益气活血方对放射性骨损伤的防护作用机制

背景：临床中观察益气活血方剂有防治放射性骨损伤的作用，但其作用机制目前尚不清楚。目的：探讨益气活血方防治放射性骨损伤的作用机制。设计：随机对照的实验研究。地点和对象：在解放军第二五一医院动物试验中心及第三军医大学动物试验中心完成。48只日本大耳白兔，雌雄不限，体质量2．0～3．0kg，月龄8～12个月。干预：将48只兔随机分成实验与对照组，各24只，均^60Coγ射线一次30Gy照射后肢小腿造模。诸药水煎醇沉，每毫升含生药2g。实验组兔每日胃内灌注益气活血方(组成：黄芪30g，太子参30g，白术15g，茯苓15g，丹参30g，鸡血藤30g，地龙15g，赤芍30g，甘草10g)2mL，从照射之日起，服用时间为6个月。对照组兔灌注同等量的生理盐水。主要观察指标：照射后的1，3，6，12，24，52周不同时相观察照射部位血管铸型、血流情况。结果：骨细胞变性坏死呈持续发展，第6周时尤为明显，对照组为27％，实验组为8％，差异明显。血管铸型为1～3周血管网逐增加，呈囊性扩张融合成片，以后渐减少，24周时实验组血管数目明显多于对照组。6，12，24，52周局部血流量对照组分别为(3．76&;#177;0.28)，(3．02&;#177;0.22)，(1.83&;#177;0．14)，(1．81&;#177;0．12)L／(min&;#183;g)。实验组分别为(4．46&;#177;0．35)，(3.73&;#177;0．27)，(3．06&;#177;0．21)(3．10&;#177;0．27)L／(min&;#183;g)，与对照组比较，差异有非常显著性意义(t=8．6549，P&;lt;0．01)。结论：益气活血方能减轻射线对骨细胞及其他组织的直接杀伤，减轻对骨血管损伤，改善骨微循环及血流。     

大鼠脊髓损伤继发骨质疏松的实验观察

背景骨质疏松是脊髓损伤的常见并发症之一,其确切机制尚未完全清楚,损伤平面上下骨质是否均发生骨质疏松,不同学者观点不同.目的观察脊髓损伤后继发骨质疏松的骨组织超微结构、血液生化改变情况,分析损伤平面上下骨质受累情况和程度.设计随机对照实验.单位吉林大学第二临床医院动物试验室,吉林大学第二临床医院检验科,吉林大学白求恩医学部电镜教研室.材料实验于2002-05/2003-05在吉林大学第二临床医院动物试验室完成.Wistar大鼠110只,均为雄性,四五月龄,体质量为300～320g.方法110只Wistar雄性大鼠随机选取10只为0周空白对照组,将余下大鼠随机分为实验组和对照组,1,2,3,7,11周对照组及实验组每组各10只.用1 mL/L戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,对照组仅行T10椎板切除不破坏硬膜,不损伤脊髓,实验组大鼠于T10椎体水平切除椎板,行Allen's法损伤脊髓.分别于0周、术后1周,2周,3周,7周,11周周末将动物下腔静脉采血4mL后麻醉状态下处死,血液离心,应用7170A HI-TACHI自动生化分析仪自动采样化验血钙、血磷的含量及碱性磷酸酶活性.另取0周空白对照组,7周实验组,11周实验组右侧肱骨、胫骨各一用25 mL/L乙二胺四乙酸脱钙1个月后制备切片,在醋酸双氧铀及柠檬酸双重染色下应用JEM-1200型透射电子显微镜观察肱骨外科颈、胫骨平台部以骨细胞为主的超微结构改变情况.结果进入结果分析的大鼠为105只.①血生化检查结果实验2周时血磷含量对照组明显低于实验组[(1.54±0.21),(2.76±0.16)mmol/L,(P＜0.01)];实验3周时血钙含量实验组明显高于对照组[(2.52±0.06),(2.35±0.12)mmol/L,(P＜0.01)];实验7周时碱性磷酸酶活性实验组明显高于对照组[(155.86±20.42),(129.25±7.30)Nμ/mg,(P＜0.01)].②电子显微镜下观察结果术后7周实验组胫骨标本可见骨细胞与骨陷窝分离,个别细胞胞核不规则,可见絮状物质、线立体粗面内质网肿胀开空化;11周时,可见骨细胞与骨陷窝严重分离.术后7周实验组肱骨标本可见骨细胞与骨陷窝分离,有的细胞核固缩粗面内质网肿胀空化;11周时仍见上述改变,但细胞肿胀空化程度减轻.结论脊髓损伤早期破骨细胞活性增强,成骨细胞活性降低,导致骨吸收增强,骨形成减弱.鼠损伤平面上下骨质均受累,但不同部位的骨骼继发骨质疏松的程度不同,骨质疏松后骨细胞超微结构改变显著.     

