元分成5组,对照组,10 nmol/L内皮素1组、10 nmol/L内皮素1+3 μmol/L选择性内皮素受体A抗拮剂BQ123组、10 nmol/L内皮素1+3 μmol/L选择性内皮素受体B抗拮剂BQ788组、10 nmol/L内皮素1+3μmol/L非特异性内皮素受体抗拮剂PD145065组.测定加药后6 h各培养液中一氧化氮浓度.结果①10 nmol/L,100 nmol/L内皮素1组在加药后30 min一氧化氮浓度与对照组基本一致,加药后6 h培养液中一氧化氮浓度高于对照组(P＜0.05).②10 nmol/L内皮素1组和100 nmol/L内皮素1组在加药30 min和6 h时一氧化氮浓度基本一致(P＞0.05).③不同内皮素受体拮抗剂对外源性内皮素1刺激神经元释放一氧化氮的影响10 nmol/L内皮素1组、10 nmol/L内皮素1+3 μmol/L选择性内皮素受体A抗拮剂BQ123组一氧化氮浓度高于对照组(P＜0.05).10 nmol/L内皮素1+3 μmol/L选择性内皮素受体B抗拮剂BQ788组、10 nmol/L内皮素1+3 μmol/L非特异性内皮素受体抗拮剂PD145065组明显低于10 nmol/L内皮素1组(P＜0.01).结论10 nmol/L和100 nmol/L内皮素1对培养液中一氧化氮的影响基本接近,提示内皮素1对皮质培养神经元释放一氧化氮增加的作用在10～100 nmol/L间无剂效关系.选择性内皮素受体B抗拮剂BQ788或非特异性内皮素受体抗拮剂PD145065可完全阻断内皮素1刺激神经元释放一氧化氮的作用,选择性内皮素受体A抗拮剂BQ123对内皮素1刺激神经元释放一氧化氮无影响,提示内皮素1是通过内皮素受体B刺激神经元释放一氧化氮.     

氯化钐对大鼠颈上神经节烟碱传递的影响

背景:稀土元素因其独特的理化性质,具有广泛的生物效应,并具有一定的神经毒性。研究已经发现某些稀土元素如镧、钆等对神经肌肉接头和交感神经节突触传递具有一定的影响,但钐对突触传递的影响及机制尚不明确。目的:观察氯化钐对大鼠交感神经节-颈上神经节烟碱型突触传递的影响,分析其可能作用途径。设计:以细胞为观察对象,对照实验。单位:广西医科大学药理教研室。材料:选用成年Wistar大鼠40只,雌雄不拘,体质量250～320g。氯化钐由氧化钐氯化处理后得到。氧化钐由广西医科大学刘达元教授赠送,纯度99.5%,相对分子质量348.7。氯化乙酰胆碱、氨甲酰胆碱均为美国Sigma公司产品。方法:实验于2001-09/2002-12在广西医科大学实验中心神经药理学实验室完成。①将大鼠急性放血处死后,迅速将颈上神经节连同节前神经干离体后固定在浴槽内,节前神经干置于吸引电极内供电刺激。用体积分数0.95的O2和体积分数0.05的CO2混合气饱和,pH为7.4±0.05,恒温(35±0.5)℃的克氏液持续灌流标本。用内充3mol/LKCl、尖端电阻30～60MΩ的玻璃微电极穿刺离体颈上神经节神经元进行细胞内生物电记录。单脉冲(频率0.2～0.5Hz;波宽0.5～1ms;刺激强度2～10V)刺激交感节前神经干,可在颈上神经节细胞内记录到快兴奋性突触后电位。用乙酰胆碱(0.1mmol/L)或氨甲酰胆碱(0.1mmol/L)灌流神经节30～60s可记录到颈上神经节细胞膜除极反应。②比较1×(10-7～10-4)mol/L氯化钐灌流对颈上神经节细胞快兴奋性突触后电位、膜电位、膜电阻和乙酰胆碱、氨甲酰胆碱膜除极发应的影响;在灌流高钙(10mmol/L)克氏液易化快兴奋性突触后电位后,继用含氯化钐的高钙克氏液灌流,观察氯化钐对高钙易化快兴奋性突触后电位作用的影响。实验中所用药物均用克氏液或改良克氏液配成相应浓度直接灌流神经节。③采用配对t检验比较灌流药物前后生物电差异。主要观察指标:①氯化钐对大鼠颈上神经节的快兴奋性突触后电位的影响。②对颈上神经节细胞膜电位和膜电阻的影响。③对乙酰胆碱和氨甲酰胆碱膜除极化反应的影响。④氯化钐对高钙(10mmol/L)易化快兴奋性突触后电位作用的影响。结果:①1×(10-7～10-4)mol/L的氯化钐能可逆性地抑制大鼠颈上神经节的快兴奋性突触后电位[1×10-4,1×10-5,1×10-6,1×107mol/L的氯化钐对大鼠颈上神经节细胞快兴奋性突触后电位幅度抑制百分率分别为(49.78±13.85)%(n=20),(39.05±4.05)%(n=10),(29.83±9.73)%(n=10),(16.30±2.16)%(n=10),P<0.05～0.01]。1×10-4mol/L的氯化钐可使顺行动作电位变成快兴奋性突触后电位(n=5)。②1×10-4mol/L的氯化钐灌流对乙酰胆碱(n=5)和氨甲酰胆碱(n=7)膜除极化反应无明显影响(P>0.05)。③1×(10-7～10-4)mol/L对颈上神经节细胞膜电位、膜电阻无明显影响(n=67,P>0.05)。④1×10-4mol/L氯化钐能拮抗高钙(10mmol/L)对快兴奋性突触后电位的易化作用(n=5,P<0.01)。结论:氯化钐通过突触前机制抑制大鼠交感神经节颈上神经节烟碱传递,可能与抑制突触前钙离子内流有关。     