灵芝茶对老年小鼠抗疲劳、抗缺氧能力及肝脏核酸含量的影响

背景灵芝茶作为保健饮品目前仅见对大鼠化学性肝损伤有保护作用;对小鼠血糖有调节作用的研究报道,其抗疲劳、抗缺氧作用的研究尚少.目的探讨灵芝茶的保健作用及在延缓衰老中的作用.设计随机对照的实验研究.地点和材料老年(17～18月龄)昆明种小白鼠,体质量40～45 g,由齐齐哈尔医学院实验动物中心提供.实验在齐齐哈尔医学院药理及生化实验室完成.干预①灵芝茶组(n=20)饮用灵芝茶8周后负重游泳,与对照组(n=20)比较游泳时间.②应用鼠用多功能乏氧瓶,对小鼠造成急性缺氧环境,对照组(n=20)饮凉开水,实验组(n=20)饮灵芝茶水,模型对照组(n=20)饮凉开水,在测定前30 min,腹腔注射异丙肾上腺素0.2 mg/kg,8周后比较耗氧率.③灵芝茶组(n=20)和凉开水对照组(n=20)各饮灵芝茶和冷水8周后,测定肝脏核酸含量.主要观察指标负重游泳时间;乏氧瓶内的耗氧率;肝脏RNA和DNA含量.结果灵芝茶组小鼠负重游泳时间[(42.83±12.6)min]长于对照组[(34.9±19.4)min],差异有显著性意义(t=3.187,P＜0.01);灵芝茶组小鼠在乏氧瓶内的耗氧率[(0.055±0.009)mL/(min·g)]高于对照组[(0.043±0.007)mL/(min·g)],差异有显著性意义(t=2.307,P＜0.05),与异丙肾上腺素组[(0.024±0.006)mL/(min·g)]比较,差异有显著性意义(t=4.015,P＜0.001);肝脏RNA含量灵芝茶组(30.93±1.26)mg/g,高于对照组(26.92±1.31)mg/g,差异有显著性意义(t=2.341,P＜0.05).DNA含量差异无明显性意义.结论灵芝茶对小鼠有抗疲劳、抗缺氧及增加肝脏RNA含量的作用.     

大鼠脑缺血再灌注损伤与盐酸法舒地尔的保护作用

背景传统钙离子拮抗剂脑保护作用并不确实,盐酸法舒地尔是一种新型钙离子拮抗剂,具有强大的扩血管作用和保护缺血脑组织的作用.目的研究盐酸法舒地尔作为细胞内钙离子拮抗剂对大鼠缺血再灌注损伤的保护作用.设计随机对照的实验研究.地点和对象全部实验于解放军总医院实验动物中心完成.选择体质量250～300 g健康SD大鼠30只(解放军总医院实验动物中心提供),以Haruo Nagasawa法建立脑缺血模型,分为盐酸法舒地尔组15只和生理盐水组15只.另选体质量250～300 g健康SD大鼠50只(解放军总医院实验动物中心提供),以Carys M Bannister转流法制作局灶缺血模型.转流法模型50只大鼠5只一组分为10组,各用于测定盐酸法舒地尔和生理盐水治疗动物缺血前,缺血60min,再灌注20,60,120min缺血区脑组织乳酸含量.干预用线栓法和转流法制作大鼠大脑中动脉区缺血再灌注模型,于缺血前30 min分别给予盐酸法舒地尔和生理盐水.主要观察指标缺血后5,60 min和再灌注30 min的局部脑血流量(rCBF);术后3,24,48 h神经功能;缺血60 min,再灌注20,60,120 min缺血脑组织乳酸含量.结果法舒地尔组缺血5,60 min,再灌注30 min局部脑血流(rCBF)为[(3.11±0.02),(3.60±0.02),(8.04±0.10)mL/(100 g·min)]明显高于对照组[(2.63±0.04),(3.17±1.29),(6.74±0.03)mL/(100 g·min)];法舒地尔组神经功能好于对照组;再灌注60,120min乳酸含量法舒地尔组[(7.2±0.3),(7.4±0.2)mmol/kg]少于对照组[(10.2±0.3),(10.0±0.3)mmol/kg].结论盐酸法舒地尔能改善动物模型缺血脑组织局部血流量,加速再灌注过程乳酸清除,具有脑保护作用.     

多孔羟基磷灰石、纤维蛋白和金葡液复合物修复骨缺损的实验研究

背景骨缺损的修复一直是骨科治疗的难点,寻找有效修复骨缺损的骨移植替代材料是目前骨缺损治疗的研究方向.目的探讨珊瑚多孔羟基磷灰石(coralline hydroxyapatite porous,CHAP)、纤维蛋白(fibrin sealant,FS)及金葡液(staphylococcus aureus injection,SAI)复合物修复骨缺损的作用及其作为人工骨移植替代材料的可行性.设计随机对照的试验研究.单位中山大学附属第三医院骨科.材料实验在中山大学动物实验室和解放军第一军医大学全军生物力学中心完成.羟基磷灰石,纤维蛋白,金葡液.方法采用新西兰大白兔54只在兔双侧桡骨制备骨缺损模型后分成实验组、对照组及空白组.将CHAP-FS-SAI复合物植入骨缺损处作为实验组,以自体骨植入作为对照组,空白组不植入任何物质.在2,4,8和12周分别进行大体标本观察,组织学,X射线片观察及生物力学测试,比较各组修复骨缺损的能力.主要观察指标动物一般情况,大体标本,X射线片,组织学,生物力学测定.结果实验组术后2周见植入物与骨端形成紧密的纤维性连接,镜下可见CHAP周围大量成纤维细胞、软骨细胞及细胞钙化.12周实验组和对照组均见大量成熟的骨细胞及板层骨;实验组见植入物完全骨化,塑形完全,CHAP未完全降解.空白组12周骨缺损区为纤维瘢痕组织填充.镜下主要为大量成纤维细胞.X射线片2周实验组与对照组有骨痂影.4周骨痂影增多.8周实验组骨缺损消失,CHAP分散在骨痂中;对照组骨折线消失,髓腔开始形成.12周实验组和对照组骨皮质连续,髓腔复通,塑形完全.空白对照组12周骨缺损区无骨性连接.生物力学测试最大扭矩及抗扭刚度在术后4,8,12周复合物组和自体骨组差异无显著性意义(P＞0.05).但术后2周,最大扭距实验组为(0.140±0.032)N·m,对照组为(0.105±0.035)N·m,抗扭刚度两组分别为(0.401±0.050),(0.311±0.050)N·m/rad,实验组高于对照组,差异有显著性意义(t=2.087 0,3.600 0,P＜0.05).结论CHAP-FS-SAI复合物具有较强的成骨能力和良好的生物相容性,能作为自体骨移植的一种替代物修复骨缺损.     

中药复方驱铅制剂对铅染毒大鼠脑海马齿状回及CA1区和CA3区一氧化氮合酶的影响

目的:观察中药复方驱铅制剂对铅染毒大鼠记忆改善的影响,并以依地酸钙钠做标准对照。方法:实验于2001-11/12在湖南师范大学生命科学院动物实验室完成。①选用健康SD大鼠60只,随机分成6个组,每组10只。阴性对照组、阳性对照组、驱铅灵(由党参15g、鸡血藤15g等组成)3.3g/(kg·d)组、驱铅灵6.6g/(kg·d)组、驱铅灵13.2g/(kg·d)组、依地酸钙钠组。②阳性对照组、依地酸钙钠组、驱铅灵各组均用20g/L的醋酸铅溶液以10μL/g体质量的剂量灌胃,1次/d,第11天停染1d,共3周。③停止染毒后第2天,驱铅灵各组分别用相应剂型的中药复方驱铅灵10μL/g体质量灌胃,1次/d,第11天停1d,共3周。④依地酸钙钠组用5g/L依地酸钙钠溶液以10μL/g体质量的剂量(50mg/kg)腹腔注射,1周注射4d,停3d,共3周。⑤阴性对照组、阳性对照组用蒸馏水灌胃,1次/d,第11天停染1d,共3周。⑥观察驱铅灵制剂对铅染毒大鼠脑海马组织结构的改善以一氧化氮合酶阳性细胞数目的多少及阳性细胞产物平均吸光度的大小作为评价指标,对大鼠海马结构形态学损伤以一氧化氮合酶阳性产物吸光度表示。结果:纳入60只,均进入结果分析,无缺失值。①铅染毒大鼠脑齿状回阳性产物吸光度情况:驱铅灵3.3g,6.6g,13.2g/(kg·d)组与依地酸钙钠组显著大于阳性对照组犤(0.0692±0.0043),(0.0707±0.0022),(0.0645±0.0027),(0.0720±0.0037),(0.0538±0.0068)A,(F=12.383,P<0.01)犦。②铅染毒大鼠脑CA1区阳性产物吸光度变化:驱铅灵3.3g,6.6g,13.2g/(kg·d)组与依地酸钙钠组的阳性产物吸光度显著大于阳性对照组犤(0.0638±0.0033),(0.0648±0.0027),(0.0613±0.0029),(0.0655±0.0037),(0.0605±0.0026),(F=10.585,P<0.01)犦。③铅染毒大鼠脑CA3区阳性产物吸光度变化:驱铅灵3.3g,6.6g,13.2g/(kg·d)组与依地酸钙钠组在脑CA3区显著大于阳性对照组犤(0.0682±0.0044),(0.0702±0.0047),(0.0630±0.0044),(0.0733±0.0051),(0.0545±0.0027),(F=18.867,P<0.01)犦。结论:中药复方驱铅制剂低、中、高各剂量组均能改善铅染毒大鼠脑海马结构的形态学损害,改善铅致学习记忆的损害,其效果与依地酸钙钠相似,不同剂量的驱铅制剂作用效果比较无显著差别。     

芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠主动脉抗原CD40和胞间黏附分子1 mRNA表达的影响

目的探讨芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠主动脉抗原CD40、胞间黏附分子1的影响.方法实验于2003-04/08在解放军第四军医大学实验动物中心、西京医院检验科分生实验中心完成.将72只SD雄性大鼠随机平均分为6个实验组阴性对照组(n=12)给以普通饮食,模型组(n=12)给予高脂、高胆固醇饮食,其余4组在给予高脂、高胆固醇饮食建立动脉粥样硬化大鼠模型同时分为芪丹通脉片低剂量组[0.36 g/(kg·d)]、中剂量组[1.08 g/(kg·d)]、高剂量组[3.24 g/(kg·d)]和阳性对照辛伐他汀组[4 mg/(kg·d)].14周后通过反转录多聚酶链反应,检测大鼠主动脉上CD40、胞间黏附分子1表达.结果模型组表达CD40、胞间黏附分子1分别为1.730±0.022,1.55±0.17,均明显高于阴性对照组(0.390±0.012,0.43±0.09)(P＜0.05);给予芪丹通脉片大鼠CD40、胞间黏附分子1表达显著降低,高浓度组(0.555±0.020,0.52±0.11)结果接近辛伐他汀组(0.400±0.016,0.46±0.12).结论动脉粥样硬化大鼠主动脉CD40、胞间黏附分子1表达增强,使用芪丹通脉片可降低CD40、胞间黏附分子1表达,且其低、中、高浓度组表达依次减少.     