Endothelium-dependent vasodilation in the skin microcirculation of patients with septic shock

The evidence for endothelial dysfunction in sepsis is mostly restricted to animal models. We investigated endothelial function in the skin microcirculation of eight patients hospitalized for septic shock in an intensive care unit (ICU). All patients required adrenergic support. Twelve hemodynamically stable ICU patients without sepsis who did not receive any vasoactive medication were used as controls. The two groups were of similar age and sex ratio. For additional reference, 16 healthy, nonsmoking subjects matched for age and sex to the first two groups were also studied. The evaluation of endothelial function was based on the comparison of skin blood flow responses to iontophoretically applied acetylcholine (Ach, an endothelium-dependent vasodilator) and sodium nitroprusside (SNP, an endothelium-independent vasodilator). Skin blood flow was measured on the volar face of the forearm using laser Doppler imaging. Before application of Ach or SNP, the mean baseline skin blood flow was below 100 perfusion units (PU) in all subjects and did not differ between groups. The maximal increase in blood flow elicited by both agents was significantly depressed in the patients with sepsis (Ach: 167 +/- 63 PU; SNP: 138 +/- 34 PU, mean +/- SD) compared with the ICU control patients (Ach: 291 +/- 135 PU, P < 0.05; SNP: 261 +/- 121 PU, P < 0.01) and the healthy, nonsmoking groups (Ach: 336 +/- 98 PU, P < 0.01; SNP: 304 +/- 81 PU, P < 0.01). The ratio of responses to Ach and SNP did not significantly differ between groups (septic: 1.22 +/- 0.40; ICU control 1.18 +/- 0.46, healthy, nonsmoking 1.12 +/- 0.24, P = 0.86). Thus, sepsis was not associated with a selective depression of the endothelium-dependent response. These results suggest that the capacity of the endothelium to produce signals for vasorelaxation remains intact in the skin microcirculation of patients with septic shock.     

L-arginine improves endothelium-dependent vasodilation in hypercholesterolemic humans.