补肾益气活血方对实验性膝骨关节炎兔关节软骨组织形态学的影响

背景目前治疗膝骨关节炎的药物主要是非类固醇类药,应用后可产生胃肠道副作用.研究表明,补肾益气活血方能明显改善膝骨关节炎患者关节疼痛和功能,并且副作用较小.目的通过建立兔膝关节骨关节炎模型,探讨补肾益气活血方对兔病变膝关节软骨病理过程的影响.设计以实验动物为研究对象,随机对照观察研究.单位一所大学动物实验中心.材料健康雄性新西兰兔36只,体质量2.0～3.0kg.方法实验于2002-01/2003-01在广州中医药大学动物实验中心完成.新西兰兔36只,建立Hulth膝骨关节炎模型,术后随机分成3组模型组、醋氨酚组和补肾益气活血方组.各组采取相应的处理方法,术后4,8和12周取材,进行组织病理学评估.主要观察指标主要结局各组关节软骨病理改变积分.次要结局①各组关节软骨肉眼观察.②各组关节软骨光镜观察.结果模型组、醋氨酚组、补肾益气活血方组关节软骨病理变化总积4周分别为(18.50±1.00),(14.25±1.26),(11.75±2.22)分;12周分别为(30.75±1.26),(22.00±3.16),(17.75±2.21)分.各组关节软骨病理变化总积分、软骨细胞病理改变积分和软骨表层病理改变积分依次为模型组＞醋氨酚组＞补肾益气活血方组.组间比较差异均有显著或非常显著性意义.结论补肾益气活血方能延缓膝骨关节炎的病理过程,达到防治膝骨关节炎的作用.     

骨髓间充质干细胞预构人工骨对兔股骨头坏死的修复作用

目的:研究转染血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)基因的骨髓间充质干细胞(bonemesenchymalstemcells,BMSCs)对兔股骨头无菌性坏死的修复作用。方法:以脂质体介导pCDNA3-Ang-1质粒转染体外分离培养的兔BM-SCs,与磷酸三钙(TCP)陶瓷复合,修复兔液氮冷冻股骨头坏死模型。48只兔随机分为实验组和对照组,以未转染细胞组作对照,实验组植入修复材料,分别于第2,4,8,12周取材,进行X射线片、电镜、组织学及图像处理、免疫印迹等方法检测骨修复情况。结果:细胞与TCP材料复合生长良好。组织学检查见转染细胞组股骨头病变进展延缓,毛细血管生长及新骨形成活跃,电镜显示实验组成骨细胞和胶原纤维多于对照组,细胞器成熟,图像分析显示术后8,12周骨小梁体积(TBV%)由对照组34.31±8.25和34.55±9.69升至实验组38.65±9.32和39.36±8.24(t=2.29～3.18,P<0.05)。实验组截面血管密度(MVD%)在术后4,8,12周达到23.68±5.76,25.16±5.46,28.47±6.63,与对照组21.54±4.98,22.36±7.25,24.25±7.31组间差异有显著性意义(t=2.23～2.64,P<0.05)。结论:实验组较对照组血供改善,股骨头修复加强。与细胞因子局部定向释放,促进血管形成及骨代谢有关。Ang-1修饰的BMSCs预构人工骨有助于股骨头坏死的修复。     

旋转磁场作用对大鼠骨钙代谢的影响

背景已有研究证明旋转磁场干预能使大鼠骨密度显著增加,并且能维持相当长的一段时间而不下降,且与性激素无关.目的研究旋转磁场对大鼠骨钙含量的影响,以及与血清骨碱性磷酸酶(bone-specific alkaline phosphatase,BAP)和尿脱氧吡啶交联(deoxypyridinoline crosslinks,DPD)的相关性.设计以实验动物为对象的随机对照实验.单位一所大学生命科学院.材料实验于2004-03/10在深圳市微生物基因工程重点实验室完成.健康成年SD大鼠90只,雌性60只,体质量(259±70)g,雄性30只,体质量(351±104)g.按雌雄随机分9组,雌性假手术组、去卵巢常钙对照组、去卵巢低钙对照组,去卵巢低钙实验组、去卵巢常钙实验组、去卵巢低钙中药实验组、雄性对照组、雄性低钙实验组、雄性常钙实验组,每组10只.干预雌性大鼠除假手术组以外均切除卵巢,去卵巢对照组单纯去卵巢,去卵巢实验组手术15 d体内残存雌激素代谢尽后,开始旋转磁场处理15 d,1次/d,2 h/次.雄性大鼠除对照组外均行磁场处理15 d,1次/d,2 h/次.分别给予常钙(含钙0.26%的食物)、低钙(含钙0.1%的食物)和辅以中药(补骨脂、黄芪、淫羊藿、肉苁蓉免煎粉剂等)饲料饲养.旋转磁场处理后,继续饲养15 d,处死后取其股骨测量各组大鼠骨钙含量,取血清测量BAP含量,取尿液测DPD含量.主要观察指标各组大鼠骨钙含量及血清BAP和DPD变化.结果纳入90只大鼠,实验过程中死亡4只,进入结果分析86只.①经旋转磁场处理后大鼠骨钙含量增高去卵巢低钙中药实验组及去卵巢低钙对照组分别为(0.226±0.015),(0.206±0.015)g/g,两组比较t=4.63,p＜0.05;雄性常钙实验组及雄性对照组分别为(0.206±0.031),(0.199±0.014)g/g,两组比较t=4.21,P＜0.05.②经旋转磁场处理后大鼠血中BAP含量增高去卵巢常钙实验组及去卵巢常钙对照组分别为(20.52±1.78),(15.68±3.68)U/L,两组比较t=4.76,P＜0.05;雄性低钙实验组及雄性对照组分别为(17.69±3.78),(8.53±2.54)U/L,两组比较t=4.59,P＜0.05.③经旋转磁场处理后实验组大鼠尿中DPD下降去卵巢低钙中药实验组及去卵巢低钙对照组分别为(86.97±37.19),(401.57±79.34)nmol/L,两组比较t=7.45,P＜0.01;雄性常钙实验组及雄性对照组分别为(97.87±31.97),(168.71±53.19)nmol/L,两组比较t=8.31,P＜0.01.结论磁场能够在短时间内(15 d)有效的促进大鼠的骨钙含量增加,且增加与血BAP升高及尿DPD下降成正相关.     

丹参对兔脊髓损伤区钙、水含量的影响

背景脊髓损伤继发损伤机制是多种病理、生理、生化机制综合作用的结果.各国学者对脊髓损伤的早期治疗,抑制或阻止脊髓损伤继发损害的方面作了较多探索.目的探讨丹参对脊髓伤区水、钙含量的影响,分析丹参对脊髓的保护作用.设计随机分组实验研究.地点和对象实验在武汉大学人民医院骨科完成,对象为日本大耳白兔35只,雌雄不拘,均购自武汉大学医学院实验中心.干预按抽签法随机分成3组正常组5只,仅做L1椎板咬除而脊髓无损伤,对照组15只,治疗组15只.采用改良Allen氏法制作兔脊髓损伤模型.术后治疗组兔静注丹参注射液,对照组兔静注等量生理盐水.主要观察指标3组兔术后2,12,24h测量脊髓损伤段水、钙含量.结果脊髓损伤后,伤区水、钙含量增高,伤后12 h对照组水、钙含量分别为(77.34±2.16)%,(30.83±8.76)μmol/g,治疗组水、钙含量分别为(68.42±3.01)%,(19.32±2.79)μmol/g.丹参治疗后2,12,24 h水、钙含量均较对照组降低,趋近正常值.结论丹参可减轻脊髓伤区水、钙储留,对脊髓起保护作用.     

骨髓间充质干细胞移植对烟雾吸入性损伤兔早期肺组织的影响

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对烟雾吸入性损伤兔早期肺组织损伤的影响.方法 采用直接贴壁法体外培养兔MSCs,用流式细胞术鉴定MSCs.将48只兔制备烟雾吸入性损伤模型后按随机数字表法均分成致伤组和MSCs组.MSCs组伤后立即静脉给予含1×107个/ml MSCs的磷酸盐缓冲液(PBS)10 ml;致伤组则给予10 ml PBS.分别于干预后2、6和24 h活杀8只兔,取肺组织行组织病理学观察,同时进行肺损伤评分.结果 流式细胞术检测显示所培养细胞为MSCs.肺大体标本和光镜下均观察到MSCs组肺损伤程度较致伤组明显减轻.虽然MSCs组和致伤组伤后2 h肺损伤评分(分)比较差异无统计学意义(4.0±0.7比4.5±0.6,P＞0.05),但MSCs组伤后6 h和24 h肺损伤评分(分)明显低于致伤组(6 h:6.1±0.9比8.2±0.9,24 h:4.6±0.9比10.4±0.8,均P＜0.01).结论 MSCs移植能明显减轻烟雾吸入性损伤兔肺组织损伤,改善肺损伤评分.

Abstract：

Objective To explore the effect of bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs)engraftment on lung tissue at early stage of smoke inhalation injury in rabbits. Methods MSCs were proliferated by the method of whole marrow culture and identified by flow cytometry. Forty-eight rabbits were randomly divided into smoke inhalation group (S group) and MSCs group (M group) after reproduction of rabbit smoke inhalation injury model. 10 ml of phosphate buffer saline (PBS) containing 1 × 107/ml MSCs was intravenously injected in M group, meanwhile 10 ml PBS was injected intravenously in S group. Eight rabbits were sacrificed at 2, 6 and 24 hours after intervention, and the lung tissue was harvested for morphological and pathological observation, and lung injury score was used to evaluate smoke inhalation injury.Results Cultured cells were confirmed to be MSCs with flow cytometry. Lung injury in rabbits of M group was less serious in morphology and histopathology than that in S group. Though there was no significance in lung injury score between M group and S group at 2 hours after injury (4.0±0.7 vs. 4.5±0.6, P＞0.05),the lung injury scores in M group at 6 hours and 24 hours after injury were significantly lower than those in S group (6 hours: 6.1±0.9 vs. 8.2±0.9, 24 hours: 4. 6±0.9 vs. 10.4±0. 8, both P＜0. 01). Conclusion Intravenous engraftment of MSCs could ameliorate lung injury induced by smoke inhalation, and improve lung injury score significantly.     