Endothelium-dependent vasodilation is impaired in hypercholesterolemia, even before the development of atherosclerosis. The purpose of this study was to determine whether infusion of L-arginine, the precursor of the endothelium-derived relaxing factor, nitric oxide, improves endothelium-dependent vasodilation in hypercholesterolemic humans. Vascular reactivity was measured in the forearm resistance vessels of 11 normal subjects (serum LDL cholesterol = 2.76 +/- 0.10 mmol/liter) and 14 age-matched patients with hypercholesterolemia (serum LDL cholesterol = 4.65 +/- 0.36 mmol/liter, P < 0.05). The vasodilative response to the endothelium-dependent vasodilator, methacholine chloride, was depressed in the hypercholesterolemic group, whereas endothelium-independent vasodilation, induced by nitroprusside, was similar in each group. Intravenous administration of L-arginine augmented the forearm blood flow response to methacholine in the hypercholesterolemic individuals, but not in the normal subjects. L-arginine did not alter the effect of nitroprusside in either group. D-arginine had no effect on forearm vascular reactivity in either group. It is concluded that endothelium-dependent vasodilation is impaired in hypercholesterolemic humans. This abnormality can be improved acutely by administration of L-arginine, possibly by increasing the synthesis of endothelium-derived relaxing factor.     

维持性血液透析患者血清Beclin1和LC3-II表达水平与血管钙化的相关性分析

目的　探究维持性血液透析（maintenance hemodialysis,MHD）患者血清Beclin1 和微管相关蛋白1 轻链3-II（microtubule associated protein 1 light chain 3-II,LC3-II）表达水平与血管钙化（vascular calcification,VC）的相关性。方法　选取2017 年4 月～ 2020 年9 月三河市燕郊人民医院收治的MHD 患者145 例作为研究对象,根据是否发生VC,将患者分为MHD 未并发VC 组（n=75）和MHD 并发VC 组（n=70）。根据VC 评估结果将MHD 并发VC 患者分为轻度VC 组（n=36）、中度VC 组（n=24）、重度VC 组（n=10）;另选取同期在该院进行体检的健康人80 例作为对照组。收集受试者一般资料,酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测受试者血清Beclin1 和LC3-II 的水平,Pearson 法分析MHD 患者血清Beclin1 和LC3-II 水平与VC 相关指标的相关性,二元logistic回归分析MHD 患者发生VC 的影响因素。结果　与对照组相比,MHD 未并发VC 组和MHD 并发VC 组血清肌酐（serum creatinine,SCr）（72.48±18.26μmol/L vs 685.30±192.42μmol/L ,733.98±206.35μmol/L）、血磷（1.28±0.42mmol/L vs 2.08±0.71mmol/L。2.86±0.87mmol/L）、血钙（1.54±0.45mmol/L vs 2.46±0.62mmol/L ,2.98±0.77mmol/L）、全段甲状旁腺激素（intact parathyroid hormone,iPTH）（58.10±17.36pg/ml vs 634.58±172.44pg/ml,769.48±195.02pg/ml）水平升高,差异有统计学意义（F=100.197 ～ 500.960,均P ＜ 0.05）;血清血红蛋白（hemoglobin,Hb）（134.82±35.16g/L vs 112.78±32.85g/L,103.66±27.91g/L）,Beclin1（8.09±2.16μg/L vs 5.65±1.43μg/L,2.56±0.73μg/L）和LC3-II（45.16±5.15μg/L vs 36.31±3.42μg/L ,27.47±2.76μg/L）水平降低,差异有统计学意义（F=18.748 ～ 372.522,均P ＜ 0.05）;与MHD 未并发VC 组相比,MHD 并发VC 组血磷、血钙及iPTH 水平升高（t=7.136 ～ 9.723,均P＜ 0.05）,血清Beclin1 和LC3-II 水平降低（t=16.605,18.982,均P ＜ 0.05）。轻度VC 组、中度VC 组和 重度VC组血清Beclin1（4.35±0.71μg/L,3.49±0.57μg/L 和1.91±0.26μg/L）和LC3-II（31.12±3.32μg/L,25.65±2.62μg/L vs 20.47±1.76μg/L）水平依次降低,差异均有统计学意义（F=366.298,296.025,均P ＜ 0.05）。MHD 患者血清Beclin1 水平与血磷、血钙及iPTH 均呈负相关（r=-0.674,-0.682,-0.597,均P ＜ 0.05）;血清LC3-II 水平与血磷、血钙及iPTH 也呈负相关（r=-0.648,-0.703,-0.674,均P ＜ 0.05）。二元logistic 回归分析发现,Beclin1 和LC3-II水平偏低是MHD 患者发生VC 的危险因素（P ＜ 0.05）。结论　MHD 并发VC 患者血清Beclin1 和LC3-II 水平降低,与VC 严重程度有关,是MHD 患者发生VC 的危险因素,可作为预测MHD 患者发生VC 的潜在生物学标志物。     