比较两种不同中药组方对创伤大鼠应激细胞因子及腹腔吞噬细胞功能的影响

背景过强的创伤应激能引起免疫调节失衡,导致免疫抑制.补益类中药复方可通过对神经、内分泌和免疫系统的调节作用,减轻创伤早期过强的应激性损伤,控制伤后早期炎性细胞的过量释放.目的了解补益、镇静安神及大黄等中药组方对创伤应激早期细胞因子白细胞介素6和C反应蛋白及免疫功能的影响.设计析因设计.单位解放军成都军区昆明总医院急诊科和统计室.材料实验于2003-03在解放军成都军区昆明总医院中心实验室进行,动物为健康成年清洁级SD大鼠36只.方法大鼠36只随机分为4组①正常对照组(n=6)不造模,灌胃生理盐水0.5 mL,2次/d.②模型组(n=6)制备骨折创伤模型,伤后1 h灌胃生理盐水0.5 mL,2次/d.③补益+安神中药组(n=12)同前造模,伤后1 h灌胃中药(炙黄芪50 g,当归20 g,石昌蒲30 g,质量浓度1 g/L)0.5 mL,2次/d.④补益+安神+大黄组(n=12)同前造模,伤后1h灌胃中药(炙黄芪40g,当归15 g,酒大黄10 g,栀子15 g,石昌蒲20 g,质量浓度1 g/L)0.5 mL,2次/d.伤后6,48 h取血测白细胞介素6和C反应蛋白水平,并做腹腔吞噬细胞活性检测.主要结局观察各组大鼠不同时间血白细胞介素6和C反应蛋白水平,吞噬细胞吞噬红细胞的吞噬百分率及吞噬指数.结果经补充后36只大鼠进入结果分析.①血白细胞介素6水平伤后6 h模型组显著高于正常对照组(P＜0.01),补益+安神中药组和补益+安神+大黄组显著低于模型组(P＜0.01).至伤后48 h,模型组由所下降,但仍高于对照组(P＜0.05),补益+安神+大黄组仍低于模型组(P＜0.05).②血清C反应蛋白水平伤后6h模型组显著高于正常对照组(P＜0.01),补益+安神中药组和补益+安神+大黄组则低于模型组(P＜0.05).至伤后48 h,模型组有所下降,但仍高于对照组(P＜0.05),与其他两组无差异(P＞0.05).③吞噬百分率补益+安神中药组和补益+安神+大黄组均高于模型组(0.46±0.17,0.56±0.15vs 0.21±0.02,P＜0.01).④吞噬指数补益+安神中药组和补益+安神+大黄组均高于模型组(21.2±6.77,23.3±6.34 vs 13.8±2.76,P＜0.01).结论两种组方对断肢应激鼠伤后早期血浆白细胞介素6和血清C反应蛋白的增高均有控制效应,并可使创伤鼠巨噬细胞的非特异性免疫功能得到保护.证明当归、黄芪、大黄等药与镇静安神药组方,具有控制创伤应激后过强全身炎性反应和调节免疫功能之功效.     

补肾益气和活血祛瘀中药治疗血管性痴呆的实验研究

背景血管性痴呆( vascular dementia,VD)是老年期痴呆中常见的一种.补肾益气法、活血祛瘀法是治疗 VD的常用中医治疗方法.而对这两种方法的比较研究尚少. 目的比较补肾益气方、活血祛瘀方对血管性痴呆大鼠的治疗作用,并探讨中药治疗血管性痴呆大鼠的机制. 设计完全随机设计,对照实验研究. 地点与材料地点为浙江省中医院脑病研究室.材料为清洁级健康成年雄性 SD大鼠 75只,鼠龄 18～ 20月,体质量 (400± 30) g.由浙江省中医学院实验动物中心提供并饲养. 方法采用双侧颈总动脉永久性结扎造成血管性痴呆大鼠模型,并观察药物对该大鼠模型的学习记忆能力,海马 CA1区锥体细胞的形态及数量的影响. 结果①补肾益气组大鼠跳台测试成绩,造模前( 2.24± 0.17) s,造模用药后 59 d( 2.73± 0.34) s, 造模用药后 60 d( 2.35± 0.28) s.活血祛瘀组大鼠跳台测试成绩,造模前( 2.41± 0.57) s, 造模用药后 59 d( 2.62± 0.41) s, 造模用药后 60 d( 2.34± 0.44) s.补肾益气方,活血祛瘀方可明显改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力.②补肾益气方,活血祛瘀方有减轻缺血对海马 CA1区锥体细胞损伤的作用. 结论①中药补肾益气方、活血祛瘀方为治疗血管性痴呆大鼠的有效方,但活血祛瘀方的治疗作用更好.②活血祛瘀方治疗血管性痴呆大鼠的机制可能与减轻缺血对海马 CA1区椎体细胞的损伤有关.     

血管生成素-1转染骨髓间充质干细胞在兔骨缺损修复及血供重建中的作用

背景血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)在血管重建及创伤修复中发挥重要作用,对其在组织工程骨修复及血供重建中的作用研究较少.目的研究转染血管生成素-1基因的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)对兔骨缺损的修复作用.设计自身对照的实验研究.地点和对象实验地点为上海交通大学附属第六人民医院动物实验中心.30只6月龄健康新西兰兔作为实验对象.干预以脂质体介导pCDNA3-Ang-1质粒转染体外分离培养的兔BM-SCs,与TCP陶瓷复合,修复兔桡骨15 mm长节段性骨缺损.以未转染细胞组作自身对照,进行观测.主要观察指标电镜观察细胞与TCP材料复合生长情况,毛细血管生长及新骨形成通过组织学方法检测,局部血供及代谢利用核素扫描进行分析.结果细胞与TCP材料复合后生长良好.组织学检查见转染细胞组毛细血管生长及新骨形成活跃,核素扫描见实验侧局部血供丰富、代谢旺盛,99Tcm放射性计数在作用后4,8,12,24周分别为67.74±17.29,87.39±22.42,93.51±24.25,116.43±28.67,与对照侧(35.33±14.48,51.67±17.36,72.47±22.13,89.79±24.71)组间差异有显著性意义(t=2.80～4.22,P＜0.05).结论Ang-1转染细胞组血供增加和骨修复加速,与细胞因子局部定向释放,加强血管形成及骨代谢有关.Ang-1修饰的BMSCs预构人工骨有助于加速骨缺损的修复.     

原核表达的重组人骨形态发生蛋白7增高牙槽嵴的实验

背景:牙齿缺失后,牙槽骨内成骨与破骨的动态平衡被打破,牙槽嵴呈现出不可逆转的骨吸收,其后果是大量的牙槽骨丢失;骨形态发生蛋白在骨及牙齿的生长发育和创伤修复中发挥重要作用。目的:观察原核表达的重组人骨形态发生蛋白7对增强牙槽嵴的新骨形成、预防牙槽嵴吸收的作用。设计:对照实验。单位:济南市口腔医院正畸科,山东省医学科学院。材料:实验于2003-06/2004-12在山东省医学科学院完成,采用新西兰大白兔28只,雌雄不限,体质量平均2kg。方法:采用大白兔建立动物拔牙创模型,将大白兔分别拔除左、右下门牙,将骨形态发生蛋白7复合载体2块40μg植入右下门牙(为实验组),仅含磷酸盐缓冲液的空载体2块40μg植入左下门牙(为对照组),术后2,4,8及12周处死动物,取标本进行扫描电镜分析、钙含量及碱性磷酸酶活性测定。主要观察指标:①扫描电镜分析结果。②碱性磷酸酶活性及钙含量。结果:①电镜照片结果:实验组的骨创愈合比对照组提前4～6周。②碱性磷酸酶活性:实验组均明显高于对照组[2周:(38.191±5.384),(19.821±2.084)μkat/g;4周:(160.815±9.669),(126.709±1.634)μkat/g;8周:(378.892±13.086),(225.212±1.884)μkat/g,P<0.01]。③钙含量:实验组均明显高于对照组[2周:(5.592±0.110),(0.913±0.064)mg/g;4周:(8.654±0.177),(1.702±0.071)mg/g;8周:(25.326±0.287),(5.980±0.145)mg/g,P<0.01]。结论:原核表达重组人骨形态发生蛋白7具有良好的增高牙槽嵴、促进拔牙创愈合的作用。     

椎管内局部灌注丹参注射液对急性脊髓损伤的保护

背景脊髓损伤后的继发性损伤期大量细胞以凋亡的方式死亡.目的探讨中药丹参注射液局部灌注对急性脊髓损伤后脊髓细胞坏死和调亡的影响.设计随机对照实验.单位陨阳医学院附属人民医院临床医学试验中心.对象4～5个月龄的一级中国白兔44只,雌雄不限,体质量2.0～2.5kg.材料选择实验于2002-06/2003-07在郧阳医学院附属人民医院临床医学试验中心完成.随机分成2组,丹参组和对照组,每组22只.两组动物均以改良Allen法造成兔不完全性脊髓损伤的模型.丹参组术后按0.3 mL/(kg·d)的总量分4次(每6 h 1次)从硬膜下导管推入丹参注射液,对照组推入等量生理盐水.注射至损伤后8,24,72 h分别处死动物,进行病理、组织形态学观察,过氧化物歧化酶和丙二醛检测,凋亡抑制基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)阳性细胞数检测.主要观察指标脊髓损伤区细胞凋亡指数和细胞凋亡率.结果44只兔均进入结果分析.①细胞凋亡结果丹参组的凋亡指数明显少于对照组(13.10±1.38,20.39±2.96,t=4.101,P＜0.01);细胞凋亡率明显低于对照组[(9.67±1.09)%,(14.68±2.81)%,t=4.072,P＜0.01];Bcl-2的表达高于对照组[(19.12±4.74)个/mm2,(13.37±3.68)个/mm2,t=2.347,P＜0.01].②过氧化物歧化酶含量丹参组高于对照组[(136.20±13.64)NU/mL,(101.70±15.24)NU/mL,t=4.132,P＜0.01].③丙二醛含量丹参组低于对照组[(1.27±0.22)nmol/mL,(2.54±0.69)nmol/mL,t=4.309,P＜0.01].④神经元和神经纤维变性及坏死丹参组轻于对照组.结论丹参局部灌注后,减少了脊髓损伤局部的细胞凋亡,抑制和减轻了急性脊髓损伤后细胞坏死.     