硫化氢对急性肺损伤大鼠白细胞介素的调节

目的 研究气体信号分子硫化氢(H2S)在油酸诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用及其在ALI中对炎症反应的调节.方法 采用鼠尾静脉缓慢注射油酸(OA,0.01 ml/kg)复制大鼠急性肺损伤模型,将SD大鼠49只随机分为三组:对照组、OA组及OA+硫氢化钠(NaHS)组.OA组和OA+NaHS组分为2 h、4 h、6 h三个观察点.对照组鼠尾静脉注射生理盐水(0.01 ml/kg),观察6 h.测定动脉血氧分压(PaO2)、肺湿干重比(W/D)、肺泡灌洗液中性粒细胞百分比(PMN%),光镜下半定量肺损伤评分(IQA),用敏感硫电极法检测血浆、肺组织匀浆H2S含量,用双抗体夹心ELISA法测定血浆、肺组织匀浆IL-6、IL-8和IL-10的含量.多组样本的均数的比较采用单因素差分析.结果 油酸鼠尾静脉注射可引起肺组织明显的形态学改变;与对照组比,OA组可见PaO2下降,W/D、PMN%、IQA增加(P＜0.01),在2 h、4 h、6 h时,血浆中H2S[对照:(36.58±6.80)μmol/L,2 h:(21.30±2.75)μmol/L,4 h:(20.63±1.26)μmol/L,6 h:(20.00±1.60)μmol/L,P＜0.01]以及肺匀浆中H2S[对照:(27.61±2.20)μmol/L,2 h:(20.67±1.37)μmol/L,4 h:(20.79±1.10)μmol/L,6 h:(18.92±0.75)μmol/L,P=0.000]均明显降低,血浆中IL-6[对照:(73.95±14.68)pg/ml,2 h:(186.70±23.85)pg/ml,4 h:(238.50±26.46)pg/ml,6 h:(215.95±25.86)pg/ml,P＜0.01]、肺匀浆中IL-6[对照:(60.58±12.91)pg/ml,2 h:(160.32±24.57)pg/ml,4 h:(195.27±46.28)pg/ml,6 h:(185.66±17.42)pg/ml,P＜0.01]均显著增加,血浆IL-8[对照:(80.69±20.42)pg/ml,2 h:(184.11±19.51)pg/ml,4 h:(286.20±53.34)pg/ml,6 h:(241.30±45.85)pg/ml,P＜0.01]、肺匀浆中IL-8[对照:(69.14±15.96)pg/ml,2 h:(174.10±20.36)pg/ml,4 h:(249.02±31.17)pg/ml,6 h:(237.74±34.18)pg/ml,P＜0.01]均显著增加,血浆IL-10[对照:(39.78±8.97)pg/ml,2 h:(111.18±11.46)pg/ml,4 h:(115.60±13.91)pg/ml,6 h: (102.41±9.93)pg/ml,P＜0.01]、肺匀浆中IL-10[对照:(71.86±14.19)pg/ml,2 h:(126.96±18.72)pg/ml,4 h:(151.88±27.61)pg/ml,6 h:(137.28±14.22)pg/ml,P＜0.01]含量均显著增加.而预先给予NaHS能减轻油酸引起的肺损伤,显著提高血浆和肺匀浆中H2S含量[4 h,血浆:(26.67±3.44)μmol/L vs(20.63±1.26)μmol/L,P=0.042;肺匀浆:(23.20±1.48)μmol/L vs(20.79±1.10)μmol/L,P=0.011;6 h,血浆:(26.98±4.93)μmol/L vs(20.00±1.60)μmol/L,P=0.022;肺匀浆:(21.43±1.79)μmol/L vs(18.92±0.75)μmol/L,P=0.016),同时血浆IL-6(185.37±21.98 pg/ml vs 238.50±26.46 pg/ml,4 h,P＜0.01;(124.22±21.84)pg/ml vs(215.95±25.86)pg/ml,6 h,P＜0.01 ]、IL-8[(199.40±34.56)pg/ml vs(286.20±53.34)pg/ml,4h,P＜0.01;(146.58±20.23)pg/ml vs(241.30±45.85)pg/ml,6 h,P＜0.01]含量明显降低,而IL-10含量增高[(154.48±18.08)pg/ml vs(115.60±13.91)pg/ml,4 h,P=0.000;(138.06±20.01)pg/ml vs(102.41±9.93)pg/ml,6 h,P=0.1300].结论 油酸诱导的大鼠ALI内源性H2S生成减少.外源性H2S通过抑制炎症因子IL-6和IL-8的表达,增加抗炎因子IL-10的表达,进而改变炎症/抗炎因子之间的比例,对油酸诱导的大鼠急性肺损伤起保护作用.     