应用超声技术评价复方丹参滴丸和美托洛尔对动脉粥样硬化的作用

目的 应用超声技术观察复方丹参滴丸和美托洛尔对兔腹主动脉动脉粥样硬化的影响。 方法 30只兔球囊拉伤后喂饲高脂饲料12周。12周后随机分为模型组、美托洛尔组和复方丹参滴丸组，各治疗组给予药物治疗12周。分别于实验前、12周末和24周末，应用超声技术检测腹主动脉。24周末处死动物进行病理学检查。 结果 12周末腹主动脉内-中膜厚度（IMT）显著增厚（P〈0．01），血流峰值速度（Vp）显著增快（P〈0．01）；24周末与模型组比较，复方丹参滴丸组和美托洛尔组IMT显著减小（P〈0．05），声学密度值AIIc％显著增大（P〈0．05），美托洛尔组Vp显著减慢（P〈0．05）。 结论 复方丹参滴丸和美托洛尔具有延缓动脉粥样硬化斑块进展的作用。     

兔心脏缺血再灌注损伤后重组水蛭素的保护作用及其机制

背景重组水蛭素能否通过抑制白细胞浸润来拮抗心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,IR)损伤,从而起到对心肌的保护作用?目的观察重组水蛭素对缺血心肌内白细胞浸润的影响,进一步探讨重组水蛭素对心肌保护的作用机制.设计随机对照的实验研究.地点、材料和干预本实验在第四军医大学唐都医院心血管病实验室完成.选取24只日本大耳白兔随机分为2组,每组12只.IR组;心脏左冠状动脉前降支IR动物模型,缺血45 min、再灌注120 min,再灌注前后静脉应用生理盐水;重组水蛭素组缺血45 min、再灌注120 min,再灌注前15 min静注重组水蛭素(1 mg/kg),再灌注时继以持续静滴重组水蛭素[1 mg/(kg·h)]120 min.主要观察指标心肌梗死范围及缺血心肌内白细胞浸润的变化.结果重组水蛭素组的心肌梗死范围为(11.7±2.4)%,与缺血再灌注组的(21.2±5.3)%比较,梗死范围明显缩小(t=7.436,P＜0.01).缺血再灌注组的髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性为(56.01±3.83)nkat/g,重组水蛭素组(35.51±1.67)nkat/g.重组水蛭素组缺血心肌内白细胞聚集较缺血再灌注组显著减少(t=3.935,P＜0.05).结论重组水蛭素能够抑制再灌注期缺血心肌内白细胞浸润,拮抗心肌IR损伤.     

不同方向外力打击致兔颅脑损伤时血清髓鞘碱性蛋白浓度的变化

背景垂直与水平打击产生的受力不同造成破坏性病变程度是否一致?血液中的髓鞘碱性蛋白含量变化与打击形式是否有关联?目的观察不同方向外力打击致兔颅脑损伤时血清髓鞘碱性蛋白浓度以及脑组织形态学变化.设计随机对照实验.单位一所医学院附属医院的神经外科.材料实验于2003-10/2004-01在沈阳医学院中心实验室完成.选择健康家兔30只,雌雄不拘,随机分为垂直打击组和水平打击组,15只/组.方法将全部家兔麻醉后俯卧位固定于多向颅脑损伤打击器的固定台上.分别抽取每只家兔的耳缘静脉血1 mL,用作受伤前髓鞘碱性蛋白对照.垂直打击组实施垂直打击,打击锤直接垂直撞击于颅顶骨上;水平打击组实施水平打击,打击锤水平撞击于兔头侧方.48 h后按相同方法制备两组血清,用作受伤后髓鞘碱性蛋白对照.最后将两组动物断头处死作病理检查.主要观察指标①打击前后两组血清髓鞘碱性蛋白浓度的变化差异.②两组颅脑损伤后的病理形态变化差异.结果按意向处理分析,30只动物均纳入实验.①两组家兔遭遇打击前髓鞘碱性蛋白浓度无明显差异.遭遇打击48 h后髓鞘碱性蛋白浓度垂直打击组与水平打击组亦无明显差异(P＞0.05);②垂直打击组髓鞘碱性蛋白打击前浓度明显低于打击后浓度[(1.68±0.86),(5.25±1.96)μg/L,t=3.226,P＜0.05];水平打击组髓鞘碱性蛋白打击前浓度明显低于打击后浓度[(1.70±0.91),(5.73±2.07)μg/L,t=3.080,P＜0.05].③打击后病理形态变化垂直打击组双侧额顶近中线部位出现皮层脑组织内血管扩张充血,深层白质水肿,血管外和细胞外间隙明显扩大;水平打击组动物除双侧额顶近中线部位出现与垂直打击组相似变化外,相同的病理还可见于颅底面,但深层白质的病理形式与前者基本一致.结论垂直或水平方向的外力打击均可造成脑损伤.打击前后髓鞘碱性蛋白浓度和打击后病理形态学表明这两种不同方向的外力打击使实验模型兔颅脑受损程度大致接近.