家兔离体主动脉血管对天麻水煎剂干预的反应

背景:现代医学研究发现天麻(Gastrodiaelata B1)具有明显地心肌保护和血管扩张作用,可用于冠心病、高血压的治疗,但其作用机制仍需明确.目的:观察天麻水煎剂对去甲肾上腺素、KCl预收缩血管反应的舒张作用,并分析其作用途径.设计:分组设计、离体动物组织对照实验.单位:川北医学院生理学教研室.材料:选用健康家兔12只,兔龄七、八个月,雌雄不拘,由川北医学院实验动物中心提供.实验所用药品天麻水煎剂由慧仁堂药店鉴定提取,将其配制成10%,20%.40%和80%浓度备用.β肾上腺素能受体阻断剂普萘洛尔为北京第二制药厂产品:一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸为Sigma公司产品:甲烯蓝、环氧酶抑制剂吲哚美辛为江苏太仓制药厂产品.方法:实验于2006-01/2007-01在川北医学院药物研究所完成.采用家兔离体主动脉平滑肌标本,以去甲肾上腺素(1×10-6mol/L)预收缩主动脉后给予1.0,2.0,4.0,8.0和16.0g/L天麻水煎剂观察其张力变化,并观察去除血管内皮、给予1×10-4mol/L左旋硝基精氨酸、1×10-5mol/L甲烯蓝、1×10-5mol/L吲哚美辛和1×10-5mol/L普萘洛尔对血管张力的影响:血管张力经张力换能器输入BL-410智能型生物信号处理系统进行处理.另外观察8g/L天麻水煎剂对无内皮细胞血管环NA和KCl的量效收缩反应.主要观察指标:离体血管张力.结果:天麻对血管环静息张力无明显影响.但不同剂量的天麻可使1×10-6mol/L去甲肾上腺素预收缩血管产生明显舒张(r=0.85,t=18.45,P＜0.01).去除血管内皮、1×10-4mol/L左旋硝基精氨酸或1×10-5mol/L甲烯蓝可减弱天麻的舒张作用,但吲哚美辛和普萘洛尔对其无影响.另外,8g/L天麻水煎剂对无内皮细胞血管环去甲肾上腺素和KCI的量效收缩反应明显降低,且去甲肾上腺素和KCl的PD2(-log游离药物半数有效浓度)分别由温育前(6.90±0.93)mol/L和(1.53±0.55)mmol/L,降低为(5.61±0.70)mol/L和(1.10±0.25)mmol/L,(t=2.41,3.82,P＜0.05).结论:天麻水煎剂对主动脉的舒张是内皮依赖性的,并与内皮一氧化氮的释放有关;也可通过拮抗ROC和PDC通道,抑制Ca2 的内流和释放等机制有关.     

ACE inhibitors improve endothelial function in type 1 diabetic patients with normal arterial pressure and microalbuminuria.

OBJECTIVE: The purpose of this study was to test whether a short-course treatment with ACE inhibitors may restore endothelium-dependent and/or -independent vasodilation in the femoral artery of microalbuminuric patients with type 1 diabetes and normal arterial pressure. RESEARCH DESIGN AND METHODS: We studied nine normotensive microalbuminuric type 1 diabetic patients and two groups of control subjects matched for femoral artery diameter to type 1 diabetic patients after placebo (control group A, n = 17) and ACE inhibitor (control group B, n = 18) treatment, respectively. The patients were enrolled in a double-blind cross-over study with a 1-week trial of either placebo, captopril (25 mg t.i.d.), or enalapril (10 mg/day) in randomized order to ascertain whether short-term ACE inhibition obtained with (captopril) or without (enalapril) a sulfhydryl donor molecule ameliorates vessel wall function. Endothelium-mediated flow-dependent vasodilation and endothelium-independent vasodilation were evaluated in the right common femoral artery by echo Doppler. RESULTS: Both captopril and enalapril normalized (control group B 22.9+/-3.2% per 8 min) endothelium-dependent response (19.6+/-7.5 and 18.0+/-5.3 vs. -10.4+/-4.1% per 8 min, P < 0.01, for both captopril and enalapril versus placebo, respectively) in the type 1 diabetic patients. Captopril (28.4+/-3.5 vs. 17.1+/-3.5% per 5 min during placebo, P < 0.05) but not enalapril (20.1+/-3.0 vs. 31.7+/-2.8% per 5 min, P < 0.05 for enalapril versus control group B, and NS for captopril vs. control group B) ameliorated endothelium-independent vasodilation in type 1 diabetic patients. CONCLUSIONS: ACE inhibition improves endothelium-dependent vasodilation in the femoral artery of normotensive microalbuminuric type 1 diabetic patients. Captopril also ameliorates endothelium-independent vasodilation, possibly through its sulfhydryl donor properties. These results may be of pathophysiological relevance to prevent cardiovascular complications in these patients.     

袢利尿剂对慢性心力衰竭患者肾功能的影响

目的 探讨袢利尿剂对慢性心力衰竭患者肾功能的影响.方法 采用病例对照研究方法,分析袢利尿剂应用与肾功能恶化发生有无统计学关联,是否为其发生的独立危险因素.以住院期间任何时间出现的肌酐值较入院时升高≥26.5 μmol/L作为肾功能恶化的标准,分为病例组(肌酐≥26.5umol/L,66例)及对照组(肌酐＜26.5 μmol/L,145例).结果 病例组袢利尿剂总剂量(385.17±49.37)mg明显大于对照组(244.50±34.82)mg(P ＜0.05),但利尿剂量与肾功能恶化的发生无独立相关性(P＞0.05),入院肌酐浓度及心功能分级与肾功能恶化的发生独立相关,OR值分别为2.248(95％CI:1.088 ～4.647)和2.485(95％ CI:1.385～4.459)(P均＜0.05).结论 袢利尿剂应用与肾功能恶化的发生无独立相关性,入院肌酐浓度偏高及心功能差为心力衰竭患者住院期间发生肾功能恶化的独立危险因素.     

Nω-硝基-L-精氨酸甲酯对失重大鼠肺动脉反应性的影响

目的探讨Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对失重大鼠肺动脉反应性的影响。方法将16只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组和尾悬吊组,每组8只。利用离体血管环灌流技术测量大鼠肺动脉环对苯肾上腺素(PE)的收缩反应和对乙酰胆碱(Ach)的舒张反应,以及L-NAME预处理后动脉环对PE的收缩反应。同时用硝酸还原酶法测定肺动脉组织一氧化氮(NO)含量。结果尾悬吊14d后大鼠肺动脉环对1×10-5~1×10-7mol/L浓度PE的收缩反应均显著下降(P均<0.01);对1×10-6~1×10-8mol/LAch的舒张反应均显著增强(P均<0.05);一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME预处理后动脉环对PE的收缩反应恢复,与对照组比较差异均无显著性。肺动脉组织NO含量增加,两组差异有显著性(P<0.05)。结论模拟失重引起肺动脉血管内皮细胞释放NO增加可能是导致其收缩反应性下降的原因之一。